備戰(zhàn)2019年高考生物 考點一遍過 考點84 動物細胞融合與單克隆抗體（含解析）

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1、考點84 動物細胞融合與單克隆抗體 1．動物細胞融合 （1）原理：細胞膜的流動性。 （2）融合方法：聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。 （3）意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能，也為制造單克隆抗體開辟了新途徑。 2．單克隆抗體 （1）制備過程 （2）優(yōu)點：特異性強、靈敏度高，可大量制備。 （3）用途：作為診斷試劑；用于治療疾病和運載藥物。 考向 單克隆抗體的制備過程分析 1．下圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。有關敘述錯誤的是 A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞 B．②過程體現(xiàn)了細胞膜的流動性 C．③

2、所示細胞因高度分化而失去了分裂能力 D．④是經篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群 【參考答案】C 解題技巧 制備單克隆抗體過程中兩次篩選的方法及目的 項目 第一次篩選 第二次篩選 篩選 原因 誘導融合后得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞 由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產生其他抗體的細胞 篩選 方法 用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“BB”細胞、 “瘤瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B瘤”細胞)能生長 用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化

3、培養(yǎng)和抗體檢測，經多次篩選得到能產生特異性抗體的細胞群 篩選 目的 得到雜交瘤細胞 得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞 2．單克隆抗體的特點是特異性強、靈敏度高、可以大量制備，已被廣泛應用于疾病的診斷和治療。用H7N9病毒制備單克隆抗體的流程如下圖所示： （1）過程③常用的方法是_________________________。 （2）向小鼠體內注射抗原蛋白，使小鼠產生________免疫。從小鼠體內分離的細胞Ⅰ是___________________________，細胞Ⅱ應具有的特點是____________________________。 （3）體外培養(yǎng)細胞Ⅱ

4、，首先應保證其處于______________________________的環(huán)境中，其次需要提供充足的營養(yǎng)和適宜的溫度。培養(yǎng)箱充入二氧化碳的作用是______________________。 （4）對于轉基因成功的細胞Ⅱ還要進行克隆化培養(yǎng)和__________________檢測。 （5）若要預防H7N9禽流感，可用圖中的______________作為疫苗。 【答案】（1）顯微注射技術 （2）體液(只答特異性不可) B淋巴細胞(漿細胞或已免疫的B淋巴細胞) 既能無限增殖，又能產生特異性抗體 （3）無菌、無毒(缺一不可) 維持培養(yǎng)液的pH （4）(專一)抗體 （

5、5）抗原蛋白 1．下列有關單克隆抗體制備及其應用的敘述，不正確的是 A．制備單克隆抗體運用的技術有動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng) B．給小鼠注射抗原，是為了獲得能產生相應抗體的B細胞 C．需要從雜交瘤細胞中篩選出能產生特定抗體的細胞 D．利用生物導彈治療癌癥就是利用了單克隆抗體清除癌細胞 2．利用細胞工程的方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關敘述正確的是 A．用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體 B．體外培養(yǎng)單個漿細胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體 C．將等量漿細胞和骨髄瘤細胞混合，經PEG誘導融合后的細

6、胞均為雜交瘤細胞 D．利用該單克隆抗體可診斷出SARS病毒的感染者 3．通過細胞工程生產單克降抗體時，通常要經過三次篩選： ①選出能產生抗體的B淋巴細胞 ②在特定培養(yǎng)基中篩選雜交瘤細胞 ③選出能產生特定抗體并能大量增殖的細胞群。這三個過程的先后順序是 A．②①③ B．①②③ C．①③② D．③②① 4．某研究者利用細胞工程制備抗A的單克隆抗體。先用抗原(A)分別免疫3只同種小白兔(X、Y和Z)，每只小白兔免疫5次，每次免疫一周后測定各小白兔血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù))，制備B淋巴細胞時，免疫小

