高考生物二輪復習 專題二十三 微生物的利用與酶的應用課件

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1、專題二十三微生物的利用與酶的應用內容索引內容索引考點一微生物的利用考點二酶的應用探高考 練模擬考點一微生物的利用答案一、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離一、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1.大腸桿菌大腸桿菌(1)特性：大腸桿菌是革蘭氏 性、 (代謝類型)的腸道桿菌，在腸道中一般對人無害，但若進入人的 系統(tǒng)，就會對人體產生危害。(2)用途：是 技術中被廣泛采用的工具。2.細菌的培養(yǎng)和分離細菌的培養(yǎng)和分離(1)細菌的繁殖：以 方式繁殖，分裂速度很快，約20 min分裂一次。(2)培養(yǎng)的方法：需要將已有細菌的培養(yǎng)物轉移到新的培養(yǎng)基中，一般用 (工具)轉移帶菌的培養(yǎng)物。 知識回扣1 1兼性厭氧泌尿基因工程分裂接種環(huán)陰答案(

2、3)細菌分離的方法與特點分離方法特點 法操作簡單 法操作復雜， 更易分開劃線分離涂布分離單菌落3.消毒和滅菌的區(qū)別消毒和滅菌的區(qū)別答案項目條件結果常用的方法消毒較為溫和的物理或 方法僅殺死 或內部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法滅菌強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅菌、 滅菌物體表面煮沸高壓蒸汽化學4.大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實驗大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實驗(1)實驗內容：將大腸桿菌擴大培養(yǎng)和劃線分離，即用 培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)大腸桿菌，培養(yǎng)后再在 培養(yǎng)基上劃線進行分離，隨后培養(yǎng)基上就會形成一個個單獨的菌落。答案LB

3、固體平面LB液體答案培養(yǎng)基滅菌 劃線分離培養(yǎng)觀察 50 mL LB液體培養(yǎng)基和50 mL LB固體培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿_滅菌 將培養(yǎng)基分別倒入4個滅菌后的培養(yǎng)皿中，水平放置，使之 形成平面在裝有液體培養(yǎng)基的中接種大腸桿菌，培養(yǎng)12 h 用接種環(huán)在接種有大腸桿菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固 體培養(yǎng)基的平板上 ，蓋好培養(yǎng)皿 培養(yǎng)皿倒置(蓋在下面)，放在37 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12 24 h后，可看到劃線的末端出現(xiàn)不連續(xù)的(2)實驗步驟倒平板接種高壓 蒸汽三角瓶連續(xù)劃線單個菌落(3)大腸桿菌分離的用途：單菌落的分離是 的通用方法，也是用于篩選 菌株的最簡便方法之一。二、分離以尿素為氮源的微生物二、分離以尿素為

4、氮源的微生物1.菌種特點菌種特點含有 酶，可以通過降解尿素作為其生長的氮源。2.培養(yǎng)基培養(yǎng)基用以 為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)，以 培養(yǎng)基為對照。3.實驗原理實驗原理(1)篩選以尿素為氮源的微生物，可使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng)選擇。(2)細菌合成的脲酶能將尿素分解成 ，致使pH升高，使酚紅指示劑 。答案消除污染雜菌高表達量脲LB全營養(yǎng)NH3變紅尿素4.實驗步驟制備培養(yǎng)基：將已滅菌的LB固體培養(yǎng)基和尿素固體培養(yǎng)基分別倒入兩個培養(yǎng)皿中，搖勻，平放至凝固制備細菌懸液：用1 g土樣配制不同濃度的細菌懸液用 分離細菌：將不同濃度的土壤稀釋液分別加入到有LB培養(yǎng)基和尿素培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，并用玻璃刮

5、刀涂布到整個平面上培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿倒置，在37 恒溫箱中培養(yǎng)2448 h觀察：培養(yǎng)基中菌落數量答案涂布分離法5.反應的鑒定在配制培養(yǎng)基時，加入指示劑酚紅，培養(yǎng)時細菌將尿素分解產生堿性的氨，使培養(yǎng)基上菌落周圍出現(xiàn) 。答案紅色的環(huán)帶1.從有機廢水中分離分解有機物的微生物時，接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) ()提示提示異養(yǎng)微生物不需要光照。2.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害、()答案思考診斷提示3.下圖中甲為劃線分離法中最重要的環(huán)節(jié)，乙為操作的結果：答案提示(1)每一次劃線后都要將接種環(huán)灼燒 ()(2)除第一次劃線外，每一次劃線的起點都是第一次劃線的末端 ()提示提

