高中生物 專題2 課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)課件 新人教版選修1

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1、專題2課題1課前預(yù)習巧設(shè)計名師課堂一點通重點突破創(chuàng)新演練大沖關(guān)知識清單案例師說課堂強化每課一練了解了解 培養(yǎng)基的種類、營養(yǎng)要素、配制原則培養(yǎng)基的種類、營養(yǎng)要素、配制原則理解理解 微生物培養(yǎng)過程中的無菌操作、接種微生物培養(yǎng)過程中的無菌操作、接種 操作要求操作要求無菌技術(shù)的操作無菌技術(shù)的操作 1概念概念 人們按照微生物對人們按照微生物對 的不同需求，配制出供其生的不同需求，配制出供其生長繁殖的長繁殖的 。 2種類種類(按照培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分按照培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分) (1)液體培養(yǎng)基：配制成的液體培養(yǎng)基：配制成的 狀態(tài)的基質(zhì)。狀態(tài)的基質(zhì)。 (2)固體培養(yǎng)基：配制成的固體培養(yǎng)基：配制成的 狀態(tài)的基

2、質(zhì)，是實驗室狀態(tài)的基質(zhì)，是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一，微生物在其上面生長，可形成肉眼中最常用的培養(yǎng)基之一，微生物在其上面生長，可形成肉眼可見的可見的 。營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)基質(zhì)營養(yǎng)基質(zhì)液體液體固體固體菌落菌落 3營養(yǎng)要素營養(yǎng)要素 各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有 、 、 、 ，此外培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對，此外培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、 以及以及 的需求。的需求。水水碳源碳源氮源氮源無機鹽無機鹽特殊營養(yǎng)物質(zhì)特殊營養(yǎng)物質(zhì)氧氣氧氣 二、無菌技術(shù)二、無菌技術(shù) 1避免雜菌污染的措施避免雜菌污染的措施 (1)對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行對

3、實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行 和和 。 (2)將用于微生物培養(yǎng)的將用于微生物培養(yǎng)的 、 和和 等器具進等器具進行滅菌。行滅菌。 (3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在 附近進行。附近進行。 (4)實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與 相接觸。相接觸。 清潔清潔消毒消毒器皿器皿接種用具接種用具培養(yǎng)基培養(yǎng)基酒精燈酒精燈火焰火焰周圍的物周圍的物品品 2消毒和滅菌消毒和滅菌 (1)消毒：消毒： 概念：使用概念：使用 的物理或化學方法僅殺死物體表的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體面或內(nèi)部

4、一部分對人體 (不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)。 常用方法：常用方法： 消毒法、消毒法、 消毒法、消毒法、 消毒消毒法。法。 (2)滅菌：滅菌： 概念：使用概念：使用 的理化因素殺死的理化因素殺死 的微生的微生物物(包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子)。 常用方法：常用方法： 滅菌、滅菌、 滅菌、滅菌、 滅菌。滅菌。較為溫和較為溫和有害的微生物有害的微生物煮沸煮沸巴氏巴氏化學藥品化學藥品強烈強烈物體內(nèi)外所有物體內(nèi)外所有灼燒灼燒干熱干熱高壓蒸汽高壓蒸汽 三、分離純化大腸桿菌的實驗操作三、分離純化大腸桿菌的實驗操作 1制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟 計算計算

5、稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板。倒平板。 2純化大腸桿菌純化大腸桿菌 微生物接種的最常用方法是微生物接種的最常用方法是 和和 。 (1)平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 的操作，將聚集的菌種逐步的操作，將聚集的菌種逐步 到培養(yǎng)基的表面。到培養(yǎng)基的表面。 (2)稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的 ，然，然后將不同稀釋度的菌液分別后將不同稀釋度的菌液分別 到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。進行培養(yǎng)。平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板稀釋涂布平板法法連續(xù)連續(xù)劃線劃線稀釋分散稀釋分散梯度稀釋梯度

6、稀釋涂布涂布 3結(jié)果分析結(jié)果分析 (1)如果接種了大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、如果接種了大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，說明形狀、大小基本一致，說明 操作符合要求。操作符合要求。 (2)若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中被若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中被 。 (3)未接種大腸桿菌的空白對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中未接種大腸桿菌的空白對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中若若 ，則說明滅菌不徹底，實驗失敗。，則說明滅菌不徹底，實驗失敗。接種接種雜菌污染雜菌污染長出菌落長出菌落 四、菌種保存四、菌種保存 1臨時保藏法臨時保藏法 適用于適用于 使用的菌種。使用的菌種。

