(浙江選考)2021版新高考生物一輪復(fù)習(xí) 專題11 生物技術(shù)實(shí)踐 第32講 酶的應(yīng)用 植物的組織培養(yǎng)教學(xué)案 新人教版

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(浙江選考)2021版新高考生物一輪復(fù)習(xí) 專題11 生物技術(shù)實(shí)踐 第32講 酶的應(yīng)用 植物的組織培養(yǎng)教學(xué)案 新人教版_第1頁
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1、第32講 酶的應(yīng)用 植物的組織培養(yǎng) 知識(shí)內(nèi)容 考試要求 知識(shí)內(nèi)容 考試要求 1.果汁中的果膠和果膠酶 實(shí)驗(yàn)與探究能力 3.植物的組織培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)與探究能力 2.α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)與探究能力  果膠和果膠酶 1.果膠:果膠是植物細(xì)胞壁的主要成分,由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成。鑒別果膠的簡易方法是用乙醇。 2.果膠酶 (1)來源:黑曲霉、蘋果青霉。 (2)組成:果膠酶并不是特指某一種酶,而是分解果膠的一類酶的總稱,主要包括果膠酶和果膠甲酯酶。 (3)作用:將果膠分解成可溶性的分子,使出汁率提高,也使渾濁的果汁變得澄清。 3.

2、探究利用蘋果或山楂勻漿制作果汁的最佳條件的實(shí)驗(yàn) (1)實(shí)驗(yàn)原理 ①果膠半乳糖醛酸+半乳糖醛酸甲酯。 ②果膠酶的活性受溫度(或pH)的影響,處于最適溫度(或pH)時(shí)活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的活性大小成正相關(guān)。 ③果膠不溶于乙醇。 (2)實(shí)驗(yàn)流程設(shè)計(jì) (3)實(shí)驗(yàn)結(jié)論:果膠酶能分解果膠,提高果汁的澄清度。 (1)果膠由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成(√) (2)鑒別果膠最簡便的方法是加入乙醇(√) (3)黑曲霉和蘋果青霉屬于原核生物,可用于生產(chǎn)果膠酶(×) (4)果膠酶和果膠甲酯酶均可水解果膠,與制備果汁有關(guān)(√) (5)通過出汁率和澄清度分析可判

3、斷果膠酶的活性(√) (6)果膠酶常存在于動(dòng)物細(xì)胞,用于消化纖維素等營養(yǎng)成分(×) 關(guān)于果膠酶的三個(gè)實(shí)驗(yàn)的變量分析 實(shí)驗(yàn)名稱(目的) 自變量 因變量 注意事項(xiàng) 探究溫度對(duì)果膠酶活性的影響 溫度 果汁量(澄清度) ①底物和酶在混合時(shí)的溫度是相同的; ②溫度梯度越小,實(shí)驗(yàn)結(jié)果越精確; ③果泥和果膠酶用量在各個(gè)試管中應(yīng)相同; ④pH應(yīng)為最適pH 探究pH對(duì)果膠酶活性的影響 pH 果汁量(澄清度) ①溫度應(yīng)為最適溫度; ②pH梯度可用NaOH和鹽酸調(diào)節(jié); ③用玻璃棒攪拌使反應(yīng)充分進(jìn)行 探究果膠酶的用量 果膠酶的用量 果汁量(澄清度) ①制備蘋果勻漿后迅

4、速加熱,使蘋果勻漿中果膠酶變性; ②溫度、pH應(yīng)為最適且保持不變 [題組沖關(guān)] 1.如圖表示某研究小組在探究果膠酶的用量時(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列有關(guān)說法不正確的是(  ) A.在AB段限制反應(yīng)速率的主要因素是酶的用量 B.在BC段限制反應(yīng)速率的因素可以是溫度、pH、底物濃度 C.在AC段增加底物濃度,可以明顯加快反應(yīng)速率 D.在該實(shí)驗(yàn)給定條件下,果膠酶的最佳用量是B點(diǎn)對(duì)應(yīng)的值 解析:選C。應(yīng)從酶的用量和活性、底物的濃度兩方面進(jìn)行分析。由曲線圖可以看出,在AB段,隨著酶的用量的增大,酶促反應(yīng)速率加快,說明此階段限制反應(yīng)速率的主要因素是酶的用量;此時(shí)增加底物濃度,反應(yīng)速率不會(huì)明顯加

5、快。在BC段,隨著酶的用量的增大,酶促反應(yīng)速率不再加快,此時(shí)底物濃度成為限制反應(yīng)速率的因素之一,增加底物濃度,反應(yīng)速率會(huì)加快。 2.工業(yè)生產(chǎn)果汁時(shí),常常利用果膠酶破除果肉細(xì)胞壁以提高水果的出汁率,為研究溫度對(duì)果膠酶活性的影響,某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn): ①將果膠酶與蘋果泥分裝于不同試管,在10 ℃水浴中恒溫處理10 min(如圖甲)。 ②將步驟①處理后的果膠酶和蘋果泥混合后,再次在10 ℃ 水浴中恒溫處理10 min(如圖乙)。 ③將步驟②處理后的混合物過濾,收集濾液,測(cè)量果汁量(如圖丙)。 ④在不同溫度條件下重復(fù)以上實(shí)驗(yàn)步驟,并記錄果汁量,結(jié)果如表所示: 溫度/℃ 10 20