6、示平板劃線時除第一次劃線外，每一次劃線的起點都是上一次劃線的末端，而不是第一次。答案提示4.篩選能分解尿素的細菌所利用的培養(yǎng)基中，尿素是唯一的氮源 ()5.分解尿素的細菌在分解尿素時，可以將尿素轉化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低 ()提示提示應為升高。1.培養(yǎng)基的配制及劃線分離操作的注意事項培養(yǎng)基的配制及劃線分離操作的注意事項(1)配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的注意事項倒平板的適宜溫度是60 左右，溫度過高會燙手，過低培養(yǎng)基又會凝固。平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(2)劃線分離操作的注意事項第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)。 重

7、難突破2 2灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。2.幾種消毒和滅菌方法及其適用范圍幾種消毒和滅菌方法及其適用范圍類型適用范圍操作方法消毒方法 煮沸消毒法日常生活100 煮沸56 min巴氏消毒法不耐高溫的液體 7075煮30 min或80 煮15 min 化學藥劑生活活體、水源等 擦拭如用酒精擦拭雙手， 用氯氣消毒水源等紫外線房間、儀器設備紫外線照射30 min滅菌方法灼燒接種工具、接種時用的試管口或瓶口等直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒干熱滅菌耐高溫、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬用

8、具等物品放入干熱滅菌箱，160170 加熱12 h高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿等，生產和實驗室常用高壓蒸汽滅菌鍋內，100 kPa，溫度121 ，1530 min3.接種微生物的兩種常用方法比較接種微生物的兩種常用方法比較比較劃線分離法涂布分離法工具接種環(huán)玻璃刮刀原理通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。在數次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的細胞群體，即菌落將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成

9、單個菌落4.分離以尿素為氮源的微生物的注意事項分離以尿素為氮源的微生物的注意事項(1)培養(yǎng)基中的酸堿指示劑產生顏色變化(變紅)，標志著存在脲酶分解尿素的作用，從而證明這一菌株能以尿素為氮源。紅色環(huán)狀區(qū)域的大小代表脲酶活性的強弱和含量的多少。紅色區(qū)域越大，表明菌株利用尿素的能力越強。(2)本實驗中配制固體培養(yǎng)基時應選用瓊脂糖而不能選用瓊脂作凝固劑。這是由于瓊脂是未被純化的混合物，內含一定量的含氮化合物。如果用瓊脂固化培養(yǎng)基，會為細菌提供一定量的非尿素類氮源，這樣會在尿素固體培養(yǎng)基上產生大量以非尿素為氮源的細菌，不利于以尿素為氮源的細菌的篩選。(3)由于尿素在高溫下會分解，所以對尿素溶液的滅菌要采

10、用G6玻璃漏斗過濾的方法。并且應在基本培養(yǎng)基經高壓蒸汽滅菌后，冷卻至60 時再加入。(4)土樣應從有哺乳動物排泄物的地方取得，這是由于動物排泄物中有一定量的尿素，在這些土壤中一般含有較多的分解尿素的細菌。題型一大腸桿菌的培養(yǎng)和分離題型一大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1.下圖為“大腸桿菌的培養(yǎng)和分離”實驗的基本流程，請回答下列問題 題型探究3 3A.配制培養(yǎng)基B.滅菌C.擴大培養(yǎng)(液體培養(yǎng)基D.劃線分離和培養(yǎng)和培養(yǎng)(固體培養(yǎng)基)E.菌種保存解析解析LB液體培養(yǎng)基是通用的細菌培養(yǎng)基，LB固體平面培養(yǎng)基則用于劃線分離形成單菌落。氯化鈉的作用是維持培養(yǎng)基的滲透壓。調節(jié)好酸堿度后才能進行滅菌，若滅菌后再進行酸堿度

11、調節(jié)，又會產生新的污染。(1)A過程配制的是通用細菌培養(yǎng)基，稱為_培養(yǎng)基。配制時除了加入特定的營養(yǎng)物質以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持_。對培養(yǎng)基酸堿度的調節(jié)，應該在B過程的_(填“前面”或“后面”)。前面LB液體滲透壓(2)D過程與C過程相比，培養(yǎng)基中增加的物質是_，E過程所需的溫度是_。解析解析在液體培養(yǎng)基的基礎上加入一定量的瓊脂可形成固體培養(yǎng)基。菌種應置于4 C冰箱中保存。4 瓊脂解析答案(3)D過程后，一個菌體便會形成一個_，這種分離方法是_的通用方法，也是篩選特定菌株的最簡便方法之一。解析解析通過劃線分離后，一個菌體就會繁殖出一個菌落。消除污染雜菌(或純化菌種)(單)菌落(4)植

