中藥飲片鑒別基礎(chǔ)知識(shí)簡(jiǎn)-PPT課件

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1、單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級(jí),第三級(jí),第四級(jí),第五級(jí),*,中藥飲片鑒別基礎(chǔ)知識(shí),一中藥飲片鑒別的定義與任務(wù),1.1,中藥飲片鑒別的定義,1.2,中藥飲片鑒別的目的與任務(wù),二中藥飲片鑒別的方法,2.1,性狀鑒別方法,2.2,顯微鑒別方法,2.3,理化鑒別方法,2.4,生物技術(shù)鑒別方法,2.5,分類鑒別方法,三中藥飲片鑒別的內(nèi)容與依據(jù),3.1,中藥飲片鑒別的內(nèi)容,3.2,中藥飲片鑒別的依據(jù),1,一 中藥飲片鑒別的定義與任務(wù),1.1,中藥飲片鑒別的定義,用性狀鑒別方法、顯微鑒別方法、理化鑒別方法、生物技術(shù)鑒別方法和分類鑒別方法鑒別中藥飲片品種真?zhèn)巍①|(zhì)量?jī)?yōu)劣的科學(xué)。,1.

2、2,中藥飲片鑒別的目的與任務(wù),1.2.1,中藥飲片鑒別的目的,確定品種及其不同商品規(guī)格的炮制品，識(shí)別飲片正品、混淆品及偽品。,鑒別品質(zhì)，確定飲片不同的商品等級(jí)與質(zhì)量?jī)?yōu)劣。,2,1.2.2,中藥飲片鑒別的任務(wù),識(shí)別品種正偽，保證飲片質(zhì)量。 中藥飲片品種眾多，來(lái)源廣泛。由于歷史的原因，飲片名實(shí)不符，正品、混淆品以及偽品混淆的情況嚴(yán)重存在，影響中藥飲片的臨床療效和信譽(yù)。鑒別飲片品種，弄清正品、混淆品和偽品，可保證其品種正確，質(zhì)量可靠。,鑒別飲片不同規(guī)格的炮制品與商品等級(jí)，保證臨床合理用藥。 中藥飲片的生品、制品含化學(xué)成分有別，臨床應(yīng)用目的有所側(cè)重，且其不同的商品規(guī)格等級(jí)與其所含成分、療效有直接的關(guān)系

3、。鑒別飲片不同規(guī)格的炮制品與商品等級(jí)，對(duì)保證臨床合理用藥，提高臨床治療效果有重要意義。,確定飲片質(zhì)量?jī)?yōu)劣指標(biāo)，制訂切實(shí)可行的中藥飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 中藥產(chǎn)地廣泛，采時(shí)有定，中藥飲片炮制有嚴(yán)格的規(guī)范。同一種中藥，不同產(chǎn)地，不同采集時(shí)間，不同炮制方法，對(duì)其活性成分有明顯影響。如秦皮以春夏之交時(shí)采集嫩皮，采后立即切絲、晾干，有效成分秦皮甲素、秦皮乙素含量高。而秋冬之季采集，水浸漬后切絲、晾干，有效成分含量低。以中藥飲片所含有代表性的活性成分為指標(biāo)，確定不同中藥飲片的地道產(chǎn)地、采集時(shí)間和炮制方法，為制訂中藥飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供數(shù)據(jù)，也是中藥飲片鑒別的任務(wù)之一。,3,二 中藥飲片鑒別的方法,2.1,性狀鑒別方法

4、,用眼看、手摸、鼻聞、口嘗和試驗(yàn),(,水試、火試,),等方法觀察中藥飲片的形狀、大小、顏色、氣味、質(zhì)地和火燒爆鳴、入水浮沉等特征以鑒別其真?zhèn)蝺?yōu)劣的方法。,2,.,1.1,眼看,看，系用眼睛直觀中藥飲片的形狀與顏色，切面、周邊與外表面和斷面等特征。,4,2.1.1.1,看形狀與顏色,指看中藥飲片固有的外形特征及其色澤。如腎形的,沙苑子,，喇叭狀的凌霄花，切面平坦，顯銀白色光澤，中部有直徑,0.3,1.5cm,的空心或半透明的薄膜，縱剖面呈梯狀排列的,通草,；而其偽品小通草的表面為白色或淡黃色，無(wú)明顯紋理；切面平坦，顯銀白色光澤，無(wú)空心，等。,觀察全草類、葉類、花類和某些動(dòng)物類中藥飲片時(shí)，需先將其

5、用水浸濕，使其展平后觀察。如觀察,金錢草,飲片，需將其水潤(rùn)軟化后，將葉片展開(kāi)置光線充足處觀察，有棕色線紋的鑒別特征；而其偽品點(diǎn)腺過(guò)路黃的葉片則布滿腺點(diǎn)。觀察中藥飲片色澤應(yīng)在自然光下，色澤的描述，要確切、簡(jiǎn)明，用兩種顏色復(fù)合描述時(shí)，以后種色調(diào)為主。如棕黃色，以黃色為主，黃棕色，以棕色為主，同等顏色有深淺不同時(shí)，用比擬法說(shuō)明。如綠色、淺綠色；紅色、淺紅色、深紅色，等。,礦物類中藥飲片色澤的觀察，要注意假色與本色的分別描述，不可含糊不清。,5,2.1.1.2,看切面,指看中藥飲片切面的形狀、顏色、質(zhì)地和紋理等特征。如山柰切面類白色，富粉性，中央略凸起，邊緣稍向內(nèi)翻，習(xí)稱,“,縮皮凸肉,”,，其偽品苦

6、山柰切面多平坦或略翹，表皮多向內(nèi)翻；何首烏切面淺黃棕色或前紅棕色，有,4,11,個(gè)類圓形異形維管束環(huán)列，呈云錦花紋狀；檳榔切面棕紅色與乳白色相間的大理石樣花紋；,雞血藤,切面木部淺棕色或棕色，有多數(shù)導(dǎo)管孔，韌皮部有紅褐色或黑棕色樹(shù)脂狀分泌物，三者相間排列呈,3,8,個(gè)偏心性半圓形的環(huán)，其偽品白花油麻藤韌皮部有淺紅色或棕紅色樹(shù)脂狀分泌物，三者相間排列呈,1,3,個(gè)圓形的環(huán)；,山豆根,切面皮部棕黃色至淡棕色，可見(jiàn)棕色環(huán)紋或髓部；北豆根切面淺棕黃色，木部淡黃色、白色或類白色，髓居中心，淡黃色木部束與黃白色射線相間排列呈輻射狀等。,看切面還要注意橫切片、斜切片與縱切片的區(qū)別。如黃芪橫切片為圓形，呈黃白

7、色，中間具菊花心；斜切片呈橢圓形，縱切片呈長(zhǎng)條形，韌皮部呈類白色、木質(zhì)部呈淡黃色。同時(shí)還要注意形成層的有無(wú)及形狀與切片中心的特征。如威靈仙形成層環(huán)明顯，中心,(,木部,),呈四方形，而其混淆品鐵絲威靈仙則無(wú)形成層環(huán)，只有一圈排列均勻的導(dǎo)管；,香櫞,橫切片呈圓形，邊緣油點(diǎn)明顯、中果皮呈黃白色，有不規(guī)則網(wǎng)狀凸起的維管束，瓤囊,9-17,室，棕色或淡紅棕色，呈橘子瓣?duì)钶椛錉钆帕?，縱切片呈弧形或半橢圓形，瓤囊呈單橘瓣?duì)?。同時(shí)，還要注意形成層的有無(wú)及形狀與切片中心的特征。如威靈仙形成層環(huán)明顯，中心（木部）呈四方形，而其易混品，鐵絲威靈仙則無(wú)形成層環(huán)，只有一圈排列均勻的導(dǎo)管。,6,2.1.1.3,看表面與

8、周邊,即看中藥飲片表面的形狀、顏色、光澤和紋理及飲片周邊的狀態(tài)等特征。根莖類飲片的表面是指柱狀藥材的外表面，如白芷的外表面為灰棕色或黃棕色，有縱皺紋及突出表面的菱形皮孔，習(xí)稱,“,疙瘩丁,”,；山楂的外表面微有光澤，呈深紅色，布有較多的灰白色小點(diǎn)；木瓜的外表面呈紅色或棕紅色，有密集的皺紋，光皮木瓜果皮光滑而無(wú)皺紋；天麻的外表面有環(huán)狀芽痕；,酸棗仁,的表面為紫紅色或紫褐色，平滑有光澤，有的有裂紋，一面較平坦，中間有隆起的縱線紋，另一面稍突起，一端凹陷，可見(jiàn)線形種臍，另端有細(xì)小突起的合點(diǎn)；而其偽品,理?xiàng)椚?的表面為黃色、棕黃色或棕紅色，有光澤，具細(xì)小的棕黃色斑點(diǎn)；,浮海石,的表面為白色或類白色，表