6、 30 40 50 60 70 80 果汁量/mL 8 13 15 25 15 12 11 10 根據(jù)上述實(shí)驗(yàn),請(qǐng)分析回答下列問題: (1)果膠酶能破除細(xì)胞壁,是因?yàn)楣z酶可以促進(jìn)細(xì)胞壁中________的水解。 (2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)溫度為________左右時(shí),果汁量最多,此時(shí)果膠酶的活性________。當(dāng)溫度再升高時(shí),果汁量降低,說明________________。 (3)實(shí)驗(yàn)步驟①的目的是____________________________________________________ ________________________。

7、 解析:(1)植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一是果膠,而果膠酶則是水解果膠的一類酶的總稱。(2)通過表中數(shù)據(jù)可知:在40 ℃時(shí),產(chǎn)生的果汁量最多,在題中所給的溫度范圍內(nèi),40 ℃時(shí)酶活性最高。當(dāng)溫度再升高時(shí),出汁量降低,酶的催化活性降低。(3)因?yàn)槊妇哂懈咝?,使底物與酶的溫度都達(dá)到預(yù)定值后再混合,避免它們事先發(fā)生反應(yīng),而引起結(jié)果不準(zhǔn)確。 答案:(1)果膠 (2)40 ℃ 最高 酶活性降低  (3)避免果汁和果膠酶混合時(shí)影響混合物溫度,從而影響果膠酶活性  α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè) 1.固定化酶的概念和方法 (1)概念:將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某

8、種介質(zhì)上,使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。 (2)方法:吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。 2. α-淀粉酶的固定化、淀粉水解的測(cè)定實(shí)驗(yàn) (1)α-淀粉酶的固定化原理 ①α-淀粉酶作用的最適條件:最適pH為5.5~7.5,最適溫度為50~75__℃。 ②方法:吸附法。 ③介質(zhì):石英砂。 (2)淀粉水解的檢測(cè)原理 淀粉糊精麥芽糖葡萄糖 遇碘顯藍(lán)色 遇碘顯紅色 遇碘不顯色 (3)實(shí)驗(yàn)過程 固定化α-淀粉酶,裝入注射器中 ↓ 以0.3 mL/min的流速滴加淀粉溶液過柱 ↓ 流出5 mL淀粉溶液后接收0.5 mL流出液 ↓ 滴加KI-I2溶液,觀察顏色,用水

9、稀釋1倍后再觀察顏色 ↓ 以10倍柱體積的蒸餾水洗滌固定化柱,放置在4 ℃冰箱中,幾天后重復(fù)實(shí)驗(yàn) (4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 對(duì)照組 實(shí)驗(yàn)組 0.5 mL淀粉溶液 0.5 mL流出液 幾天后重復(fù)實(shí)驗(yàn)中0.5 mL流出液 加KI-I2 變藍(lán) 紅色 紅色 再加水稀釋1倍 淺藍(lán) 淺紅色 淺紅色 (5)實(shí)驗(yàn)結(jié)論:固定化α-淀粉酶能將淀粉水解成糊精。 (1)固定化酶是通過物理或化學(xué)的方法將非水溶性的酶固定在某種介質(zhì)上,使之成為可重復(fù)使用的酶制劑(×) (2)酶分子被固定化后不再具有酶的專一性(×) (3)酶分子被固定化后穩(wěn)定性較酶在水溶液中穩(wěn)定(√) (4)α-淀

10、粉酶分解淀粉為糊精,糊精遇碘液變紫色(×) (5)固定化酶技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)酶的永久利用,在工業(yè)生產(chǎn)中具有極大的推廣價(jià)值(×) (6)固定化酶的方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法(√) (7)制備固定化柱時(shí),用10倍體積蒸餾水洗滌的目的是洗去未吸附的α-淀粉酶(√) (8)“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)”實(shí)驗(yàn)中,采用的是枯草桿菌的α-淀粉酶,其最適pH為5.5~7.5,最適溫度為50~75 ℃(√) (9)“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)”實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,需要將固定化酶柱置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中,以保證酶的活性(×) 1.酶的固定化方法及適用對(duì)象 名稱 原理

11、 圖示 包埋法 將微生物細(xì)胞均勻地包埋在不溶于水的多孔性載體中 化學(xué)結(jié)合法 利用共價(jià)鍵、離子鍵將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合,或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上 物理吸附法 通過物理吸附作用,把酶固定在纖維素、瓊脂糖、多孔玻璃或離子交換樹脂等載體上 2.兩次用10倍體積的蒸餾水洗滌注射器的目的比較 洗滌過程 目的 在固定α-淀粉酶后,用10倍體積的蒸餾水洗滌注射器 除去未吸附的游離α-淀粉酶 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用10倍體積的蒸餾水洗滌注射器 洗去殘留的淀粉溶液和產(chǎn)物 3.證明洗滌固定化淀粉酶柱的流出液中沒有淀粉酶的方法 在試管中加入1 mL可溶性淀粉,再加入幾滴洗滌固定化淀粉酶柱的

12、流出液,混合后用手握住試管增加溫度,幾分 鐘(充分反應(yīng))后加1~2滴KI-I2指示劑,如仍顯藍(lán)色,說明流出液中沒有淀粉酶。 [題組沖關(guān)] 1.下列關(guān)于α-淀粉酶的固定化過程的敘述,錯(cuò)誤的是(  ) A.首先要在燒杯中將5 mg α-淀粉酶溶于4 mL蒸餾水中 B.再將5 g石英砂加入上述燒杯中,不時(shí)攪拌30 min C.隨后將燒杯中的物質(zhì)裝入1支下端接有氣門心但并不封住的注射器中 D.最后用10倍體積的蒸餾水洗滌此注射器,除去那些未吸附的游離淀粉酶 解析:選C。α-淀粉酶的固定化酶的制備應(yīng)該是將燒杯中的物質(zhì)裝入1支下端接有氣門心并用夾子封住的注射器中,而不是不封住的注射器中。

