2020版高考生物一輪復(fù)習(xí) 生物技術(shù)與工程 第2講 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用教學(xué)案 新人教版

第2講微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用考綱展示1.微生物的分離和培養(yǎng)2.某種微生物數(shù)量的測(cè)定3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用考點(diǎn)一| 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)種類(lèi)：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，二者的區(qū)別是是否添加凝固劑。(3)營(yíng)養(yǎng)成分：主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。其他條件：pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣。2無(wú)菌技術(shù)(1)關(guān)鍵：防止外來(lái)雜菌的入侵。(2)不同對(duì)象的無(wú)菌操作方法(連線(xiàn))：答案：bb、aa、b3制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(1)計(jì)算：依據(jù)配方比例，計(jì)算配制100 mL的培養(yǎng)基時(shí)，各種成分的用量。(2)稱(chēng)量：準(zhǔn)確地稱(chēng)取各種成分。(3)溶化(4)滅菌(5)倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時(shí)，在酒精燈火焰旁倒平板。4純化大腸桿菌(1)菌落：由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體。(2)純化大腸桿菌的方法純化培養(yǎng)原理：在培養(yǎng)基上得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的菌落，即可獲得較純的菌種。純化大腸桿菌的關(guān)鍵步驟：接種。常用的微生物接種方法有兩種。a平板劃線(xiàn)法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。b稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。5菌種的保存方法(1)對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法。(2)對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。1選修1P18“旁欄小資料”，微生物的接種方法只有平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法嗎？微生物接種的核心是什么？提示：不是，微生物的接種技術(shù)還包括斜面接種、穿刺接種等方法，其核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。2如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)分析接種的具體方法。(1)獲得圖A、圖B效果的接種方法分別是什么？提示：稀釋涂布平板法；平板劃線(xiàn)法。(2)某同學(xué)在用A方法純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是什么？為了防止雜菌污染，有同學(xué)建議加入抗生素，你覺(jué)得可以嗎？并說(shuō)明理由。提示：菌液濃度過(guò)高(土壤溶液稀釋不夠)。不可以，因?yàn)榭股夭坏珰珉s菌，而且也可以殺滅大腸桿菌，因此在培養(yǎng)基上不可以加入抗生素。1選擇無(wú)菌技術(shù)的原則(1)考慮無(wú)菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對(duì)象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能滅菌。2純化大腸桿菌的兩種方法的異同(1)相同點(diǎn)：平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法都能獲得單細(xì)胞菌落。(2)不同點(diǎn)：平板劃線(xiàn)法不能對(duì)微生物計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法能對(duì)微生物計(jì)數(shù)。考法1考查無(wú)菌技術(shù)1(2018·全國(guó)卷)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是_。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線(xiàn)照射消毒，其原因是紫外線(xiàn)能_。在照射前，適量噴灑_，可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠(chǎng)供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)_(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒(méi)有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是_。解析：(1)在實(shí)驗(yàn)室中，能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點(diǎn)表現(xiàn)為在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)紫外線(xiàn)照射能消毒的原因是其能夠破壞微生物細(xì)胞中的DNA分子。在利用紫外線(xiàn)照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。(4)自來(lái)水通常采用氯氣消毒。(5)采用高壓蒸汽滅菌時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而溫度未達(dá)到相應(yīng)要求，最可能的原因是沒(méi)有排盡高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)的冷空氣。答案：(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡考法2考查微生物的純化技術(shù)2(2014·全國(guó)卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)。(2)該小組采用平板劃線(xiàn)法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)_滅菌。在第二次及以后的劃線(xiàn)時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)。這樣做的目的是_。(3)示意圖A和B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)的利用率。解析：(1)為了檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。0.1 mL稀釋液中平均有(393837)/338個(gè)活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×1003.8×104，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×1 0003.8×107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到迅速?gòu)氐诇缇哪康?。在第二次及以后的劃線(xiàn)時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線(xiàn)性，是用平板劃線(xiàn)法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。