7、鼠的血清抗體效價需達到16 000以上，結果如圖所示。下列有關敘述錯誤的是 A．將抗原A注入小白兔體內的目的是獲得已免疫的B淋巴細胞 B．最適合用于制備B淋巴細胞的是第五次免疫后的Y小白兔 C．骨髓瘤細胞與B淋巴細胞的融合必須使用滅活的病毒進行促融 D．融合細胞需經兩次篩選才可獲得只分泌抗A抗體的雜交瘤細胞 5．關于下面制備單克隆抗體過程示意圖的敘述，不正確的是 A．①表示已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B．②促進細胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導 C．④中的篩選是通過抗原—抗體反應進行的 D．⑤可以無限增殖 6．下圖是單克隆抗體制備流

8、程的示意圖。下列有關敘述正確的是 A．從小鼠脾臟中獲得細胞①主要參與細胞免疫 B．過程②利用細胞膜選擇透過性原理 C．細胞③同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性 D．④是經篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群 7．甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測甘草酸，科研人員利用細胞工程技術制備了抗甘草酸的單克隆抗體，其基本操作過程如下圖。相關敘述正確的是 A．過程①注射相應抗原后應立即從小鼠脾臟中提取細胞甲 B．過程②誘導細胞融合，利用了細胞膜的選擇透過性 C．過程③、④的篩選方法相同，細胞丙、丁遺傳物質相同 D．過程⑤無論在體內還是體外進行，細胞丁都可大量增

9、殖 8．人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖。相關敘述正確的是 A．①過程所用的促融方法與植物體細胞雜交完全相同 B．③過程以抗HCG單克隆抗體為抗原進行檢測 C．應給小鼠多次注射HCG，以獲得較多的記憶細胞 D．④過程需要添加抗生素等物質，以防止病毒污染 9．如下圖所示，請據(jù)圖回答下面的問題。 （1）淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞膜也能“融合”在一起，說細胞膜具有___________________特點。此過程中，常用的生物誘導劑為__

10、________________，該雜交細胞的特點是____________________________________________________。 （2）雜交瘤細胞的體外培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分有何主要不同？______________________________________________________________________。 （3）單克隆抗體注入體內后可以自動追蹤抗原(病原體或癌變細胞等)并與之結合，而絕不攻擊任何正常細胞，故稱為“生物導彈”，這是利用了__________________________________。 （4）在單克隆抗體制備

11、過程中，應用了細胞工程中的_________________和_______________兩大技術。 10．2013年4月16日國家衛(wèi)生和計劃生育委員會公布，全國共報告人感染H7N9禽流感確診病例77例，其中16人已死亡，禽流感再度備受關注。醫(yī)學界正在致力于研究預防H7N9禽流感病毒的疫苗和單克隆抗體?？茖W家決定采用基因敲除術將小鼠的Ig基因敲除，代之以人的Ig基因，然后用H7N9病毒去免疫小鼠，再經雜交瘤技術即可產生大量完全人源化抗體。如圖是某科研機構的實驗方案。請回答： （1）此處基因敲除技術的受體細胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的__________細胞，經技術處理后的該細胞，

12、再重新植入小鼠脾臟中增殖。 （2）小鼠B淋巴細胞用B表示，小鼠骨髓瘤細胞用A表示，在培養(yǎng)液中，用滅活的動物病毒作促融劑，培養(yǎng)液中共有__________種類型的融合細胞（只考慮兩兩融合） （3）第一次篩選是選出____________________型的細胞（用字母組合表示），篩選具體方法是在培養(yǎng)基中加入某種物質，抑制骨髓瘤細胞DNA的復制，而B細胞DNA復制雖不受影響，但增殖能力很有限，只有雜交瘤細胞可以借助B細胞DNA復制的途徑，繼續(xù)增殖。此種培養(yǎng)基稱為____________________培養(yǎng)基。 （4）將能產生抗H7N9病毒的雜交瘤細胞在動物培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，其培養(yǎng)液與植物組織

