高考生物一輪復(fù)習(xí) 專題27 克隆技術(shù)課件
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1、專題27克隆技術(shù)高考生物高考生物 (北京市專用)考點(diǎn)考點(diǎn)1 1 植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程1.(2018江蘇單科,8,2分)花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過(guò)程的示意圖,下列敘述正確的是()A.為了防止微生物污染,過(guò)程所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30 minB.過(guò)程的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化C.過(guò)程逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D.過(guò)程應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上五年高考答案答案C本題主要考查花藥離體培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。為了防止微生物污染,過(guò)程所用的花蕾需在70%乙醇中浸泡30 s,A錯(cuò)誤;過(guò)程的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分
2、裂素的比值適中,且生長(zhǎng)素含量高于細(xì)胞分裂素時(shí),有利于根的分化,B錯(cuò)誤;進(jìn)行過(guò)程的愈傷組織經(jīng)過(guò)了秋水仙素的處理,故其分化后的植株中可篩選獲得純合的二倍體,C正確;經(jīng)煉苗后的幼苗是能進(jìn)行光合作用且能獨(dú)立進(jìn)行代謝的植株,故幼苗的生長(zhǎng)基質(zhì)中不用添加蔗糖和多種植物激素,D錯(cuò)誤。規(guī)律總結(jié)規(guī)律總結(jié)激素杠桿生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的協(xié)同調(diào)控作用在植物組織培養(yǎng)中非常重要,人們常把它們稱為“激素杠桿”。例如,當(dāng)生長(zhǎng)素的含量高于細(xì)胞分裂素時(shí),主要誘導(dǎo)植物組織脫分化和根原基的形成;而當(dāng)細(xì)胞分裂素的效應(yīng)高于生長(zhǎng)素時(shí),則主要誘導(dǎo)植物組織再分化和芽原基的形成。2.(2016江蘇單科,9,2分)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是()
3、A.PEG是促細(xì)胞融合劑,可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B.用原生質(zhì)體制備人工種子,要防止細(xì)胞破裂C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理,可直接獲得單克隆抗體D.核移植克隆的動(dòng)物,其線粒體DNA來(lái)自供卵母體答案答案D植物細(xì)胞融合前需先用酶解法去掉細(xì)胞壁,形成原生質(zhì)體,再用PEG促進(jìn)原生質(zhì)體融合,A錯(cuò)誤;人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子,不用原生質(zhì)體為材料,B錯(cuò)誤;骨髓瘤細(xì)胞需與經(jīng)免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞融合,再經(jīng)篩選培養(yǎng)才能獲得單克隆抗體,C錯(cuò)誤;動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核取出,移入已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,核移植克隆動(dòng)物的線粒體DNA來(lái)自供卵母體。
4、解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵解答本題的關(guān)鍵是熟知題中所述的知識(shí)。植物細(xì)胞融合時(shí)需要先去掉細(xì)胞壁;原生質(zhì)體與植物細(xì)胞的區(qū)別在于有無(wú)細(xì)胞壁;能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞,而不是骨髓瘤細(xì)胞。3.(2014北京理綜,5,6分)在25 的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成的是 ()A.光合色素的提取與分離B.用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖C.大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)D.制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基答案答案A用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖時(shí)需水浴加熱,B錯(cuò)誤;大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí),溫度需要保持在大鼠的正常體溫3739 范圍內(nèi),C錯(cuò)誤;制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基需高溫滅菌,D錯(cuò)誤;光合色素的提取與分離在室溫下即可完成,A正確。4
5、.(2008北京理綜,29,18分)白菜、甘藍(lán)均為二倍體,體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18。以白菜為母本、甘藍(lán)為父本,經(jīng)人工授粉后,將雌蕊離體培養(yǎng),可得到“白菜甘藍(lán)”雜種幼苗。請(qǐng)回答問(wèn)題:(1)白菜和甘藍(lán)是兩個(gè)不同的物種,存在 隔離。自然條件下,這兩個(gè)物種間不能通過(guò) 的方式產(chǎn)生后代。雌蕊離體培養(yǎng)獲得“白菜甘藍(lán)”雜種幼苗,所依據(jù)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有 。(2)為觀察“白菜甘藍(lán)”染色體的數(shù)目和形態(tài),通常取幼苗的 做臨時(shí)裝片,用 染料染色。觀察、計(jì)數(shù)染色體的最佳時(shí)期是 。(3)二倍體“白菜甘藍(lán)”的染色體數(shù)為 。這種植株通常不育,原因是減數(shù)分裂過(guò)程中 。為使其可育,可通過(guò)人工誘導(dǎo)產(chǎn)生四倍體“白菜甘藍(lán)
6、”,這種變異屬于 。答案答案(1)生殖雜交(有性生殖)全能性(2)根尖(莖尖)醋酸洋紅(龍膽紫、堿性)有絲分裂中期(3)19沒(méi)有同源染色體配對(duì)的現(xiàn)象染色體變異解析解析將經(jīng)人工授粉后得到的雌蕊進(jìn)行離體培養(yǎng),這樣得到的雌蕊主要利用的是融合的受精卵,它是由白菜的卵細(xì)胞(n=10)和甘藍(lán)的精子(n=9)結(jié)合而來(lái)的。這樣培育得到的“白菜甘藍(lán)”是異源二倍體,染色體數(shù)是2n=10+9=19。由于在雜種體內(nèi)沒(méi)有同源染色體,在減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)紊亂,不能形成正常的配子,所以通常是不育的,可用秋水仙素處理使染色體數(shù)目加倍得到可育的四倍體“白菜甘藍(lán)”。幼苗中細(xì)胞分裂活動(dòng)最旺盛的是根尖的分生區(qū),在有絲分裂的中期染色體形態(tài)
7、固定、數(shù)目清晰可數(shù),是對(duì)染色體進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)的最佳時(shí)期。以下為教師用書(shū)專用5.(2015四川理綜,9,11分)將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中,可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉,其過(guò)程如下圖所示(注:農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中)。質(zhì)粒中“Bt”代表“Bt基因”,“KmR”代表“卡那霉素抗性基因”(1)過(guò)程需用同種 酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。為將過(guò)程獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái),應(yīng)使用 培養(yǎng)基。(2)過(guò)程中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓 進(jìn)入棉花細(xì)胞;除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),目的是 。(3)若過(guò)程僅獲得大量的
8、根,則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加 以獲得芽;部分接種在無(wú)激素培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根,原因是 。(4)檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲(chóng)性狀,常用方法是 。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉能減少 的使用,以減輕環(huán)境污染。答案答案(1)限制性核酸內(nèi)切(1分)選擇(1分)(2)T-DNA(1分)篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞(2分)(3)細(xì)胞分裂素濃度(1分)芽頂端合成的生長(zhǎng)素向基部運(yùn)輸,促進(jìn)根的分化(2分)(4)投放棉鈴蟲(chóng)(2分)農(nóng)藥(1分)解析解析本題考查基因工程與植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)。(1)同種限制酶切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA,可獲得相同的黏性末端,以構(gòu)建基因表達(dá)載體。重組質(zhì)粒含完整的卡那霉素抗性基因,故應(yīng)使用含卡那霉素的選擇培養(yǎng)