答案：(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(4)溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)3某研究小組研究了不同濃度的抗生素A對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)如圖1?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題：(1)該培養(yǎng)基為大腸桿菌提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、無(wú)機(jī)鹽、_四類(lèi)，而配置該培養(yǎng)基時(shí)，通常加入_作為凝固劑。(2)為了確保利用_法接種大腸桿菌時(shí)，形成一層菌膜，則對(duì)菌種的稀釋倍數(shù)_。另外，在培養(yǎng)和接種大腸桿菌時(shí)要特別注意進(jìn)行_操作。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選出對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯的抗生素A濃度的依據(jù)是_。(3)為減少實(shí)驗(yàn)誤差，每一濃度的抗生素A還要制備_。(4)該研究小組運(yùn)用上述實(shí)驗(yàn)方法還研究了相同濃度的a、b、c三種不同抗生素對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響。請(qǐng)?jiān)趫D2中圖示這一處理方案(可模仿圖1加以必要的注解)。解析：(1)微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的四類(lèi)主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源。該實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，常用的凝固劑是瓊脂。(2)圖中接種大腸桿菌時(shí)所使用的接種方法是稀釋涂布平板法，為了得到菌膜，稀釋倍數(shù)不能太大。接種和培養(yǎng)大腸桿菌的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。據(jù)圖1分析，號(hào)圓紙片的抑菌圈最大，說(shuō)明該濃度的抗生素A對(duì)大腸桿菌抑制作用最明顯。(3)為減少實(shí)驗(yàn)誤差，每一濃度的抗生素A還要制備多個(gè)圓紙片進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)。(4)該方案的自變量為相同濃度的a、b、c三種不同抗生素，還應(yīng)有空白對(duì)照，注意在圖中要標(biāo)記清楚，具體圖解見(jiàn)答案。答案：(1)氮源瓊脂(2)稀釋涂布平板不能太大無(wú)菌透明圈越大，抑制效果越明顯(3)多個(gè)圓紙片(4)圖示見(jiàn)如圖所示考點(diǎn)二| 微生物的分離與計(jì)數(shù)1篩選菌株(1)尋找目的菌株的方法：根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。(2)實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選：方法：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。實(shí)例：篩選尿素分解菌時(shí)使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(3)選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。(2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)(C÷V)×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。操作：設(shè)置重復(fù)組和對(duì)照組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。同時(shí)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。3土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。(2)原理 分解尿素的細(xì)菌 CO(NH2)2H2OCO22NH3 酚紅指示劑變紅色(3)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論培養(yǎng)基變紅：該種細(xì)菌能分解尿素。培養(yǎng)基不變紅：該種細(xì)菌不能分解尿素。(4)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用稀釋涂布平板法。(5)實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養(yǎng)與觀(guān)察細(xì)菌的計(jì)數(shù)。4分解纖維素的微生物的分離(1)纖維素酶組成：纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。作用：纖維素纖維二糖葡萄糖 (2)纖維素分解菌的篩選原理 纖維素分解菌 紅色復(fù)合物紅色消失，出現(xiàn)透明圈。篩選方法：剛果紅染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。培養(yǎng)基：以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)流程：富含纖維素的環(huán)境 ：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度 ：制備系列稀釋液 ：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 ：產(chǎn)生透明圈的菌落1選擇菌落數(shù)時(shí)，若得到3個(gè)或3個(gè)以上菌落數(shù)在30300的平板是否一定正確？并說(shuō)明理由。提示：不一定。如得到3個(gè)平板，菌落數(shù)分別為200、34、240，雖然菌落數(shù)均在“30300”，但由于34與另外兩個(gè)平板上的菌落數(shù)差異較大，應(yīng)找出原因并重新實(shí)驗(yàn)。2研究人員用含有剛果紅的培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，篩選到了幾株有透明降解圈的菌落如圖所示。據(jù)圖回答以下問(wèn)題：(1)簡(jiǎn)述透明圈的形成過(guò)程。提示：剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。細(xì)菌分泌的纖維素酶能將培養(yǎng)基中的纖維素降解成纖維二糖和葡萄糖，形成透明圈。(2)推測(cè)與圖中透明圈大小有關(guān)因素主要是什么？降解纖維素能力最強(qiáng)的菌種是哪種？提示：纖維素酶的產(chǎn)量和活性。 菌落。1選擇培養(yǎng)基的作用原理(1)在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，如加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在滿(mǎn)足基本所需培養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上加入。(2)改變培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分，如缺乏氮源時(shí)可以分離出固氮微生物；以石油作為唯一碳源時(shí)，可以分離出能消除石油污染的微生物。(3)改變微生物的培養(yǎng)條件，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物，在高鹽環(huán)境中培養(yǎng)可分離得到耐鹽菌。