14第十四章超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)

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1、第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 返回總目錄返回總目錄目錄目錄 激發(fā)試驗(yàn)激發(fā)試驗(yàn) 1IgE的檢測(cè)的檢測(cè)2免疫復(fù)合物檢測(cè)免疫復(fù)合物檢測(cè)3抗球蛋白試驗(yàn)抗球蛋白試驗(yàn)4藥物過(guò)敏篩選實(shí)驗(yàn)藥物過(guò)敏篩選實(shí)驗(yàn) 5第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l 超敏反應(yīng)（超敏反應(yīng)（hypersensitivityhypersensitivity）又稱變態(tài)反應(yīng)，是又稱變態(tài)反應(yīng)，是指機(jī)體再次接受相同抗原刺激后，

2、發(fā)生的以組織細(xì)胞指機(jī)體再次接受相同抗原刺激后，發(fā)生的以組織細(xì)胞損傷或生理功能紊亂為主的特異性免疫應(yīng)答。損傷或生理功能紊亂為主的特異性免疫應(yīng)答。 l 變應(yīng)原（變應(yīng)原（allergenallergen）：）：引起超敏反應(yīng)的抗原稱引起超敏反應(yīng)的抗原稱之為變應(yīng)原。之為變應(yīng)原。 超敏反應(yīng)超敏反應(yīng) 第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 第一節(jié)第一節(jié) 激發(fā)試驗(yàn)激發(fā)試驗(yàn)激發(fā)試驗(yàn)（激發(fā)試驗(yàn)（provocation testprovocation test） 是模擬自然發(fā)是模擬自然發(fā)病條件，用少量超敏原引起一次較輕的超敏反應(yīng)病條件，用少量超敏原引起一次較輕的超敏反應(yīng)發(fā)作，達(dá)到確定

3、超敏原的一種體內(nèi)試驗(yàn)。發(fā)作，達(dá)到確定超敏原的一種體內(nèi)試驗(yàn)。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l 非特異性激發(fā)：非特異性激發(fā)：是用組胺等刺激物做霧化吸入，是用組胺等刺激物做霧化吸入， 以觀察患者對(duì)以觀察患者對(duì)型超敏反應(yīng)的敏感性，進(jìn)而分型超敏反應(yīng)的敏感性，進(jìn)而分 析病因或判定療效。析病因或判定療效。l 特異性激發(fā)：特異性激發(fā)：是用抗原如塵螨等做試驗(yàn)，對(duì)明確是用抗原如塵螨等做試驗(yàn)，對(duì)明確 超敏原有一定價(jià)值。超敏原有一定價(jià)值。 用于用于型和型和型超敏反應(yīng)性疾病的檢查。型超敏反應(yīng)性疾病的檢查。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 一

4、、皮膚試驗(yàn)一、皮膚試驗(yàn)是在皮膚進(jìn)行的體內(nèi)免疫學(xué)試驗(yàn)，簡(jiǎn)稱皮試。是在皮膚進(jìn)行的體內(nèi)免疫學(xué)試驗(yàn)，簡(jiǎn)稱皮試。機(jī)制：機(jī)制：型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 型超敏反應(yīng)型超敏反應(yīng)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l皮內(nèi)試驗(yàn)皮內(nèi)試驗(yàn)l點(diǎn)刺試驗(yàn)（挑刺或刺痕試驗(yàn)）點(diǎn)刺試驗(yàn)（挑刺或刺痕試驗(yàn)）l斑貼試驗(yàn)斑貼試驗(yàn)（一）試驗(yàn)類型及方法（一）試驗(yàn)類型及方法 第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （二）結(jié)果判定及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（二）結(jié)果判定及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)l速發(fā)型皮膚試驗(yàn)結(jié)果判定速發(fā)型皮膚試驗(yàn)結(jié)果判定 陽(yáng)

5、性反應(yīng)以風(fēng)團(tuán)為主；陽(yáng)性反應(yīng)以風(fēng)團(tuán)為主； 點(diǎn)刺試驗(yàn)的陽(yáng)性反應(yīng)以紅暈為主。點(diǎn)刺試驗(yàn)的陽(yáng)性反應(yīng)以紅暈為主。l遲發(fā)型皮膚試驗(yàn)結(jié)果判定遲發(fā)型皮膚試驗(yàn)結(jié)果判定 陽(yáng)性結(jié)果以紅腫和硬結(jié)為主。陽(yáng)性結(jié)果以紅腫和硬結(jié)為主。 第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 相同超敏原不同稀釋度相同超敏原不同稀釋度 速發(fā)型速發(fā)型151530min30min內(nèi)觀察內(nèi)觀察 遲發(fā)型遲發(fā)型484872h72h內(nèi)觀察內(nèi)觀察0.010.03ml/針4mm/針針?lè)椒ǚ椒ńY(jié)果結(jié)果皮內(nèi)試驗(yàn)皮內(nèi)試驗(yàn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l 比皮內(nèi)試驗(yàn)敏感性稍低，但假陽(yáng)性較少；比皮內(nèi)

6、試驗(yàn)敏感性稍低，但假陽(yáng)性較少；l 皮試液濃度要比皮內(nèi)試驗(yàn)高皮試液濃度要比皮內(nèi)試驗(yàn)高1010100100倍。倍。將試驗(yàn)抗原與對(duì)照液分別將試驗(yàn)抗原與對(duì)照液分別滴于試驗(yàn)部位的皮膚上滴于試驗(yàn)部位的皮膚上用針尖透過(guò)液滴輕挑一下用針尖透過(guò)液滴輕挑一下以刺破皮膚而不出血為度以刺破皮膚而不出血為度1min后拭（吸）去試驗(yàn)抗原液后拭（吸）去試驗(yàn)抗原液點(diǎn)刺試驗(yàn)點(diǎn)刺試驗(yàn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 速發(fā)型皮膚試驗(yàn)的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)速發(fā)型皮膚試驗(yàn)的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)分級(jí) 皮 內(nèi) 試 驗(yàn) 點(diǎn) 刺 試 驗(yàn)- -無(wú)風(fēng)團(tuán)或小于陰性對(duì)照無(wú)風(fēng)團(tuán)或小于陰性對(duì)照無(wú)風(fēng)團(tuán)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照無(wú)風(fēng)團(tuán)反應(yīng)或小于

