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1、課時作業(yè)10 DNA的粗提取與鑒定
1.(2019年高考·江蘇卷)下列關于DNA粗提取與鑒定的敘述,錯誤的是( )
A.用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近
B.DNA析出過程中,攪拌操作要輕柔以防DNA斷裂
C.預冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNA
D.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱
解析:哺乳動物成熟的紅細胞中無細胞核和細胞器,不能提取到DNA;雞血、菜花、豌豆、菠菜等都具有細胞核,可以通過不同的方法提取DNA,用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量差異很大,A錯誤。為防止DNA斷裂,在DNA析出過程中攪拌操作要輕柔且沿著一個方向,B正確。DNA不
2、溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精溶液,預冷的酒精溶液可用來進一步純化粗提的DNA,C正確。在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色,因此,用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱,D正確。
答案:A
2.在采用雞血材料對DNA進行粗提取的實驗中,若需進一步提取雜質較少的DNA,可依據(jù)的原理是( )
A.在物質的量濃度為0.14 mol/L的氯化鈉溶液中DNA的溶解度最小
B.DNA遇二苯胺在沸水浴的條件下會染成藍色
C.DNA不溶于酒精而細胞中的一些物質易溶于酒精
D.質量濃度為0.1 g/mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用
答案:C
3.下列關于“DNA的粗提
3、取與鑒定”實驗敘述,錯誤的是( )
A.酵母和菜花均可作為提取DNA的材料
B.DNA既溶于2mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水
C.向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌,可見玻棒上有白色絮狀物
D.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍
解析:原則上含DNA的生物材料都行,只是DNA含量高的成功的可能性更大,所以酵母和菜花可作為提取DNA 的材料,故A正確;DNA 在2 mol/ L NaCl溶液和蒸餾水中,溶解度較大,故B正確;向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌,雞血細胞會破裂,因DNA在蒸餾水中溶解度較大,故不會析出,C錯誤; DNA 溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍,故D正
4、確。
答案:C
4.在DNA的粗提取實驗過程中,先后兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用分別是( )
A.稀釋血液、沖洗樣品
B.使血細胞破裂、降低NaCl濃度使DNA析出
C.使血細胞破裂、增大DNA溶解量
D.使血細胞破裂、提取含雜質較少的DNA
解析:第一次加入蒸餾水的作用是使血細胞過度吸水而破裂使核內物質釋放。第二次加入適量蒸餾水,是為了將NaCl溶液濃度降低到0.14 mol/L,使DNA因溶解度達到最小而析出。
答案:B
5.向溶有DNA的2 mol/L NaCl溶液中不斷加入蒸餾水,在這個過程中DNA和雜質蛋白質等的溶解度變化情況分別是( )
A.減小、減小
5、 B.增大、增大
C.先減小后增大、增大 D.減小、增大
解析:DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,濃度大于或小于此濃度時溶解度都較高。而DNA溶解度低時,蛋白質的溶解度卻較高。
答案:C
6.下列操作中,對DNA的提取量影響較大的是( )
①使雞血細胞在蒸餾水中充分破裂,釋放出DNA等核中物質
②攪拌時,要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動
③在析出DNA黏稠物時,要緩緩加蒸餾水,直至溶液中黏稠物不再增多
④在用酒精沉淀DNA時,要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻
⑤在DNA的溶解和再溶解時,要充分攪
6、拌
A.①②④⑤ B.①②③④
C.①③④⑤ D.②③④⑤