13、 2.(2020·浙江模擬)在20世紀(jì)50年代,酶已經(jīng)大規(guī)模地應(yīng)用于各個(gè)生產(chǎn)領(lǐng)域,到了70年代又發(fā)明了固定化酶技術(shù)。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題: (1)固定化酶技術(shù)將酶固定在____________上,使酶既能與____________接觸,又能與____________分離,同時(shí)固定在載體上的酶還能____________。常用的固定方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。 (2)“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)”中: A.α-淀粉酶固定在____________上,使用了圖中方法____________(填出號(hào)碼及名稱)。 B.實(shí)驗(yàn)中,用滴管滴加淀粉溶液時(shí),使淀粉溶液以

14、____________的流速過固定化酶柱,目的是__________________________。 C.灌注了固定化酶的注射器在使用完后要____________此柱,并放置在____________中保存。 解析:(1)固定化酶技術(shù)將酶固定在不溶于水的載體上,使酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,同時(shí)固定在載體上的酶還能反復(fù)利用。(2)A.α-淀粉酶固定在石英砂上,使用了圖中方法乙(吸附法)。B.實(shí)驗(yàn)中,用滴管滴加淀粉溶液時(shí),使淀粉溶液以0.3 mL/min的流速過固定化酶柱,目的是使淀粉充分與酶接觸。C.灌注了固定化酶的注射器在使用完后要用10倍體積的蒸餾水洗滌此柱,并放置在4

15、℃冰箱保存。 答案:(1)不溶于水的載體 反應(yīng)物 產(chǎn)物 反復(fù)利用 (2)A.石英砂 乙(吸附法) B.0.3 mL/min 使淀粉充分與酶接觸 C.用10倍體積的蒸餾水洗滌 4 ℃冰箱  植物的組織培養(yǎng) 1.植物組織培養(yǎng)的原理 (1)理論基礎(chǔ):植物細(xì)胞具有全能性。 (2)植物組織培養(yǎng)的基本過程 (3)植物組織培養(yǎng)影響因素 ①選材:不同植物組織或同一植物組織的不同部分,培養(yǎng)的難易程度差別很大,菊花的組織培養(yǎng),一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。 ②培養(yǎng)基:植物組織培養(yǎng)需要適宜的培養(yǎng)基,常用的是MS培養(yǎng)基,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加生長素和細(xì)胞分裂素兩種植物激素。

16、實(shí)驗(yàn)中使用的生長素類似物是萘乙酸(NAA),細(xì)胞分裂素類似物是芐基腺嘌呤(BA)。 ③其他條件:pH、溫度和光照等條件對(duì)植物組織培養(yǎng)也很重要。 2.菊花組織培養(yǎng)過程 (1)制備MS固體培養(yǎng)基:配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。 (2)外植體消毒:自然生長的莖離體→用70%的乙醇浸泡10 min→再用5%的次氯酸鈉浸泡5 min→再用另一5%的次氯酸鈉浸泡5 min→最后用無菌水清洗。 (3)接種:始終在酒精燈火焰旁進(jìn)行,對(duì)接種工具要用灼燒滅菌。 (4)生芽培養(yǎng) ①培養(yǎng)基:發(fā)芽培養(yǎng)基(MS+BA+NAA); ②培養(yǎng)條件:溫度為18~25 ℃;光照≥14.5 h/d;pH為5.8~6

17、.0; ③培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn):健壯的叢狀苗。 (5)生根培養(yǎng) ①培養(yǎng)基:生根培養(yǎng)基(MS+NAA); ②培養(yǎng)條件與發(fā)芽培養(yǎng)相同。 (6)煉苗 ①培養(yǎng)基:草炭土或蛭石; ②培養(yǎng)條件:2~3 d內(nèi)濕度控制為80%;2~3 d后逐漸降低濕度至自然濕度。 (7)移栽(定植) (1)植物組織培養(yǎng)最常用的培養(yǎng)基是LB培養(yǎng)基(×) (2)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長素等激素的種類和摩爾濃度可以誘導(dǎo)器官進(jìn)行不同的分化(×) (3)以菊花為材料進(jìn)行組織培養(yǎng),首先在生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上獲得叢狀苗(×) (4)萘乙酸和芐基腺嘌呤分別是生長素和細(xì)胞分裂素類似物(√) (5)配制

18、母液可以減少某些元素因量小而造成的誤差(√) (6)使用時(shí),萘乙酸一般用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液溶解,芐基腺嘌呤需用少量0.1 mol/L鹽酸溶解(√) (7)菊花切段進(jìn)行組培時(shí),每個(gè)切段上必須保留一個(gè)頂芽(×) (8)植物組培的最適溫度是18~25 ℃,每天的光照不少于14.5 h(√) (9)生根的叢狀苗需要移到草炭土或蛭石上進(jìn)行濕度鍛煉,直至降至自然濕度(√) (10)使用自然莖段進(jìn)行組織培養(yǎng),一般先在70%乙醇中浸泡,再放入5%次氯酸鈉中浸泡兩次,然后用無菌水清洗后,將其培養(yǎng)在生芽培養(yǎng)基中(√) 1.MS培養(yǎng)基的成分及各成分的作用 成分 作用 微量元素和大量