7、陰性對(duì)照+ +風(fēng)團(tuán)風(fēng)團(tuán)3 35mm5mm、紅暈、紅暈20mm20mm無(wú)風(fēng)團(tuán)無(wú)風(fēng)團(tuán), ,陰性對(duì)照紅暈陰性對(duì)照紅暈20mm20mm+風(fēng)團(tuán)風(fēng)團(tuán)6 69mm9mm伴紅暈伴紅暈無(wú)風(fēng)團(tuán)，紅暈無(wú)風(fēng)團(tuán)，紅暈20mm20mm+風(fēng)團(tuán)風(fēng)團(tuán)101015mm15mm伴紅暈伴紅暈風(fēng)團(tuán)伴紅暈風(fēng)團(tuán)伴紅暈+風(fēng)團(tuán)風(fēng)團(tuán)15mm15mm伴紅暈和偽足伴紅暈和偽足風(fēng)團(tuán)伴紅暈和偽足風(fēng)團(tuán)伴紅暈和偽足第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 遲發(fā)型皮試結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)遲發(fā)型皮試結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)程度 結(jié)果判定 - -無(wú)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照無(wú)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照 + +僅有紅腫僅有紅腫 +紅腫伴硬結(jié)紅腫伴硬結(jié) +紅腫、硬結(jié)、

8、小皰紅腫、硬結(jié)、小皰 +大皰或大皰或/ /和潰瘍和潰瘍第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l第一次讀：第一次讀：4848小時(shí)打開(kāi)斑試器小時(shí)打開(kāi)斑試器, ,間隔間隔3030min待斑試器待斑試器 壓痕消失后判定結(jié)果。壓痕消失后判定結(jié)果。l第二次讀：第第二次讀：第3 3天或第天或第4 4天。天。l如懷疑光過(guò)敏，在斑貼試驗(yàn)的基礎(chǔ)上給予紫外線照如懷疑光過(guò)敏，在斑貼試驗(yàn)的基礎(chǔ)上給予紫外線照 射，操作過(guò)程相似。射，操作過(guò)程相似。 斑貼試驗(yàn)斑貼試驗(yàn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 斑貼試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)斑貼試驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)程度反應(yīng)程

9、度結(jié)果判定結(jié)果判定 無(wú)反應(yīng)或小于陰性對(duì)無(wú)反應(yīng)或小于陰性對(duì)照照 + +輕度紅腫、搔癢輕度紅腫、搔癢 +明顯紅腫、時(shí)有紅斑明顯紅腫、時(shí)有紅斑 +紅腫伴皮疹、水皰紅腫伴皮疹、水皰 +紅腫、水皰伴潰瘍紅腫、水皰伴潰瘍第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （三）結(jié)果分析及注意事項(xiàng)（三）結(jié)果分析及注意事項(xiàng) l假陰性出現(xiàn)的常見(jiàn)原因：假陰性出現(xiàn)的常見(jiàn)原因： 皮試液的濃度過(guò)低或失效；皮試液的濃度過(guò)低或失效； 老年患者或過(guò)敏性休克或哮喘大發(fā)作之后；老年患者或過(guò)敏性休克或哮喘大發(fā)作之后； 皮試前用過(guò)抗組胺藥或免疫抑制劑；皮試前用過(guò)抗組胺藥或免疫抑制劑； 操作不當(dāng)將皮試液注入皮下或注

10、入量過(guò)少等。操作不當(dāng)將皮試液注入皮下或注入量過(guò)少等。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （三）結(jié)果分析及注意事項(xiàng)（三）結(jié)果分析及注意事項(xiàng) l假陽(yáng)性出現(xiàn)的常見(jiàn)原因：假陽(yáng)性出現(xiàn)的常見(jiàn)原因： 皮試液含有非特異性刺激物；皮試液含有非特異性刺激物； 患者患有皮膚劃痕征；患者患有皮膚劃痕征； 操作手法較重；操作手法較重； 注入量較大或濃度過(guò)高；注入量較大或濃度過(guò)高； 注入少量空氣等。注入少量空氣等。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l詢問(wèn)病史詢問(wèn)病史陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照l(shuí)必備搶救藥品和設(shè)施必備搶救藥品和設(shè)施如何避免假性結(jié)果的出現(xiàn)：如何避

11、免假性結(jié)果的出現(xiàn)：適應(yīng)證適應(yīng)證陰性對(duì)照陰性對(duì)照皮試液濃度皮試液濃度第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （四）應(yīng)用與評(píng)價(jià)（四）應(yīng)用與評(píng)價(jià) l預(yù)防藥物或疫苗等過(guò)敏預(yù)防藥物或疫苗等過(guò)敏 l防治防治型超敏反應(yīng)性疾病型超敏反應(yīng)性疾病 l結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素試驗(yàn)l評(píng)估機(jī)體細(xì)胞免疫功能評(píng)估機(jī)體細(xì)胞免疫功能 l預(yù)防皮膚接觸過(guò)敏預(yù)防皮膚接觸過(guò)敏第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)核菌素試驗(yàn) l是用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，通過(guò)觀察局部是否出是用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，通過(guò)觀察局部是否出現(xiàn)遲發(fā)型超敏反應(yīng)，判斷機(jī)體有無(wú)結(jié)核分枝桿菌感現(xiàn)遲

12、發(fā)型超敏反應(yīng)，判斷機(jī)體有無(wú)結(jié)核分枝桿菌感染和對(duì)該菌的免疫力。染和對(duì)該菌的免疫力。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l陽(yáng)性：陽(yáng)性：機(jī)體已感染過(guò)結(jié)核桿菌或機(jī)體已感染過(guò)結(jié)核桿菌或BCG接種成功；接種成功；l強(qiáng)陽(yáng)性：強(qiáng)陽(yáng)性：可能有活動(dòng)性結(jié)核病；可能有活動(dòng)性結(jié)核??；l陰性：陰性：機(jī)體未感染過(guò)結(jié)核分枝桿菌，機(jī)體未感染過(guò)結(jié)核分枝桿菌， 但應(yīng)考慮：但應(yīng)考慮： 感染初期；感染初期； 老年人；老年人； 重度結(jié)核病患者，機(jī)體處于免疫反應(yīng)低下?tīng)顟B(tài)；重度結(jié)核病患者，機(jī)體處于免疫反應(yīng)低下?tīng)顟B(tài)； 患有其他疾病。患有其他疾病。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免

