《電化學(xué)發(fā)光免疫分析法課件》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《電化學(xué)發(fā)光免疫分析法課件（75頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、化學(xué)發(fā)光免疫分析法,Chemiluminescence Immunoassay,免疫分析,基于抗原和抗體的特異性反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)的一種手段； 免疫標(biāo)記技術(shù)是將一些既易測(cè)定又具有高度敏感性的物質(zhì)標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上，通過(guò)這些標(biāo)記物的增強(qiáng)放大效應(yīng)來(lái)顯示反應(yīng)系統(tǒng)中抗原或抗體的性質(zhì)與含量。,免疫學(xué)檢測(cè)歷史演進(jìn),放射免疫檢測(cè)（興起于20世紀(jì)70年代，現(xiàn)仍普遍使用于縣級(jí)以上醫(yī)院）； 酶聯(lián)免疫檢測(cè)（興起于20世紀(jì)80年代，各臨床機(jī)構(gòu)普遍使用）； 以化學(xué)發(fā)光為代表的光生物學(xué)標(biāo)記及免疫檢測(cè)技術(shù)（20世紀(jì)90年代開(kāi)始推廣使用，產(chǎn)品步入成長(zhǎng)期）三個(gè)階段。,生活中常見(jiàn)的化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象,發(fā)光分類(lèi),光照發(fā)光（熒光）:發(fā)
2、光劑經(jīng)短波長(zhǎng)入射光照射后進(jìn)入激發(fā)態(tài)，當(dāng)回復(fù)至基態(tài)時(shí)發(fā)出較長(zhǎng)波長(zhǎng)的可見(jiàn)光。 生物發(fā)光：反應(yīng)底物在熒光素酶的催化下利用ATP產(chǎn)能，生成激發(fā)態(tài)的氧化熒光素，后者在回復(fù)到基態(tài)時(shí)多余的能量以光子形式放出。 化學(xué)發(fā)光,化學(xué)發(fā)光 Chemiluminescence (CL),化學(xué)發(fā)光是指在某些特殊的化學(xué)反應(yīng)中，反應(yīng)的中間體或產(chǎn)物由于吸收了反應(yīng)釋放的化學(xué)能而處于電子激發(fā)態(tài)，當(dāng)其回到基態(tài)時(shí)伴隨產(chǎn)生的光輻射現(xiàn)象。,化學(xué)發(fā)光原理,所謂化學(xué)發(fā)光 (CL) , 就是化學(xué)反應(yīng)的能量把體系中共存的某種分子從基態(tài)激發(fā)到激發(fā)態(tài)從而產(chǎn)生發(fā)光的現(xiàn)象。,化學(xué)發(fā)光的分類(lèi),直接化學(xué)發(fā)光 A + B C* + D C* C + h 例:
3、NO + O3 NO2* + O2 NO2* NO2 + h,化學(xué)發(fā)光的分類(lèi),間接化學(xué)反應(yīng)發(fā)光 A + B C* + D C* + E E* + C E* E + h,化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)中常用的化學(xué)發(fā)光劑或發(fā)光底物,酶促反應(yīng)的發(fā)光底物 直接化學(xué)發(fā)光劑 電化學(xué)發(fā)光劑,1酶促反應(yīng)的發(fā)光底物,酶促反應(yīng)的發(fā)光底物是指經(jīng)酶的降解作用而發(fā)出光的一類(lèi)發(fā)光底物，目前化學(xué)發(fā)光酶免疫技術(shù)中常用的酶有辣根過(guò)氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（ALP），相應(yīng)發(fā)光底物為：,(1) HRP的發(fā)光底物,常用的底物為魯米諾或其衍生物和對(duì)-羥基苯乙酸。 魯米諾或其衍生物 魯米諾的氧化反應(yīng)在堿性緩沖液中進(jìn)行，通常以0.1mol/L p