12、物組織培養(yǎng)時，先配制MS培養(yǎng)基，再加入一定比例的植物激素，當生長素相對較多時，可促進_。解析解析植物組織培養(yǎng)中生長素相對較多時，有利于生根，而細胞分裂素相對較多時，則有利于生芽。生根解析答案(5)植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都需要無菌操作，下列不適宜用高壓蒸汽滅菌的是()A.接種環(huán)和鑷子B.三角瓶和廣口瓶C.發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基D.用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽解析解析高壓蒸汽滅菌常用于培養(yǎng)基、培養(yǎng)器材等的滅菌，而用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽則不能進行任何滅菌操作，否則會導致細胞死亡。解析2.檢驗飲用水的細菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請回答下列與檢驗飲用水有關的問題：(1)要測定飲用水中大腸桿菌的數量，常

13、采用_法，通常將水樣進行一系列的梯度_，然后將上述的水樣用玻璃刮刀分別涂布到_的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數量。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數時_(填“是”或“否”)需要對照組。原因是：_。需要判斷培養(yǎng)基使用之前是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)涂布分離稀釋LB固體培養(yǎng)基是答案(2)下面所示的四種菌落分布圖中，不可能由上述方法得到的是_。(3)大腸桿菌的培養(yǎng)條件是無菌，培養(yǎng)基配制時需加入氯化鈉，以維持_。配制培養(yǎng)基時先_后_。A.調節(jié)pH B. 滅菌C.消毒 D.調節(jié)溫度滲透壓答案3.請回答微生物培養(yǎng)和分離的有關問題：(1)欲從土壤中分離出能利用尿素的細菌：以_為唯一氮源且加入了_指示劑的培養(yǎng)基，用_法

14、分離細菌。若培養(yǎng)基平板上有菌落存活且顏色變_，則說明分離成功。題型二分離以尿素為氮源的微生物題型二分離以尿素為氮源的微生物解析解析分離能利用尿素的細菌，只需以尿素為唯一氮源，加酚紅作指示劑，采用涂布分離法分離細菌，只要培養(yǎng)基中的指示劑變紅，標志著存在脲酶水解尿素的反應，證明菌株可以以尿素為氮源。涂布分離(或涂布)尿素酚紅紅解析答案(2)分離以尿素為氮源的細菌和分離大腸桿菌都使用了LB培養(yǎng)基，其成分_。A.前者含瓊脂，后者不含瓊脂和瓊脂糖B.兩者都含有瓊脂C.前者含有瓊脂糖，后者不含瓊脂糖但含瓊脂D.兩者都不含瓊脂和瓊脂糖解析解析分離以尿素為氮源的細菌所用培養(yǎng)基應含有瓊脂糖，而分離大腸桿菌所用培

15、養(yǎng)基則不含瓊脂糖而含瓊脂。解析4.要獲得能夠分泌脲酶的細菌的菌種，某生物興趣小組的同學設計了以下培養(yǎng)和篩選的途徑：(1)獲得菌種：要獲得較多的能夠分泌脲酶的細菌，最好取525 cm處的淺層土樣，說明這類細菌的細胞呼吸方式為_，在生態(tài)系統(tǒng)中屬于_(成分)。分解者需氧呼吸答案(2)將土樣加入無菌水中配制成懸液，并配制如圖所示的培養(yǎng)基，其中尿素在培養(yǎng)基中必須是作為保證微生物生長的唯一_。向培養(yǎng)基中添加尿素的方法是待其他成分滅菌冷卻后，加入尿素溶液，而該尿素溶液要事先用_過濾，使之無菌。從物理性質看，該培養(yǎng)基屬于_。葡萄糖：0.05 gNaCl：0.24 gK2HPO4：0.24 g瓊脂糖：1.0 g

16、酚紅：0.5 g水：30 mL尿素：20 mL(含2 g脲)固體培養(yǎng)基氮源G6玻璃漏斗答案(3)利用酚酞指示劑可檢測出細菌是否能分泌脲酶，原理是脲酶能使_，結果菌落周圍培養(yǎng)基呈紅色。(4)為獲取能分泌脲酶的單菌落，必須將土壤樣液進行稀釋，并取少量稀釋土壤液用_接種于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)皿在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時必須倒置，原因是_。培養(yǎng)基中的尿素分解為NH3，使周圍的pH升高防止冷凝后的水珠從皿蓋上落入培養(yǎng)基，造成污染涂布分離法答案(5)若要分離土壤中的尿素分解菌，對于采集和處理土壤樣品，下列敘述錯誤的是()A.最好選擇在肥沃濕潤、動物排泄物多的土壤中取樣B.采集的土樣需經高溫滅菌后，才可以用于制取土壤稀釋液