13、疫學(xué)檢驗(yàn) 二、二、支氣管激發(fā)試驗(yàn)支氣管激發(fā)試驗(yàn)手捏式霧化器手捏式霧化器 bronchial provocative test,BPTl 測(cè)定支氣管吸入某種刺激性物質(zhì)后產(chǎn)生收縮反應(yīng)程測(cè)定支氣管吸入某種刺激性物質(zhì)后產(chǎn)生收縮反應(yīng)程 度的方法，亦稱氣道反應(yīng)性測(cè)定；度的方法，亦稱氣道反應(yīng)性測(cè)定；l 吸入一定量的激發(fā)物；吸入一定量的激發(fā)物；l 比較吸入前后肺通氣功能指標(biāo)；比較吸入前后肺通氣功能指標(biāo)；l 判斷氣道高反應(yīng)性程度。判斷氣道高反應(yīng)性程度。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 霧化抗原顆粒霧化抗原顆粒55微米微米測(cè)定肺功能指標(biāo)：測(cè)定肺功能指標(biāo)：用力肺活量用力肺活量(

14、FVC)1 1秒用力呼氣容積秒用力呼氣容積(FEV1)最大呼氣流速最大呼氣流速(PEF)比氣道傳導(dǎo)率比氣道傳導(dǎo)率(sGaw)射流霧化器射流霧化器第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l 特異性特異性BPTBPT 將一定濃度的抗原刺激物裝入霧化器中將一定濃度的抗原刺激物裝入霧化器中 使受試者經(jīng)口或鼻吸入霧化顆粒，其攜帶激發(fā)物在使受試者經(jīng)口或鼻吸入霧化顆粒，其攜帶激發(fā)物在 支氣管樹(shù)及肺泡沉積而起作用。支氣管樹(shù)及肺泡沉積而起作用。l 非特異性非特異性BPTBPT 將一定濃度的激發(fā)物裝入霧化器中，將一定濃度的激發(fā)物裝入霧化器中， 進(jìn)行同特異性進(jìn)行同特異性BPTBPT的

15、操作。的操作。l 吸氣流速、霧化顆粒直徑的大小以及氣道通暢與否吸氣流速、霧化顆粒直徑的大小以及氣道通暢與否 均可影響霧化顆粒在氣道的沉積，從而影響氣道的均可影響霧化顆粒在氣道的沉積，從而影響氣道的 反應(yīng)性。反應(yīng)性。（一）試驗(yàn)類型及方法（一）試驗(yàn)類型及方法第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 測(cè)基礎(chǔ)肺功能測(cè)基礎(chǔ)肺功能 激發(fā)物稀釋液：激發(fā)物稀釋液：低濃度低濃度/ /小劑量小劑量雙倍濃度雙倍濃度/ /劑量遞增劑量遞增陽(yáng)性伴明顯氣促、喘息陽(yáng)性伴明顯氣促、喘息口吸入口吸入1 11 1分半鐘分半鐘測(cè)定肺功能測(cè)定肺功能陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)/ /明顯不適明顯不適/ /臨床癥狀臨床

16、癥狀直至直至激發(fā)物達(dá)到最高濃度激發(fā)物達(dá)到最高濃度陰性反應(yīng)陰性反應(yīng)支氣管支氣管舒張劑舒張劑吸入吸入技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （二）測(cè)定指標(biāo)及結(jié)果判斷（二）測(cè)定指標(biāo)及結(jié)果判斷支氣管支氣管反應(yīng)有三種類型：速發(fā)、遲發(fā)和雙重反應(yīng)。反應(yīng)有三種類型：速發(fā)、遲發(fā)和雙重反應(yīng)。每次觀察不能小于每次觀察不能小于2424小時(shí)。小時(shí)。lFEV1：重復(fù)性好，結(jié)果穩(wěn)定；重復(fù)性好，結(jié)果穩(wěn)定；lPEF：峰流速儀價(jià)格低廉、方便、不受場(chǎng)地限制，峰流速儀價(jià)格低廉、方便、不受場(chǎng)地限制， 與與FEV1FEV1有較好的相關(guān)性，適合流行病學(xué)調(diào)查；有較好的相關(guān)性，適合流行病學(xué)調(diào)查；

17、lsGaw：敏感性好，但重復(fù)性稍差。敏感性好，但重復(fù)性稍差。測(cè)定指標(biāo)測(cè)定指標(biāo)1第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 變應(yīng)原的確定常以定性試驗(yàn)判斷結(jié)果。變應(yīng)原的確定常以定性試驗(yàn)判斷結(jié)果。 陽(yáng)性：陽(yáng)性：氣道反應(yīng)性增高氣道反應(yīng)性增高 FEV1、PEF較基礎(chǔ)下降較基礎(chǔ)下降2020或或sGaw下降下降35%35%， 有時(shí)伴有明顯自覺(jué)癥狀或肺部聞及哮鳴音。有時(shí)伴有明顯自覺(jué)癥狀或肺部聞及哮鳴音。定性判斷定性判斷2（二）測(cè)定指標(biāo)及結(jié)果判斷（二）測(cè)定指標(biāo)及結(jié)果判斷第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 陰性：陰性：氣道反應(yīng)性正常氣道反應(yīng)性正常 F

18、EV1、PEF或或sGaw上述標(biāo)準(zhǔn)，正常值為陰性。上述標(biāo)準(zhǔn)，正常值為陰性。 無(wú)論激發(fā)試驗(yàn)陽(yáng)性或陰性，均應(yīng)排除氣道反應(yīng)性的影無(wú)論激發(fā)試驗(yàn)陽(yáng)性或陰性，均應(yīng)排除氣道反應(yīng)性的影響因素?？梢烧?，間隔響因素?？梢烧?，間隔2 23 3周后復(fù)檢或周后復(fù)檢或2 2個(gè)月后再測(cè)。個(gè)月后再測(cè)。定性判斷定性判斷2（二）測(cè)定指標(biāo)及結(jié)果判斷（二）測(cè)定指標(biāo)及結(jié)果判斷第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （三）注意事項(xiàng)及禁忌證（三）注意事項(xiàng)及禁忌證 l受試者在心肺功能不全、高血壓、甲亢、妊娠、嚴(yán)受試者在心肺功能不全、高血壓、甲亢、妊娠、嚴(yán)重咽喉炎、呼吸道感染或肺炎等情況下一般不適宜重咽喉炎、呼

19、吸道感染或肺炎等情況下一般不適宜作激發(fā)試驗(yàn)；作激發(fā)試驗(yàn)；l有過(guò)敏性休克，嚴(yán)重的血管性水腫及嚴(yán)重的喉頭水有過(guò)敏性休克，嚴(yán)重的血管性水腫及嚴(yán)重的喉頭水腫病史者；腫病史者；l一周之內(nèi)預(yù)防接種、職業(yè)性過(guò)敏因素的接觸等。一周之內(nèi)預(yù)防接種、職業(yè)性過(guò)敏因素的接觸等。禁忌證禁忌證1第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l受試者在檢查前：受試者在檢查前：4848小時(shí)：停小時(shí)：停！抗組胺藥、色甘酸鈉及皮質(zhì)激素類藥抗組胺藥、色甘酸鈉及皮質(zhì)激素類藥; ;1212小時(shí)：停小時(shí)：停！支氣管擴(kuò)張劑支氣管擴(kuò)張劑; ;1515分鐘：實(shí)驗(yàn)室休息分鐘：實(shí)驗(yàn)室休息, ,病史、體檢排除病史、體檢排除B