9、面與斷面均密具細(xì)孔；其偽品,浮石,表面粗糙，為灰白色或灰黃色，有多數(shù)大小不等的細(xì)孔，斷面有的具絹絲狀光澤。香櫞飲片的周邊呈波狀，其偽品柚子飲片的周邊為整齊的圓形，等。,7,2.1.1.4,看斷面,指看中藥飲片的破折面、碎斷面或用刀削平后斷面的質(zhì)地及花紋等特征。如土茯苓破折面的粉性，大黃、木瓜破折面的顆粒性，虎杖、黃柏破折面的纖維性；厚樸斷面的閃亮晶星；,紅參,偽品商陸水浸潤(rùn)后的刀削面呈角質(zhì)性，有明顯的數(shù)層同心形環(huán)紋，等。,2.1.2,手摸,摸，即用手捻拭中藥飲片質(zhì)地情況和用尺量度飲片大小的程度。,8,2.1.2.1,捻拭質(zhì)地,指用手捻拭中藥飲片質(zhì)地的軟硬柔韌度和疏松、粘性等特征。如黃芪軟而綿韌

10、，其偽品蜀葵則硬而較脆；當(dāng)歸軟而柔，歐當(dāng)歸則糯而糙；小通草手捏易變形，水浸后摸之有粘滑感；滑石潤(rùn)滑而細(xì)膩，海桐皮有丁而頂手，燈心草質(zhì)輕而具彈性，天仙子手握具有黏性等 。,2.1.2.2,量度大小,指用測(cè)量工具量度中藥飲片的長(zhǎng)短、厚薄和直徑的大小。測(cè)量多用游標(biāo)卡尺或具毫米刻度的直尺。飲片量值大于,1cm,時(shí)以厘米,(cm),為單位，小于,1cm,時(shí)以毫米,(mm),為單位。測(cè)量厚度時(shí)，要以中藥飲片中間為準(zhǔn)；測(cè)量細(xì)小個(gè)體中藥飲片,(,如車前子、葶藶子等,),時(shí)，可將每,10,粒種子緊密排成一行，以毫米刻度尺測(cè)量后，求其平均值，得出每粒種子的量值。,9,2,.,1.3,鼻聞,聞也稱嗅，即用鼻的嗅覺(jué)聞

11、中藥飲片特有的氣味。多數(shù)中藥飲片氣味各殊，在熟悉其味的前提下，一嗅即可辨出真?zhèn)?。如信石、阿魏的大蒜氣；?xì)辛、零陵香的清香氣；牡丹皮、香加皮的芳香氣；防風(fēng)、秦艽的類胡蘿卜氣；丁香、金銀花的濃郁香氣；烏梢蛇、金錢白花蛇的腥臭氣及伏龍肝的土腥氣，等。嗅聞中藥飲片氣味時(shí)多可直接嗅聞，必要時(shí)可在折斷、破碎或揉搓及熱水濕潤(rùn)后進(jìn)行。,2.1.4,口嘗,嘗,，即用口舌嘗試中藥飲片的味道及粘舌的程度。一般是用舌尖接觸中藥飲片或取少量置口中咀嚼一分鐘左右，使舌各部位均接觸到藥液，仔細(xì)體會(huì)其味道后再吐出來(lái)。如五味子酸、苦、甘、辛、咸五味俱全，一嘗即知；木瓜混淆品西藏木瓜與木瓜在外形上不易區(qū)別，嘗其味道木瓜味酸、略澀

12、，西藏木瓜味極酸、叮牙。桂枝味甜，偽品陰香枝味淡而辛。貴重藥物天竺黃吸濕性強(qiáng)，口嘗粘舌，其混淆品人工天竺黃吸濕性稍差，口嘗微粘舌，其偽品竹黃無(wú)吸濕性，口嘗不粘舌。肉桂味甜、辣而渣少；石斛味淡而粘滑，等。,10,2,.,1.5,試驗(yàn),驗(yàn)，即用水或火對(duì)中藥飲片進(jìn)行簡(jiǎn)單的試驗(yàn)，觀察其形狀、顏色變化等特征。,2.1.5.1,水試,指將中藥飲片用水浸漬或共研等方法處理，觀察其形狀特征變化及理化反應(yīng)現(xiàn)象，鑒別中藥飲片正偽優(yōu)劣的方法。常見(jiàn)的水試法如下：,1,） 用水浸漬 將中藥飲片置入水中，浸漬一定時(shí)間，觀察其形狀和水溶液顏色的變化。如蘇木熱水浸液呈鮮桃紅色；天竺黃用水浸泡，由象牙色變?yōu)闇\綠色或天藍(lán)色；天仙

13、子易混品水蓑衣子水浸后，表皮膨脹豎立，互相粘結(jié)成團(tuán)；胖大海、蛤蟆油用水浸漬，吸水膨脹，體積膨大數(shù)倍；煅石膏水浸漬，很快粘結(jié)成團(tuán)等。,2,） 投入水中 將中藥飲片少許投入水中，觀察其沉浮或旋轉(zhuǎn)現(xiàn)象。如上等沉香，相對(duì)密度,1,，入水則沉；三棱質(zhì)地緊密而重，入水也沉，而其偽品荊三棱質(zhì)地疏松，入水不沉而浮于水上；熊膽粉少許投入水中，在水面旋轉(zhuǎn)并有黃線下沉而不散；麝香少許入剛沸而靜的水中，粉末急速旋轉(zhuǎn)如飛而漸沸翻溶化。,11,3,） 與水共研或用水調(diào)合 將中藥飲片加水適量研磨或用水少量調(diào)合，觀察水溶液或中藥飲片表面的變化。如乳香加水共研，呈白色或黃白色乳濁液，沒(méi)藥加水共研，則呈黃棕色至棕褐色乳濁液；藤黃

14、加水共研，呈黃色或黃綠色乳濁液；牛黃少許加水調(diào)合，涂于指甲上，可將指甲染黃且具清涼透甲之感，蟾酥表面滴水少許有乳白色泡沫產(chǎn)生，等。,4,）水煮或水溶 將中藥飲片用水煮或加水溶化，觀察其形狀與水溶液的變化等。如菟絲子用水煮沸，露出白色卷旋狀的胚，形如吐絲；羚羊絲用水煮沸，具清香氣兒而不發(fā)軟；琥珀加水煮沸變軟而不溶化；血竭加水煮沸軟化發(fā)粘，水溶液不應(yīng)有色；阿膠加水煮沸，逐漸溶化，溶液澄明；大青鹽、白礬加水溶化等。水試也稱入水，意指中藥飲片入水或與水接觸后產(chǎn)生的某些變化。水試所用的水一般指蒸餾水,12,2.1.5.2,火試,指將中藥飲片用火燒或煅，觀察其形狀、顏色、氣味、聲音和滲出物等反應(yīng)現(xiàn)象，鑒別

15、飲片正偽優(yōu)劣的方法。常用的火試方法如下：,1,）直接火燒 將中藥飲片直接置于火上燒灼，以嗅其氣味，觀察光焰、色澤、爆鳴等現(xiàn)象的方法。如沉香、降香火燒，有濃香氣；琥珀火燒有松香氣；安息香火燒有苯甲酸氣；雄黃火燒有大蒜氣；爐甘石煅燒為黃色，冷后變?yōu)榘咨?，?yáng)起石煅燒時(shí)為紅色，冷后變?yōu)楹谏?，青黛火燒產(chǎn)生藍(lán)紫色煙霧；海金沙火燒有黃色火星爆鳴聲等。,2,）隔物火燒 將中藥飲片置于紙上或容器中，觀察其形狀、顏色及氣味等現(xiàn)象。如將血竭少血放在白紙片上，于火上燒烤，血竭溶化成片，色澤鮮紅如血，伴有嗆鼻香氣無(wú)油跡擴(kuò)散。,3,） 鉑金絲沾藥火燒 根據(jù)礦物類藥所含金屬離子在無(wú)色火焰中產(chǎn)生的相應(yīng)顏色。取鉑金絲，用鹽酸濕

16、潤(rùn)后，沾取藥物粉末少許，置于無(wú)色火焰（酒精燈）中燃燒，由火焰顏色的不同，鑒別其真?zhèn)蔚姆椒āＨ绾c離子的藥物（大青鹽、砂）顯持久的亮黃色火焰；含銅離子的藥物（膽礬）顯翠綠色火焰等。,13,2.2,顯微鑒別方法,用顯微鏡觀察中藥飲片的表面特征、組織構(gòu)造、細(xì)胞形態(tài)及其后含物的形態(tài)和性質(zhì)，以鑒別其正、偽、優(yōu)、劣的方法。,2.2.1,解剖顯微鏡鑒別法,用解剖顯微鏡觀察中藥飲片的切面、周邊、外表面等特征，以鑒別其真?zhèn)蝺?yōu)劣的方法。根類、根莖類、根與根莖類、果實(shí)類、種子類和莖木類、皮類中藥飲片，可直接置顯微鏡下觀察；葉類、花類、全草類、動(dòng)物類中藥飲片可預(yù)先浸軟、展平后，置顯微鏡下觀察。,各類中藥飲片觀察的要點(diǎn)