7、(1)過程：過程： 將菌種接種到試管的將菌種接種到試管的 培養(yǎng)基上，合適溫度下培養(yǎng)基上，合適溫度下培養(yǎng)。培養(yǎng)。 保藏：菌落長成后，放于保藏：菌落長成后，放于 冰箱中。冰箱中。 轉(zhuǎn)移：每隔轉(zhuǎn)移：每隔36個月，將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到個月，將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到 的培養(yǎng)基上。的培養(yǎng)基上。 (2)缺點：菌種容易被缺點：菌種容易被 或產(chǎn)生或產(chǎn)生 。 2菌種的長期保存菌種的長期保存 對于需要長期保存的菌種，可采用對于需要長期保存的菌種，可采用 的方法。的方法。固體斜面固體斜面頻繁頻繁4新鮮新鮮污染污染變異變異甘油管藏甘油管藏 1讀教材讀教材P14基礎(chǔ)知識基礎(chǔ)知識培養(yǎng)基，歸納并回答下列問題。培養(yǎng)基，

8、歸納并回答下列問題。 (1)微生物營養(yǎng)要素有哪些？碳源的主要來源有哪些？微生物營養(yǎng)要素有哪些？碳源的主要來源有哪些？ 提示：提示：各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽和生長因子。碳源、氮源、無機鹽和生長因子。 主要來源：無機化合物有主要來源：無機化合物有CO2、Na2CO3等；有機化合等；有機化合物有糖類、脂肪酸、花生餅、石油等。物有糖類、脂肪酸、花生餅、石油等。 (2)結(jié)合微生物物質(zhì)組成分析碳源、氮源、生長因子結(jié)合微生物物質(zhì)組成分析碳源、氮源、生長因子在微生物體內(nèi)有哪些作用？在微生物體內(nèi)有哪些作用？(完成下表完成下表)2讀教材

9、讀教材P15無菌技術(shù)無菌技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容，歸納并回答下列問題：的相關(guān)內(nèi)容，歸納并回答下列問題：(1)實驗室常用的消毒、滅菌方法有哪些？實驗室常用的消毒、滅菌方法有哪些？提示：提示：消毒消毒滅菌滅菌具體方法具體方法煮沸消毒法、巴氏消毒煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥物消毒法法、化學藥物消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌壓蒸汽滅菌 (2)試從消毒、滅菌的條件和結(jié)果方面進行比較分析試從消毒、滅菌的條件和結(jié)果方面進行比較分析二者的區(qū)別并填寫下表。二者的區(qū)別并填寫下表。 3讀教材讀教材P16實驗操作實驗操作制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基相關(guān)內(nèi)容，思考并討論下列

10、問題：相關(guān)內(nèi)容，思考并討論下列問題： (1)分析配制培養(yǎng)基之前，對所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)要計分析配制培養(yǎng)基之前，對所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)要計算稱量的原因。算稱量的原因。 提示：提示：保證培養(yǎng)基中的各種營養(yǎng)物質(zhì)比例協(xié)調(diào)，有利于保證培養(yǎng)基中的各種營養(yǎng)物質(zhì)比例協(xié)調(diào)，有利于微生物的生長。微生物的生長。 (2)在配制培養(yǎng)基時，各組分溶化后是否立即進行滅菌？在配制培養(yǎng)基時，各組分溶化后是否立即進行滅菌？為什么？為什么？ 提示：提示：配制的培養(yǎng)基除滿足微生物的營養(yǎng)物質(zhì)需求外，配制的培養(yǎng)基除滿足微生物的營養(yǎng)物質(zhì)需求外，還需滿足微生物對還需滿足微生物對pH、氧氣等的要求，所以培養(yǎng)基各組分溶、氧氣等的要求，所以培養(yǎng)基

11、各組分溶化后需調(diào)化后需調(diào)pH后再進行滅菌。后再進行滅菌。 (3)倒平板時，應(yīng)注意哪些問題？倒平板時，應(yīng)注意哪些問題？ 提示：提示：培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50左右時才能倒左右時才能倒平板；平板；整個操作在酒精燈火焰旁進行；整個操作在酒精燈火焰旁進行；倒平板時，培倒平板時，培養(yǎng)基若濺到培養(yǎng)皿蓋和皿底之間的部位，該平板應(yīng)丟棄；養(yǎng)基若濺到培養(yǎng)皿蓋和皿底之間的部位，該平板應(yīng)丟棄；平板冷凝后要倒置。平板冷凝后要倒置。 (4)平板劃線操作時，需要對接種環(huán)灼燒滅菌，填表比較平板劃線操作時，需要對接種環(huán)灼燒滅菌，填表比較下列灼燒滅菌的目的。下列灼燒滅菌的目的。 4讀教材讀教材P20結(jié)果分析