19、元素 提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽 蔗糖 提供碳源,維持細(xì)胞滲透壓 甘氨酸、維生素、 煙酸、肌醇 滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求 2.脫分化和再分化的比較 過程 特點(diǎn) 條件 脫分化 外植體成為愈傷組織 排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞團(tuán) 離體、營養(yǎng)物質(zhì)、植物激素和其他適宜條件 再分化 愈傷組織成為叢芽或胚狀體結(jié)構(gòu) 有根、芽或有生根發(fā)芽的能力 3.植物激素在組織培養(yǎng)過程中的作用 生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素,其作用及特點(diǎn)如表所示。 激素使用 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 使用順序 先使用生長素

20、,后使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化 先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素 細(xì)胞既分裂又分化 同時(shí)使用 分化頻率提高 生長素用 量和細(xì)胞 分裂素用 量的比例 比值高 利于根的分化、抑制芽的形成 比值低 利于芽的分化、抑制根的形成 比值適中 促進(jìn)愈傷組織的生長 植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作的易錯(cuò)點(diǎn) (1)材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。 (2)外植體消毒:所用消毒劑為70%的酒精和5%的次氯酸鈉溶液,所使用的清洗液是無菌水。 (3)組織培養(yǎng)時(shí)不用天然激素而是用人工合成的激素,是因?yàn)橹参镏写嬖谙鄳?yīng)的分解天然激素的酶而沒

21、有分解相應(yīng)的人工合成激素的酶,所以天然激素在植物體內(nèi)作用和存在的時(shí)間短,人工合成激素作用和存在的時(shí)間長,效果明顯?!? [題組沖關(guān)] 1.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的說法,錯(cuò)誤的是(  ) A.植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)需要無機(jī)養(yǎng)料 B.植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)不需要有機(jī)養(yǎng)料 C.離體的植物組織細(xì)胞的脫分化和再分化主要受激素的影響 D.溫度、培養(yǎng)基的滲透壓等也影響植物組織培養(yǎng) 解析:選B。植物組織培養(yǎng)過程中,離體的植物組織和細(xì)胞,對(duì)營養(yǎng)、環(huán)境等條件要求相對(duì)特殊,除需要無機(jī)養(yǎng)料和生長調(diào)節(jié)物質(zhì)外,還需要有機(jī)養(yǎng)料,如蔗糖等,并且需要一定的外界條件。 2.菊花組織培養(yǎng)的部分過程如下圖所示。據(jù)圖回答

22、下列問題: (1)過程①利用________(填“較高”或“較低”)滲透壓,使原生質(zhì)體產(chǎn)量大幅度提高,但存活率卻因此而降低,分析降低的原因可能是________________________。過程②細(xì)胞壁形成后,可逐漸__________滲透壓。 (2)幼苗莖段帶葉,就會(huì)帶有________,也就有了分生組織,所以不通過____________________階段就可直接形成叢狀苗。過程③應(yīng)在______________(從具體功能角度)培養(yǎng)基中進(jìn)行,全過程對(duì)光照要求是________。 A.早期每天24 h光照,后期每天24 h黑暗 B.每天一定時(shí)長的光照 C.早期每天24

23、h黑暗,后期每天24 h光照 D.每天24 h黑暗 解析:(1)過程①為由菊花幼苗莖切段得到原生質(zhì)體,可以利用較高的滲透壓,但滲透壓較高,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞過度失水損傷、死亡,從而使原生質(zhì)體產(chǎn)量大幅度提高,但存活率卻因此而降低。因此過程②細(xì)胞壁形成后,可逐漸降低滲透壓。 (2)幼苗莖段帶葉,就會(huì)帶有腋芽、芽,也就有了分生組織,所以不通過愈傷組織階段就可以直接形成叢狀苗。過程③應(yīng)在發(fā)芽培養(yǎng)基中進(jìn)行,全過程對(duì)光照的要求是每天一定時(shí)長的光照。 答案:(1)較高 細(xì)胞過度失水損傷、死亡 降低 (2)腋芽、芽 愈傷組織、脫分化 發(fā)芽(生芽) B 1.下列關(guān)于果膠酶的說法,不正確的是(  )

24、A.果膠酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì) B.果膠酶并不是唯一能水解果膠的酶 C.有些微生物可用于生產(chǎn)果膠酶 D.果膠酶是一種能完全水解果膠的酶 解析:選D。果膠酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì);果膠不是只能被果膠酶水解,果膠甲酯酶也能水解果膠,二者共同作用才能使果膠完全降解。由于微生物代謝旺盛,繁殖快,培養(yǎng)方便,因此常被利用進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)果膠,生產(chǎn)果膠酶的微生物主要是霉菌,如黑曲霉、蘋果青霉等。 2.用吸附法將α-淀粉酶固定在石英砂上,當(dāng)一定濃度的淀粉溶液流過固定化酶柱后,柱底端收集到的溶液中,加入KI-I2溶液,其顏色變化為(  ) A.顯藍(lán)色 B.顯紅色 C.不顯色 D.流出液中因含淀粉酶,使