17、如下：,根類、根莖類、根與根莖類 注意切面髓部的有無(wú)，維管束、射線的類型和分布特點(diǎn)，周邊形狀、外表面的紋理、皮孔的類型，等。,14,果實(shí)類、種子類 注意形態(tài)、大小、顏色、表面花紋、棱線、油點(diǎn)和毛茸等附屬物特征及切面果皮、種皮、胚乳、子葉的狀態(tài)。完整的果實(shí)還要注意所含種子的數(shù)目、形狀、大小、色澤及表面特征。,全草類 注意藥用各部位的有無(wú)及形態(tài)，切面和內(nèi)、外表面的腺點(diǎn)、毛茸、氣孔及附屬物等特征。,莖木類 注意切面紋理、年輪的有無(wú)和射線分布類型，基本組織中樹(shù)脂、油點(diǎn)、晶體等內(nèi)含物特征和外表面紋理、斑痕、皮孔等特征。,皮類 注意外表面紋理、斑痕、皮孔和內(nèi)表面紋理狀況及晶體的有無(wú)，切面表皮、皮層的排列比

18、例與緊密程度、射線的類型與特點(diǎn)。,葉類 注意葉片的葉脈、葉緣、葉基、葉端的形狀，葉片的大小、色澤，葉片上、下表面的質(zhì)地和有無(wú)毛茸、腺點(diǎn)等特征。,花類 注意花全形和各部分的形態(tài)、大小、花冠、花萼、花蕊形狀與數(shù)目和花序類型。,動(dòng)物類 該類中藥飲片的藥用部位來(lái)源復(fù)雜，有動(dòng)物的全體、某一部分、生理產(chǎn)物、病理產(chǎn)物或加工品等。用解剖顯微鏡鑒別時(shí)，要根據(jù)所觀察飲片藥用部位的不同，分別注意其整體各部狀態(tài)和切面特征。,礦物類 注意礦物類中藥飲片的形狀,集合體的形態(tài)與晶形，顏色（自色、他色、假色）、條痕、光澤、透明度及表面特征，等。,15,2.2.2,生物顯微鏡鑒別法,用生物顯微鏡觀察中藥飲片的組織與細(xì)胞特征，以

19、鑒別中藥飲片真?zhèn)蝺?yōu)劣的方法。,2.2.2.1,各類中藥飲片橫切面組織觀察要點(diǎn),1,）根類、根莖類、根與根莖類 （,1,）根據(jù)維管束類型，確定其為單子葉植物或雙子葉植物的根。（,2,）概覽各種組織的排列方式。（,3,）由外向內(nèi)仔細(xì)觀察各部組織特征，并應(yīng)注意有無(wú)木栓層；表皮細(xì)胞形狀和附屬物（根毛、凸起等）；皮層細(xì)胞類型、形狀及層數(shù)；內(nèi)皮層細(xì)胞凱氏點(diǎn)（帶）特征；維管束類型，木質(zhì)部、韌皮部的排列方式及其中的導(dǎo)管、油細(xì)胞、石細(xì)胞、晶體、射線細(xì)胞等的形狀、大小、排列方式、有無(wú)髓部和細(xì)胞,內(nèi)含物特征等。（,4,）細(xì)胞性質(zhì)難定時(shí)，以顯微化學(xué)反應(yīng)的方法試驗(yàn)確定。,16,2,）果實(shí)、種子類 （,1,）果實(shí)類 概覽

20、果實(shí)構(gòu)造形式；由外向內(nèi)觀察組織細(xì)胞特征，要注意外果皮細(xì)胞形狀、顏色、氣孔與細(xì)胞內(nèi)含物、附屬物形態(tài)特征；中果皮細(xì)胞形態(tài)及其中石細(xì)胞、油細(xì)胞、晶體等的存在與否；內(nèi)果皮細(xì)胞的性質(zhì)、層數(shù)及形態(tài)與鑲接方式。（,2,）種子類 概覽種子組織特征的構(gòu)造方式；由外向內(nèi)仔細(xì)觀察組織細(xì)胞特征，應(yīng)注意種皮表皮細(xì)胞的形態(tài)、類型和其它特征（突起、內(nèi)含物、黏液質(zhì)等）；注意柵狀細(xì)胞層細(xì)胞的形態(tài)、大小、細(xì)胞壁特點(diǎn)及有無(wú)光輝帶；注意有無(wú)油細(xì)胞層、色素細(xì)胞層、營(yíng)養(yǎng)層，并觀察細(xì)胞內(nèi)含物顏色、數(shù)量等特征；注意內(nèi)種皮石細(xì)胞的形狀、層數(shù)和內(nèi)含物特點(diǎn)；觀察胚芽細(xì)胞、胚細(xì)胞的形狀及其內(nèi)含物的性質(zhì)（淀粉?；蚝哿＃┡c特征，如晶體形狀、大小等。,

21、3,）莖木類 （,1,）莖類 根據(jù)形成層的有無(wú)，初步確定是單子葉植物的莖還是雙子葉植物的莖；根據(jù)木質(zhì)部的有無(wú)，確定是木質(zhì)莖還是草質(zhì)莖。概覽各部組織的排列方式。由外向內(nèi)仔細(xì)觀察各部組織特征。須注意表皮細(xì)胞形態(tài)及垂周壁形狀、角質(zhì)層的有無(wú)和厚薄及附屬物特征，注意觀察木栓細(xì)胞的色澤、形狀，纖維的類型和長(zhǎng)短以及細(xì)胞內(nèi)含物（晶體、淀粉粒）、分泌組織、細(xì)胞的形態(tài)等。（,2,）木類 除按莖類順序觀察外，須注意導(dǎo)管形狀、大小、紋孔類型、管胞、木纖維、木射線的排列方式、形態(tài)及細(xì)胞內(nèi)含物特征等。,17,4,）皮類 概覽組織排列方式；由外向內(nèi)依次觀察各部特征，如木栓細(xì)胞、皮層細(xì)胞的形狀、層數(shù)、顏色、類型以及細(xì)胞內(nèi)含物

22、特征，觀察有無(wú)厚壁組織、晶體、油細(xì)胞、黏液細(xì)胞、樹(shù)脂道、乳管和韌皮部射線的寬度、形狀及其伸展方式和細(xì)胞列數(shù)等。,5,）葉類 觀察上、下表皮細(xì)胞的形狀和氣孔以及角質(zhì)層厚度、垂周壁的形狀、毛茸類別與特征等。 觀察葉肉組織中柵欄細(xì)胞、海綿細(xì)胞層數(shù)和形狀及細(xì)胞后含物特征。觀察葉脈的維管束類型、纖維和乳汁管類型與形態(tài)。,6,）花類 根據(jù)組織制片的部位不同，觀察要點(diǎn)是：花萼、花冠制片：觀察上、下表皮細(xì)胞及附屬物特征；觀察葉肉組織及其內(nèi)含物特征。 雄蕊制片：觀察花藥組織方式、藥膈形狀和大小，花室構(gòu)造、花粉粒形態(tài)與構(gòu)造，尤其要注意花粉粒表面的雕紋形狀、萌發(fā)孔類型與數(shù)目特征。,18,2.2.2.2,各類飲片粉末

23、組織的觀察要點(diǎn),1,）根與根莖類 （,1,）根類 要注意木栓細(xì)胞顏色、表面觀形狀、細(xì)胞壁特點(diǎn)、性質(zhì)和木薄壁細(xì)胞的有無(wú)；石細(xì)胞、纖維的顏色、大小、類型、形狀和紋孔疏密、胞腔寬窄；導(dǎo)管類型、大??；分泌組織（分泌細(xì)胞、分泌道、乳汁管等）、細(xì)胞形狀、大小與分泌物顏色；草酸鈣晶體、菊糖的有無(wú)及類型、大??；淀粉粒形狀、類型、大小、臍點(diǎn)形狀與層紋形態(tài)。（,2,）根莖類 與根類相似。尤須注意鱗莖、塊莖的淀粉粒形狀、大小、臍點(diǎn)形狀及復(fù)粒、半復(fù)粒等特征；黏液細(xì)胞內(nèi)含物特征；鱗葉表皮細(xì)胞顏色、形狀和細(xì)胞壁特征。,2,）果實(shí)種子類 （,1,）果實(shí)類 要注意果皮細(xì)胞的類型、形狀、大小、外果皮細(xì)胞垂周壁增厚情況和氣孔形狀

24、、角質(zhì)層紋理與附屬物特征，內(nèi)果皮鑲嵌的有無(wú)及細(xì)胞排列方式；果肉薄壁細(xì)胞的形態(tài)和細(xì)胞內(nèi)含物特征；石細(xì)胞、纖維、淀粉粒、晶體的有無(wú)及形態(tài)、大小等特征。（,2,）種子類 要注意種皮表皮細(xì)胞表面觀與斷面觀形態(tài)、垂周壁情況；柵狀細(xì)胞層、油細(xì)胞層、色素細(xì)胞層的有無(wú)及形態(tài)；內(nèi)皮層石細(xì)胞表面觀、斷面觀形狀、大小、胞腔與內(nèi)含物特征。,3,）莖木類 （,1,）莖類 要注意表皮細(xì)胞表面觀、斷面觀形狀、顏色、垂周壁特征與角質(zhì)層表面紋理、氣孔、毛茸和下皮纖維的有無(wú)；纖維類型、顏色、大小、形態(tài)與紋孔類型等特征；木薄壁細(xì)胞、木栓細(xì)胞形狀特征與石細(xì)胞、導(dǎo)管類型、大小與形態(tài)特征；分泌細(xì)胞形態(tài)、大小、內(nèi)含物特征；草酸鈣晶體類型、