17、C.制備土壤稀釋液時，要用無菌水D.用于制備土壤稀釋液的各種器具要經過滅菌返回考點二酶的應用一、果汁中的果膠和果膠酶一、果汁中的果膠和果膠酶1.果膠果膠(1)果膠是 的主要成分，它由_組成。(2)果膠與果汁加工：果膠不僅影響出汁率，還會使果汁渾濁。2.果膠酶果膠酶(1)來源：黑曲霉、蘋果青霉等。(2)組成：果膠酶并不是特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，主要包括果膠酶和 酶。答案 知識回扣1 1植物細胞壁半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯果膠甲酯(3)作用：將果膠分解成可溶性的分子，使出汁率提高，也使渾濁的果汁變得澄清。3.探究利用蘋果或山楂勻漿制作果汁的最佳條件的實驗探究利用蘋果或山楂勻漿制作

18、果汁的最佳條件的實驗(1)實驗原理答案果膠酶的活性受溫度(或pH)的影響，處于最適溫度(或pH)時活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的 成正比。果膠不溶于乙醇。活性大小(2)實驗流程設計答案不加熱95%的乙醇二、二、淀粉酶淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測的固定化及淀粉水解作用的檢測1.淀粉酶的固定化淀粉酶的固定化(1)固定化酶概念：將水溶性的酶用的方法固定在某種介質上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。方法：吸附法、 、交聯(lián)法和包埋法等。(2)淀粉酶的固定化淀粉酶作用的最適條件：最適pH為 ；最適溫度為 。方法：法。答案物理或化學共價偶聯(lián)法5.57.55075吸附淀粉的水解作用答

19、案糊精麥芽糖遇碘顯藍色遇碘顯紅色遇碘不顯色2.淀粉水解的測定實驗淀粉水解的測定實驗固定淀粉酶滴管滴加淀粉溶液加溶液觀察 幾天后重復實驗。KII2洗滌3.淀粉酶固定化實驗過程淀粉酶固定化實驗過程固定化淀粉酶，裝入注射器中以0.3 mL/min的流速滴加 過柱流出5 mL淀粉溶液后接收0.5 mL流出液滴加 溶液，觀察顏色，用水稀釋1倍后再觀察顏色以10倍柱體積的蒸餾水洗滌固定化柱，放置在4 冰箱中，幾天后重復實驗答案淀粉溶液KII21.將果膠酶用于果膠生產，既能提高果肉的出汁率又能提高果汁的澄清度()2.酶的活性受溫度、pH和酶用量等因素的影響 ()提示提示酶用量不影響酶的活性。3.果膠起著將植

20、物細胞粘合在一起的作用，它溶于乙醇 ()提示提示果膠不溶于乙醇。4.用固定化淀粉酶進行淀粉水解實驗時不需考慮溫度 ()提示提示溫度影響酶的活性。思考診斷答案提示5.固定化淀粉酶可永久使用 ()提示提示固定化酶能夠連續(xù)使用，但不是永久使用。6.淀粉酶固定化實驗結束后，將固定化柱放在常溫下即可 ()提示提示固定化柱低溫保存。答案提示1.探究影響果膠酶活性因素實驗的相關分析探究影響果膠酶活性因素實驗的相關分析(1)實驗原則：遵循單一變量原則、對照原則，嚴格控制變量，盡量減少無關變量的影響。(2)實驗原理：果膠酶活性受溫度、pH或酶抑制劑的影響，在最適溫度或pH時，其活性最高，果肉的出汁率、果汁的澄清

21、度都與果膠酶的活性大小呈正相關。 重難突破2 2(3)三個實驗的變量分析實驗名稱(目的)自變量因變量注意事項 探究溫度對 果膠酶活性 的影響溫度果汁量(澄清度) 底物和酶在混合時的溫度是相同的； 溫度梯度越小，實驗結構越精確； 蘋果泥和果膠酶的用量在各個試管 中應相同 pH應為最適pH 探究pH對 果膠酶活 性的影響pH果汁量(澄清度) 溫度應為最適溫度； pH梯度可用NaOH和鹽酸調節(jié)； 用玻璃棒攪拌使反應充分進行 探究果膠 酶的用量果膠酶的用量果汁量(澄清度) 制備蘋果勻漿后迅速加熱，使 蘋果漿中果膠酶變性； 溫度、pH應為最適溫度和最適 pH且保持不變2.酶的固定化方法及適用對象酶的固定