13、培養(yǎng)的MS培養(yǎng)基相比，特有成分是______________________________。 （5）利用上述技術生產的單克隆抗體可制作成診斷盒，用于準確、快速診斷H7N9禽流感病毒的感染者，這種診斷運用了____________________雜交技術。 （6）有人設想，能否利用經H7N9病毒免疫后的小鼠效應T細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞，大量生產單克隆干擾素，用于H7N9禽流感患者的有效治療。你覺得該方法_______________（填“可行”或“不可行”），因為______________________________。 11．（2018·江蘇卷）如圖為細胞融

14、合的示意圖，下列敘述正確的是 A．若a細胞和b細胞是植物細胞，需先去分化再誘導融合 B．a細胞和b細胞之間的融合需要促融處理后才能實現(xiàn) C．c細胞的形成與a、b細胞膜的流動性都有關 D．c細胞將同時表達a細胞和b細胞中的所有基因 12．（2017·江蘇卷）牛雄性胚胎中存在特異性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y 單克隆抗體，篩選胚胎進行移植，以利用乳腺生物反應器進行生物制藥。下列相關敘述正確的是 A．H-Y 單克隆抗體由骨髓瘤細胞分泌 B．應選用原腸胚做雌雄鑒別 C．鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D．用H-Y 抗原免疫母?？色@得相應抗體 1．【答

15、案】D 2．【答案】D 【解析】單克隆抗體是由單個的雜交瘤細胞經過增殖而形成的遺傳信息相同的大量細胞產生的化學性質單一、特異性強的抗體，所以用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清抗體不屬于單克隆抗體，A錯誤；漿細胞不能增殖，體外培養(yǎng)單個漿細胞不能獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體，B錯誤；將等量漿細胞和骨髄瘤細胞混合，經PEG誘導融合后的細胞中，只有漿細胞和骨髄瘤細胞融合后形成的細胞才屬于雜交瘤細胞，C錯誤；利用該單克隆抗體能夠與抗原特異性結合的原理，可診斷出SARS病毒的感染者，D正確。 3．【答案】B 4．【答案】C 【解析】制備抗A的單克隆抗體，必須先獲

16、得能產生抗A的B淋巴細胞，則需要將抗原A注入小白兔體內從而獲得已免疫的B淋巴細胞，A正確。由于第五次免疫后Y小白兔的血清抗體的效價最高，因此最適合用于制備B淋巴細胞，B正確。骨髓瘤細胞與B淋巴細胞的融合可以采用物理法（離心、電激）、化學法（聚乙二醇）或滅活的病毒進行促融，C錯誤。融合細胞需經兩次篩選才可獲得只分泌抗A抗體的雜交瘤細胞，第一次是篩選出雜交瘤細胞(用選擇培養(yǎng)基)，第二次是進一步篩選出能產生抗A抗體的雜交瘤細胞，D正確。 5．【答案】A 【解析】已免疫的B淋巴細胞可以從小鼠的脾臟中提取，也可以從血漿中提取，骨髓瘤細胞是從小鼠的骨髓中提取的。單克隆抗體是利用已免疫的B淋巴細胞和骨

17、髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞得到的，融合方法可以用化學方法——聚乙二醇，生物方法——滅活的病毒等。如果要篩選能產生特定抗體的細胞群，可以通過檢測抗原—抗體反應，如果有反應說明產生了抗體。融合細胞具有雙親的特點，既能無限增殖又能產生單一抗體。 6．【答案】D 【解析】①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應B細胞，參與體液免疫，A錯誤；在動物細胞融合的過程中，利用細胞膜的流動性，B錯誤；效應B細胞與骨髓瘤細胞進行融合，只考慮兩兩融合會有三種結果：雜交瘤細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞、B細胞自身融合細胞等，只有雜交瘤細胞既能無限增殖又能產生特異性抗體，C錯誤；④過程表示用抗體陽性檢測，篩選出能分泌特異