4、H8.6 Tris緩沖液作底物液。,H2O2 /OH HRP,+N2 + H2O +光, HPA在H2O2存在下被HRP氧化成氧化二聚體（熒光 物質(zhì)），在350nm激發(fā)光作用下，發(fā)出450nm波長(zhǎng) 的熒光，可用熒光光度計(jì)測(cè)量。,H2O2 HRP,+熒 光,氧化二聚體,（2）ALP的發(fā)光底物,常用的底物為3-（2-螺旋金剛烷-4-甲氧基-4-甲基-4-（3-磷酸氧基）-苯基-1，2-二氧乙烷（AMPPD）和4-甲基傘形酮磷酸鹽（4-MUP，熒光底物）。,AMPPD,AMPPD在堿性條件下，被ALP酶解生成相當(dāng)穩(wěn)定的AMP-D陰離子，其有2-30min的分解半衰期，發(fā)出波長(zhǎng)為470nm的持續(xù)性光，
5、在15min時(shí)其強(qiáng)度達(dá)到高峰，15 60min內(nèi)光強(qiáng)度保持相對(duì)穩(wěn)定。,光,AP /OH HPO4 2,4-MUP,4-MUP在ALP催化下生成4-甲基傘形酮，在360nm激發(fā)光的作用下，發(fā)出448nm的熒光，用熒光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量。,熒光,AP,H3PO4 +,360nm 激發(fā)光,CAP TODAY調(diào)查結(jié)果-Mar. 2003,全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)全球市場(chǎng)占有率,ChemiflexTM 效應(yīng),Sulfupropyl Derivative 穩(wěn)定性組分 極其穩(wěn)定,10月效期, 30 天上機(jī), 最少30 天校正曲線,Nitrogen Bond (吖啶Sulfonamide Group) 穩(wěn)定性組分產(chǎn)生巨
6、大的光 (50% more) 優(yōu)異的靈敏度和線性范圍 (TSH 0.008 uIU/mL),專(zhuān)利的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物,提升檢測(cè)功能靈敏度 增加檢測(cè)線性范圍 降低定標(biāo)頻率 延長(zhǎng)試劑效期,專(zhuān)利的穩(wěn)定(sulfopropyl)基團(tuán),專(zhuān)利的發(fā)光(sulfonamide)基團(tuán),ARCHITECT 使用pre-trigger/trigger雙重反應(yīng)來(lái)提升和產(chǎn)生光信號(hào),直接夾心法分析模式 磁微粒子上包被的抗體與分析物及專(zhuān)利的吖啶酯標(biāo)記抗體結(jié)合,ARCHITECT HBsAg Assay Design,經(jīng)過(guò)最后一步?jīng)_洗,磁微粒子上捕捉有免疫復(fù)合物,Pre-Trigger 被加入 Pre-Trigger使專(zhuān)利的吖啶
7、酯標(biāo)記物從固相載體上釋放到溶液中,磁塊吸附 磁微粒子被磁塊吸附在反應(yīng)杯的壁上,從而防止磁粒子對(duì)光信號(hào)檢測(cè)的干擾,Trigger 被加入 提供一個(gè)堿性環(huán)境產(chǎn)生光信號(hào),吖啶酯標(biāo)記物 被釋放產(chǎn)生光信號(hào),產(chǎn)生的信號(hào)以Relative Light Unit (RLU)方式表達(dá).,ARCHITECT 使用pre-trigger/trigger雙重反應(yīng)來(lái)提升和產(chǎn)生光信號(hào),競(jìng)爭(zhēng)法分析模式 分析物及專(zhuān)利的吖啶酯標(biāo)記物與磁微粒子上包被的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,Chemiflex 靈活的處理步驟,靈活的步驟,獨(dú)有的化學(xué)發(fā)光,一步法 加樣本+結(jié)合物 加固相 單步?jīng)_洗 讀數(shù),兩步法 加樣本+固相 一步?jīng)_洗 加結(jié)合物 兩步?jīng)_洗 讀