解析:①充分釋放出核中的DNA分子,使進入濾液中的DNA量盡量的多;③是讓DNA充分沉淀,保證DNA的量,④的道理同③。在②所述的操作中,可以保證DNA分子的完整性,但不影響提取量。除了①、③、④、⑤影響DNA的提取量外,使用塑料器皿也可以減少DNA在操作中的損失。
答案:C
7.在蛋白質和DNA的混合液中,要想得到較純的DNA,可采用的方法有( )
①向混合液中加入足量的蒸餾水
②向混合液中加入DNA水解酶
③向混合液中加入冷的95%的酒精
④向混合液中加入蛋白酶
A.①② B.③④
C.①③ D.②
7、④
解析:DNA分子在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低,在冷的酒精中可析出,據(jù)此可將DNA和蛋白質分離;DNA水解酶能將DNA水解成脫氧核苷酸,而蛋白酶則將蛋白質水解成可溶性的多肽,從而將蛋白質與DNA分離。
答案:B
8.在NaCl溶液中反復溶解、析出并過濾,就能除去DNA溶液中的雜質的理由不包括( )
A.用高濃度鹽溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質
B.用低濃度鹽使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質
C.反復操作就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質
D.反復操作就能夠使各種雜質變性而沉淀析出
解析:DNA在NaCl溶液中反復溶解、析出的操
8、作過程中,使用的NaCl溶液的濃度,并沒有達到使蛋白質變性的程度。
答案:D
9.某同學用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定實驗,操作錯誤的是( )
A.加入洗滌劑后用力進行快速、充分的研磨
B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA
C.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌
D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱
解析:用植物材料提取DNA時,需要先用洗滌劑溶解細胞膜,但應注意,加入洗滌劑后動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作,所以A錯;用蛋白酶處理過濾后的研磨液,能催化其中的蛋白質水解成小分子,有利于DNA的進一步純化,所以B正確;加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以
9、免加劇DNA分子的斷裂,導致DNA分子不能形成絮狀沉淀,所以C正確;在DNA鑒定時,先使其溶解在2 mol/L(或0.015 mol/L)的NaCl溶液中,之后加入二苯胺試劑混合均勻后沸水浴加熱5 min,待冷卻后觀察顏色變化,所以D正確。
答案:A
10.下列關于酒精在相關實驗中運用的敘述,正確的是( )
①在接種前一般要用50%的酒精擦拭雙手
②在提取葉綠體中色素時可用酒精代替丙酮
③在95%的冷酒精中DNA的溶解度較大
④用蘇丹Ⅲ染液鑒定花生子葉中的脂肪時需要用酒精洗去浮色
A.①② B.③④
C.①③ D.②④
解析:本題考查對常用實驗藥品的作用的掌握情況。在平
10、時學習時,要善于進行比較歸納。在接種前,一般要用75%的酒精擦拭雙手;色素溶于有機溶劑,不溶于水,可用酒精替代丙酮;DNA在95%的冷酒精溶解度較小,容易析出;在用蘇丹Ⅲ染液鑒定花生子葉中的脂肪時需要用酒精洗去浮色。另外,在用洋蔥根尖觀察有絲分裂過程的實驗中,也用到95%酒精,其作用是使細胞固定。
答案:D
11.蛋白酶能將蛋白質水解而使染色體中的DNA分離出來,下列藥品可達到上述同一目的的是( )
A.蒸餾水 B.NaCl溶液
C.NaOH溶液 D.鹽酸
解析:蛋白酶是將染色體上的蛋白質分解后讓DNA分離出來,用0.14 mol/L的NaCl處理DNA時,DNA的溶解度最低,
11、可從NaCl溶液中分離出來。二者的原理雖然不同,但目的是一樣的。獲取DNA的方法有多種,其中利用DNA在NaCl中的溶解度不同,可以達到與蛋白酶水解蛋白質而分離出DNA相同的效果。
答案:B
12.在DNA粗提取實驗中,有兩次DNA的沉淀析出,其依據(jù)的原理是( )
①DNA在NaCl的濃度為0.14 mol/L時溶解度最低
②DNA在95%的酒精中沉淀析出
A.兩次都是①
B.兩次都是②
C.第一次是①,第二次是②
D.第一次是②,第二次是①
解析:第一次,利用的原理是①,因為在這種濃度的NaCl溶液中,DNA的溶解度最低,而蛋白質溶解度增大,所以通過過濾能將DNA與蛋白質
12、分開,以除去蛋白質。第二次利用的原理是②,即冷酒精能使DNA沉淀,而部分蛋白質溶于酒精,可進一步提純DNA,所以兩次順序不能顛倒。
答案:C
13.鑒定下列各種物質時,需要加熱(含水浴加熱)的一組是( )