25、大小、分布方式等特征。 （,2,）木類 要注意纖維類型、顏色、大小、紋孔類型與紋孔口相交特征；木射線細(xì)胞列數(shù)、形狀與紋孔特征；導(dǎo)管與分泌組織的類型；細(xì)胞后含物的類型、形狀及大小、團(tuán)塊的有無(wú)與形態(tài)、顏色。,19,4,） 皮類 注意木栓細(xì)胞的顏色、形態(tài)、纖維類型、存在方式、形狀和胞腔內(nèi)含物性質(zhì)與顏色；石細(xì)胞形狀、大小、存在方式；分泌組織（樹(shù)脂道、分泌細(xì)胞、乳汁管、油細(xì)胞等）形狀、大小與分泌物顏色；篩管分子形態(tài)；細(xì)胞后含物的有無(wú)及形態(tài)、大小等特征。,5,） 葉類 注意表皮細(xì)胞表面觀形狀、大小、垂周壁特點(diǎn)和氣孔軸式；毛茸類型、存在方式與細(xì)胞組成數(shù)目及表面有無(wú)紋理、疣點(diǎn)、胞腔內(nèi)含物特征；晶體類型、存在方

26、式、大?。粚?dǎo)管類型、直徑與存在方式；石細(xì)胞、纖維、分泌細(xì)胞的有無(wú)和形狀、大小等。,6,） 花類 注意毛茸類型、形態(tài)、表面特征；花粉粒形狀、大小、表面紋理、突起和萌發(fā)孔類型、多少；草酸鈣晶體類型、形狀及分泌細(xì)胞、色素的有無(wú)；花托表皮細(xì)胞和纖維、花絲表皮細(xì)胞、花瓣表皮細(xì)胞的形態(tài)特征和果皮組織的有無(wú)與形態(tài)等。,7,） 全草類 根據(jù)藥用部分的不同，觀察要點(diǎn)同各類項(xiàng)下。,8,） 菌藻類 要注意菌絲、孢子的形狀、顏色與團(tuán)塊形態(tài)；晶體有無(wú)及形態(tài)、大小與類型。,9,） 動(dòng)物類 據(jù)中藥飲片所用動(dòng)物部位不同，各類的觀察要點(diǎn)為：（,1,） 動(dòng)物全體要注意表皮細(xì)胞碎片形狀與色素顆粒的顏色；肌肉纖維的類型、形態(tài)、橫斷面

27、直徑及空隙有無(wú)；剛毛形態(tài)、大小與顏色；體壁碎片顏色、形態(tài)、表面紋理及菌絲體、類結(jié)晶體、結(jié)晶體的有無(wú)；骨碎片顏色、形狀、骨陷窩形態(tài)與排列方式，骨小管粗細(xì)與表面特征。（,2,）分泌物和病理產(chǎn)物要注意團(tuán)塊顏色及其中包埋物的性質(zhì)特征，表皮組織與其它細(xì)胞的形狀、大小等。（,3,） 角甲類要注意碎塊顏色、形狀、橫斷面、縱斷面觀形態(tài)特征及色素顆粒顏色。,20,10,）礦物類 要注意粉末碎片與顆粒的顏色、形狀、折光性質(zhì)及表面、斷面紋理，等。,粉末組織標(biāo)本片置顯微鏡下觀察，多種細(xì)胞、組織碎片等雜亂無(wú)章地聚于視野中，進(jìn)行特征描述時(shí)，要采取,先多數(shù)后少數(shù)，先特殊后一般，先觀察后測(cè)試的原則，,做到多而不亂，繁而不雜，

28、有條有理。,先多數(shù)后少數(shù),就是先描述視野中多見(jiàn)、易見(jiàn)的細(xì)胞及碎片，后描述少見(jiàn)的、偶見(jiàn)的細(xì)胞及碎片。,先特殊后一般,即注意描述比較特殊的，有定性意義的組織、細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物（如晶體、分泌物）等，提及一般的組織細(xì)胞特征即可。,先觀察后測(cè)試,就是先仔細(xì)觀察各細(xì)胞及組織碎片的形態(tài)特征，必要時(shí)進(jìn)行顯微化學(xué)試驗(yàn)，以確定細(xì)胞及其內(nèi)含物的性質(zhì)。然后再對(duì)其有鑒別意義的組織細(xì)胞進(jìn)行直徑、大小的定量測(cè)定。,21,2.2.3,細(xì)胞及其內(nèi)含物的顯微測(cè)量鑒別法,顯微鏡下測(cè)量細(xì)胞的長(zhǎng)度、寬度、直徑、厚度和計(jì)算某一特征的數(shù)量多少，以鑒別藥物真?zhèn)蝺?yōu)劣的方法，稱為顯微測(cè)量鑒別法。其單位通常用微米（,m,）表示。,2.2.3.1,

29、測(cè)微量尺,即顯微鏡下測(cè)量細(xì)胞大小的標(biāo)尺。分鏡臺(tái)測(cè)微尺和目鏡測(cè)微尺兩部分。,鏡臺(tái)測(cè)微尺 也稱臺(tái)微尺或載臺(tái)量尺。為一特制的載玻片，中央有一圓形精密刻度標(biāo)尺。標(biāo)尺一般長(zhǎng),1mm,，分,10,大格，每大格又分,10,小格，每小格的長(zhǎng)度為,0.1mm,，即,10m,。標(biāo)尺的外圍有一黑色圓環(huán)，便于在顯微鏡下尋找標(biāo)尺的位置。,鏡臺(tái)測(cè)微尺是顯微測(cè)量的標(biāo)尺，用來(lái)標(biāo)化目鏡測(cè)微尺在不同目、物鏡配合使用時(shí)的長(zhǎng)度。,目鏡測(cè)微尺 也稱鏡微尺或目鏡量尺。是一直徑,1.8,2.0cm,，中央刻有精密平行線或網(wǎng)絡(luò)線刻度標(biāo)尺的圓形玻片，標(biāo)尺刻度面常是,5mm,，分為,100,小格。使用時(shí)放在目鏡中，用來(lái)直接測(cè)量細(xì)胞的大學(xué)，但其刻

30、度所代表的長(zhǎng)度是依顯微鏡的放大倍數(shù)而改變的。因此，必須用臺(tái)微尺標(biāo)化后方可使用。,22,目鏡測(cè)微尺的標(biāo)化 顯微測(cè)量前，須用臺(tái)微尺標(biāo)定目微尺在所用目、物鏡配合使用下每小格的實(shí)際長(zhǎng)度。方法是將目微尺裝入目鏡內(nèi)，臺(tái)微尺置于載物臺(tái)上，用低倍鏡觀察到臺(tái)微尺刻度并適當(dāng)調(diào)整焦距，至能同時(shí)看清目微尺、臺(tái)微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動(dòng)目微尺，移動(dòng)臺(tái)微尺，使兩種量尺的刻度平行，左邊的,“,0,”,刻度重合，再向右尋找第二條重合刻度，根據(jù)兩條重合刻度間兩種量尺的小格數(shù)，計(jì)算出目微尺每小格的長(zhǎng)度（,m,）。例如目微尺,31,小格（,0,31,）與臺(tái)微尺的,45,小格（,0,45,）重合，則目微尺每一小格的實(shí)際長(zhǎng)度為,14.5m,，

31、即,10m,45,31,14.5m,。為使用方便，可將每個(gè)不同倍數(shù)的目鏡和物鏡配合，標(biāo)定每一組目鏡與物鏡配合使用時(shí)，目微尺每一小格的實(shí)際長(zhǎng)度值。得到一組數(shù)據(jù)（如歐林巴斯顯微鏡目鏡與物鏡配合使用時(shí)，目鏡每一小格的數(shù)據(jù)如表），以隨時(shí)應(yīng)用。,23,各組目、物鏡配合使用數(shù)值表（,m/,格）,目尺規(guī)格,目鏡倍數(shù),物 鏡 倍 數(shù),4,10,40,1/10,尺形,15,12.7,5.0,1.25,10,17,6.6,1.65,1/2,網(wǎng)形,15,133,65,12.5,1/5,網(wǎng)形,15,50,20,5,24,2.2.3.2,細(xì)胞及其內(nèi)含物實(shí)際尺度的測(cè)量,將欲測(cè)量的組織標(biāo)本片置于載物臺(tái)上，調(diào)焦觀察，轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡

32、刻度，使測(cè)微尺的刻度重迭在目的物上，觀察該物體的總長(zhǎng)度為多少小格，乘以每小格前述的標(biāo)化值，計(jì)算出目的物的實(shí)際長(zhǎng)度。如采用,15,倍目鏡、,10,倍物鏡，測(cè)得觀察淀粉粒的直徑為,5,小格，每小格的標(biāo)化值為,5m,，則此淀粉粒的實(shí)際直徑,5,5m,25m,。,為減少誤差，顯微測(cè)量通常使用高倍鏡。但欲測(cè)量較長(zhǎng)的纖維、乳汁管長(zhǎng)度時(shí)，以在低倍鏡下測(cè)量為宜。,測(cè)量物體的長(zhǎng)度往往有差異，差異不大時(shí)，可記載一個(gè)數(shù)據(jù)，如直徑約,25m,；差異較大時(shí)可記載最大值與最小值，如長(zhǎng),20,50m,，若有少數(shù)達(dá),60m,，則可記為,20,50,（,60,）,m,；可記載最小值、常見(jiàn)值和最大值，如長(zhǎng),15,50,80m,。

33、,葉類飲片脈島數(shù)、氣孔數(shù)和氣孔指數(shù)的測(cè)量，可用網(wǎng)格目微尺；麝香中摻雜物的測(cè)量可用血球計(jì)數(shù)器。,25,2.2.4,細(xì)胞及其后含物性質(zhì)的顯微化學(xué)鑒別法,將藥物粉末、切片、浸出液或其升華物置載玻片上，加適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)試液，加蓋玻片后置顯微鏡下觀察反應(yīng)，以鑒別其性質(zhì)的方法，稱為顯微化學(xué)鑒別法。,2.2.4.1,顯微化學(xué)鑒別的常用方法,（,1,）藥物粉末或切片試驗(yàn)法 將藥物粉末或徒手切片置載玻片，滴加適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)試液，加蓋玻片，置顯微鏡下觀察組織、細(xì)胞產(chǎn)生的顏色或結(jié)晶狀況。如細(xì)胞壁性質(zhì)和細(xì)胞后含物性質(zhì)的反應(yīng)等。,（,2,）透化液試驗(yàn)法 藥物過(guò),25,目篩的粉末，加適當(dāng)溶劑浸漬,30,分鐘，用吸管吸取,1,2,

34、滴于載玻片，在其旁邊滴加適宜的化學(xué)試液一滴，用棉簽或棒狀尖端溝通使兩種溶液接觸，放置片刻，蓋上蓋玻片，置顯微鏡下觀察兩液接觸形成的結(jié)晶形狀與顏色。如,小檗堿,，莨菪堿、檳榔堿等生物堿性質(zhì)的鑒別反應(yīng)。,（,3,）微量升華物顯微化學(xué)觀察法 取藥物粉末，照升華法提取升華物，置顯微鏡下觀察升華物的形狀、顏色、必要時(shí)，滴加適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)試液后，觀察其反應(yīng)現(xiàn)象。如大黃的升華物呈黃色菱針狀或羽狀結(jié)晶，滴加,1%,氫氧化鈉試液,1,滴，結(jié)晶溶解并現(xiàn)紅色；胡黃連的升華物呈針狀、針簇狀、棒狀、板狀結(jié)晶及黃色球狀物等。,26,2.2.4.2,細(xì)胞壁與細(xì)胞后含物顯微化學(xué)性質(zhì)的反應(yīng),1,） 細(xì)胞壁顯微化學(xué)性質(zhì)的反應(yīng),（,1

35、,） 木質(zhì)化細(xì)胞壁,間苯三酚鹽酸反應(yīng)：加間苯三酚試液,1,2,滴，使材料濕潤(rùn)，放置,2,3,分鐘或微熱，加鹽酸一滴，根據(jù)木化程度不同顯紅色紫紅色。,硫酸苯胺反應(yīng)：加硫酸苯胺試液,1,2,滴，放置,1,2,分鐘或微溫，顯姜黃色。,（,2,）木栓化或角質(zhì)化細(xì)胞壁,蘇丹,染色反應(yīng)：如蘇丹,試液,1,2,滴，放置,1,2,分鐘或微熱，顯桔紅色、紅色或紫紅色。再加,20%,氫氧化鈉試液，呈黃色，加熱后，木栓化細(xì)胞壁溶解呈黃色滴狀，角質(zhì)化細(xì)胞壁不改變形狀。,氯化鋅碘反應(yīng)：加氯化鋅碘試液,1,2,滴，顯黃色至棕色。,（,3,）纖維化細(xì)胞壁：,氯化鋅碘反應(yīng)：加氯化鋅碘試液,1,2,滴，顯藍(lán)色或紫色。,碘,-,

36、硫酸反應(yīng)：加碘試液,1,滴使其濕潤(rùn)，放置,1,2,分鐘后，用濾紙吸去過(guò)多的碘液，再加硫酸液（,3350,）,1,滴，顯藍(lán)色或紫色。,銅氨試液反應(yīng)：加新配制的銅氨試液,1,2,滴細(xì)胞壁逐漸膨脹后溶解。,（,4,）硅質(zhì)化細(xì)胞,釕紅試液反應(yīng)：加釕紅試液,1,滴，顯紅色。,27,2,）細(xì)胞后含物顯微化學(xué)性質(zhì)的反應(yīng),（,1,）淀粉粒：加碘試液顯藍(lán)色，加,5%,氫氧化鉀溶液，淀粉粒先膨脹后溶解；用甘油醋酸試液裝片，置偏光顯微鏡下觀察，未糊化淀粉粒顯偏光現(xiàn)象，已糊化淀粉粒無(wú)偏光現(xiàn)象。,（,2,）糊粉粒：加碘試液顯棕色或黃棕色；加硝酸汞試液顯磚紅色。加三硝基苯酚試液，顯黃色。,（,3,）菊糖：加,10%-,萘

37、酚乙醇試液，再加硫酸,1,2,滴，顯紫紅色并很快溶解；加,15,20%,麝香草酚醇溶液，再加硫酸,1,滴顯胭脂紅色并溶解。,（,4,）脂肪油、揮發(fā)油或樹(shù)脂：如蘇丹,試液，顯桔紅色、紅色或紫紅色，加,90%,乙醇，脂肪油不溶解；揮發(fā)油溶解；加鋨酸試液，脂肪油染成棕色至黑色，揮發(fā)油與樹(shù)脂均不染色。,（,5,）粘液：加釕紅試液顯紅色；加亞甲藍(lán)試液呈天藍(lán)色；封藏在墨汁中，呈無(wú)色透明團(tuán)塊狀，加蒸餾水膨脹后溶解。,（,6,）草酸鈣結(jié)晶：加稀醋酸不溶解；加稀鹽酸溶解而無(wú)氣泡發(fā)生；加硫酸（,12,）溶液逐漸溶解，片刻后析出針狀或針簇狀硫酸鈣結(jié)晶。,（,7,）碳酸鈣結(jié)晶：滴加稀鹽酸試液，晶體溶解，同時(shí)有氣泡發(fā)生

38、；滴加硫酸（,12,）溶液，晶體溶解，產(chǎn)生氣泡，并形成散在的硫酸鈣針晶。,28,2.3,理化鑒別方法,中藥飲片的理化鑒別方法主要是根據(jù)其所含化學(xué)成分的理化性質(zhì)，采用物理、化學(xué)或物理化學(xué)的方法進(jìn)行鑒別，通過(guò)確認(rèn)中藥飲片中某些特征性成分的檢出，從而判斷中藥飲片的真?zhèn)芜_(dá)到鑒別的目的。在理化鑒別方法中常用的有微量升華法、化學(xué)鑒別法、光譜鑒別法和色譜鑒別法等，其中色譜鑒別法是應(yīng)用最多的一種鑒別手段，尤其是薄層色譜法應(yīng)用廣泛。另外，新技術(shù)、新方法,色譜指紋圖譜法、色譜聯(lián)用法、,X-,衍射法和差熱分析法等不斷應(yīng)用于中藥材和中藥飲片的鑒別。目前，部分中藥飲片尚無(wú)含量測(cè)定的指標(biāo)，因此，鑒別就成為中藥飲片質(zhì)量控制

39、的一個(gè)非常重要的環(huán)節(jié)。,29,2.3.1,微量升華鑒別方法,微量升華法是一種常用的理化鑒別方法，適宜于一些具有升華性成分的中藥飲片的鑒別。在一定的溫度下，具有升華特性成分通過(guò)升華分離以后，再根據(jù)升華性成分的理化特征進(jìn)行鑒別。,探討某些中藥飲片中有效成分在一定溫度下能夠升華的性質(zhì)，根據(jù)升華物的結(jié)晶形狀、顏色來(lái)鑒別中藥飲片的真?zhèn)渭捌焚|(zhì)的優(yōu)劣。采用微量升華法得到升華物，在顯微鏡下觀察結(jié)晶形狀、顏色，并滴加適當(dāng)化學(xué)試劑，觀察其反應(yīng)，來(lái)確定某些中藥飲片的鑒別特征。對(duì)不同來(lái)源、不同藥用部分的中藥飲片，可根據(jù)其升華物的特征來(lái)確定化學(xué)成分是否相同，為鑒定中藥飲片的真?zhèn)闻c質(zhì)量的優(yōu)劣提供依據(jù)。,操作方法：取一塊與