8、數(shù),預(yù)處理 加樣本, 預(yù)處理 轉(zhuǎn)移預(yù)處理液 加固相 一步?jīng)_洗 加結(jié)合物 兩步?jīng)_洗 讀數(shù),分析設(shè)計(jì)的靈活性 分析設(shè)計(jì)并沒(méi)有局限于一步法 新項(xiàng)目開(kāi)展時(shí)間大大減少 超級(jí)分析表現(xiàn) 基于不同的測(cè)試, 應(yīng)用不同的方法設(shè)計(jì),Chemiflex,ARCHITECT分析項(xiàng)目,肝炎 乙肝表面抗原確證 乙肝表面抗原(定量) 乙肝表面抗體(定量) 乙肝核心抗體 乙肝e抗原 乙肝e抗體 丙肝抗體(第三代) 甲肝總抗體* 甲肝IgM抗體* 艾滋抗體* HTLV1/2抗體* 腫瘤標(biāo)志物 甲胎蛋白 癌胚抗原 糖類(lèi)抗原125* 糖類(lèi)抗原153* 糖類(lèi)抗原199 游離前列腺特異性抗原 總前列腺特異性抗原 Pepsinogen I
9、(胃癌) B2-微球蛋白*,生殖/內(nèi)分泌 總B人絨毛膜促性腺激素 促黃體生成素 促卵泡生成素 雌二醇 孕酮 睪酮 催乳素 雌三醇* 藥物濃度監(jiān)測(cè) 地高辛* 茶堿* 卡馬西平* 苯巴比妥* 丙戊酸* 洋地黃* 慶大霉素* 萬(wàn)古霉素* 苯妥英鈉* *待開(kāi)發(fā)項(xiàng)目,甲狀腺功能 三碘甲狀腺原氨酸 甲狀腺素 游離三碘甲狀腺原氨酸 游離甲狀腺素 超敏促甲狀腺素 先天性疾病 風(fēng)疹病毒IgG* 風(fēng)疹病毒IgM* 弓型蟲(chóng)IgG* 弓型蟲(chóng)IgM* 巨細(xì)胞病毒IgG* 巨細(xì)胞病毒IgM* 梅毒* 代謝 鐵蛋白 B12 葉酸 糖化血紅蛋白 心肌鈣蛋白-I* 肌酸激酶*,RSH-靈活的軌道系統(tǒng),獨(dú)特的三維立體設(shè)計(jì)提供連續(xù)
10、和靈活運(yùn)行模式 多色的閃爍燈提示操作員軌道狀況,及時(shí)進(jìn)行必要處理 急診和重檢樣品優(yōu)于常規(guī)樣品的操作,最大限度減少緊急樣品檢測(cè)時(shí)間,急診/優(yōu)先樣品架位,單個(gè)5個(gè)樣本位的ARCHITECT樣本架 7個(gè)樣本架共有35個(gè)樣本位 插入樣本架后系統(tǒng)自動(dòng)選擇優(yōu)先測(cè)試 指示燈直觀顯示架位情況,常規(guī)樣品盤(pán)位,每個(gè)樣本盤(pán)可放置5個(gè)ARCHITECT樣本架共25個(gè)樣本 i2000SR樣本盤(pán)位數(shù)量為4個(gè) 樣本架運(yùn)行順序?yàn)閺淖笾劣?、先進(jìn)先出 指示燈直觀顯示盤(pán)位情況,RSH-提高工作流程的效率,實(shí)驗(yàn)室樣品的快速靈活分樣是通過(guò)RSH和強(qiáng)大的Architect軟件實(shí)現(xiàn) 自動(dòng)稀釋 自動(dòng)重檢 自動(dòng)反射 樣品架運(yùn)輸速度達(dá)0.9m/
11、s加速度 兩個(gè)樣本間的吸樣間隔2秒 急診/優(yōu)先樣品3分鐘完成分樣 為將來(lái)生化和免疫的整合提供必要的條件,試劑通道,25個(gè)試劑位置 自動(dòng)旋轉(zhuǎn),混勻試劑 試劑包裝100和500人份 試劑冰箱,消耗品,反應(yīng)杯容器 一次最多可放置1200個(gè)反應(yīng)杯(RV) 可連續(xù)放置,RV杯的放置,智能化探針,不銹鋼樣品/試劑探針 有防撞功能設(shè)計(jì) 智能探針清洗模式(緩沖液,清潔劑和不同清洗模式) 探針自動(dòng)定位校正 凝塊,氣泡和液面感應(yīng) 25ul的死體積量,智能沖洗設(shè)計(jì),沖洗模塊(Wash manifold) 3針沖洗,干凈徹底 相互獨(dú)立 沖洗吸液監(jiān)測(cè)(WAM) 在沖洗中進(jìn)行溫度感應(yīng)監(jiān)測(cè) 確保液體吸/放的正確,預(yù)激發(fā)液和
12、激發(fā)液,抽送式設(shè)計(jì),方便安放 大容量上機(jī)試劑 預(yù)激發(fā)液:3000測(cè)試,15小時(shí)離機(jī)時(shí)間 激發(fā)液:9000測(cè)試,45小時(shí)離機(jī)時(shí)間,預(yù)激發(fā)液,激發(fā)液,大瓶清洗液,上機(jī)緩沖液25升(1000T) 濃縮緩沖液(1:10) 系統(tǒng)自動(dòng)抽入,濃縮洗液,固體廢物的排放,反應(yīng)杯干燥排放 可一次排放1000測(cè)試 15分鐘的連續(xù)排放時(shí)間,Waste chute,確保廢物更換,廢液的排放,外接式液體排放 可下排 或接泵上排,Architect 操作軟件,“形象化”的用戶軟件 圖標(biāo)操作 容易操作 遠(yuǎn)程診斷 機(jī)上操作手冊(cè) 在線幫助 自動(dòng)提醒和更新的保養(yǎng)手冊(cè),Architect 主菜單,Architect 保養(yǎng)手冊(cè),Arc