25、得溶液顏色顯紫色 解析:選B。一定濃度的淀粉溶液流過固定化α-淀粉酶酶柱后,淀粉可轉(zhuǎn)化為糊精,糊精遇KI-I2溶液顯紅色,酶經(jīng)固定化后,不能從柱底端流出。 3.用菊花的莖尖組織培養(yǎng)可培育出試管苗。下面關(guān)于這一過程的說法正確的是(  ) A.進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),一次性加足營養(yǎng)物質(zhì)以防止污染 B.整個(gè)培養(yǎng)過程應(yīng)在光下進(jìn)行,有利于長葉 C.要根據(jù)培養(yǎng)過程的實(shí)際情況,更換培養(yǎng)基 D.整個(gè)培養(yǎng)過程都應(yīng)在密閉條件下進(jìn)行,以免雜菌的污染 解析:選C。一般來說,從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織時(shí),由于培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分已接近耗盡,必須更換培養(yǎng)基。脫分化培養(yǎng)時(shí)不必見光,因?yàn)樵跓o光條件下愈傷組織長得更快。再分化時(shí)

26、可見光,試管苗應(yīng)該進(jìn)行見光培養(yǎng)。 4.(2019·浙江4月選考)回答與果膠和果膠酶有關(guān)的問題: (1)通常從腐爛的水果上分離產(chǎn)果膠酶的微生物,其原因除水果中果膠含量較高外,還因?yàn)開_______________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)為了獲得高產(chǎn)果膠酶微生物的單菌落,通常對(duì)分離或誘變后的微生物懸液進(jìn)行_______________________

27、_________________________________________________。 (3)在某種果汁生產(chǎn)中,用果膠酶處理顯著增加了產(chǎn)量,其主要原因是果膠酶水解果膠使__________________________。果汁生產(chǎn)中的殘?jiān)?、果皮等用于果膠生產(chǎn),通常將其提取液濃縮后再加入________使之形成絮狀物,然后通過離心、真空干燥等步驟獲得果膠制品。 (4)常用固定化果膠酶處理含果膠的污水,其主要優(yōu)點(diǎn)有________________________和可連續(xù)處理等。在建立和優(yōu)化固定化果膠酶處理工藝時(shí),除考慮果膠酶的活性和用量、酶反應(yīng)的溫度、pH、作用時(shí)間等環(huán)境因素外,

28、還需考慮的主要有________________和____________________。 答案:(1)腐爛的水果中含產(chǎn)果膠酶的微生物較多 (2)涂布分離(或劃線分離) (3)水果組織軟化疏松及細(xì)胞受損 95%乙醇 (4)提高果膠酶的穩(wěn)定性 固定化的方法 固定化所用的介質(zhì) 5.下面是植物組織培養(yǎng)過程示意圖,請(qǐng)回答有關(guān)問題: 外植體愈傷組織長出叢芽生根移栽成活 (1)外植體若是菊花莖段組織,則在配制MS固體培養(yǎng)基時(shí),________(填“必須”或“不必”)添加植物激素。 (2)外植體若是月季的花藥,則圖中的①過程________(填“需要”或“不需要”)光照,而經(jīng)②③④過程培養(yǎng)

29、出的植物一般稱為________植株。 (3)外植體若是菊花的根尖組織,則在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是________,這個(gè)過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有________。 (4)植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂和分化的關(guān)鍵性激素,在植物組織培養(yǎng)過程中: ①若先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素,實(shí)驗(yàn)結(jié)果是細(xì)胞__________________。 ②當(dāng)同時(shí)使用這兩種激素時(shí),生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值________(填“高”“低”或“適中”)時(shí),促進(jìn)愈傷組織的形成。 解析:(1)由于菊花莖段的組織培養(yǎng)比較容易,因此不必添加植物激素。(2)月季的花藥培養(yǎng)初期不需要光照

30、,幼小植株形成后才需要光照?;ㄋ庪x體培養(yǎng)得到的植株為單倍體植株,也稱花粉植株。(3)植物組織培養(yǎng)獲得的植株是正常的植株,無論外植體取自植物的何種組織器官,因?yàn)檫@些細(xì)胞均具有全能性,所以利用菊花的根尖組織在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是綠色。(4)植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂和分化的關(guān)鍵性激素,在植物組織培養(yǎng)過程中,若先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素,則細(xì)胞既分裂也分化。當(dāng)同時(shí)使用這兩種激素時(shí),生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值適中時(shí),促進(jìn)愈傷組織的形成。 答案:(1)不必 (2)不需要 單倍體(花粉) (3)綠色 全能性 (4)①既分裂也分化?、谶m中 1.某植物富含

31、果膠、淀粉、蛋白質(zhì)和纖維素等成分。某小組開展了該植物綜合利用的研究。回答下列與果膠、淀粉等提取和利用有關(guān)的問題: (1)果膠提取工藝研究結(jié)果表明,原料先經(jīng)過一段時(shí)間沸水漂洗的果膠得率(提取得到的果膠占原料質(zhì)量的百分率)顯著高于常溫水漂洗的果膠得率,最主要原因是沸水漂洗________(A.有助于清洗雜質(zhì)和去除可溶性糖 B.使植物組織變得松散 C.使有關(guān)酶失活 D.有利于細(xì)胞破裂和原料粉碎制漿)。 (2)在淀粉分離生產(chǎn)工藝研究中,為促進(jìn)淀粉絮凝沉降,添加生物絮凝劑(乳酸菌菌液),其菌株起重要作用。為了消除絮凝劑中的雜菌,通常將生產(chǎn)上使用的菌液,采用________________,進(jìn)行單菌落