18、性抗體的雜交瘤細胞，D正確。 7．【答案】D 【解析】過程①注射相應抗原后應經過一段時間，使小鼠產生漿細胞，再從小鼠脾臟中提取細胞甲，A項錯誤；過程②誘導細胞融合，利用了細胞膜的流動性，B項錯誤；過程③篩選雜交瘤細胞，過程④篩選能產生單一抗體的雜交瘤細胞，二者方法不同，C項錯誤；過程⑤無論在體內還是體外進行，細胞丁都可大量增殖，D項正確。 8．【答案】B 9．（1）流動性 聚乙二醇(或滅活病毒) 具有無限增殖能力，能產生特異性抗體 （2）動物細胞培養(yǎng)用的是液體培養(yǎng)基，且其中含有動物血清 （3）抗原與抗體之間結合的高度特異性 （4）動物細胞融合 動物細胞培養(yǎng)

19、 【解析】（1）淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，兩種細胞膜也能“融合”在一起，說明細胞膜具有一定的流動性；常用聚乙二醇或滅活病毒作為誘導劑，該雜交細胞的特點是具有無限增殖能力，能產生特異性抗體。（2）動物細胞培養(yǎng)用的是液體培養(yǎng)基，且其中含有動物血清；植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，而且含有生長素和細胞分裂素。（3）單克隆抗體注入體內后可以自動追蹤抗原并與之結合，而絕不攻擊任何正常細胞，故稱為“生物導彈”，這是利用了抗原與抗體之間結合的高度特異性。（4）在單克隆抗體制備過程中，應用了細胞工程中的動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)兩大技術。 10．【答案】（1）B淋巴 （2）3 （3）AB

20、 選擇 （4）動物血清或血漿 （5）抗原—抗體 （6）不可行 骨髓瘤細胞是效應T細胞要攻擊殺死的靶細胞，兩者不可能融合成雜交瘤細胞 【解析】（1）此處基因敲除技術的受體細胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的B淋巴細胞細胞，因為B淋巴細胞可以產生抗體。（2）在誘導細胞融合時，若考慮兩兩融合，則有AA、BB和AB三類細胞，而在制備單克隆抗體的制備過程中需要異種細胞核融合的細胞，所以需要選擇培養(yǎng)基的篩選才能獲得所需要的雜交瘤細胞，該細胞既能無限增殖又能產生專一抗體。（3）第一次篩選是選出AB型的細胞（用字母組合表示），篩選具體方法是在培養(yǎng)基中加入某種物質，抑制骨髓瘤細胞DNA的復制，而B

21、細胞DNA復制雖不受影響，但增殖能力很有限，只有雜交瘤細胞可以借助B細胞DNA復制的途徑，繼續(xù)增殖。此種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。（4）將能產生抗H7N9病毒的雜交瘤細胞在動物培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，其培養(yǎng)液與植物組織培養(yǎng)的MS培養(yǎng)基相比，特有成分是動物血清或血漿。（5）利用上述技術生產的單克隆抗體可制作成診斷盒，用于準確、快速診斷H7N9禽流感病毒的感染者，這種診斷運用了抗體—抗原雜交技術。（6）由于骨髓瘤細胞是效應T細胞要攻擊殺死的靶細胞，兩者不可能融合成雜交瘤細胞，所以不能利用經H7N9病毒免疫后的小鼠效應T細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞。 11．【答案】BC 12．【答案】D 【解析】單克隆抗體由雜交瘤細胞分泌，A錯誤；做雌雄性別鑒別應選擇囊胚期的滋養(yǎng)層細胞，B錯誤；由于是利用乳腺生物反應器進行生物制藥，則鑒別后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎沒有意義，C錯誤；H-Y抗原免疫母牛，使其體內產生體液免疫，產生相應的漿細胞，獲得相應抗體，D正確。 11