20、PTBPT的禁忌證。的禁忌證。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)2（三）注意事項(xiàng)及禁忌證（三）注意事項(xiàng)及禁忌證第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l基礎(chǔ)基礎(chǔ)FEV1占預(yù)計(jì)值占預(yù)計(jì)值70%70%以上才能進(jìn)行試驗(yàn)。以上才能進(jìn)行試驗(yàn)。l受試者應(yīng)為哮喘患者病情穩(wěn)定時(shí)或緩解期。受試者應(yīng)為哮喘患者病情穩(wěn)定時(shí)或緩解期。l吸入激發(fā)物的濃度應(yīng)從小到大，逐漸遞增。吸入激發(fā)物的濃度應(yīng)從小到大，逐漸遞增。l應(yīng)備有急救器械、藥品和有經(jīng)驗(yàn)的臨床醫(yī)生在場(chǎng)。應(yīng)備有急救器械、藥品和有經(jīng)驗(yàn)的臨床醫(yī)生在場(chǎng)。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)2（三）注意事項(xiàng)及禁忌證（三）注意事項(xiàng)及禁忌證第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超

21、敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （四）應(yīng)用與評(píng)價(jià)（四）應(yīng)用與評(píng)價(jià)有一定的危險(xiǎn)性，但較皮膚試驗(yàn)的特異性高有一定的危險(xiǎn)性，但較皮膚試驗(yàn)的特異性高與受試者的病史、癥狀和體征相關(guān)性較強(qiáng)與受試者的病史、癥狀和體征相關(guān)性較強(qiáng)確定支氣管哮喘的過(guò)敏原，尤其皮試結(jié)果不肯定時(shí)確定支氣管哮喘的過(guò)敏原，尤其皮試結(jié)果不肯定時(shí)排除皮試時(shí)的假陽(yáng)性反應(yīng)和假陰性反應(yīng)排除皮試時(shí)的假陽(yáng)性反應(yīng)和假陰性反應(yīng)檢測(cè)新制劑的抗原性、平喘藥療效及觀察脫敏效果檢測(cè)新制劑的抗原性、平喘藥療效及觀察脫敏效果缺點(diǎn)是每次僅能用一種抗原，要專門(mén)設(shè)備和技術(shù)，缺點(diǎn)是每次僅能用一種抗原，要專門(mén)設(shè)備和技術(shù)，并需對(duì)病人進(jìn)行訓(xùn)練并與之配合并需對(duì)病人進(jìn)行訓(xùn)練并與之配合第十四

22、章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 觀察癥狀觀察癥狀癥狀好轉(zhuǎn)癥狀好轉(zhuǎn)或減輕或減輕導(dǎo)致導(dǎo)致三、食物激發(fā)試驗(yàn)三、食物激發(fā)試驗(yàn)基礎(chǔ)基礎(chǔ)飲食飲食吃可疑的吃可疑的過(guò)敏食物過(guò)敏食物癥狀癥狀加重加重1 1周后周后疑似疑似過(guò)敏原，重復(fù)過(guò)敏原，重復(fù)3 3次次確定確定某食物為過(guò)敏原某食物為過(guò)敏原癥狀未減輕癥狀未減輕1 1周后周后排除排除 食物所致過(guò)敏食物所致過(guò)敏第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 四、其他方法四、其他方法口腔激發(fā)試驗(yàn)口腔激發(fā)試驗(yàn)將超敏原直接與口腔黏膜接觸，當(dāng)口腔將超敏原直接與口腔黏膜接觸，當(dāng)口腔黏膜出現(xiàn)腫脹和充血時(shí)，可判斷為陽(yáng)性黏膜

23、出現(xiàn)腫脹和充血時(shí)，可判斷為陽(yáng)性反應(yīng)。反應(yīng)。 結(jié)膜激發(fā)試驗(yàn)結(jié)膜激發(fā)試驗(yàn)將超敏原滴于一眼，陽(yáng)性反應(yīng)為結(jié)膜充將超敏原滴于一眼，陽(yáng)性反應(yīng)為結(jié)膜充血、水腫、分泌增加、搔癢，甚至眼瞼血、水腫、分泌增加、搔癢，甚至眼瞼紅腫。注意假陽(yáng)性對(duì)結(jié)果的干擾。紅腫。注意假陽(yáng)性對(duì)結(jié)果的干擾。鼻黏膜激發(fā)試驗(yàn)鼻黏膜激發(fā)試驗(yàn)將抗原吸入將抗原吸入/ /滴入受試者鼻腔，出現(xiàn)鼻滴入受試者鼻腔，出現(xiàn)鼻黏膜水腫、蒼白、鼻癢、流涕、噴嚏為黏膜水腫、蒼白、鼻癢、流涕、噴嚏為陽(yáng)性。陽(yáng)性。 返回章目錄返回章目錄第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 第二節(jié)第二節(jié) IgE的檢測(cè)的檢測(cè) 一、一、IgE的測(cè)定的測(cè)定 C

24、LIA敏感度更高，特異性高，定量敏感度更高，特異性高，定量 固相固相RIA是較傳統(tǒng)的是較傳統(tǒng)的IgE檢測(cè)方法檢測(cè)方法ELISA 雙抗體夾心法，操作簡(jiǎn)便，敏感性很雙抗體夾心法，操作簡(jiǎn)便，敏感性很高，是測(cè)定血清高，是測(cè)定血清IgE最常用的方法最常用的方法第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 臨床意義臨床意義 正常人群血清正常人群血清IgE水平受地域環(huán)境、種水平受地域環(huán)境、種 族、遺傳、年齡、性別、寄生蟲(chóng)感染、測(cè)定法及取族、遺傳、年齡、性別、寄生蟲(chóng)感染、測(cè)定法及取 樣等影響，結(jié)果有一定差異。樣等影響，結(jié)果有一定差異。 參考值參考值0.10.10.9mg/L0.9mg