32、分離,然后將其____________,并進(jìn)行特性鑒定,篩選得到純的菌株。 (3)在用以上提取過果膠和淀粉后的剩渣加工飲料工藝研究中,將剩渣制成的汁液經(jīng)蛋白酶和纖維素酶徹底酶解處理后,發(fā)現(xiàn)仍存在渾濁和沉淀問題。可添加________________使果膠徹底分解成半乳糖醛酸,再添加________________,以解決汁液渾濁和沉淀問題。 (4)在建立和優(yōu)化固定化酶反應(yīng)器連續(xù)生產(chǎn)工藝研究中,通常要分析汁液中各種成分的濃度和所用酶的活性,然后主要優(yōu)化各固定化酶反應(yīng)器中的__________________________________(答出2點(diǎn))、反應(yīng)液的pH和酶反應(yīng)時(shí)間等因素。其中,酶

33、反應(yīng)時(shí)間可通過________________來調(diào)節(jié)。 解析:(1)植物體中存在果膠酶,果膠酶能催化果膠的水解,沸水漂洗后會(huì)使果膠酶失去活性,所以先經(jīng)過一段時(shí)間沸水漂洗的果膠得率顯著高于常溫水漂洗的果膠得率。(2)純化菌種常使用劃線分離法或涂布分離法,通過擴(kuò)大培養(yǎng)進(jìn)行特性鑒定,篩選得到純的菌株。(3)果膠酶和果膠甲酯酶能使果膠徹底分解成半乳糖醛酸,淀粉在水中的溶解度比較小,也是造成汁液渾濁的原因,所以可用淀粉酶催化淀粉的水解。(4)本題考查連續(xù)生產(chǎn)工藝,反應(yīng)器中底物的量、酶制劑的量、反應(yīng)液的溫度、反應(yīng)液的pH、酶反應(yīng)時(shí)間等都會(huì)影響產(chǎn)物的生成率。單位時(shí)間內(nèi)流經(jīng)反應(yīng)器的液體流量越大,反應(yīng)時(shí)間就越

34、短,反之則長。 答案:(1)C (2)劃線分離法(或涂布分離法) 擴(kuò)大培養(yǎng) (3)果膠酶和果膠甲酯酶 淀粉酶使淀粉分解 (4)固定化酶的量、反應(yīng)液溫度 控制反應(yīng)器液體流量(或體積) 2.(2020·浙江黃巖選考模擬)獼猴桃被譽(yù)為“水果之王”。如圖是利用獼猴桃進(jìn)行深加工的過程圖,請(qǐng)分析回答: (1)圖中過程①加入果膠酶的主要作用是分解____________________________中的果膠,使榨取果汁變得容易。 (2)為了保持果膠酶催化的高活性和高效率,必要的條件是保持______________________,同時(shí)還必須做到施加的果膠酶________。 (3)產(chǎn)果膠

35、酶的菌株一般可從腐爛的果蔬或果園泥土中分離,利用以________為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基篩選。 (4)圖中菌種X、Y分別是________、________。 解析:(1)果膠酶能夠分解細(xì)胞壁和胞間層中的果膠,使榨取果汁變得容易。 (2)溫度和pH均能影響酶的活性,因此為了保持果膠酶的催化活性最高,需要保持適宜的溫度和pH;為了提高生產(chǎn)效率,還要做到施加的果膠酶適量。 (3)為了篩選能夠高效生產(chǎn)果膠酶的菌種,應(yīng)利用以果膠為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)。 (4)酒精發(fā)酵的菌種為酵母菌,醋酸發(fā)酵的菌種為醋桿菌。 答案:(1)細(xì)胞壁和胞間層 (2)適宜的溫度和pH 適量 (3)果

36、膠 (4)酵母菌 醋桿菌 3.生產(chǎn)果汁時(shí),用果膠酶處理果泥可提高果汁的出汁量?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題: (1)某同學(xué)用三種不同的果膠酶進(jìn)行三組實(shí)驗(yàn),各組實(shí)驗(yàn)除酶的來源不同外,其他條件都相同,測(cè)定各組的出汁量,據(jù)此計(jì)算各組果膠酶的活性的平均值并進(jìn)行比較。這一實(shí)驗(yàn)的目的是______________________。 (2)現(xiàn)有一種新分離出來的果膠酶,為探究其最適溫度,某同學(xué)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn):取試管16支,分別加入等量的果泥、果膠酶、緩沖液,混勻,平均分為4組,分別置于0 ℃、5 ℃、10 ℃、40 ℃下保溫相同時(shí)間,然后,測(cè)定各試管中的出汁量并計(jì)算各組出汁量平均值。該實(shí)驗(yàn)溫度設(shè)置的不足之處有___

37、_____________________和________________________。 (3)某同學(xué)取5組試管(A~E)分別加入等量的同種果泥,在A、B、C、D 4個(gè)實(shí)驗(yàn)組的試管中分別加入等量的緩沖液和不同量的同種果膠酶,然后,補(bǔ)充蒸餾水使4組試管內(nèi)液體體積相同;E組加入蒸餾水使試管中液體體積與實(shí)驗(yàn)組相同。將5組試管置于適宜溫度下保溫一定時(shí)間后,測(cè)定各組的出汁量。通過A~D組實(shí)驗(yàn)可比較不同實(shí)驗(yàn)組出汁量的差異。本實(shí)驗(yàn)中,若要檢測(cè)加入酶的量等于0而其他條件均與實(shí)驗(yàn)組相同時(shí)的出汁量,E組設(shè)計(jì)________(填“能”或“不能”)達(dá)到目的,其原因是______________________