22、化方法及適用對象名稱原理圖示包埋法將微生物細胞均勻地包埋在不溶于水的多孔性載體中 共價偶 聯(lián)法利用共價鍵、離子鍵將酶分子或細胞相互結合，或將其結合到載體上吸附法通過物理吸附作用，把酶固定在纖維素、瓊脂糖、多孔玻璃或離子交換樹脂等載體上題型一果汁中的果膠和果膠酶題型一果汁中的果膠和果膠酶解析1.下列有關果膠酶及果膠酶實驗探究的敘述，正確的是()A.探究果膠酶的用量時，pH、溫度不影響實驗結果B.果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和葡萄糖異構酶等C.探究溫度對果膠酶活性的影響時，溫度、蘋果泥、果膠酶的用量及反 應時間等都是自變量D.可以用相同時間內過濾得到的果汁體積來確定果膠酶的用量 題型探究

23、3 3解析解析探究果膠酶的用量時，pH、溫度會影響實驗結果；葡萄糖異構酶不屬于果膠酶的成分；探究溫度對果膠酶活性的影響實驗中，溫度為單一變量，其他因素保持不變。2.某同學為探究溫度對果膠酶活性的影響，在不同溫度條件下，將等量的果膠酶加入到等量的蘋果泥中，在反應同樣時間后，再將反應液過濾同樣時間，用量筒測定濾出蘋果汁的體積。下列曲線圖能正確反映實驗結果的是()解析解析解析果膠酶在0 時活性較低，但也能催化蘋果泥形成果汁，果汁量不為0；隨著溫度升高，果膠酶的活性先升高后下降，果汁量也是先升高后降低。正確的應是B曲線。題型二題型二淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測測直

24、接使用酶和固定化酶的比較解題必備解題必備比較項目直接使用酶固定化酶制作方法 吸附法、共價偶聯(lián)法、交聯(lián)法、 包埋法等是否需要營養(yǎng)物質否否酶的種類一種或多種一種催化反應單一或多種單一反應底物各種物質(大分子、小分子)各種物質(大分子、小分子)缺點 對環(huán)境條件非常敏感，易失活； 難回收，成本高，影響產品質量 不利于催化一系列反應優(yōu)點催化效率高、耗能低、低污染 既能與反應底物接觸， 又能與產物分離；可以 重復使用3.下列關于固定化酶的說法，錯誤的是()A.固定化酶的不足之處是不能催化一系列反應B.固定化酶可再次利用，降低了生產成本C.固定后的酶既能與反應物接觸，又能與反應物分離D.固定化酶易溶于水解析

25、解析解析由于酶具有專一性，因此固定化酶不能催化一系列反應，A項正確；固定化酶可反復利用，降低了生產成本，B項正確；固定后的酶既能與反應物接觸，又能與反應物分離，C項正確；固定化酶不易溶于水，易與反應物分離，D項錯誤。4.(2015舟山中學測試)某校學生嘗試用瓊脂作載體，用包埋法固定淀粉酶來探究固定化酶的催化效果。實驗結果見下表(假設加入試管中的固定化淀粉酶量與普通淀粉酶量相同)。實驗表明1號試管中淀粉未被水解，最可能的原因是() 1號試管2號試管固定化淀粉酶普通淀粉酶淀粉溶液60 保溫5 min，取出冷卻至室溫，滴加碘碘化鉀溶液現(xiàn)象變藍不變藍A.實驗中的溫度過高，導致固定化淀粉酶失去活性B.淀

26、粉是大分子物質，難以通過瓊脂與淀粉酶接觸C.水浴保溫時間過短，固定化淀粉酶未將淀粉水解D.實驗程序出現(xiàn)錯誤，試管中應先加入碘碘化鉀溶液后保溫解析解析由于固定化酶是用包埋法固定的，而淀粉是大分子物質，它不能通過瓊脂與酶充分接觸，導致淀粉不能被水解而遇碘碘化鉀溶液呈現(xiàn)藍色。解析返回探高考 練模擬1.(2016溫州中學期末測試)下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為1、2、3、4、5。下列操作方法正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌B.劃線操作須在火焰上進行C.在5區(qū)域中才有可能得到所需菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌解析解析解析操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼

27、燒滅菌，A項錯誤；劃線操作須在火焰旁進行，B項錯誤；在5區(qū)域中最有可能得到所需菌落，C項錯誤；在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌，D項正確。2.(2016魯迅中學期末測試)下列關于“探究果膠酶最適用量的實驗”的敘述，錯誤的是()A.配制不同濃度的果膠酶溶液，并在各組中加入等量的該溶液B.實驗溫度為無關變量，要在相同的適宜溫度條件下進行實驗C.用玻璃棒攪拌加酶的果泥，攪拌時間可以不相同D.調節(jié)pH，使各組中的pH相同而且處于適宜狀態(tài)解析解析在探究果膠酶最適用量的實驗中，果膠酶量為自變量，通過配制不同濃度的果膠酶溶液來控制；實驗溫度、攪拌時間、pH為無關變量，需要控制等量、適宜

28、，A、B、D項正確，C項錯誤。解析3.(2016溫州中學測試)探究溫度對果膠酶活性影響的實驗中，得到如下實驗結果。據此分析其中不正確的是()溫度()3035404550556065707580果汁量(mL)3.54.68.610.912.3 11.7 10.15.43.94.85.6A.實驗過程中應先將蘋果泥和果膠酶分別調節(jié)到對應溫度后再混合B.為了實驗結果的科學性，各組混合處理時間和過濾果汁時間均應相同C.應在5055 設置更細溫度梯度進行實驗，探究果膠酶的最適溫度D.該實驗結果表明高溫能使果膠酶失活，但高溫也可能促進果膠分解解析解析解析實驗過程中應先將蘋果泥和果膠酶分別調節(jié)到對應溫度后再混

29、合，A項正確；為了實驗結果的科學性和控制單一變量，各組混合處理時間和過濾果汁時間均應相同，B項正確；實驗中的溫度梯度跨度較大，要想確定最適溫度，需要設置更細溫度梯度進行實驗，分析數據可知，應該在4555 設置更細溫度梯度進行實驗，探究果膠酶的最適溫度，C項錯誤；高溫可以使酶失活，由表格數據可以看出，高溫也可能促進果膠分解，D項正確。4.在細菌培養(yǎng)過程中，下列有關操作正確的是()A.涂布器用火焰灼燒進行滅菌B.培養(yǎng)基分別裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌C.倒平板和取菌液都必須要在酒精燈火焰旁進行D.分離得到的菌落應先接種在平板上，培養(yǎng)24 h后，置于4 冰箱保存解析解析解析涂布器應該用高壓蒸汽滅菌，A項錯誤

30、；培養(yǎng)基應該先滅菌后分裝，B項錯誤；倒平板和取菌液都必須要在酒精燈火焰旁進行，以防止雜菌污染，C項正確；分離得到的菌落應先接種于斜面上，置于37 的恒溫箱培養(yǎng)24 h后，再置于4 冰箱保存，D項錯誤。5.(2014浙江自選，17節(jié)選)(1)現(xiàn)有一份污水樣品，某興趣小組欲檢測其中的細菌數，進行以下實驗。將一定量的污水樣品進行濃度梯度稀釋。取適量不同稀釋度的稀釋液，用_法分別接種于固體平面培養(yǎng)基上，經培養(yǎng)后進行計數。該實驗應注意，接種前，從盛有_的容器中將玻璃刮刀取出，放在酒精燈火焰上灼燒，冷卻后待用；分組時，需用_作為對照。解析解析細菌的分離與計數常用涂布分離法，即用玻璃刮刀將一定體積的稀釋液涂

31、布到固體平面培養(yǎng)基上。玻璃刮刀在使用前需進行滅菌處理，即將其浸入體積分數為70%的酒精中，隨后取出放在酒精燈火焰上灼燒，冷卻后待用。為排除其他因素的影響，提高實驗的可信度，實驗中要設置空白對照。未接種的培養(yǎng)基涂布分離70%酒精解析答案(2)在上述細菌培養(yǎng)實驗中進行計數時，應計數的是接種了()A.各個稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細菌數B.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細菌數C.各個稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數D.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數解析返回解析解析將菌液涂布到固體平面培養(yǎng)基上后，倒置放在恒溫箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)一段時間后，統(tǒng)計菌落數。當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，這樣通過統(tǒng)計菌落數就可估算出待測樣品的細菌數目，所以要選擇合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數。