9、基篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。(2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),其目的是利用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌將T-DNA導(dǎo)入棉花細(xì)胞中。除去農(nóng)桿菌后在含卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),其目的是篩選出含有目的基因的棉花細(xì)胞。(3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí),利于根的分化,抑制芽的形成,反之,有利于芽的分化,抑制根的形成。因芽頂端可合成生長(zhǎng)素,故接種在無(wú)激素的培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根。(4)可用投放棉鈴蟲(chóng)的方法檢測(cè)抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)效果。轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的種植可減少農(nóng)藥使用量,從而減輕環(huán)境污染。6.(2015浙江自選,18,10分)下面是關(guān)于植物克隆和生態(tài)工程的問(wèn)題。請(qǐng)回答:(1)為培育能高效吸收和富集重
10、金屬鎘的轉(zhuǎn)基因植物,將野外采得的某植物幼葉消毒后,用酶混合液處理,獲得了原生質(zhì)體。酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇,其作用是 。(2)將目的基因?qū)氲皆|(zhì)體,經(jīng)培養(yǎng)形成愈傷組織,再通過(guò) 得到分散的胚性細(xì)胞,發(fā)育成 ,生長(zhǎng)發(fā)育后獲得轉(zhuǎn)基因植株。(3)愈傷組織繼代次數(shù)過(guò)多會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力,下列原因錯(cuò)誤的是 。A.愈傷組織發(fā)生遺傳變異B.愈傷組織不能分散成單細(xì)胞C.愈傷組織中激素平衡發(fā)生改變D.愈傷組織對(duì)外源激素敏感性發(fā)生改變(4)某農(nóng)業(yè)生態(tài)工程基地按照生態(tài)和 規(guī)律,對(duì)種植業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)行了優(yōu)化設(shè)計(jì)。通過(guò)套種、間種和 等技術(shù)的應(yīng)用,使種植的農(nóng)作物為該生態(tài)系統(tǒng)組成成分中的 提供更多的食物。在農(nóng)
11、業(yè)生產(chǎn)中盡量不施用農(nóng)藥,其目的是 。A.減少水土流失B.減少土壤肥力C.減少環(huán)境污染D.減少生物多樣性答案答案(1)維持滲透壓(2)液體懸浮培養(yǎng)胚狀體(3)B(4)經(jīng)濟(jì)輪種消費(fèi)者C解析解析(1)酶混合液中含有甘露醇,可以維持一定的滲透壓,保持去壁后的原生質(zhì)體的正常形態(tài)。(2)導(dǎo)入目的基因的原生質(zhì)體經(jīng)誘導(dǎo)形成愈傷組織后,采用液體懸浮培養(yǎng)獲得分散的胚性細(xì)胞,胚性細(xì)胞可發(fā)育成胚狀體,進(jìn)而發(fā)育成植株個(gè)體。(3)愈傷組織細(xì)胞繼代培養(yǎng)次數(shù)過(guò)多由于外源植物激素平衡改變不能分化成胚狀體而失去全能性,也有可能發(fā)生變異,致使對(duì)外源激素敏感性改變,而失去全能性。愈傷組織分化形成胚狀體不需要分散成單個(gè)細(xì)胞。(4)構(gòu)建
12、農(nóng)業(yè)生態(tài)工程基地需遵循生態(tài)和經(jīng)濟(jì)規(guī)律,對(duì)種植業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)。如種植業(yè)中采用套種、間種和輪種等技術(shù),可使農(nóng)作物為消費(fèi)者提供更多的食物。另外,為減少環(huán)境污染,農(nóng)業(yè)生態(tài)工程要求盡量不施用農(nóng)藥。7.2014江蘇單科,29(1)(3)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱為 。(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如圖所示。細(xì)胞干重在12 d后下降的原因有 ;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是 、 。 (3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng) 處理,會(huì)產(chǎn)
13、生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和 酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后,觀察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,合理的解釋是 、 。 答案答案(1)脫分化(2)蔗糖濃度下降,pH降低提供能源調(diào)節(jié)滲透壓 (3)秋水仙素(低溫)果膠經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中期解析解析(1)外植體經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)分析坐標(biāo)曲線圖,可見(jiàn)培養(yǎng)液中的蔗糖濃度已降至較低,pH也由6降為4,因此使得細(xì)胞生命活動(dòng)受阻,細(xì)胞干重減小。培養(yǎng)液中的蔗糖可為培養(yǎng)的細(xì)胞提供能源,又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的滲透壓。(3)二倍體愈傷組織經(jīng)秋水仙素、低溫等人工誘
14、導(dǎo)處理,可產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。植物細(xì)胞之間除纖維素外,還存在果膠層,因此可利用纖維素酶和果膠酶解離愈傷組織。愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)人工誘導(dǎo)后,細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍成4n,染色體數(shù)為4n的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,處于有絲分裂后期的細(xì)胞中含有8n條染色體;若加倍到4n的細(xì)胞,經(jīng)誘導(dǎo)后繼續(xù)加倍形成染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,這樣的細(xì)胞再進(jìn)行有絲分裂,在中期時(shí)會(huì)看到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞。解后反思解后反思本題主要考查植物組織培養(yǎng)、人工誘導(dǎo)多倍體及固定化技術(shù)等相關(guān)知識(shí)。試題難度中等。理解細(xì)胞脫分化、秋水仙素的生理作用等基礎(chǔ)知識(shí)是解答本題的關(guān)鍵。8.(2014廣東理綜,29,16分)鐵皮石斛是我國(guó)名貴中藥,生物堿是其
15、有效成分之一。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡(jiǎn)稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實(shí)驗(yàn)流程如下:新生營(yíng)養(yǎng)芽PLBsPLBs實(shí)驗(yàn)結(jié)果在固體培養(yǎng)基上,PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時(shí)間的變化如圖所示,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)選用新生營(yíng)養(yǎng)芽為外植體的原因是 ,誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過(guò)程稱 。(2)與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在 , , 。(3)脫落酸(ABA)能提高生物堿含量,但會(huì)抑制PLBs的生長(zhǎng)。若采用液體培養(yǎng),推測(cè)添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開(kāi)展探究實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該推測(cè),在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案時(shí)探討了以下問(wèn)題:ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式:設(shè)4個(gè)ABA
16、處理組,1個(gè)空白對(duì)照組,3次重復(fù)。因ABA受熱易分解,故一定濃度的無(wú)菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基 后按比例加入。實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和取樣:實(shí)驗(yàn)50天完成,每10天取樣,將樣品(PLBs)稱重(g/瓶)后再測(cè)定生物堿含量。如初始(第0天)數(shù)據(jù)已知,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還需測(cè)定的樣品數(shù)為 。依所測(cè)定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時(shí)間:當(dāng)某3個(gè)樣品(重復(fù)樣)的 時(shí),其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度,對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間是適宜培養(yǎng)時(shí)間。答案答案(1)細(xì)胞分化程度低,容易誘導(dǎo)形成PLBs(2分)細(xì)胞的脫分化(2分)(2)生長(zhǎng)起始較快(2分)快速生長(zhǎng)時(shí)間較長(zhǎng)(2分)PLBs產(chǎn)量較高(2分)(3)滅菌、冷卻(2分)75(1分)PLBs