12、與評價結(jié)果分析與評價內(nèi)容，根據(jù)你自己的實驗內(nèi)容，根據(jù)你自己的實驗操作，分析交流下列問題：操作，分析交流下列問題： (1)如何判斷培養(yǎng)基的制作是否合格？如何判斷培養(yǎng)基的制作是否合格？ 提示：提示：將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12 d，無菌落，無菌落生長，說明培養(yǎng)基制備成功。生長，說明培養(yǎng)基制備成功。 (2)如何判斷接種操作是否符合無菌要求？如何判斷接種操作是否符合無菌要求？ 提示：提示：根據(jù)培養(yǎng)基上生長出的菌落的顏色、形狀、大小根據(jù)培養(yǎng)基上生長出的菌落的顏色、形狀、大小等特征判斷，若菌落特征符合大腸桿菌的特點，則說明接種等特征判斷，若菌落特征符合大腸桿菌的特點，則

13、說明接種操作符合要求，若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過操作符合要求，若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作未達到要求。程中，無菌操作未達到要求。 某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗，實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落行了實驗，實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題。觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題。 (1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了了_和和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本

14、成分是本成分是_和和_。 (2)對培養(yǎng)基進行滅菌，應(yīng)該采用的方法是對培養(yǎng)基進行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_。 (3)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37。要。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種_作為對照實驗。作為對照實驗。 (4)培養(yǎng)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有這說明湖水樣品中有_種細菌。一般說來，菌落總種細菌

15、。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越_。 (5)如果提高培養(yǎng)基中如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐的濃度，可以用于篩選耐_細菌，這種培養(yǎng)基被稱為細菌，這種培養(yǎng)基被稱為_。 解析解析(1)蛋白胨可提供碳源、氮源、維生素，而淀粉可蛋白胨可提供碳源、氮源、維生素，而淀粉可提供碳源，除此之外，微生物的生長還需無機鹽和水。提供碳源，除此之外，微生物的生長還需無機鹽和水。 (2)對培養(yǎng)基的滅菌，在實驗室內(nèi)常用高壓蒸汽滅菌法。對培養(yǎng)基的滅菌，在實驗室內(nèi)常用高壓蒸汽滅菌法。 (3)在實驗的過程中，除實驗變量以外其他各變量均應(yīng)適宜在實驗的過程中，除實驗變

16、量以外其他各變量均應(yīng)適宜且相同，以利于更好的實現(xiàn)實驗?zāi)康摹Ｇ蚁嗤?，以利于更好的實現(xiàn)實驗?zāi)康摹?(4)不同的菌落具有各自的菌落特征不同的菌落具有各自的菌落特征(如硬度、顏色、透明如硬度、顏色、透明度、光滑度等度、光滑度等)。 (5)培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長，稱為選擇培養(yǎng)基，可以培生長，促進所需要的微生物的生長，稱為選擇培養(yǎng)基，可以培養(yǎng)、分離出特定微生物。養(yǎng)、分離出特定微生物。 答案答案(1)氮源氮源(碳源不作要求碳源不作要求)碳源無機鹽水碳源無機鹽水(2)高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱

17、無菌水恒溫培養(yǎng)箱無菌水(4)多高多高(5)鹽鹽(或或NaCl)選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用相關(guān)題目的解題策略微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用相關(guān)題目的解題策略 對于有關(guān)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用的題目，在解答時應(yīng)注意對于有關(guān)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用的題目，在解答時應(yīng)注意從以下幾個方面把握：從以下幾個方面把握： (1)培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成，包括碳源、氮源、無機鹽和水以培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成，包括碳源、氮源、無機鹽和水以及生長因子，其中各種成分由哪種有機物提供應(yīng)根據(jù)其化學及生長因子，其中各種成分由哪種有機物提供應(yīng)根據(jù)其化學元素組成來推斷。元素組成來推斷。 (2)無菌操作技術(shù)，區(qū)別消毒和滅菌，以及各自常用的方無菌操作技術(shù)，區(qū)別

18、消毒和滅菌，以及各自常用的方法和優(yōu)點。法和優(yōu)點。 (3)在實驗過程中，必須設(shè)置對照實驗，明確設(shè)置對照的在實驗過程中，必須設(shè)置對照實驗，明確設(shè)置對照的方法。方法。 培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是()化學消毒化學消毒灼燒滅菌灼燒滅菌干熱滅菌干熱滅菌紫外線消毒紫外線消毒高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌巴氏消毒法巴氏消毒法ABC D 解析解析培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果；用干熱滅菌；接種環(huán)可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果；實驗操作者的雙手可用化學藥劑進行消毒，如用酒精擦拭雙實驗操作者的雙手可用化學藥劑進行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用手；空氣可用紫外線消毒；牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。答案為巴氏消毒法。答案為A。 答案答案A