①還原性糖 ②脂肪
③DNA ④蛋白質
A.①② B.③④
C.①③ D.②④
解析:鑒定還原性糖是用斐林試劑,需要水浴加熱;鑒定脂肪是用蘇丹Ⅲ染液或蘇丹Ⅳ染液,然后在顯微鏡下觀察其顏色,不用加熱;鑒定DNA是用二苯胺,需要水浴加熱;而鑒定蛋白質是用雙縮脲試劑,不需加熱,就可觀察到顏色。
答案:C
14.DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性,隨著NaCl溶液濃度
13、的變化而變化。
(1)請在下列濃度的NaCl溶液中,選出能使DNA析出最徹底的一種和溶解度最高的一種____________。
A.0.14 mol/L B.2 mol/L
C.0.15 mol/L D.0.3 mol/L
(2)欲使溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,需要降低NaCl溶液的濃度,最有效的方法是__________。
A.加蒸餾水 B.加礦泉水
C.加清水 D.加生理鹽水
(3)DNA不溶于酒精,但細胞中的某些物質卻可以溶于酒精溶液,利用這一原理可以__________,可以推測溶于酒精中的可能有____________________
14、____________________________________________________。
(4)利用DNA遇__________呈藍色的特性,將該物質作為鑒定__________的試劑。其實驗過程要點是向放有__________的試管中加入4 mL的__________混合均勻后,將試管置于__________5 min,待試管__________,觀察試管中溶液顏色的變化。
解析:根據(jù)課本DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線可知,DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,在2.0 mol/L的NaCl溶液中溶解度最高。溶解度低時,DNA析出較徹底,染色體由D
15、NA和蛋白質組成,為了把DNA和蛋白質分開,采取DNA不溶于酒精的辦法可將DNA和蛋白質分開,利用DNA遇二苯胺(沸水浴)變藍的特性可鑒定DNA。
答案:(1)A、B (2)A
(3)去除雜質 某些鹽類、蛋白質、糖類或其他大分子物質
(4)二苯胺 DNA DNA 二苯胺試劑 沸水浴加熱 冷卻后
15.“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,A、B、C、D、E五個小組除下表中所列處理方法不同、實驗材料不同外,其他操作步驟均相同,而且正確,但實驗結果卻不同。
組
別
實驗材料
提取核物
質時加入
的溶液
去除雜質時
加入的溶液
DNA鑒定
時加入的
試劑
A
雞血
蒸餾
16、水
95%的酒精(25 ℃)
二苯胺
B
菜花葉片
蒸餾水
95%的酒精(冷卻)
二苯胺
C
人血漿
蒸餾水
95%的酒精(冷卻)
二苯胺
D
人成熟
紅細胞
2 mol/L
的氯化鈉
0.14 mol/L的
氯化鈉溶液
雙縮脲
試液
E
雞血
蒸餾水
95%的酒精(冷卻)
二苯胺
請分析回答:
(1)B組實驗不成功的原因:_________________________________
________________________________________________________
______________
17、__。
(2)實驗材料選擇錯誤的組別是____________,其原因是
________________________________________________________
_______________________________________________________
________________。
(3)沸水浴中試管顏色變藍的組別是__________,其中顏色較淡的組別是__________。
解析:(1)提取菜花細胞中的DNA,應在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽,進行充分的攪拌和研磨才能釋放出核DNA。
(2)成熟的哺乳動物紅細胞無細胞核,人血漿中無DNA,所以從人的成熟紅細胞和人血漿中均得不到DNA,因此不能作為DNA粗提取的實驗材料。
(3)A項中去除雜質時加入95%的酒精為25 ℃,效果不佳,最終得到DNA量少些,顯淺藍色。B、C、D組得不到DNA,不變藍,E組中各步均正確,提取出的DNA與二苯胺顯藍色。
答案:(1)植物細胞在蒸餾水中不能被破壞,得不到DNA(或受細胞壁的限制,吸水膨脹不會破裂,應采用研磨的方法)
(2)C、D(缺一不可) 人的血漿中沒有細胞結構,成熟的紅細胞中沒有細胞核,選用這些材料得不到DNA
(3)A、E A
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