高三生物 實(shí)驗(yàn)專項(xiàng)突破31 DNA的粗提取與鑒定 新人教版 課件

上傳人:無(wú)*** 文檔編號(hào):72165223 上傳時(shí)間:2022-04-08 格式:PPT 頁(yè)數(shù):14 大?。?80.50KB
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1、 實(shí)驗(yàn)原理 1. DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同,其中在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí)最低。 2. DNA不溶于酒精,但是細(xì)胞中的一些有機(jī)物如蛋白質(zhì)則溶于酒精,可以用酒精提純。 3. DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)被染成藍(lán)色,可用來(lái)鑒定DNA分子。 實(shí)驗(yàn)流程 1. 做該實(shí)驗(yàn)時(shí),不能用豬血代替雞血,因?yàn)椴溉閯?dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核,不能提取DNA。 2. 制備雞血細(xì)胞液時(shí),要注意向雞血中加檸檬酸鈉,防止血液凝固。 3. 漲破細(xì)胞的方法:向血細(xì)胞中加入蒸餾水,血細(xì)胞溶液的濃度大于蒸餾水的濃度,從而使血細(xì)胞大量吸水而漲破。不能用生理鹽水,因?yàn)檠?xì)胞溶液的濃度與生理鹽水的濃度相當(dāng),

2、所以血細(xì)胞在生理鹽水中不能吸收水分。 4. 兩次加入蒸餾水,第一次是為了使血細(xì)胞吸水漲破;第二次是為了降低氯化鈉的濃度,有利于DNA的析出。 5. 兩次析出DNA的方法:第一次是加入蒸餾水,降低氯化鈉的濃度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因?yàn)镈NA不溶于酒精溶液。 6. 鑒定DNA時(shí)要用兩支試管,其中不加DNA的試管起對(duì)照作用,該試管溶液不變色,另一支加有DNA的試管溶液變藍(lán)色。選材時(shí)注意選用細(xì)胞易破碎、DNA含量相對(duì)較高的生物組織;鑒定DNA的二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會(huì)影響鑒定效果。 2010江蘇卷某生物興趣小組開(kāi)展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng),具體步驟如下: 材料處理:稱取新鮮的花菜

3、、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,一組置于20、另一組置于20條件下保存24 h。 DNA粗提?。?第一步:將上述材料分別放入研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過(guò)濾,取濾液備用。 第二步:先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步:取6支試管,分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測(cè):在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5 min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。材料保存溫度花菜辣椒

4、蒜黃20 (注:“”越多表示藍(lán)色越深) 分析上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程,回答下列問(wèn)題: (1)該探究性實(shí)驗(yàn)的課題名稱是_。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少_。 (3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出結(jié)論并分析。 結(jié)論1:與20相比,相同實(shí)驗(yàn)材料在20條件下保存,DNA的提取量較多。 結(jié)論2:_。 針對(duì)結(jié)論1,請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲。 (4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是: _。 然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。 思路點(diǎn)撥:本題主要考查DNA粗提取的相關(guān)知識(shí),意在考查考生的實(shí)驗(yàn)與探究能力。如果DNA斷裂,就不容易被提取出來(lái);溫度主要是通過(guò)影響酶的活性來(lái)影響生理過(guò)程。粗提取得到的DNA中含有少量的蛋白質(zhì),可以通過(guò)氯仿的特殊功能來(lái)去除蛋白質(zhì),提高DNA純度。 答案:(1)探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響(2)DNA斷裂(3)等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃提取的DNA量最多低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時(shí)間,吸取上清液

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