25、/L某些過(guò)敏體質(zhì)者高于正常某些過(guò)敏體質(zhì)者高于正常100010001000010000倍倍 血清血清IgE高高特應(yīng)癥、支氣管肺曲菌病、特應(yīng)癥、支氣管肺曲菌病、藥物性間質(zhì)性肺炎、麻風(fēng)、藥物性間質(zhì)性肺炎、麻風(fēng)、寄生蟲(chóng)病及寄生蟲(chóng)病及IgE型骨髓瘤等型骨髓瘤等第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 二、特異性二、特異性IgE的測(cè)定的測(cè)定l 用純化的過(guò)敏原去檢測(cè)相應(yīng)的用純化的過(guò)敏原去檢測(cè)相應(yīng)的IgE抗體的一類試驗(yàn)?？贵w的一類試驗(yàn)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：常用間接法測(cè)特異性常用間接法測(cè)特異性IgE。免疫印跡技術(shù)：免疫印跡技術(shù)：操作簡(jiǎn)單，能一次性測(cè)定多種變。操作簡(jiǎn)單

26、，能一次性測(cè)定多種變。應(yīng)原的特異性應(yīng)原的特異性IgE，故臨床已普遍采用，故臨床已普遍采用IBT法。法。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （+ +）E EE EE EE EE EE E洗滌洗滌洗滌洗滌洗滌洗滌結(jié)果結(jié)果ELISA間接法檢測(cè)特異性間接法檢測(cè)特異性IgE第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 特異性變應(yīng)原加入待檢血清特異性變應(yīng)原加入待檢血清+- 轉(zhuǎn)印至轉(zhuǎn)印至NC膜膜NC膜膜多種特異性變應(yīng)原+ + +- - - +分離特異性變應(yīng)原條帶待檢血清待檢血清特異性特異性IgE抗抗-IgEHRP底物底物特異性抗原特異性抗原條帶顯

27、色條帶顯色NC膜膜變應(yīng)原變應(yīng)原特異性特異性IgE抗抗-IgEHRPIBT檢測(cè)特異性檢測(cè)特異性IgE返回章目錄返回章目錄第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 第三節(jié)第三節(jié) 免疫復(fù)合物檢測(cè)免疫復(fù)合物檢測(cè)l免疫復(fù)合物免疫復(fù)合物（immune complex, IC）:指由抗原與相應(yīng)指由抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合而成的復(fù)合物。的抗體結(jié)合而成的復(fù)合物。l局部免疫復(fù)合物：局部免疫復(fù)合物：沉積在機(jī)體的某一局部。沉積在機(jī)體的某一局部。l循環(huán)循環(huán)IC（circulating IC, CIC）：）：血液中存在的血液中存在的IC。 l型超敏反應(yīng)：型超敏反應(yīng)：在傳染病或性病時(shí)，在傳染病或性

28、病時(shí)，IC沉淀于局部后沉淀于局部后激活補(bǔ)體，最終導(dǎo)致組織損傷，形成激活補(bǔ)體，最終導(dǎo)致組織損傷，形成IC病。病。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 抗原特異性抗原特異性IC抗抗原非特異性原非特異性IC不考慮形成不考慮形成IC抗原的性質(zhì)，抗原的性質(zhì)，檢測(cè)未知抗原檢測(cè)未知抗原與相應(yīng)抗體形與相應(yīng)抗體形成的成的IC總量總量第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 一、抗原非特異性一、抗原非特異性CIC檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)技術(shù)CIC：分子量分子量600kDa以上，沉降系數(shù)以上，沉降系數(shù)19S；熱聚合人熱聚合人IgG(heat agglutinati

29、on human IgG, HAHG)： 作為參考標(biāo)準(zhǔn)品，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行作為參考標(biāo)準(zhǔn)品，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行CIC定量或測(cè)定定量或測(cè)定 A值代表值代表CIC相當(dāng)于相當(dāng)于HAHG的含量。的含量。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) CIC的檢測(cè)方法：的檢測(cè)方法：按抗體分子在結(jié)合抗原后發(fā)生的按抗體分子在結(jié)合抗原后發(fā)生的物理學(xué)和生物學(xué)特性的改變而設(shè)計(jì)。物理學(xué)和生物學(xué)特性的改變而設(shè)計(jì)。 PEG比濁法比濁法; ;ELISA法法; ;胞法胞法Raji細(xì)胞法細(xì)胞法; ;抗球蛋白技術(shù)抗球蛋白技術(shù)mRF凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)。凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反

30、應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （一）（一）PEG比濁法比濁法1.1.基本原理基本原理 聚乙二醇聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）為）為 不帶電荷、直鏈大分子結(jié)構(gòu)的多糖，有強(qiáng)脫水作用，不帶電荷、直鏈大分子結(jié)構(gòu)的多糖，有強(qiáng)脫水作用， 利用利用2%2%4%4%濃度的濃度的PEG可選擇性沉淀大分子可選擇性沉淀大分子CIC。2.2.技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn) 生物化學(xué)檢驗(yàn)。生物化學(xué)檢驗(yàn)。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 2%PEG沉淀大分子沉淀大分子CIC； 4%PEG沉淀較小分子沉淀較小分子CIC； 超過(guò)超過(guò)5%PEG選擇性沉淀選擇性沉淀CIC的特性消失；的

31、特性消失； 溫度影響極大，需進(jìn)行溫差校正；溫度影響極大，需進(jìn)行溫差校正； 低密度脂蛋白使?jié)岫仍黾?，空腹采血；低密度脂蛋白使?jié)岫仍黾?，空腹采血?高高球蛋白血癥和標(biāo)本反復(fù)凍融濁度增加。球蛋白血癥和標(biāo)本反復(fù)凍融濁度增加。3.3.注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （二）（二）ELISA法法1.1.基本原理基本原理 ELISA法測(cè)定的法測(cè)定的CIC，是能夠結(jié)合，是能夠結(jié)合C1q的的 IgG類抗體與其特異性抗原形成的類抗體與其特異性抗原形成的CIC。2.2.技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn) 將聚苯乙烯包被上將聚苯乙烯包被上C1q，加入受檢血清，加入受檢血清， CIC

32、中中IgG的的Fc段與段與C1q結(jié)合，再加抗人結(jié)合，再加抗人IgGHRP， 形成形成C1q-CIC-抗人抗人IgGHRP復(fù)合物，加底物顯色。復(fù)合物，加底物顯色。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 靈敏度高于靈敏度高于PEG比濁法，檢測(cè)到比濁法，檢測(cè)到0.1mg/L，重重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)；復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)； C1q制品不易精制制品不易精制, 純品不穩(wěn)定，只能檢出與補(bǔ)純品不穩(wěn)定，只能檢出與補(bǔ)體結(jié)合的體結(jié)合的CIC。3.3.方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （三）細(xì)胞法（三）細(xì)胞法Raji細(xì)胞法細(xì)胞法 Raji細(xì)胞是從