40、載玻片大小相近的金屬片，置一塊具有圓孔（直徑,2cm,）的石棉板上，金屬片中央放一內(nèi)徑約,15mm,，高約,7mm,的金屬圈，于金屬圈內(nèi)加中藥飲片粉末,0.5g,1.0g,，圈上方覆蓋一載玻片，在石棉板下邊用酒精燈加熱，火焰對(duì)準(zhǔn)小孔處，至粉末開(kāi)始變焦黃時(shí)，去火，放冷，此時(shí)有升華物附著于載玻片上，將載玻片取下，反轉(zhuǎn)，置顯微鏡下觀察升華物的結(jié)晶形狀和顏色等，并可加適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)試劑觀察反應(yīng)結(jié)果，必要時(shí)可用顯微熔點(diǎn)測(cè)定結(jié)晶的熔點(diǎn)。如大黃中的蒽醌化合物，牡丹皮中的丹皮酚，薄荷中的薄荷腦，斑蝥中的斑蝥素等，均可用微量升華法確證。大黃升華物為黃色棱柱狀或羽毛狀結(jié)晶的蒽醌類化合物，牡丹皮升華物為白色丹皮酚的簇晶

41、，薄荷升華物為無(wú)色針晶簇（薄荷醇），斑蝥升華物為片狀斑蝥素結(jié)晶，等。,30,2.3.2,化學(xué)鑒別方法,化學(xué)鑒別法是選擇適宜的化學(xué)試劑，與中藥飲片中的某些化學(xué)成分產(chǎn)生一定的化學(xué)反應(yīng)，從而觀察顏色的變化或沉淀的生成等。其中包括顯微化學(xué)反應(yīng)、顏色反應(yīng)、沉淀反應(yīng)和熒光法等?；瘜W(xué)鑒別法一般是采用中藥飲片粉末或經(jīng)過(guò)一定的提取制成適宜的供試液，再經(jīng)過(guò)一定的化學(xué)反應(yīng)后達(dá)到鑒別的目的。如黃連飲片粉末滴加稀鹽酸，放置,5min,，可見(jiàn)黃色結(jié)晶析出（小檗堿的鹽酸鹽）。,顏色反應(yīng)與沉淀反應(yīng)是利用一定的化學(xué)試劑與中藥飲片中特征的化學(xué)成分（或組分）發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化或生成沉淀，判別某種成分的存在與否進(jìn)行鑒別。該法在化

42、學(xué)藥品的鑒別項(xiàng)中廣泛應(yīng)用，在中藥飲片鑒別中同樣具有重要的應(yīng)用價(jià)值，是常用的鑒別方法之一。但在實(shí)際應(yīng)用中，由于中藥飲片組分復(fù)雜，干擾因素較多，故定性鑒別中注意采用一切可行的方法排除干擾。顏色反應(yīng)與沉淀反應(yīng)一般可在試管中進(jìn)行，半微量試驗(yàn)也可用點(diǎn)滴板、薄層板和在紙色譜上進(jìn)行。,31,2.3.3,光譜鑒別方法,光譜鑒別法是根據(jù)中藥飲片中某些化學(xué)成分在紫外,-,可見(jiàn)光區(qū)具有特征性吸收光譜從而達(dá)到鑒別的目的。因?yàn)椴煌闹兴庯嬈瘜W(xué)成分不同，該法是根據(jù)所含化學(xué)成分不飽和程度的差異，因而使得其吸收曲線在形態(tài)、峰位、峰強(qiáng)度上的差異而達(dá)到定性鑒別。在一定的條件下根據(jù)吸收光譜的特征可用于中藥飲片的鑒別，以評(píng)價(jià)其

43、中藥飲片的質(zhì)量。其中包括紫外光譜法、熒光光譜法和紅外光譜法等。,2.3.3.1,紫外,-,可見(jiàn)光譜法,紫外,-,可見(jiàn)光譜法（,ultraviolet and visible spectrophotometry,，,UV,）具有較高的靈敏度，因此，可用來(lái)檢查中藥飲片的純度和雜質(zhì)的限量，是控制中藥飲片及其質(zhì)量的重要手段。如對(duì),山奈,及其偽品苦山柰、徐長(zhǎng)卿及其偽品竹林霄、對(duì),毛冬青,及其偽品毛冬青莖、對(duì),血竭,及其混淆品龍血竭的鑒別等。在使用紫外光譜法鑒定中藥飲片時(shí)，一些親緣關(guān)系較近的中藥飲片，由于化學(xué)成分相差不大，通常的紫外光譜難以達(dá)到鑒別的目的，則可采用多溶劑紫外吸收，通過(guò)綜合比較其圖譜的差異，

44、亦可獲得較好的鑒別效果。,32,2.3.3.2,熒光分析法,熒光分析法（,fluorometry,）是根據(jù)中藥飲片中所含的某些成分在紫外光照射下吸收一定波長(zhǎng)的能量后，發(fā)射出比吸收光的波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光即為熒光，用熒光分光光度法測(cè)定在特定波長(zhǎng)照射下，各中藥飲片相同溶劑提取液的發(fā)射熒光光譜，并比較其區(qū)別，可達(dá)到鑒別的目的。熒光法和薄層法相結(jié)合，即將中藥飲片提取液先經(jīng)薄層展開(kāi)，再將薄層板置于,365nm,或,254nm,波長(zhǎng)下觀察熒光，比較其斑點(diǎn)熒光的顏色和展開(kāi)距離或?qū)⒈影逯糜诒訏呙鑳x中，用適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)進(jìn)行掃描，可以得到各中藥飲片的熒光掃描圖用于鑒別，這類方法對(duì)于一些含有能發(fā)射熒光成分的中藥飲

45、片尤為適用。例如，大黃和土大黃粉末，兩者的顯微特征和化學(xué)反應(yīng)都很相似，但在紫外光下檢視，前者具深棕色熒光，后者顯藍(lán)紫色熒光。,33,2.3.3.3,紅外光譜法,紅外光譜法（,infrared spectrum,，,IR,）是屬于分子吸收光譜。因紅外線的能量較低，只能引起分子振動(dòng)能級(jí)躍遷，而振動(dòng)能級(jí)的躍遷會(huì)伴隨著許多轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的躍遷，故紅外光譜也稱之為振,-,轉(zhuǎn)光譜。,IR,法可依據(jù)峰位、峰強(qiáng)度和峰形來(lái)判斷化合物的類別，推測(cè)某些基團(tuán)的存在，進(jìn)而推斷未知化合物的結(jié)構(gòu)。紅外光譜法廣泛應(yīng)用于有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)鑒定以及化學(xué)組成的分析，多用于定性分析，也可以進(jìn)行定量分析。,紅外光譜法應(yīng)用于中藥飲片的鑒別，具有

46、制樣簡(jiǎn)單、快速和圖譜具有,“,指紋性,”,等優(yōu)點(diǎn)，故應(yīng)用較廣。如對(duì)翻白草及其偽品委陵菜、,浮海石,及其偽品浮石的鑒別，皂礬及其炮制品醋皂礬的鑒別等。,34,2.3.3.4,質(zhì)譜法,質(zhì)譜法（,mass spectrometry,或,mass spectroscopy,，,MS,）是利用多種離子化技術(shù)，按照帶電粒子（即離子）的質(zhì)量對(duì)電荷比值（質(zhì)荷比，,m/z,）的大小依次排列形成的圖譜，從而進(jìn)行物質(zhì)成分和結(jié)構(gòu)分析的一種方法。質(zhì)譜法應(yīng)用范圍廣，即可用于無(wú)機(jī)成分的分析，也可用于有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)分析，還可用于同位素分析，不受試樣物態(tài)的限制，對(duì)氣態(tài)、液態(tài)和固態(tài)樣品都可進(jìn)行分析。具有靈敏度高，試樣用量少，分

47、析速度快等特點(diǎn)。在對(duì)有機(jī)化合物的質(zhì)譜分析中，可由高分辨質(zhì)譜獲得分子離子峰的質(zhì)量數(shù)，從而獲得化合物的精確相對(duì)分子質(zhì)量；從分子離子峰和碎片離子峰獲得的信息可推測(cè)有機(jī)化合物的裂解方式及其與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系；通過(guò)同位素峰強(qiáng)比及其分布特征可推算分子中,Cl,、,Br,、,S,等原子數(shù)；通過(guò)色譜聯(lián)用技術(shù)（,GC-MS,、,LC-MS,等），可為復(fù)雜體系（天然產(chǎn)物、生化介質(zhì)和藥物成分等）的分離分析、鑒別和含量測(cè)定提供快速、準(zhǔn)確的分析方法，特別是采用選擇離子監(jiān)測(cè)（,selected ion monitoring,，,SIM,）技術(shù)，可獲得很高的靈敏度和選擇性。當(dāng)中藥與天然產(chǎn)物提取液分子在質(zhì)譜儀的離子源中以某種方