17、重量和生物堿含量乘積的平均值最大(3分)解析解析本題主要考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識(shí),并以植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)為背景考查實(shí)驗(yàn)探究能力。(1)植物組織培養(yǎng)中外植體常選用莖尖、芽尖,原因是莖尖和芽尖分裂能力強(qiáng),易誘導(dǎo)其脫分化,而且一般不含病毒。(2)從圖中比較光照和黑暗條件下PLBs重量曲線可知,光照條件下PLBs生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)在開(kāi)始生長(zhǎng)時(shí)間,快速生長(zhǎng)的時(shí)間及達(dá)到生長(zhǎng)穩(wěn)定時(shí)重量的大小等方面。(3)因ABA受熱易分解,所以必須在培養(yǎng)基滅菌并冷卻至常溫時(shí)才能加入無(wú)菌ABA。依題干信息可知,本實(shí)驗(yàn)有5組,每組3個(gè)樣品,需分別在第0天、10天、20天、30天、40天、50天測(cè)定PLBs重量和生物堿含量,而初始數(shù)
18、據(jù)(第0天)已知,因此還需測(cè)定的樣品數(shù)是535=75。根據(jù)實(shí)驗(yàn)探究目的,當(dāng)3個(gè)樣品(重復(fù)樣)的PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大時(shí),其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度,對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間為適宜培養(yǎng)時(shí)間。考點(diǎn)考點(diǎn)2 2 動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程1.(2018江蘇單科,22,3分)如圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是(多選)()A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因答案答案BC植物細(xì)胞壁會(huì)阻礙細(xì)胞融合,故植物細(xì)胞融合前需先用酶解法除去細(xì)胞壁,A錯(cuò)
19、誤;細(xì)胞間的融合需在相應(yīng)的誘導(dǎo)處理下才能完成(如離心、聚乙二醇等,動(dòng)物細(xì)胞還可用滅活病毒誘導(dǎo)融合),B正確;細(xì)胞融合過(guò)程出現(xiàn)了膜的變形,故細(xì)胞融合過(guò)程與細(xì)胞膜流動(dòng)性有關(guān),C正確;c細(xì)胞中具有a、b細(xì)胞的全部基因,但這些基因不一定能全部表達(dá),D錯(cuò)誤。知識(shí)鏈接知識(shí)鏈接常用的人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法(1)人工誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法:物理法離心、振動(dòng)、電激等,化學(xué)法一般用聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)。(2)人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。2.(2015天津理綜,6,6分)2015年2月3日,英國(guó)議會(huì)下院通過(guò)一項(xiàng)歷史性法案,允許以醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過(guò)
20、程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代B.捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C.三親嬰兒的染色體全部來(lái)自母親提供的細(xì)胞核D.三親嬰兒的培育還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)答案答案C 分析圖示可知:母親只提供細(xì)胞核,因而可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代,A正確;紅綠色盲基因?qū)儆诤嘶?而捐獻(xiàn)者提供的是去核卵母細(xì)胞,其紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒,B正確;三親嬰兒的染色體一半來(lái)自母親提供的細(xì)胞核,一半來(lái)自精子,C錯(cuò)誤;體外受精形成的受精卵需培養(yǎng)形成早期胚胎,而后經(jīng)胚胎移植進(jìn)入受體子宮內(nèi),D正確。疑難突破疑難突破真核生物
21、的有性生殖過(guò)程,遺傳物質(zhì)大部分來(lái)母方,小部分來(lái)自父方;染色體一半來(lái)自母方,一半來(lái)自父方。3.(2014浙江理綜,3,6分)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C.由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀答案答案B連續(xù)細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系,大多數(shù)具有異倍體核型,A錯(cuò)誤;癌細(xì)胞在合適條件下可以發(fā)生不定向的基因突變而逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞,B正確;由一個(gè)單細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆,C錯(cuò)誤;未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)性,D錯(cuò)誤。4.(2017課標(biāo)全國(guó),38,15分)編碼
22、蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成,編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成,如圖1所示?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)現(xiàn)要通過(guò)基因工程的方法獲得蛋白乙,若在啟動(dòng)子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA),則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙,原因是 。(2)某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過(guò)程中,在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等,還加入了序列甲作為 ,加入了 作為合成DNA的原料。(3)現(xiàn)通過(guò)基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白,要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用,某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn):將一定
23、量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組,其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一組作為對(duì)照,培養(yǎng)并定期檢測(cè)T淋巴細(xì)胞濃度,結(jié)果如圖2。由圖2可知:當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí),添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加,此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖,可采用的方法是 。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度,CO2的作用是 。僅根據(jù)圖1、圖2可知,上述甲、乙、丙三種蛋白中,若缺少 (填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段,則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。答案答案(1)編碼乙的DNA序列起始端無(wú)ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA無(wú)起始密碼子(2)模板dNTP(3)進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)維持培養(yǎng)
24、液的pHC解析解析本題主要考查基因工程技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理。(1)分析編碼蛋白乙的DNA序列可知,起始端無(wú)ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA不含起始密碼子,所以直接利用該DNA片段構(gòu)建的表達(dá)載體在宿主細(xì)胞中不能翻譯出蛋白乙。(2)進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),需要在反應(yīng)體系中加入熱穩(wěn)定DNA聚合酶、引物、模板DNA、原料dNTP(dCTP、dATP、dGTP、dTTP)等。(3)因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)具有細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象,當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí),若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖,則需分瓶進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng);在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需提供一定的氣體環(huán)境,其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。由圖2可知,加入蛋白丙刺激T淋巴細(xì)胞