33、細(xì)胞是從Burkitt淋巴瘤分離建株似淋巴瘤分離建株似 B細(xì)胞系，在體外繁殖傳代，細(xì)胞表面有高密度的細(xì)胞系，在體外繁殖傳代，細(xì)胞表面有高密度的 C1q、C3b、C3d等補(bǔ)體受體，而且不易脫落。等補(bǔ)體受體，而且不易脫落。1.1.基本原理基本原理第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 將定量待檢血清、將定量待檢血清、HAHG和和Raji細(xì)胞混合，使補(bǔ)細(xì)胞混合，使補(bǔ)體、體、CIC或或HAHG與與Raji細(xì)胞形成復(fù)合物，加入細(xì)胞形成復(fù)合物，加入抗人抗人IgGFIC，形成形成Raji細(xì)胞細(xì)胞補(bǔ)體補(bǔ)體CIC(或或 HAHG)抗人抗人IgG FIC復(fù)合物，檢測(cè)熒光強(qiáng)度。復(fù)合物

34、，檢測(cè)熒光強(qiáng)度。2.2.技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 培養(yǎng)條件能改變培養(yǎng)條件能改變Raji細(xì)胞細(xì)胞其其表面受體的數(shù)表面受體的數(shù)量及親和性，影響檢測(cè)敏感性量及親和性，影響檢測(cè)敏感性; ;待檢血清中如有抗淋巴細(xì)胞的抗體，能和待檢血清中如有抗淋巴細(xì)胞的抗體，能和Raji細(xì)胞反應(yīng)細(xì)胞反應(yīng); ;SLE血清中的抗血清中的抗DNA也能和也能和Raji細(xì)胞反應(yīng)，細(xì)胞反應(yīng)，使測(cè)定結(jié)果偏高。使測(cè)定結(jié)果偏高。 3.3.影響因素影響因素第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 敏感性高敏感性高(6mg/L HAHG)，實(shí)用性強(qiáng)；實(shí)

35、用性強(qiáng)；缺點(diǎn)需培養(yǎng)缺點(diǎn)需培養(yǎng)Raji細(xì)胞和同位素標(biāo)記抗人細(xì)胞和同位素標(biāo)記抗人IgG，操作繁瑣操作繁瑣;Raii細(xì)胞培養(yǎng)較困難，不易長(zhǎng)期穩(wěn)定保持細(xì)胞培養(yǎng)較困難，不易長(zhǎng)期穩(wěn)定保持其特性，培養(yǎng)條件受限。其特性，培養(yǎng)條件受限。4.4.方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) （四）抗球蛋白技術(shù)（四）抗球蛋白技術(shù)mRF凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)?zāi)z擴(kuò)散試驗(yàn)1.1.基本原理基本原理 IgG或或IgM類自身抗體與類自身抗體與IC中中IgG的的Fc段結(jié)合而不與游離段結(jié)合而不與游離IgG結(jié)合的特性，結(jié)合的特性，mRF與與CIC親和親和力較強(qiáng)。力較強(qiáng)。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾

36、病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 2.2.技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn) 將將mRF和待檢血清中的和待檢血清中的CIC在瓊脂凝在瓊脂凝膠中擴(kuò)散，膠中擴(kuò)散，mRFCIC結(jié)合形成沉淀現(xiàn)象，進(jìn)行結(jié)合形成沉淀現(xiàn)象，進(jìn)行CIC定性或定量定性或定量。3.3.方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià) 敏感度較低敏感度較低100mg/L（HAHG），），mRF來(lái)源受限，操作費(fèi)時(shí)，難于常規(guī)應(yīng)用。來(lái)源受限，操作費(fèi)時(shí)，難于常規(guī)應(yīng)用。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) CIC檢測(cè)方法的基本原理及敏感性比較檢測(cè)方法的基本原理及敏感性比較方法方法原理原理 敏感性敏感性(mg/L HAHG)PEG比濁法比濁法溶解度溶

37、解度2020超速離心超速離心分子大小分子大小- -分子超濾分子超濾分子大小分子大小- -凝膠過(guò)濾凝膠過(guò)濾分子大小分子大小3030ELISA法法結(jié)合結(jié)合C1q0.10.1C1q液相法液相法結(jié)合結(jié)合C1q1010C1q偏離試驗(yàn)偏離試驗(yàn)結(jié)合結(jié)合C1q1 15 5抗補(bǔ)體實(shí)驗(yàn)抗補(bǔ)體實(shí)驗(yàn)固定補(bǔ)體固定補(bǔ)體0.10.1mRF凝膠擴(kuò)散法凝膠擴(kuò)散法結(jié)合結(jié)合RF100100mRF固相抑制法固相抑制法結(jié)合結(jié)合RF1 12020抗抗體法抗抗體法結(jié)合結(jié)合Ig2 23 3Raji細(xì)胞法細(xì)胞法補(bǔ)體受體補(bǔ)體受體6 6花環(huán)抑制試驗(yàn)花環(huán)抑制試驗(yàn)補(bǔ)體受體補(bǔ)體受體1010第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫

38、學(xué)檢驗(yàn) 二、二、CIC檢測(cè)方法評(píng)價(jià)及應(yīng)用檢測(cè)方法評(píng)價(jià)及應(yīng)用自身免疫性疾病病程中連續(xù)動(dòng)態(tài)觀察或輔助診斷：自身免疫性疾病病程中連續(xù)動(dòng)態(tài)觀察或輔助診斷：試驗(yàn)方法本身不完善；試驗(yàn)方法本身不完善；IC形成的復(fù)雜性，如在生理狀態(tài)下形成的復(fù)雜性，如在生理狀態(tài)下IC是由各種抗原是由各種抗原 與相應(yīng)抗體所構(gòu)成的，維持動(dòng)態(tài)平衡。在病理狀態(tài)與相應(yīng)抗體所構(gòu)成的，維持動(dòng)態(tài)平衡。在病理狀態(tài) 下往往是單一種類下往往是單一種類IC增高，而此種單一成分增高發(fā)增高，而此種單一成分增高發(fā) 展到足以影響展到足以影響IC總體水平情況下，才能被試驗(yàn)檢出?？傮w水平情況下，才能被試驗(yàn)檢出。（一）檢測(cè)方法評(píng)價(jià)（一）檢測(cè)方法評(píng)價(jià)第十四章第十四章