48、式電離后，所形成的離子在高壓電場(chǎng)作用下加速飛行，此時(shí)含有不同質(zhì)量的離子束，經(jīng)過(guò)質(zhì)量分析，按質(zhì)荷比的大小順序依次排列，即可得到質(zhì)譜圖。不同提取液所含化學(xué)成分不同，所得質(zhì)譜圖顯示的分子離子基峰及進(jìn)一步的裂解碎片峰則不一致，可供其鑒別。如對(duì)連翹不同藥用部位的鑒別和含量測(cè)定，等。,35,2.3.3.5,核磁共振法,核磁共振光譜法（,nuclear magnetic resonance spectroscopy,，,NMR,）類似于紅外和紫外光譜，是另一種形式的吸收光譜技術(shù)。在外磁場(chǎng)的作用下，具有磁矩的原子核存在著不同的能級(jí)，當(dāng)用一定頻率的射頻照射分子時(shí)，可引起原子核自旋能級(jí)的躍遷，即產(chǎn)生核磁共振。以核

49、磁共振信號(hào)強(qiáng)度對(duì)照射頻率或磁場(chǎng)強(qiáng)度作圖，即為核磁共振光譜（,NMR spectrum,）。核磁共振光譜法（,NMR spectroscopy,）是利用核磁共振光譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)（包括構(gòu)型和構(gòu)象）測(cè)定、定性或定量分析的方法。目前，在化學(xué)、醫(yī)藥和生物學(xué)等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，應(yīng)用最多的是氫核磁共振簡(jiǎn)稱氫譜（,1H-NMR,）和碳,-13,核磁共振簡(jiǎn)稱碳譜（,13C-NMR,）。由于中藥飲片中的化學(xué)成分較為復(fù)雜，通常選用某一溶劑的特征提取物進(jìn)行分析，獲得該中藥成分的,NMR,指紋圖譜。如,36,2.3.4,色譜鑒別方法,色譜法（,chromatography,）又稱層析法，是利用各種組分的物理、化學(xué)性質(zhì)的差異，根

50、據(jù)混合物中各種組分在兩相分配系數(shù)的不同進(jìn)行分離分析的方法。色譜鑒別法是根據(jù)其化學(xué)成分的保留行為通過(guò)分離而進(jìn)行鑒別的一種方法。一相是固定相，另一相是流動(dòng)相，由于各組分受到兩相的作用力不同，從而使各組分以不同的速度移動(dòng)達(dá)到分離的目的。從色譜過(guò)程的分離原理上講，分為分配色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法和分子排阻色譜法。該法具有分離度好，靈敏度高，專屬性強(qiáng)，應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)，特別適應(yīng)于中藥材和中藥飲片的鑒別。常用的色譜鑒別方法有紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法和高效毛細(xì)管電泳法等。,37,2.3.4.1,紙色譜法,紙色譜法（,paper chromatography,，,PC,）是根

51、據(jù)不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相間的分配系數(shù)不同而進(jìn)行分離的一種分配層析法。以層析濾紙為載體，濾紙中,6%,7%,的水分以氫鍵與纖維素的羥基相結(jié)合構(gòu)成固定相，而纖維間空隙通過(guò)的溶劑為流動(dòng)相，樣品組分在兩相中作反復(fù)多次分配達(dá)到分離。由于溶質(zhì)在兩相中分配系數(shù)的差異而得到分離。方法具有簡(jiǎn)單、分離效能較高、所需儀器設(shè)備價(jià)廉等特點(diǎn)，主要用于多功能團(tuán)或高極性化合物如糖、氨基酸等水溶性成分的分析分離，目前在中藥材中應(yīng)用較少。,操作方法：將試樣溶于適當(dāng)?shù)娜軇?，點(diǎn)樣于濾紙一端，另用一適當(dāng)溶劑系統(tǒng)，借毛細(xì)現(xiàn)象從點(diǎn)樣的一端向另一端流動(dòng)，此稱為展開(kāi)；展開(kāi)結(jié)束，取出濾紙晾干；用適當(dāng)?shù)姆椒@色。紙層析法按溶劑展開(kāi)的方向，可分為

52、上行、下行和徑向三種。上行法中又可分為單向與雙向兩種。該方法設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便，所需樣品量少，應(yīng)用很廣泛，不僅可用于定性鑒別，也能用于定量分析,38,2.3.4.2,薄層色譜法,薄層色譜（,thin layer chromatography,，,TLC,）是一種吸附薄層色譜分離法，利用各成分對(duì)同一吸附劑吸附能力不同，使在移動(dòng)相（溶劑）流過(guò)固定相（吸附劑）的過(guò)程中，連續(xù)的產(chǎn)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達(dá)到各成分互相分離的目的。常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。,操作方法：薄層色譜法系將適宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點(diǎn)樣、展開(kāi)后，根據(jù)比移值

53、（,Rf,）與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖的比移值（,Rf,）作對(duì)比，用以進(jìn)行藥物的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定的一種方法。薄層色譜法的比移值（,Rf,）是溶質(zhì)移動(dòng)的距離,/,溶液移動(dòng)的距離，即表示物質(zhì)移動(dòng)的相對(duì)距離。各種物質(zhì)的,Rf,值隨要分離化合物的結(jié)構(gòu)，薄層板的種類、溶劑、溫度等不同而不同，但在條件固定的情況下，,Rf,值對(duì)每一種化合物來(lái)說(shuō)是一個(gè)特定數(shù)值。,薄層色譜鑒別法操作簡(jiǎn)便，具有分離和鑒定的雙重功能和多種專屬的檢測(cè)方法，是中藥飲片最常用的鑒別方法。薄層色譜鑒別時(shí)，一般采用對(duì)照品和對(duì)照藥材對(duì)照法，即分別吸取適宜濃度的供試品、對(duì)照品或?qū)φ账幉娜芤?，在同一薄層板上點(diǎn)樣，展開(kāi)與檢視，供試品溶

54、液所顯主斑點(diǎn)的顏色（或熒光）和位置應(yīng)與對(duì)照溶液的斑點(diǎn)一致。如對(duì),西洋參,及其偽品人參,龍膽及其偽品秦艽尾子,毛冬青,及其非藥用部分毛冬青莖的鑒別，等。,39,2.3.4.3,氣相色譜法,氣相色譜法（,gas chromatography,，,GC,）是以氣體為流動(dòng)相的色譜方法，主要用于分離分析易揮發(fā)性的物質(zhì)。氣相色譜法的流動(dòng)相為氣體，稱為載氣；色譜柱分為填充柱和毛細(xì)管柱兩種，填充柱內(nèi)裝吸附劑、高分子多孔小球或涂漬固定液的載體。毛細(xì)管柱內(nèi)壁或載體經(jīng)涂漬或交聯(lián)固定液。注入進(jìn)樣口的供試品被加熱氣化，并被載氣帶入色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，先后進(jìn)入檢測(cè)器，色譜信號(hào)用記錄儀或數(shù)據(jù)處理器記錄。然后根據(jù)色

55、譜圖上出現(xiàn)的物質(zhì)成分的峰面積或峰高進(jìn)行定量分析。,對(duì)氣相色譜儀一般要求，除另有規(guī)定外，載氣為氮?dú)?；色譜柱為填充柱或毛細(xì)管柱，填充柱的材質(zhì)為不銹鋼或玻璃，載體用直徑為,0.25,0.18mm,、,0.18,0.15mm,或,0.15,0.125mm,經(jīng)酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子多孔小球；常用玻璃或彈性石英毛細(xì)管柱的內(nèi)徑為,0.20,或,0.32mm,。進(jìn)樣口溫度應(yīng)高于柱溫,30,50,；進(jìn)樣量一般不超過(guò)數(shù)微升；柱徑越細(xì)進(jìn)樣量應(yīng)越少。一般情況下，檢測(cè)器種類、固定液品種及特殊指定的色譜柱材料不得任意改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長(zhǎng)度、載體牌號(hào)、粒度、固定液涂布濃度、載氣流速、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)器的

56、靈敏度等，均可適當(dāng)改變，以適應(yīng)具體品種并符合系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。一般色譜圖約于,30min,內(nèi)記錄完畢。,氣相色譜法適合于揮發(fā)性成分或通過(guò)衍生化后能氣化成分的定性、定量分析，具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)便，樣品無(wú)須化學(xué)前處理，提供信息量大等優(yōu)點(diǎn)。如對(duì)冰片、麝香與其偽品的鑒別，等。,40,2.3.4.4,高效液相色譜法,高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC）和其他分離方法相比，具有高靈敏度（可達(dá)10121015g/mL）、高選擇性、高效能、高速度及應(yīng)用廣泛等特點(diǎn)。按固定相的聚集狀態(tài)可分為液-液色譜法和液-固色譜法。按分離原理則可分為分配