38、__________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析:(1)根據(jù)題意,用三種不同的果膠酶進(jìn)行三組實(shí)驗(yàn),各組實(shí)驗(yàn)除酶的來源不同外,其他條件都相同,測(cè)定各組的出汁量,據(jù)此計(jì)算各組果膠酶的活性的平均值并進(jìn)行比較,可見實(shí)驗(yàn)的自變量是果膠酶的來源不同,因變量是果膠酶的活性,所以該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄坎煌瑏碓垂z酶的活性。 (2)根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可知,該實(shí)驗(yàn)是探究果膠酶的最適溫度,所以自變量是溫度,因變量是果膠

39、酶的活性,用出汁量進(jìn)行衡量,出汁量越多則果膠酶活性越高。該實(shí)驗(yàn)方案中,溫度應(yīng)該在常溫范圍內(nèi)設(shè)置系列溫度梯度且梯度差值相等,所以4組的溫度應(yīng)分別設(shè)置為15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃;另外探究溫度對(duì)酶活性的影響時(shí),應(yīng)保證酶促反應(yīng)只能在設(shè)定的溫度下進(jìn)行,同一實(shí)驗(yàn)組的反應(yīng)溫度只能是一個(gè),所以實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該是將各組盛有果膠酶的試管與盛有果泥的試管分別在設(shè)定溫度下處理一定時(shí)間后再將兩支試管混合,才能保證實(shí)驗(yàn)在設(shè)定的溫度下進(jìn)行。 (3)根據(jù)題意,本實(shí)驗(yàn)的自變量是果膠酶的量,因變量是出汁量,對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)應(yīng)遵循單一變量原則和對(duì)照原則,根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置,通過A~D組實(shí)驗(yàn)可比較不同實(shí)驗(yàn)組出汁量的差異。若要檢測(cè)

40、加入酶的量等于0而其他條件均與實(shí)驗(yàn)組相同時(shí)的出汁量,則E組應(yīng)加入緩沖液而不是蒸餾水,使試管中液體體積與實(shí)驗(yàn)組相同,才符合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循的單一變量原則。 答案:(1)探究不同來源果膠酶的活性 (2)4組的溫度設(shè)置不合適 各組的酶促反應(yīng)受兩個(gè)不同溫度影響(每一設(shè)定溫度的兩支試管應(yīng)先達(dá)到預(yù)定溫度,然后再混合)(其他答案合理也可) (3)不能 E組加入蒸餾水而不是緩沖液違背了單一變量原則 4.乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,具有重要應(yīng)用價(jià)值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下: (1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí),宜用________作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的作用是________

41、。從功能上講,這種培養(yǎng)基屬于____________。 (2)培養(yǎng)微生物L(fēng)前,宜采用________方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌。 (3)乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法(共價(jià)鍵結(jié)合法)進(jìn)行固定化,可通過檢測(cè)固定化乳糖酶的________確定其應(yīng)用價(jià)值。除化學(xué)結(jié)合法外,酶的固定化方法還包括________、______________________、離子吸附法及交聯(lián)法等。 解析:(1)若要篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物,需要利用以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基,不能利用乳糖的微生物在此培養(yǎng)基上不能存活,從而起到篩選作用。 (2)對(duì)接種環(huán)滅菌常用的方法是灼燒滅菌。 (3)固定化乳糖酶的應(yīng)用價(jià)值主要與其活性有關(guān)。酶的固定

42、化方法除化學(xué)結(jié)合法外,還包括包埋法和物理吸附法等。 答案:(1)乳糖 凝固劑 選擇培養(yǎng)基 (2)灼燒 (3)(酶)活性[或:(酶)活力] 包埋法 物理吸附法(注:兩空可顛倒) 5.(2020·杭州模擬)酶經(jīng)過固定化后,不僅能提高酶的穩(wěn)定性,而且容易與產(chǎn)物分開,具有可反復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn)。如圖為利用枯草桿菌生產(chǎn)α-淀粉酶及酶固定化實(shí)驗(yàn)流程圖,回答有關(guān)問題: (1)篩選高表達(dá)菌株的最簡便方法之一是____________。一般通過________________、______________兩種手段實(shí)現(xiàn)。篩選出的菌株在發(fā)酵生產(chǎn)之前還需利用________培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。 (2)利用物理

43、或化學(xué)的方法將α-淀粉酶固定在________的介質(zhì)上成為固定化酶。 (3)如圖是實(shí)驗(yàn)室中α-淀粉酶的固定化裝置示意圖。實(shí)驗(yàn)過程涉及兩次蒸餾水洗滌反應(yīng)柱的操作,所用的蒸餾水體積為裝填體積的________,第二次洗滌的目的是除去________________________。 (4)若如圖中的液體X為淀粉溶液,從反應(yīng)柱下端接取少量流出液進(jìn)行KI-I2顏色測(cè)試,結(jié)果未呈現(xiàn)紅色。下列有關(guān)此現(xiàn)象的解釋錯(cuò)誤的是(  ) A.反應(yīng)柱中沒有α-淀粉酶被固定 B.流速過快淀粉未被水解 C.接取的流出液是蒸餾水 D.流速過慢淀粉被水解成葡萄糖 答案:(1)單菌落分離 劃線分離 (稀釋)涂布

44、分離 液體 (2)非水溶性 (3)10倍 殘留的淀粉溶液 (4)D 6.(2020·浙江吳越聯(lián)盟高三第二次聯(lián)考)草莓汁酸甜可口,深受大眾喜愛,加工草莓汁時(shí),草莓中的果膠易導(dǎo)致果汁渾濁,影響品質(zhì),為探究制作果汁的最佳條件,研究人員進(jìn)行了實(shí)驗(yàn),結(jié)果如下表所示。 組別 果膠酶用 量(mL/kg) pH 溫度(℃) 草莓汁透光率(%) 1 0.025 2.5 35 24.55 2 0.035 4.5 35 96.47 3 0.035 2.5 45 22.70 4 0.045 3.5 35 96.47 5 0.045 2.5 55 1