39、 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 腎臟疾?。杭毙阅I小球腎炎、移植腎、腎臟疾?。杭毙阅I小球腎炎、移植腎、IgA腎病；腎病；消化系統(tǒng)疾病：慢活肝炎、原發(fā)性膽淤性肝硬化；消化系統(tǒng)疾?。郝罡窝?、原發(fā)性膽淤性肝硬化；皮膚?。菏n麻疹、天皰瘡、皮疹性皮炎；皮膚?。菏n麻疹、天皰瘡、皮疹性皮炎；型超敏反應(yīng)性疾病型超敏反應(yīng)性疾?。篠LE、RA、硬皮癥、自身硬皮癥、自身 免疫性溶血性貧血等。免疫性溶血性貧血等。此外，此外，CIC的檢測(cè)對(duì)于腫瘤、肝癌、白血病、霍奇金的檢測(cè)對(duì)于腫瘤、肝癌、白血病、霍奇金病、神經(jīng)肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥等疾病的診斷。病、神經(jīng)肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥等疾病的診斷。( (二二

40、) )臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 固定或沉積于病變局部組織中的固定或沉積于病變局部組織中的IC測(cè)定常用免測(cè)定常用免疫組化技術(shù)，如熒光免疫組化技術(shù)檢測(cè)到組織標(biāo)本疫組化技術(shù)，如熒光免疫組化技術(shù)檢測(cè)到組織標(biāo)本有有Ig和補(bǔ)體。受累組織的成分、構(gòu)型和特定的部位和補(bǔ)體。受累組織的成分、構(gòu)型和特定的部位可為疾病的嚴(yán)重程度和預(yù)后提供依據(jù)?？蔀榧膊〉膰?yán)重程度和預(yù)后提供依據(jù)。三、沉積于組織中三、沉積于組織中IC 的測(cè)定的測(cè)定返回章目錄返回章目錄第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 類型類型第四節(jié)第四節(jié) 抗人球蛋白試驗(yàn)抗人

41、球蛋白試驗(yàn)(Coombs試驗(yàn)試驗(yàn))l不完全抗體：不完全抗體：抗體分子較短小，只能與顆粒抗原抗體分子較短小，只能與顆粒抗原一方相結(jié)合，不出現(xiàn)可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象，但能封閉一方相結(jié)合，不出現(xiàn)可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象，但能封閉抗原決定簇，使其不能再與完全抗體結(jié)合?？乖瓫Q定簇，使其不能再與完全抗體結(jié)合。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l抗人球蛋白試驗(yàn)抗人球蛋白試驗(yàn)（antiglobulin test,AGT）：）：將人將人 球蛋白注入異種動(dòng)物，誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生抗人球蛋白球蛋白注入異種動(dòng)物，誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生抗人球蛋白血清血清 （antiglobulin serum，AGS)，AGS加入表

42、加入表面結(jié)合有不完全抗體的紅細(xì)胞復(fù)合物中，就能出面結(jié)合有不完全抗體的紅細(xì)胞復(fù)合物中，就能出現(xiàn)可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。現(xiàn)可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 作用：作用：檢測(cè)紅細(xì)胞表面結(jié)檢測(cè)紅細(xì)胞表面結(jié)合的不完全抗體。合的不完全抗體。臨床意義：臨床意義：新生兒溶血癥新生兒溶血癥和自身免疫性溶血性貧血和自身免疫性溶血性貧血的診斷。的診斷。RBC為為Rh+7S7S的的IgG體內(nèi)發(fā)生體內(nèi)發(fā)生+抗抗IgG體外測(cè)試體外測(cè)試抽血抽血一、直接抗球蛋白試驗(yàn)一、直接抗球蛋白試驗(yàn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 檢測(cè)游離在血檢測(cè)游離在血

43、清中的不完全清中的不完全抗體或紅細(xì)胞抗體或紅細(xì)胞表面的抗原表面的抗原RBC為為Rh+ 不完全抗體試劑不完全抗體試劑+抗抗IgG體外測(cè)試體外測(cè)試二、間接抗球蛋白試驗(yàn)二、間接抗球蛋白試驗(yàn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 間接間接Coombs試驗(yàn)各反應(yīng)物加入量試驗(yàn)各反應(yīng)物加入量反應(yīng)物反應(yīng)物受檢管受檢管陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照陰性對(duì)照血清（受檢或已知）血清（受檢或已知）2 2滴滴5%5%紅細(xì)胞懸液紅細(xì)胞懸液( (已知或受檢已知或受檢) )1 1滴滴不完全抗不完全抗D血清血清2 2滴滴AB型血清型血清2 2滴滴5% 5% Rh陽(yáng)性紅細(xì)胞懸液陽(yáng)性紅細(xì)胞懸液1 1滴滴1

44、 1滴滴1技術(shù)要點(diǎn)技術(shù)要點(diǎn)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 凝集為陽(yáng)性，表明受檢血清有不完全抗體或紅細(xì)凝集為陽(yáng)性，表明受檢血清有不完全抗體或紅細(xì)胞上有相應(yīng)抗原；同時(shí)具備陽(yáng)性對(duì)照管凝集陰性對(duì)照胞上有相應(yīng)抗原；同時(shí)具備陽(yáng)性對(duì)照管凝集陰性對(duì)照管不凝集，如有不完全抗體，可將血清以作倍比稀釋管不凝集，如有不完全抗體，可將血清以作倍比稀釋進(jìn)行效價(jià)測(cè)定。進(jìn)行效價(jià)測(cè)定。2結(jié)果判斷結(jié)果判斷第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 在在37水浴中，抗體吸附相應(yīng)紅細(xì)胞上的結(jié)合程水浴中，抗體吸附相應(yīng)紅細(xì)胞上的結(jié)合程 度，與致敏的時(shí)間、離子強(qiáng)度有關(guān)；度

45、，與致敏的時(shí)間、離子強(qiáng)度有關(guān)； 離心速度和時(shí)間十分重要，原則應(yīng)以最小的離心離心速度和時(shí)間十分重要，原則應(yīng)以最小的離心 力和最短的離心時(shí)間使陽(yáng)性對(duì)照管出現(xiàn)反應(yīng)為宜。力和最短的離心時(shí)間使陽(yáng)性對(duì)照管出現(xiàn)反應(yīng)為宜。34 是一種極為敏感的檢查不完全抗體的方法，也是是一種極為敏感的檢查不完全抗體的方法，也是RhD 檢出的確證試驗(yàn)。操作繁雜，受試驗(yàn)條件影響較大。檢出的確證試驗(yàn)。操作繁雜，受試驗(yàn)條件影響較大。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)方法評(píng)價(jià)方法評(píng)價(jià)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l血液病的檢測(cè)；血液病的檢測(cè)；l鑒定血型和檢查血清中不完全抗體；鑒定血型和檢查血清中不完全抗體；l有