25、增殖的效果明顯比蛋白甲、乙低;結(jié)合圖1中蛋白丙與蛋白甲、乙的DNA序列可知,缺少C片段所編碼的肽段,會(huì)降低蛋白刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。知識(shí)拓展知識(shí)拓展認(rèn)識(shí)dNTPdNTP是脫氧核糖核苷三磷酸的縮寫(xiě),是dCTP、dATP、dGTP、dTTP的統(tǒng)稱?!癲”代表脫氧,“N”代表變量A、T、C、G中的一種。dNTP可作為生物DNA合成以及PCR過(guò)程的原料。5.(2016課標(biāo)全國(guó),40,15分)下圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為 。過(guò)程表示去除細(xì)胞核,該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,
26、去核時(shí)常采用 的方法。代表的過(guò)程是 。(2)經(jīng)過(guò)多次傳代后,供體細(xì)胞中 的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此,選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是 。(4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣,其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了 。答案答案(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響(4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性解析解析(1)因供體的性別不確定,故其細(xì)胞核內(nèi)的性染色體組成為XX或XY;一般將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到M中期,用顯微操作法將其細(xì)胞核去除;代表的過(guò)程是胚胎移植。(2)傳代培養(yǎng)10代
27、以內(nèi)的細(xì)胞可以保持正常的二倍體核型,超過(guò)10代以后,供體細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來(lái)自卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀會(huì)產(chǎn)生影響。(4)克隆動(dòng)物的成功可以證明動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。6.(2018課標(biāo)全國(guó),38,15分)某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5末端,獲得了L1-GFP融合基因(簡(jiǎn)稱為甲),并將其插入質(zhì)粒P0,構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1,其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下,圖中E1E4四種限制酶產(chǎn)生
28、的黏性末端各不相同。 回答下列問(wèn)題:(1)據(jù)圖推斷,該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí),使用了兩種限制酶,這兩種酶是 。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證 ,也是為了保證 。(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后,若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光,則說(shuō)明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了 和 過(guò)程。(3)為了獲得含有甲的牛,該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的 移入牛的 中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。(4)為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定,在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的 (填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。答案答案(1)E1和E4甲的完整
29、甲與載體正確連接(2)轉(zhuǎn)錄翻譯(3)細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞(4)核DNA解析解析(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),使用的限制酶不能破壞融合基因。選用產(chǎn)生不同黏性末端的兩種限制酶,可以防止自身環(huán)化,并且保證融合基因和質(zhì)粒正確連接。(2)在牛的皮膚細(xì)胞中觀察到綠色熒光,說(shuō)明L1基因已經(jīng)表達(dá),即在該皮膚細(xì)胞中完成了轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程。(3)培育轉(zhuǎn)基因的克隆牛需將含目的基因的細(xì)胞的細(xì)胞核移入牛的去核卵母細(xì)胞中。(4)為檢測(cè)克隆牛的不同組織細(xì)胞中是否含有融合基因,需提取不同組織細(xì)胞的核DNA作為PCR模板,用PCR方法進(jìn)行鑒定。7.(2014課標(biāo),40,15分,0.4871)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X
30、、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過(guò) 次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是 小鼠,理由是 。(2)細(xì)胞融
31、合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有 ,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是 。(3)雜交瘤細(xì)胞中有 個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是 條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是 。答案答案(1)4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%(3)1100(4)不能無(wú)限增殖解析解析(1)分析題圖可知,經(jīng)4次免疫后,小鼠Y的血清抗體效價(jià)就可達(dá)到16 000以上。由于4次免疫后的Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高,故最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)中,由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的,
32、而且誘導(dǎo)融合率不可能達(dá)到100%,所以會(huì)有未融合的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞、融合的具有同種核的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞三種類型。(3)雜交瘤細(xì)胞同時(shí)具有B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的核物質(zhì),但細(xì)胞核只有一個(gè)。由于雜交瘤細(xì)胞在分裂過(guò)程中染色體會(huì)丟失,故細(xì)胞核中染色體數(shù)目最多是40+60=100(條)。(4)B淋巴細(xì)胞已經(jīng)分化,沒(méi)有無(wú)限增殖的潛能。解后反思解后反思本題考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí),難度較大。理解細(xì)胞融合的原理與操作過(guò)程是解題關(guān)鍵。8.(2015安徽理綜,31,9分)科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊,以便通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白,其技術(shù)路線如圖。(1)由過(guò)程獲得的A
33、為 。(2)在核移植之前,必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核,目的是 。受體應(yīng)選用 期卵母細(xì)胞。(3)進(jìn)行胚胎移植時(shí),代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生 ,這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。(4)采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆,理論上可獲得無(wú)限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊,這是因?yàn)?。答案答案(1)含目的基因的表達(dá)載體(2)保證核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞M(3)免疫排斥反應(yīng)(4)整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)解析解析(1)在基因工程中,構(gòu)建基因表達(dá)載體后才能將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。(2)核移植技術(shù)選用的成熟卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂中期(M中期),需去掉細(xì)胞核以保證得到的克