13、hitect i2000SR(免疫模塊)可整合的儀器,Chemiflex TM專(zhuān)利技術(shù) 靈活步驟(一步,二步和預(yù)處理) 化學(xué)發(fā)光(高靈敏度,寬線性和高穩(wěn)定性) 保證200 測(cè)試/小時(shí) 靈活的上樣方式 135 個(gè)一次最大上樣量 35 個(gè)急診 /優(yōu)先樣品位 100 個(gè)常規(guī)樣品位 原試管,血清管或樣品杯 急診分析 18分鐘 自動(dòng)稀釋,重檢,轉(zhuǎn)測(cè)和預(yù)處理 25 個(gè)冷藏試劑位置 500 & 100 測(cè)試/盒 30 天上機(jī)穩(wěn)定期 5 小時(shí)離機(jī)時(shí)間 圖標(biāo)式易操作軟件 可與 c8000整合成 ci8200,ARCHITECT ci8200: 重要特點(diǎn)摘要,免疫生化檢測(cè)的整合 速度 最高 200測(cè)試/小時(shí)（免疫
14、） 最高1200測(cè)試/小時(shí)（生化） 運(yùn)行能力 367條碼識(shí)別樣品管 冷藏試劑倉(cāng)，免疫25個(gè)，生化68個(gè) 工作流程效率的提升 免疫，急診18 分鐘 自動(dòng)重檢/反射能力 無(wú)須樣品分開(kāi) 降低技術(shù)人員的勞動(dòng),壓力凝塊檢測(cè) 攜帶率 0.1ppm,2直接化學(xué)發(fā)光劑,這類(lèi)發(fā)光劑不需酶的催化作用，只需改變?nèi)芤旱膒H等條件就能發(fā)光，如吖啶酯（acridinium, AE）在含過(guò)氧化氫的稀堿溶液中即能發(fā)光。,3.電化學(xué)發(fā)光劑,是指通過(guò)在電極表面進(jìn)行電化學(xué)反應(yīng)而發(fā)出光的物質(zhì)?；瘜W(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕Ru(bpy)32+（圖19-1）和電子供體三丙胺（TPA）在陽(yáng)性電極表面可同時(shí)失去一個(gè)電子而發(fā)生氧化反應(yīng)。二價(jià)的Ru(b
15、py)32+被氧化成三價(jià)，成為強(qiáng)氧化劑，TPA失去電子后被氧化成陽(yáng)離子自由基TPA+，它很不穩(wěn)定，可自發(fā)地失去一個(gè)質(zhì)子（H+），形成自由基TPA.，成為一種很強(qiáng)的還原劑，可將一個(gè)高能量的電子遞給三價(jià)的Ru(bpy)33+使其形成激發(fā)態(tài)的Ru(bpy)32+.。激發(fā)態(tài)的三聯(lián)吡啶釕不穩(wěn)定，很快發(fā)射出一個(gè)波長(zhǎng)為620nm的光子，回復(fù)到基態(tài)的三聯(lián)吡啶釕。這一過(guò)程可在電極表面周而復(fù)始地進(jìn)行，產(chǎn)生許多光子，使光信號(hào)增強(qiáng),化學(xué)發(fā)光免疫分析 chemiluminescence immunoassay（ CLIA）,CLIA是將化學(xué)發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種新的免疫分析技術(shù)。 這種方法兼有發(fā)光分析的高
16、靈敏度和抗原抗體反應(yīng)的高度特異性。,免疫發(fā)光技術(shù)要點(diǎn),包括抗原抗體反應(yīng) 標(biāo)記物游離部分和結(jié)合部分分離 發(fā)光反應(yīng)及檢測(cè)等三部分。,（一）抗原抗體反應(yīng),抗原抗體反應(yīng)模式主要有以下三類(lèi)。 1雙抗體夾心法 2雙抗原夾心法 3固相抗原競(jìng)爭(zhēng)法,1雙抗體夾心法,用固相抗體和酶標(biāo)抗體與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)抗原反應(yīng)，生成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)B/F分離，加入底物經(jīng)酶促反應(yīng)后發(fā)光，其發(fā)光量與待測(cè)標(biāo)本中抗原含量呈正比。