46、助于有助于RhD的檢出，多用于檢測(cè)母體的檢出，多用于檢測(cè)母體RhD抗體；抗體；l輸血前交叉配血試驗(yàn)及其他特殊研究；輸血前交叉配血試驗(yàn)及其他特殊研究；l及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生；及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生；l紅細(xì)胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測(cè)。紅細(xì)胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測(cè)。5返回章目錄返回章目錄臨床意義臨床意義第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l 方法：熒光分光光度法、放射免疫分析法及酶免疫方法：熒光分光光度法、放射免疫分析法及酶免疫 分析法測(cè)定。分析法測(cè)定。l 變應(yīng)原刺激劑致嗜堿粒細(xì)胞釋放組胺，可以檢測(cè)出嗜變應(yīng)原刺激劑致

47、嗜堿粒細(xì)胞釋放組胺，可以檢測(cè)出嗜 堿粒細(xì)胞的釋放能力，變應(yīng)原刺激劑可以特異性確定堿粒細(xì)胞的釋放能力，變應(yīng)原刺激劑可以特異性確定 變應(yīng)原的類型。變應(yīng)原的類型。類型類型第五節(jié)第五節(jié) 藥物過(guò)敏篩選實(shí)驗(yàn)藥物過(guò)敏篩選實(shí)驗(yàn)一、組胺含量測(cè)定一、組胺含量測(cè)定第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) l BHRT是變應(yīng)原刺激劑刺激純化、洗滌后的嗜堿粒細(xì)是變應(yīng)原刺激劑刺激純化、洗滌后的嗜堿粒細(xì) 胞懸液而后釋放化學(xué)介質(zhì)組胺，通過(guò)測(cè)定組胺的量來(lái)胞懸液而后釋放化學(xué)介質(zhì)組胺，通過(guò)測(cè)定組胺的量來(lái) 反映嗜堿粒細(xì)胞的釋放能力。反映嗜堿粒細(xì)胞的釋放能力。l BHRT的結(jié)果可以從細(xì)胞釋放一定量的組胺所

48、需要的的結(jié)果可以從細(xì)胞釋放一定量的組胺所需要的 變應(yīng)原濃度或在一定濃度的變應(yīng)原作用下細(xì)胞所釋放變應(yīng)原濃度或在一定濃度的變應(yīng)原作用下細(xì)胞所釋放 定量的組胺量來(lái)表達(dá)。定量的組胺量來(lái)表達(dá)。l 實(shí)驗(yàn)的靈敏度高，結(jié)果可靠，但價(jià)格較高。實(shí)驗(yàn)的靈敏度高，結(jié)果可靠，但價(jià)格較高。嗜堿粒細(xì)胞組胺釋放嗜堿粒細(xì)胞組胺釋放(basophil histamine release test，BHRT)第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) (human basophil degranulation test，HBDT)人嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)人嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)嗜堿粒細(xì)胞胞質(zhì)中硫酸肝素顆?？?/p>

49、以被堿性染料嗜堿粒細(xì)胞胞質(zhì)中硫酸肝素顆?？梢员粔A性染料( (甲苯胺藍(lán)、阿利新藍(lán)等甲苯胺藍(lán)、阿利新藍(lán)等) )染色。當(dāng)嗜堿粒細(xì)胞表染色。當(dāng)嗜堿粒細(xì)胞表面結(jié)合的面結(jié)合的IgE與過(guò)敏原結(jié)合后，嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒，與過(guò)敏原結(jié)合后，嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒，則不再被染色，染色完整的細(xì)胞減少，從減少的則不再被染色，染色完整的細(xì)胞減少，從減少的完整細(xì)胞判斷變應(yīng)原引起的過(guò)敏狀況。完整細(xì)胞判斷變應(yīng)原引起的過(guò)敏狀況。第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 類胰蛋白酶類胰蛋白酶類胰蛋白酶：類胰蛋白酶：是是MC更具有選擇性的標(biāo)志，更具有選擇性的標(biāo)志，類胰類胰蛋白酶儲(chǔ)存于分泌顆粒中，蛋白酶儲(chǔ)存于分泌

50、顆粒中，MC激活時(shí)，被釋放至激活時(shí)，被釋放至細(xì)胞外；細(xì)胞外；類胰蛋白酶原以酶原的形式存在，它的類胰蛋白酶原以酶原的形式存在，它的釋放不需要釋放不需要MC的激活，所以它的血清水平可以反的激活，所以它的血清水平可以反映體內(nèi)映體內(nèi)MC數(shù)目。嗜堿粒細(xì)胞幾乎不含類胰蛋白酶。數(shù)目。嗜堿粒細(xì)胞幾乎不含類胰蛋白酶。返回章目錄返回章目錄第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) 小小 結(jié)結(jié) 超敏反應(yīng)性疾病通過(guò)體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)，可進(jìn)行變超敏反應(yīng)性疾病通過(guò)體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)，可進(jìn)行變應(yīng)原的相關(guān)檢測(cè)，包括應(yīng)原的相關(guān)檢測(cè)，包括激發(fā)試驗(yàn)激發(fā)試驗(yàn)（根據(jù)刺激物不同（根據(jù)刺激物不同分為非特異性和特異性激發(fā)

51、試驗(yàn)，按檢測(cè)部位又分分為非特異性和特異性激發(fā)試驗(yàn)，按檢測(cè)部位又分為皮膚試驗(yàn)、為皮膚試驗(yàn)、支氣管激發(fā)試驗(yàn)支氣管激發(fā)試驗(yàn)、食物激發(fā)試驗(yàn)等）；、食物激發(fā)試驗(yàn)等）；IgEIgE檢測(cè)檢測(cè)（總（總IgE和特異性和特異性IgE檢測(cè)）檢測(cè)）；免疫復(fù)合物檢免疫復(fù)合物檢測(cè)測(cè)主要針對(duì)抗原非特異性主要針對(duì)抗原非特異性CICCIC；抗球蛋白試驗(yàn)抗球蛋白試驗(yàn)（直接（直接法和間接法）；法和間接法）；藥物過(guò)敏篩選實(shí)驗(yàn)藥物過(guò)敏篩選實(shí)驗(yàn)（組胺含量測(cè)定（組胺含量測(cè)定和特異性抗體測(cè)定和特異性抗體測(cè)定 ）。）。返回章目錄返回章目錄第十四章第十四章 超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn)超敏反應(yīng)性疾病的免疫學(xué)檢驗(yàn) THANK YOU FOR YOUR ATTENTION!返回總目錄返回總目錄