34、隆動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞。(3)胚胎移植時(shí)受體動(dòng)物對(duì)移入的胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這為胚胎的存活提供了可能。(4)由于整合有目的基因的胎兒成纖維細(xì)胞具有增殖能力,可進(jìn)行傳代培養(yǎng),所以理論上可利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和核移植技術(shù),獲得無(wú)限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊??键c(diǎn)考點(diǎn)1 1 植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程1.(2018北京海淀期中,16)以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.以綠色葉片和白色花瓣作為外植體,進(jìn)行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗B.外植體脫分化培養(yǎng)成愈傷組織的過(guò)程,需要植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的處理C.若用某一細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),該細(xì)胞
35、必須有完整的細(xì)胞核和葉綠體D.選用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng),不能獲得與原植株基因型相同的植物體A A組組 2016201820162018年高考模擬年高考模擬基礎(chǔ)題組基礎(chǔ)題組三年模擬答案答案C 綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞含有該物種全套的遺傳物質(zhì),具有全能性,能通過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得試管苗,A選項(xiàng)正確;外植體脫分化過(guò)程需要一定比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,B選項(xiàng)正確;外植體不一定需要有葉綠體,C選項(xiàng)錯(cuò)誤;花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株,其與原植株基因型不同,D選項(xiàng)正確。易混易錯(cuò)易混易錯(cuò)花粉粒作為外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng),獲得的是單倍體植株。2.(2018北京朝陽(yáng)期末,14)下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述中,正確的是()
36、A.愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞B.二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中要注意保持材料用具等無(wú)菌D.同一株綠色開(kāi)花植株不同部位的細(xì)胞得到的組培苗基因型一定相同答案答案C愈傷組織是脫分化得到的,未分化的一團(tuán)薄壁細(xì)胞,沒(méi)有特定的結(jié)構(gòu)和功能,A選項(xiàng)錯(cuò)誤;二倍體植物的花粉組織培養(yǎng)得到的是高度不育的單倍體植株,同一個(gè)體的體細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的是基因型相同的植株,但若選擇花藥離體培養(yǎng)得到的是單倍體植株,B、D選項(xiàng)錯(cuò)誤。易混易錯(cuò)易混易錯(cuò)細(xì)胞分化的結(jié)果是形成具有特定結(jié)構(gòu)和功能的組織細(xì)胞,脫分化得到的愈傷組織分化程度低,是無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。3.(2018
37、北京朝陽(yáng)期末,29)科研人員研究了馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)幼苗的成苗率和脫毒率的影響,結(jié)果如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.培育脫毒苗所依據(jù)的原理有基因突變和細(xì)胞全能性B.培育脫毒苗的過(guò)程中涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段C.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明莖尖越小脫毒率越高,成苗率越低D.根據(jù)本實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)脫毒苗時(shí)莖尖的適宜大小為0.27 mm答案答案A培育脫毒苗所依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性,A選項(xiàng)錯(cuò)誤;據(jù)圖信息知,莖尖越小,脫毒率越高,成苗率越低,C選項(xiàng)正確;培養(yǎng)脫毒苗時(shí)需要綜合考慮成苗率和脫毒率兩個(gè)因素,根據(jù)本實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)脫毒苗時(shí)莖尖的適宜大小為0.27 mm,D選項(xiàng)正確。4.(2018北京豐臺(tái)期末,30)草莓病毒病可使草莓
38、減產(chǎn)30%80%。培養(yǎng)和應(yīng)用脫毒苗是改善草莓品質(zhì)、提高產(chǎn)量的有效途徑??茖W(xué)家為獲得草莓脫毒苗進(jìn)行實(shí)驗(yàn),選擇草莓植株的不同部位,經(jīng)過(guò)不同條件處理后進(jìn)行組織培養(yǎng),統(tǒng)計(jì)脫毒率如下表所示。下列有關(guān)敘述正確的是()組別培養(yǎng)部位處理脫毒率1盆栽草莓38 處理90天66%23 mm莖尖25 處理90天20%33 mm莖尖35 處理21天20%43 mm莖尖38 處理14天20%53 mm莖尖38 處理21天60%60.3 mm莖尖38 處理28天73%96%70.3 mm莖尖38 處理46天100%A.莖尖切段越小,培養(yǎng)基需添加生長(zhǎng)素越多B.繼續(xù)提高處理溫度可更早獲得脫毒苗C.熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合脫毒效果
39、更好D.熱處理脫毒法更能有效提高草莓產(chǎn)量答案答案C生長(zhǎng)素的生理作用具有兩重性,應(yīng)該加適宜濃度的生長(zhǎng)素,A選項(xiàng)錯(cuò)誤;植物細(xì)胞的代謝需要適宜的溫度,B選項(xiàng)錯(cuò)誤;D選項(xiàng)題干中沒(méi)有相應(yīng)信息支撐;從表中數(shù)據(jù)可知,熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合獲得的草莓苗脫毒效果更好,C選項(xiàng)正確。5.(2017北京豐臺(tái)期末,19)如圖為植物體細(xì)胞雜交及組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列說(shuō)法不正確的是()A.過(guò)程分別需要用胰蛋白酶和聚乙二醇進(jìn)行處理B.高爾基體在過(guò)程發(fā)揮了重要作用C.過(guò)程需要更換培養(yǎng)基,才能進(jìn)一步分化為植株D.A、B的基因型分別為Rr、Yy,則雜種植株的基因型為RrYy答案答案A過(guò)程分別需要用纖維素酶、果膠酶和聚乙二醇進(jìn)行處
40、理;高爾基體在過(guò)程再生細(xì)胞壁中發(fā)揮了重要作用;過(guò)程需要更換培養(yǎng)基,調(diào)整細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例后,愈傷組織才能進(jìn)一步分化為植株。植物體細(xì)胞雜交后形成的雜種植株的基因型即為雜交前植株基因型的組合。易錯(cuò)警示易錯(cuò)警示胰蛋白酶可用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中組織細(xì)胞的離散處理。6.(2017北京東城期末,30)下圖為培育甘蔗脫毒苗的兩條途徑,研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)程獲得的幼苗脫毒效果更好。下列敘述不正確的是()A.帶葉原基的芽與植物體其他組織中的病毒含量相同B.過(guò)程的作用是使組織中的病毒在圖中處理溫度下部分或全部失活C.過(guò)程、所用培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同D.題圖中脫毒苗的培育過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性
41、答案答案A根據(jù)題目分析可知,本題是采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),利用植物細(xì)胞的全能性,培育甘蔗脫毒苗,D正確;和為再分化過(guò)程,誘導(dǎo)生芽和誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同,C正確;溫度處理,可以使組織中的病毒部分或全部失活,B正確;帶葉原基的芽與植物體其他組織中的病毒含量不同,A錯(cuò)誤。易錯(cuò)警示易錯(cuò)警示 植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的使用順序和不同配比會(huì)影響組織分化的方向。7.(2017北京順義期末,28)下列現(xiàn)代生物技術(shù)實(shí)踐中不需進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的是()A.通過(guò)單倍體育種培育矮稈抗病的水稻品種B.通過(guò)植物體細(xì)胞雜交方法培育白菜甘藍(lán)C.通過(guò)誘變育種的方法培育高產(chǎn)大豆D.通過(guò)轉(zhuǎn)入Bt
42、基因的方法培育抗蟲(chóng)棉答案答案C誘變育種是指利用物理因素或化學(xué)因素誘發(fā)生物發(fā)生基因突變,誘變育種中一般作用于萌發(fā)的種子或幼苗,不需要再進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。解后反思解后反思要判斷哪些生物技術(shù)實(shí)踐需要植物組織培養(yǎng),其實(shí)可以從植物組織培養(yǎng)的操作對(duì)象入手,一般是特定的植物細(xì)胞或離體的組織、器官才需要在人工條件下實(shí)現(xiàn)其細(xì)胞的全能性,A、B、D三種技術(shù)實(shí)踐中很明顯必須進(jìn)行植物組織培養(yǎng)才能最終培育成完整植株。8.(2016北京海淀一模,5)在應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得白菜甘藍(lán)的操作步驟中,不正確的是()A.用鹽酸和酒精的混合液解離以獲得原生質(zhì)體B.用聚乙二醇誘導(dǎo)白菜和甘藍(lán)的原生質(zhì)體融合C.用植物組織培養(yǎng)技術(shù)把雜