,2雙抗原夾心法,該法常用于抗體的檢測(cè)，用固相抗原和酶標(biāo)記抗原與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)抗體反應(yīng)，生成固相抗原-待測(cè)抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)B/F分離，在免疫復(fù)合物中加入底物進(jìn)行酶促發(fā)光，其發(fā)光量與待測(cè)標(biāo)
17、本中抗體含量呈正比。,3固相抗原競(jìng)爭(zhēng)法,該法常用于多肽類(lèi)小分子抗原的測(cè)定，用已知固相抗原和待測(cè)標(biāo)本的相應(yīng)抗原與一定量的酶標(biāo)記抗體發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)，反應(yīng)平衡后經(jīng)B/F分離，固相抗原與酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物被留下來(lái)，通過(guò)加入底物進(jìn)行酶促發(fā)光反應(yīng)，其發(fā)光量與待測(cè)標(biāo)本中抗原含量呈反比。,（二）游離和結(jié)合部分分離,是將游離酶標(biāo)記物和酶標(biāo)記物免疫復(fù)合物進(jìn)行分離過(guò)程，常用分離技術(shù)有： 1磁顆粒分離法 2微粒子捕獲法 3包被珠分離法,1磁顆粒分離法,用抗原或抗體包被的磁顆粒與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體和酶標(biāo)的抗體或抗原通過(guò)一定模式的免疫學(xué)反應(yīng)后,最終通過(guò)磁場(chǎng)將結(jié)合酶標(biāo)記物免疫復(fù)合物和游離酶標(biāo)記物進(jìn)行分離的技術(shù)。,2微
18、粒子捕獲法,與磁顆粒分離法所不同是所用顆粒是無(wú)磁性的微粒子作為抗體或抗原的包被載體, 然后用纖維膜柱子進(jìn)行酶標(biāo)記物的結(jié)合狀態(tài)和游離狀態(tài)的分離。,3包被珠分離法,將用聚苯乙稀等實(shí)驗(yàn)材料制成小珠, 在小珠上包被抗原或抗體,經(jīng)抗原抗體反應(yīng)后,將結(jié)合狀態(tài)和游離狀態(tài)的酶標(biāo)記物進(jìn)行分離。,（三）化學(xué)發(fā)光和檢測(cè),以熒光酶免疫分析為例，加入底物4-MUP，酶標(biāo)抗體上ALP將4-MUP分解，脫磷酸根基團(tuán)后形成4-甲基傘形酮（4-MU），它在360nm激發(fā)光的照射下，發(fā)出448nm的熒光，經(jīng)熒光讀數(shù)儀記錄，放大，最后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線由電腦計(jì)算出所測(cè)物質(zhì)的含量。,電化學(xué)發(fā)光（ECL),電致化學(xué)發(fā)光 (ECL) 是通過(guò)在
19、電極上施加一定波形的電壓或電流信號(hào)進(jìn)行電解反應(yīng)的產(chǎn)物之間或與體系中共存組分反應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的現(xiàn)象。 ECL與CL的差異在于ECL是電啟動(dòng)發(fā)光反應(yīng)，而CL是通過(guò)化合物混合啟動(dòng)發(fā)光反應(yīng)。因此ECL反應(yīng)易精確控制，具有靈活性。,電化學(xué)發(fā)光劑,定義：指通過(guò)在電極表面進(jìn)行電化學(xué)反應(yīng)而發(fā)出光的物質(zhì)。 特點(diǎn) 反應(yīng)在電極進(jìn)行 化學(xué)發(fā)光劑：三聯(lián)毗啶釕 電子供體為：三丙胺（TPA）,三聯(lián)毗啶釕分子結(jié)構(gòu)圖,三聯(lián)吡啶釕 （ Ru(bpy)32+ ）特點(diǎn),ECL分析中采用Ru(bpy)32+作為標(biāo)記物，其活化衍生物是Ru(bpy)32+N羥基琥珀酸胺酯（NHS） ，該衍生物具有水溶性，且高度穩(wěn)定，保證電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的高