45、3.12 請(qǐng)回答: (1)草莓細(xì)胞中,去掉果膠,會(huì)使植物組織變得松散,這是因?yàn)楣z具有______________________的作用。果膠酶通過________________________作用促進(jìn)果膠的水解反應(yīng),使草莓細(xì)胞彼此容易分開。 (2)生產(chǎn)過程中,既可獲得澄清度高的草莓汁,又可減少酶的用量,降低成本的條件組合是第____________組。為測(cè)定該組條件下處理后的草莓汁中是否還有果膠,可取一定量的草莓汁與等量的________________________混合。 (3)果膠酶可從某些微生物如__________________中提取,為提高生產(chǎn)效率,可將此酶固定在

46、適宜介質(zhì)上制成______________________。 (4)在合適條件下,將果膠酶與海藻酸鈉混合后,滴加到一定濃度的鈣離子溶液中,使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對(duì)酶進(jìn)行____________。 A.吸附         B.包埋 C.裝柱 D.洗滌 解析:(1)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,其中果膠具有將植物細(xì)胞粘合在一起的作用,所以根據(jù)酶的專一性,應(yīng)該用果膠酶催化果膠水解,去掉草莓細(xì)胞中的果膠,使得細(xì)胞彼此分離。 (2)根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析,第2組用的酶比較少,草莓汁透光率高,可大大降低成本,提高品質(zhì)。 (3)果膠酶可從某些微生物如黑曲霉(或蘋果青霉)中提取,

47、為提高生產(chǎn)效率,可將此酶固定在適宜介質(zhì)上制成固定化酶。 (4)將酶與海藻酸鈉融合,形成凝膠珠的方法是包埋法。 答案:(1)將植物細(xì)胞粘合在一起 催化 (2)2 95%的乙醇 (3)黑曲霉(或蘋果青霉) 固定化酶 (4)B 7.我國植物學(xué)家將名貴蘭花的莖尖細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),最終發(fā)育成完整的新植株。如圖是組織培養(yǎng)形成蘭花植株的示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題: (1)用此技術(shù)培養(yǎng)形成蘭花植株依據(jù)的原理是______________________________ ________。 (2)在培養(yǎng)過程中,要促進(jìn)細(xì)胞分裂生長,培養(yǎng)基中應(yīng)有營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素,營養(yǎng)物質(zhì)包括無機(jī)物和小分子

48、的有機(jī)物,植物激素包括________________和________________兩類植物激素。 (3)在培養(yǎng)過程中,除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外,成功的另一個(gè)關(guān)鍵是操作過程必須保證________________________________________________________。 (4)過程③~④進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是____________________________________, 過程④~⑤除了細(xì)胞分裂外,還進(jìn)行細(xì)胞____________等過程。 (5)從育種的角度來看,植物組織培養(yǎng)與有性繁殖相比,優(yōu)勢(shì)主要有(列舉兩條):___________

49、_____________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析:該技術(shù)依據(jù)的是植物細(xì)胞的全能性,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞全能性的首要條件是離體、無菌,然后要給予一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和適宜的外界條件。在培養(yǎng)過程中,細(xì)胞以有絲分裂的方式增殖,經(jīng)過細(xì)胞分裂、分化最終形成植株。植物組織培養(yǎng)屬于無性繁殖,具有保持親本優(yōu)良性狀、能快速大量繁殖種苗等優(yōu)點(diǎn)。 答案:(1)植物細(xì)胞的全能性 (2)生長素 細(xì)胞

50、分裂素 (3)無菌 (4)有絲分裂 分化 (5)能保持母本的優(yōu)良性狀;培養(yǎng)周期短,繁殖效率高(或快速繁殖);能培育無病毒植物等(列出兩條即可) 8.(2020·浙江黃巖選考模擬)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染病毒傳播給后代,導(dǎo)致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如圖,請(qǐng)回答下列問題: 外植體愈傷組織芽、根植株 (1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時(shí),一般選取________作為外植體,其依據(jù)是________________________________________________________________________。

51、(2)在過程①中,常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和________,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加________________,有利于外植體啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織,接種后2~5 d,若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染,原因可能是____________________。 (3)在過程②中,愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是________________________________________________________________________ _________________________________________

52、_______________________________。 解析:(1)因莖尖(或根尖)病毒極少,甚至無病毒,所以常用其作為外植體培育無病毒植株。(2)在植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中,除了添加植物必需的礦質(zhì)元素外,還要添加有機(jī)物,添加植物激素有利于啟動(dòng)細(xì)胞分裂實(shí)現(xiàn)脫分化形成愈傷組織并且可誘導(dǎo)愈傷組織細(xì)胞再分化過程。若對(duì)外植體消毒不徹底,會(huì)造成外植體邊緣局部污染。(3)在培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素的用量比值不同,誘導(dǎo)生根發(fā)芽結(jié)果不同,當(dāng)比值低時(shí),有利于發(fā)芽,比值高時(shí),有利于生根。 答案:(1)莖尖(或根尖) 莖尖(或根尖)病毒極少,甚至無病毒 (2)有機(jī)物 植物激素 外植體消毒不徹底 (3)培養(yǎng)基中生長素類物質(zhì)用量與細(xì)胞分裂素類物質(zhì)用量的比值偏低 18

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