43、種細(xì)胞培養(yǎng)成植株D.經(jīng)篩選獲得符合要求的白菜甘藍(lán)雜種植株答案答案A在植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,需要用纖維素酶和果膠酶去壁以獲得原生質(zhì)體,用鹽酸和酒精的混合液解離細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,其可用于觀察洋蔥根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂實(shí)驗(yàn),A錯(cuò)誤。考點(diǎn)考點(diǎn)2 2 動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程1.(2018北京東城期末,25)若用a表示骨髓瘤細(xì)胞,b表示B淋巴細(xì)胞,則單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選可表示為()選項(xiàng)篩選前第一次篩選獲得第二次篩選獲得Aa、aa、ab、bb、ba、aa、ababBa、aa、ab、bb、bab、bb、babCa、aa、ab、bb、bab能無(wú)限增殖的abDa、aa、ab、bb、bab能產(chǎn)生特
44、定抗體的ab答案答案D單克隆抗體制備過(guò)程中的第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞,第二次篩選是要獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,D選項(xiàng)正確。易混易錯(cuò)易混易錯(cuò)第一次篩選得到的雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生抗體,能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞不一定產(chǎn)生的是實(shí)驗(yàn)所需的目標(biāo)抗體。2.(2018海淀期中,20)科研工作者利用禽流感病毒蛋白制備單克隆抗體,下列步驟中敘述正確的是()A.用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)禽流感病毒,通過(guò)離心獲得抗原蛋白B.多次注射適宜濃度的抗原免疫小鼠,以獲得更多的漿細(xì)胞C.用滅活的病毒誘導(dǎo)漿細(xì)胞與禽流感病毒融合得到雜交瘤細(xì)胞D.將單個(gè)雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠腹腔培養(yǎng)可獲得多種單克隆抗體答案答案B病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)
45、構(gòu),不能獨(dú)立進(jìn)行新陳代謝,需要寄生在活細(xì)胞中,“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液”是指用于培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液,不是含有動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液,因此其不能用來(lái)培養(yǎng)病毒,A選項(xiàng)錯(cuò)誤;多次用特定抗原免疫小鼠,可以獲得更多的能產(chǎn)生目的抗體的漿細(xì)胞,B選項(xiàng)正確;應(yīng)誘導(dǎo)漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,而非與病毒融合,C選項(xiàng)錯(cuò)誤;將單個(gè)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng),只可獲得一種單克隆抗體,D選項(xiàng)錯(cuò)誤。3.(2017北京西城期末,13)下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖,沒(méi)有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥,可抑制DNA和RNA的合成,對(duì)正常細(xì)胞也有一定毒性。下列說(shuō)法不正確的是()A.單克
46、隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程C.在治療中,應(yīng)先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物導(dǎo)彈D.單克隆抗體特異性強(qiáng),能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害答案答案C 根據(jù)漿細(xì)胞分泌特異性抗體和骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖的特性,利用融合篩選出的雜交瘤細(xì)胞,來(lái)制備單克隆抗體,A正確;阿霉素可抑制DNA和RNA的合成,即抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程,B正確;據(jù)圖可知,要先注射生物導(dǎo)彈,生物導(dǎo)彈可使非活化磷酸阿霉素轉(zhuǎn)化成活化阿霉素,能更好地殺死腫瘤細(xì)胞,C錯(cuò)誤;單克隆抗體能將阿霉素定向帶到腫瘤細(xì)胞所在的位置,能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害,D正確。解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵準(zhǔn)確獲取圖中
47、信息是解題關(guān)鍵。4.(2016北京東城期末,29)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,不正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性B.傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞C.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需定期更換培養(yǎng)液以清除代謝廢物答案答案A細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞仍具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織,分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖,故依據(jù)的原理是細(xì)胞增殖,A錯(cuò)誤。5.(2016北京豐臺(tái)期末,50)對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列說(shuō)法不正確的是()A.在利用肝腫瘤組織塊制備
48、細(xì)胞懸液時(shí),可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是抑制細(xì)胞呼吸C.為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素D.在合成培養(yǎng)基中,通常需加入血清、血漿等天然成分答案答案B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH,B錯(cuò)誤。6.(2018北京石景山期末,37)女性懷孕后會(huì)分泌一種糖蛋白絨毛膜促性腺激素(HCG),尿液中會(huì)檢出HCG的存在。用抗HCG單克隆抗體制備的試紙可以測(cè)試女性是否懷孕。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖,請(qǐng)分析回答: (1)制備單克隆抗體利用的生物學(xué)技術(shù)有 和 。給小
49、鼠注射的HCG相當(dāng)于 ,注射后小鼠體內(nèi)發(fā)生的特異性免疫反應(yīng)類型是 。(2)促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合得到乙,常采用的方法有 。(3)用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙篩選,得到的細(xì)胞丙的特點(diǎn)是 。(4)對(duì)丙檢測(cè)篩選得到丁,采用的方法是 。生產(chǎn)的單克隆抗體可以與 特異性結(jié)合,從而診斷早孕。(5)將驗(yàn)孕試紙標(biāo)有MAX標(biāo)志線的一端插入待測(cè)尿液中(尿液不能沒(méi)過(guò)該線),片刻后取出平放,若尿液中含有HCG,會(huì)隨尿液向右擴(kuò)散,與包埋在標(biāo)志線右側(cè)區(qū)域的被顯色劑標(biāo)記的抗HCG抗體1發(fā)生特異性結(jié)合,形成的復(fù)合體繼續(xù)隨尿液向右擴(kuò)散至檢測(cè)線處,又可以與固定在該區(qū)域的抗體2結(jié)合形成新的復(fù)合體,并不斷積累,從而在此處顯示出顏色。對(duì)照線區(qū)域固定
50、著另外一種抗體3,可以捕獲被顯色劑標(biāo)記的抗體1。因而當(dāng)尿液繼續(xù)擴(kuò)散到對(duì)照線時(shí),也會(huì)顯示出顏色。據(jù)此判斷:若檢測(cè)線和對(duì)照線均顯示顏色,表示 ;若僅有對(duì)照線顯示顏色,表示 ;若檢測(cè)線和對(duì)照線均不顯示顏色,表示 。答案答案(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合抗原體液免疫(2)PEG、電激、滅活的病毒(3)既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生專一抗體(4)抗原抗體雜交人絨毛膜促性腺激素(或HCG)(5)待測(cè)女性已懷孕未懷孕操作不正確或試紙條已失效解析解析(1)制備單克隆抗體利用的生物學(xué)技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。HCG是蛋白質(zhì)類激素,對(duì)小鼠來(lái)說(shuō),相當(dāng)于抗原,主要分布在體液中,不會(huì)侵染組織細(xì)胞,所以機(jī)體產(chǎn)生體液免疫。(