57、色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法和分子排阻色譜法。,高效液相色譜法是采用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有填充劑（固定相）的色譜柱進(jìn)行分離測(cè)定的色譜方法。經(jīng)由進(jìn)樣閥注入的供試品，由流動(dòng)相帶入柱內(nèi)，各成分在柱內(nèi)被分離后，依次進(jìn)入檢測(cè)器，由記錄儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜信號(hào)。,HPLC法配以不同的檢測(cè)器，可對(duì)多種成分進(jìn)行同時(shí)分析，一般用于含量測(cè)定，也可根據(jù)特征色譜峰進(jìn)行定性分析。HPLC法用于中藥飲片的鑒別，一般情況下，若含量測(cè)定采用了高效液相色譜法，可同時(shí)用于該藥味的鑒別試驗(yàn)。HPLC法已廣泛應(yīng)用于各種藥物及其制劑的分析測(cè)定，尤其是在中藥與生物樣品等復(fù)

58、雜體系的分離分析中發(fā)揮著極其重要的作用。如對(duì),黃柏,與其混淆品關(guān)黃柏，對(duì),羅布麻葉,與其混淆品大葉白麻葉，對(duì)何首烏、制何首烏的鑒別與含量測(cè)定等。,41,2.3.4.5,高效毛細(xì)管電泳法,高效毛細(xì)管電泳法（,high performance capillary electrophoresis,，,HPCE,）是,20,世紀(jì)末發(fā)展起來(lái)的一種高效、快速分離技術(shù)，是經(jīng)典電泳技術(shù)和現(xiàn)代微柱分離相結(jié)合的產(chǎn)物，具有分離模式多、分離效率高、速度快和分析范圍廣的特點(diǎn)。在毛細(xì)管電泳中，由于沒(méi)有分子縱向擴(kuò)散和質(zhì)量轉(zhuǎn)移，所以色譜圖中峰形比液相色譜更敏銳，靈敏度也更好，被認(rèn)為是一種高速、高效的分離技術(shù)，再加之樣品、溶劑

59、用量少和自動(dòng)化程度高的優(yōu)點(diǎn)得到迅速發(fā)展。近年來(lái)的研究報(bào)道顯示，,HPCE,法在中藥分析中其優(yōu)勢(shì)尤為突出。對(duì)中藥注射液或水提取物而言，其,HPCE,指紋圖譜的特征性遠(yuǎn)超過(guò),HPLC,指紋圖譜。如對(duì)連翹的,HPCE,鑒別、含量測(cè)定，等。,42,2.3.5,色譜指紋圖譜鑒別方法,中藥指紋圖譜（,traditional Chinese medicine fingerprint,）能提供從原藥材的種植、栽培、引種，中藥飲片、中成藥生產(chǎn)過(guò)程中工藝的規(guī)范與優(yōu)化，到產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定全方位的質(zhì)量保證。因此，中藥指紋圖譜也將成為研究道地藥材、稀有藥材替代品以及中藥材、中藥飲片真?zhèn)舞b別的依據(jù)。制定理想的指紋圖譜不

60、僅能達(dá)到定性鑒別，也可用于定量分析。,中藥指紋圖譜的建立應(yīng)以系統(tǒng)的化學(xué)成分研究和藥理學(xué)研究為依托，應(yīng)體現(xiàn)系統(tǒng)性、特征性和重現(xiàn)性（可操作性）三個(gè)基本原則。,a.,系統(tǒng)性：指紋圖譜反映的化學(xué)成分應(yīng)包括中藥所含大多數(shù)組分的類別或指標(biāo)成分的全部。如人參中的有效成分多為皂苷類化合物，則其指紋圖譜應(yīng)盡可能多地反映其中的皂苷成分；銀杏葉中的有效成分是黃酮和銀杏內(nèi)酯類，則其指紋圖譜可采用兩種方法針對(duì)這兩類成分進(jìn)行分析，以達(dá)到系統(tǒng)、全面的目的。,b.,特征性：指紋圖譜中反映的化學(xué)信息（表現(xiàn)為保留時(shí)間或比移值）具有高度的選擇性，能特征地區(qū)分中藥的真?zhèn)闻c優(yōu)劣，成為中藥自身的,“,化學(xué)條碼,”,。,c.,重現(xiàn)性（可操

61、作性）：是指建立的指紋圖譜，在規(guī)定的方法和條件下，不同,43,的操作者、不同的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)能做出相同結(jié)果，其誤差應(yīng)在允許的范圍內(nèi)，這樣才能保證指紋圖譜的通用性和實(shí)用性。中藥指紋圖譜系指中藥材、中藥飲片、提取物或中藥制劑等經(jīng)適當(dāng)處理后，采取一定的分析手段，得到能夠標(biāo)示該中藥材、中藥飲片、提取物或中藥制劑特性的共有峰的圖譜，即運(yùn)用現(xiàn)代分析技術(shù)對(duì)中藥化學(xué)信息以圖形（圖像）的方式進(jìn)行表征并加以描述?，F(xiàn)代分析技術(shù)包括光譜、色譜、波譜、核磁共振、,X-,射線衍射等以及各種聯(lián)用技術(shù)。指紋圖譜的特點(diǎn)是通過(guò)指紋圖譜的特異性，能有效鑒別樣品的真?zhèn)位虍a(chǎn)地；通過(guò)指紋圖譜主要特征峰的含量或比例的制定，可有效地控制樣品的質(zhì)量

62、，確保其質(zhì)量的相對(duì)穩(wěn)定。,中藥指紋圖譜系指采用光譜、色譜或其它分析方法建立的用以表征中藥化學(xué)成分特征的指紋圖譜。其中色譜法最常用的是薄層色譜（,TLC,或,TLCS,）、氣相色譜（,GC,）、高效液相色譜（,HPLC,）和高效毛細(xì)管電泳（,HPCE,）等。,中藥指紋圖譜可分為中藥材指紋圖譜、中藥飲片指紋圖譜、生產(chǎn)工藝過(guò)程中間產(chǎn)物（中間體或提取物）指紋圖譜和中藥制劑（中成藥）指紋圖譜。目前而言，最主要和最常用的是中藥化學(xué)成分指紋圖譜，特別是,HPLC,色譜指紋圖譜在中藥材、中藥飲片及其中藥制劑中的廣泛應(yīng)用。如對(duì),丹參,不同生產(chǎn)期產(chǎn)品的,HPLC,色譜指紋圖譜鑒別，對(duì)北沙參不同規(guī)格飲片的,HPLC

63、,色譜指紋圖譜鑒別與含量測(cè)定，等。,44,2024/10/22,45,2.3.6,色譜聯(lián)用鑒別方法,色譜聯(lián)用技術(shù)包括如,GC-MS,，,HPLC-MS,，,HPCE-MS,等方法，可提供各種信息，并且提供的信息量大，可反映幾十種、上百種化學(xué)成分組成的復(fù)雜體系，適合解決中藥復(fù)雜體系的分析要求。,GC,適用于揮發(fā)性化學(xué)成分。,HPLC,適用于非揮發(fā)性成分，中藥中的大部分化學(xué)成分均可用,HPLC,法得出良好的指紋圖譜。,HPCE,適用于大部分化學(xué)成分，特別是生物大分子肽和蛋白質(zhì)的分離，但其重現(xiàn)性有待進(jìn)一步提高。,2.3.6.1,氣相色譜,-,質(zhì)譜聯(lián)用法,氣相色譜,-,質(zhì)譜聯(lián)用法（,gas chrom

64、atography-mass spectrometry,，,GC-MS,）是一種高效能、高選擇性、高靈敏度的分離分析方法。結(jié)合了色譜、質(zhì)譜兩者的優(yōu)勢(shì)，使樣品的分離、定性及定量成為自動(dòng)化連續(xù)的過(guò)程。質(zhì)譜檢測(cè)器與傳統(tǒng)檢測(cè)器相比具有更高的靈敏度，樣品用量少，只需,10-9 g,10-12 g,；分析速度快、應(yīng)用范圍廣，在選擇合適電離方法的前提下，一般化合物都能被電離，能獲得更多的化合物結(jié)構(gòu)信息，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)檢測(cè)器的不足。,GC-MS,聯(lián)用分析的靈敏度高，適合于低分子化合物（相對(duì)分子質(zhì)量,1000,）的分析，尤其適合于揮發(fā)性成分的分析測(cè)定。在醫(yī)藥領(lǐng)域中質(zhì)量控制與有機(jī)溶劑殘留和中藥的農(nóng)藥殘留量測(cè)定、食品分析以及環(huán)境監(jiān)測(cè)等方面廣泛應(yīng)用。,46,2.3.6.2,液相色譜,-,質(zhì)譜聯(lián)用法,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（liquid chromatography-mass spectrometry，LC-MS）起始于20世紀(jì)70年代，但直到20世紀(jì)80年代中后期大氣壓電離技術(shù)（atmosphere pressure ionization，API）得到發(fā)展且逐漸成熟，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)才得以迅速發(fā)展，并很快成為分析和科研有力的工具。LC-MS法是以HPLC為分離工具，以MS為鑒定和測(cè)試手段，而通過(guò)適當(dāng)接口將二者連接成完整的分析儀器。試樣經(jīng)過(guò)HPLC系統(tǒng)進(jìn)樣，由色譜柱進(jìn)行分離