20、效和穩(wěn)定，而且避免了本底噪聲的干擾。,三聯(lián)吡啶釕（ Ru(bpy)32+ ）特點(diǎn),Ru(bpy)32+衍生物與免疫球蛋白結(jié)合的分子比超過(guò)20仍不會(huì)影響抗體的可溶性和免疫活性； Ru(bpy)32+分子量小，空間位阻小 ，即便小分子的核酸也能標(biāo)記，使檢測(cè)的菜單大大豐富，更重要的是為其檢測(cè)菜單的開(kāi)發(fā)前景提供了廣闊空間。,電化學(xué)發(fā)光原理圖,基態(tài),激發(fā)態(tài),不穩(wěn)定,電化學(xué)發(fā)光免疫分析 (Electro-Chemiluminescence Immunoassay, ECLI),ECLI是繼EIA、RIA、FIA、時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)（TRFIA）之后的新一代標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)； ECLI是電化學(xué)發(fā)光(ECL
21、)和免疫測(cè)定相結(jié)合的產(chǎn)物； ECLI是目前最先進(jìn)的標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)之一。,ECLI原理,在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，用電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕Ru(bpy)32+標(biāo)記Ab，通過(guò)Ag-Ab反應(yīng)和磁珠分離技術(shù)，根據(jù)三聯(lián)吡啶釕在電極上發(fā)出的光強(qiáng)度對(duì)待測(cè)的Ag或Ab進(jìn)行定量/定性。,ECLIA檢測(cè)流程圖一（雙抗體夾心的形成）,ECLIA檢測(cè)流程圖二 （生物素與親和素結(jié)合）,ECLIA體系結(jié)構(gòu)圖,ECLIA檢測(cè)流程圖三 （磁珠吸引吸附于電極表面）,ECLIA檢測(cè)流程圖四 （電極充電啟動(dòng)電化學(xué)反應(yīng)）,ECLIA檢測(cè)流程圖五 （撤消磁場(chǎng)沖洗磁珠）,方法評(píng)價(jià),采用的固相載體是帶有磁性的直徑約2.
22、8 m的聚苯乙烯微粒。其特點(diǎn)是反應(yīng)面積比板式擴(kuò)大2030倍，吸附效率高；在液體中形成均勻的懸液，參與反應(yīng)時(shí)類(lèi)似液相，反應(yīng)速度大大加快；,方法評(píng)價(jià),“鏈霉親和素-生物素”是是具有很強(qiáng)的非共價(jià)相互作用的一對(duì)化合物，具有牢固而特異的結(jié)合，應(yīng)用此放大系統(tǒng)，使檢測(cè)的靈敏度大大提高；,方法評(píng)價(jià),利用氧化鐵的磁性，使用電磁場(chǎng)分離結(jié)合態(tài)和游離態(tài)，方便迅速，實(shí)現(xiàn)了精確的全自動(dòng)化； 標(biāo)記物的再循環(huán)利用，使發(fā)光時(shí)間更長(zhǎng)、強(qiáng)度更高、易于測(cè)定。,ELIA優(yōu)越性,高度敏感，可達(dá)pgml或pmol水平； 特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，CV5。 測(cè)定范圍寬，可達(dá)7個(gè)數(shù)量級(jí)。 試劑穩(wěn)定，無(wú)毒害，無(wú)污染，有效期長(zhǎng)，達(dá)數(shù)月甚至數(shù)年。 操作簡(jiǎn)單，耗時(shí)短，易于自動(dòng)化。 在對(duì)環(huán)保很重視的國(guó)家，CLIA成了取代RIA的首選方法。,臨床應(yīng)用,激素 腫瘤標(biāo)記物 內(nèi)分泌功能 傳染性疾病 其它 如VB12、葉酸、鐵蛋白、肌鈣蛋白、肌紅蛋白、酶、脂肪酸、維生素和藥物等多種檢測(cè)項(xiàng)目。,謝謝！,
電化學(xué)發(fā)光免疫分析法課件