51、2)促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合得到乙,常采用的化學(xué)方法有PEG等,物理方法有離心、振動(dòng)、電激等,生物方法是利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。(3)用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙篩選,得到的雜交瘤細(xì)胞丙的特點(diǎn)既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生專一抗體。(4)利用抗原抗體雜交的方法篩選的丁是可以產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。生產(chǎn)的單克隆抗體可以與抗原人絨毛膜促性腺激素(或HCG)特異性結(jié)合。(5)準(zhǔn)確獲取題干信息,并解讀信息可知:驗(yàn)孕試紙利用了雙抗夾心法的原理,進(jìn)行檢測(cè)是否懷孕??贵w1和抗體2是HCG的兩種抗體,分別和HCG的兩個(gè)抗原表位結(jié)合,抗體3是抗體1 的抗體(二抗)。有HCG產(chǎn)生時(shí)檢測(cè)線和對(duì)照線均顯示顏色,表示已懷孕。沒(méi)有HCG產(chǎn)生
52、時(shí)檢測(cè)線不顯示顏色,對(duì)照線顯示顏色,表示未懷孕。解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵弄清楚抗原和抗體的關(guān)系,同時(shí)準(zhǔn)確把握一種抗原通常可以與多種抗體特異性結(jié)合,而一種抗體只能特異性識(shí)別一種抗原表位。B B組組 2016201820162018年高考模擬年高考模擬綜合題組綜合題組時(shí)間:40分鐘分值:90分一、選擇題(每題6分,共42分)1.(2018北京朝陽(yáng)期末,15)實(shí)驗(yàn)人員利用矮牽牛(二倍體,2n=14)的紅色花瓣細(xì)胞(液泡呈紅色)與枸杞(四倍體,4n=48)葉肉細(xì)胞,制備了相應(yīng)的原生質(zhì)體,并誘導(dǎo)其融合,經(jīng)篩選、培養(yǎng)獲得雜種植株。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.獲得該雜種植株克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B.可利用電激、
53、離心等方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C.可利用光學(xué)顯微鏡觀察,篩選出雜種原生質(zhì)體D.若原生質(zhì)體均為兩兩融合,則融合后的細(xì)胞中染色體數(shù)目均為62條答案答案D原生質(zhì)體均為兩兩融合的情況有三種,所以融合后的細(xì)胞染色體數(shù)目可能為28條、96條或62條,D選項(xiàng)錯(cuò)誤;矮牽牛紅色的花瓣細(xì)胞與枸杞綠色的葉肉細(xì)胞進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交,克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,融合后的原生質(zhì)體是可以通過(guò)顯微鏡觀察鑒定的,A、C選項(xiàng)正確??捎秒娂?、離心等方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,B選項(xiàng)正確。2.(2018北京海淀期末,25)下列有關(guān)生物技術(shù)應(yīng)用的敘述,不正確的是()A.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育花藥獲得單倍體植株B.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把正?;?qū)氩?/p>
54、人細(xì)胞進(jìn)行基因治療C.將-抗胰蛋白酶基因轉(zhuǎn)入乳腺細(xì)胞培育乳汁中含有該酶的轉(zhuǎn)基因羊D.將愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行誘變處理并篩選得到抗鹽堿的煙草新品種答案答案C轉(zhuǎn)基因動(dòng)物是將目的基因轉(zhuǎn)入受精卵細(xì)胞發(fā)育而來(lái)的動(dòng)物,C選項(xiàng)錯(cuò)誤。3.(2018北京東城期末,26)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.都需要無(wú)菌操作B.都需要使用胰蛋白酶C.都需要使用激素D.都需要含5%CO2的氣體環(huán)境答案答案A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要用胰蛋白酶離散組織細(xì)胞,并需要含95%空氣加5%CO2的氣體環(huán)境,植物組織培養(yǎng)不需要,B、D選項(xiàng)錯(cuò)誤;植物組織培養(yǎng)通常需要植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要,C選項(xiàng)錯(cuò)誤;二者均需要無(wú)菌
55、操作,A選項(xiàng)正確。 4.(2018北京朝陽(yáng)期末,27)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y 抗原,可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y 單克隆抗體,篩選胚胎進(jìn)行移植,以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是()A.此過(guò)程利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.H-Y 單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌C.培養(yǎng)鑒別后的雄性胚胎用于生產(chǎn)藥物D.目的基因與含有血紅蛋白基因的啟動(dòng)子的載體連接答案答案AH-Y 單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌,B選項(xiàng)錯(cuò)誤;據(jù)“牛雄性胚胎中存在特異性H-Y 抗原,可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y 單克隆抗體,利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥”知,篩選的胚胎為雌性胚胎,C選項(xiàng)錯(cuò)誤;目的基因應(yīng)該與含乳腺
56、細(xì)胞的特異表達(dá)基因的啟動(dòng)子的載體連接,D選項(xiàng)錯(cuò)誤。解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵準(zhǔn)確獲取題干中的文字信息是解題關(guān)鍵。5.(2018北京海淀二模,5)下列實(shí)驗(yàn)中,不能達(dá)成實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖?)A.用H2O2酶探究pH對(duì)酶活性影響B(tài).用Taq DNA聚合酶構(gòu)建表達(dá)載體C.用胰蛋白酶制備動(dòng)物細(xì)胞懸液D.用纖維素酶和果膠酶制備植物原生質(zhì)體答案答案B構(gòu)建表達(dá)載體需用限制酶和DNA連接酶,Taq DNA聚合酶是用于PCR的,B選項(xiàng)符合題意。6.(2016北京海淀期末,30)下列與細(xì)胞工程技術(shù)相關(guān)的表述中,不正確的是()A.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性B.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙C.動(dòng)物細(xì)胞融
57、合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分基本相同答案答案D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基特有的成分有葡萄糖、動(dòng)物血清或血漿、抗生素等;植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基特有的成分有蔗糖、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素、瓊脂等,D錯(cuò)誤。動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理都是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性,C正確。7.(2016北京豐臺(tái)期末,49)下列屬于克隆的過(guò)程是()將目的基因與載體結(jié)合并在受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增由一個(gè)精原細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成四個(gè)精子通過(guò)植物組織培養(yǎng)將離體細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株固體培養(yǎng)基上的一個(gè)細(xì)菌繁殖形成一個(gè)菌落由一個(gè)受精卵細(xì)胞形成一個(gè)多細(xì)胞個(gè)體A.B.C.D.7.(2016北
58、京豐臺(tái)期末,49)下列屬于克隆的過(guò)程是()將目的基因與載體結(jié)合并在受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增由一個(gè)精原細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成四個(gè)精子通過(guò)植物組織培養(yǎng)將離體細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株固體培養(yǎng)基上的一個(gè)細(xì)菌繁殖形成一個(gè)菌落由一個(gè)受精卵細(xì)胞形成一個(gè)多細(xì)胞個(gè)體A.B.C.D.答案答案D克隆意為復(fù)制,中擴(kuò)增重組DNA屬于分子水平的克隆,產(chǎn)生遺傳信息相同的DNA;屬于植物個(gè)體的克隆,通過(guò)組織培養(yǎng)產(chǎn)生遺傳物質(zhì)相同的子代;屬于微生物個(gè)體或細(xì)胞水平的克隆,單菌落中的細(xì)菌遺傳物質(zhì)均相同;為減數(shù)分裂產(chǎn)生精子的過(guò)程,基因可能發(fā)生分離和重組,精子中遺傳物質(zhì)和精原細(xì)胞不同;一個(gè)受精卵形成多細(xì)胞個(gè)體屬于生長(zhǎng)發(fā)育。故D正確。8.(2018北京
59、海淀期中,36)人肌紅蛋白(Myo)是早期診斷急性心肌梗塞的生化標(biāo)志物之一。為制備抗Myo的單克隆抗體,科研人員進(jìn)行研究。(15分)(1)科研人員以Myo作為抗原免疫小鼠,取小鼠的脾臟細(xì)胞與 細(xì)胞誘導(dǎo)融合。用 培養(yǎng)基篩選融合細(xì)胞,得到雜交瘤細(xì)胞。(2)將得到的雜交瘤細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè),之后稀釋、培養(yǎng)、再進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)并多次重復(fù)上述操作,多次重復(fù)該過(guò)程的目的是篩選獲得抗Myo抗體 的雜交瘤細(xì)胞。(3)雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法,具體原理如下圖:固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合,這是由于不同抗體與同一抗原表面的 結(jié)合。該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是 。(4
60、)研究人員獲得三種抗Myo單克隆抗體,分別記為A、B、C。為檢測(cè)它們之中哪兩種適合用二、非選擇題(共48分)于雙抗體夾心法,科研人員需要進(jìn)行 組實(shí)驗(yàn),檢測(cè)并比較各組實(shí)驗(yàn)的 。答案答案(1)骨髓瘤選擇(2)產(chǎn)量大、純度高(3)不同部位(表位)與待測(cè)抗原結(jié)合;酶催化檢測(cè)底物反應(yīng),可通過(guò)測(cè)定酶反應(yīng)產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量(4)6產(chǎn)物量解析解析(1)利用效應(yīng)B細(xì)胞可以分泌抗體、骨髓瘤細(xì)胞可以無(wú)限增殖的特性,誘導(dǎo)融合經(jīng)篩選得到既能分泌抗體,又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞。(2)多次重復(fù)該過(guò)程的目的是篩選獲得抗Myo抗體產(chǎn)量大、純度高的雜交瘤細(xì)胞。(3)固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合,這是同一抗原侵染機(jī)體后,機(jī)
61、體可以產(chǎn)生多種抗體,不同抗體可以與該抗原表面的不同部位(表位)特異性結(jié)合。(4)A、B、C三種抗體進(jìn)行排列組合,共有六種組合方式。9.(2018北京海淀二模,29)植物在漫長(zhǎng)的進(jìn)化過(guò)程中逐漸形成了對(duì)病原體的特異性防衛(wèi)反應(yīng)(植物免疫反應(yīng))。為探究水楊酸(SA)對(duì)植物免疫的影響,科研人員進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。(18分)(1)科研人員將特定基因轉(zhuǎn)入煙草愈傷組織細(xì)胞,經(jīng)過(guò) 過(guò)程后發(fā)育成SA積累缺陷突變體植株。用煙草花葉病毒(TMV)分別侵染野生型和突變體植株,得到圖1所示結(jié)果。據(jù)圖分析,SA能 植物的抗病性。(2)研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞內(nèi)存在兩種與SA結(jié)合的受體,分別是受體a和b,SA優(yōu)先與受體b結(jié)合。結(jié)合態(tài)的受體a和
62、游離態(tài)的受體b都能抑制抗病蛋白基因的表達(dá)。病原體侵染時(shí),若抗病蛋白基因不能表達(dá),則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。依據(jù)上述機(jī)理分析,SA含量適中時(shí),植物抗病性強(qiáng)的原因是 ,抗病蛋白基因表達(dá),抗病性強(qiáng);SA含量過(guò)高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,原因是 抑制抗病蛋白基因表達(dá),導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。(3)研究發(fā)現(xiàn),植物一定部位被病原體侵染,一段時(shí)間后未感染部位對(duì)病原體的抗性增強(qiáng)。為探究機(jī)理,科研人員在圖2所示煙草的3號(hào)葉片上接種TMV,得到圖3所示結(jié)果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,接種后96小時(shí),3號(hào)葉片中SA含量明顯升高,未感染的上位葉片中SA含量略有升高,隨著時(shí)間延長(zhǎng), ??蒲腥藛T測(cè)定各葉片中SA合成酶的活性,發(fā)現(xiàn)該酶活性僅在3號(hào)葉片中明顯增高,
63、據(jù)此推測(cè),未感染的上位葉片中SA的來(lái)源是 。為驗(yàn)證該推測(cè),科研人員進(jìn)一步實(shí)驗(yàn):給3號(hào)葉片接種TMV,用透明袋罩住,透明袋內(nèi)充入18O2以摻入新合成的SA中,密封袋口。處理一段時(shí)間后,提取 葉片中的SA,測(cè)定 。結(jié)果證明該推測(cè)成立。(4)綜合上述結(jié)果分析,植物通過(guò)調(diào)控不同部位SA的量來(lái)抵御病原體的侵染,其原理是 。答案答案(1)再分化提高(或“增強(qiáng)”)(2)含量適中的SA優(yōu)先與細(xì)胞內(nèi)游離態(tài)的受體b結(jié)合,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)幾乎沒(méi)有游離態(tài)的受體b和結(jié)合態(tài)的受體a(或“游離態(tài)的受體b幾乎全部與SA結(jié)合,受體a未與SA結(jié)合”)結(jié)合態(tài)的受體a(3)3號(hào)葉片中SA含量進(jìn)一步升高,未感染的上位葉片中SA含量顯著增加由
64、3號(hào)葉片合成并運(yùn)輸而來(lái)未感染的上位含18O的SA含量(4)感染部位大量(或“過(guò)量”)合成SA引發(fā)感染部位細(xì)胞凋亡,阻止病原體擴(kuò)散;合成的SA運(yùn)輸至未感染部位,引起未感染部位SA含量適當(dāng)升高,提高抗病蛋白基因表達(dá),植物抗病性增強(qiáng),不易被病原體侵染解析解析(1)將特定基因轉(zhuǎn)入煙草愈傷組織細(xì)胞,經(jīng)過(guò)再分化發(fā)育成突變體植株,是植物組織培養(yǎng)過(guò)程。據(jù)圖1分析,突變體不能積累SA,病斑面積大,抗病性弱,推知SA能提高植物的抗病性。(2)據(jù)題干信息“細(xì)胞內(nèi)存在兩種與SA結(jié)合的受體,分別是受體a和b,SA優(yōu)先與受體b結(jié)合。結(jié)合態(tài)的受體a和游離態(tài)的受體b都能抑制抗病蛋白基因的表達(dá)。”可知,含量適中的SA優(yōu)先與細(xì)胞
65、內(nèi)游離態(tài)的受體b結(jié)合,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)幾乎沒(méi)有游離態(tài)的受體b和結(jié)合態(tài)的受體a,抗病蛋白基因表達(dá),抗病性強(qiáng);SA含量過(guò)高時(shí),結(jié)合態(tài)的受體a抑制抗病蛋白基因表達(dá),導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。(3)據(jù)圖3給出的96小時(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,對(duì)于144小時(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可仿寫(xiě)為“3號(hào)葉片中SA含量進(jìn)一步升高,未感染的上位葉片中SA含量顯著增加”。據(jù)題干文字信息“發(fā)現(xiàn)該酶活性僅在3號(hào)葉片中明顯增高”及圖示信息,可推測(cè)未感染的上位葉片中SA由3號(hào)葉片合成并運(yùn)輸而來(lái)。18O是穩(wěn)定同位素,不能測(cè)定放射性,應(yīng)該測(cè)定未感染的上位葉片中的含18O的SA含量。(4)綜合上述結(jié)果分析,植物通過(guò)調(diào)控不同部位SA的量來(lái)抵御病原體的侵染, 原理是感染部位
66、大量(或“過(guò)量”)合成SA引發(fā)感染部位細(xì)胞凋亡,阻止病原體擴(kuò)散;合成的SA運(yùn)輸至未感染部位,引起未感染部位SA含量適當(dāng)升高,提高抗病蛋白基因表達(dá),植物抗病性增強(qiáng),不易被病原體侵染。10.(2016北京豐臺(tái)期末,37)人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中,經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒,該病毒表面的A蛋白為主要抗原,且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖:(15分)(1)過(guò)程代表的過(guò)程是 。(2)過(guò)程構(gòu)建出的表達(dá)載體必須要含有 和目的基因等結(jié)構(gòu)。(3)生產(chǎn)藥物時(shí)可用微生物做受體細(xì)胞,則應(yīng)采用 處理,使受體細(xì)胞處于 ,從而將表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞;藥物生產(chǎn)也可用乳腺生物反應(yīng)器,那么應(yīng)采用 的方法,將表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞。(4)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)技術(shù)名稱是 ,誘導(dǎo)該過(guò)程的化學(xué)試劑是 。(5)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí),可選用圖中基因工程生產(chǎn)的 作疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí),可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒,與已知病毒進(jìn)行 比較;或用圖中的 進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。答案答案(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)(至少答出兩種)(3)Ca2+感受態(tài)(或容易吸收周圍DNA的狀態(tài))顯微
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