2目的微生物選擇的三種方法(1)利用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法接種在固體平板培養(yǎng)基上，根據(jù)目的微生物特定的菌落特征挑選目的微生物。(2)利用選擇培養(yǎng)基直接篩選目的微生物。(3)利用鑒別培養(yǎng)基鑒別篩選目的微生物?？挤?考查微生物的選擇培養(yǎng)1(2017·全國(guó)卷)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生_。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是_。但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是_(答出兩點(diǎn)即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇_(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_。(3)用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_(答出兩點(diǎn)即可)。解析：(1)有些細(xì)菌能分解尿素是因?yàn)檫@些細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解成CO2和NH3。能分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2作為碳源合成有機(jī)物，但這些細(xì)菌可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是：作為能源物質(zhì)氧化分解為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料。(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，這樣只有能分解尿素的細(xì)菌才能在培養(yǎng)基上生存。若選擇“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”作為氮源，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用。(3)用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，它們可以為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)；同時(shí)，KH2PO4和Na2HPO4還可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定。答案：(1)脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定考法2微生物的分離與計(jì)數(shù)2(2018·全國(guó)卷)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制_的生長(zhǎng)，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類(lèi)型除氮源外還有_(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有_(答出兩點(diǎn)即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長(zhǎng)出菌落后可通過(guò)加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是_，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_。(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是_。解析：(1)在微生物學(xué)中，將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱(chēng)做選擇培養(yǎng)基。若M培養(yǎng)基是用于真菌的篩選，則應(yīng)加入鏈霉素以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，其屬于選擇培養(yǎng)基。(2)馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、水等多種物質(zhì)，因此，除氮源外其中還有微生物生長(zhǎng)所需要的碳源、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)要素。進(jìn)入細(xì)胞的氮源可參與合成蛋白質(zhì)、核酸(DNA、RNA)等含氮的生物大分子。(3)加入顯色劑碘液后，淀粉遇碘變藍(lán)，而淀粉的水解產(chǎn)物則不發(fā)生這種反應(yīng)。若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，土壤中能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可將淀粉分解，菌落周?chē)蜁?huì)出現(xiàn)透明圈，這樣，我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選能產(chǎn)淀粉酶的微生物了。(4)乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，結(jié)果的重復(fù)性太差，不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。答案：(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無(wú)機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周?chē)矸郾凰?，形成透明?4)乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差3為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量及其對(duì)抗生素耐藥性情況”，某同學(xué)進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：(1)配制的細(xì)菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等主要營(yíng)養(yǎng)成分外，還應(yīng)加入適量的_和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要進(jìn)行的是_。(2)接種微生物的方法有很多，圖中過(guò)程所示的方法為_(kāi)。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量(單位：個(gè)/mL)，這里的n_。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，原因是_。(3)為了檢測(cè)乳酸菌對(duì)抗生素的敏感性，取該單菌落適當(dāng)稀釋?zhuān)臃N于固體培養(yǎng)基表面，在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿(mǎn)平板。將分別含有A、B、C三種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A_(填“敏感”或“不敏感”)；含C濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是_。解析：(1)配制的細(xì)菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽等主要營(yíng)養(yǎng)成分外，還需要特殊的物質(zhì)維生素，由于該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因此還應(yīng)加入適量的瓊脂作為凝固劑。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要先調(diào)pH。(2)接種微生物的方法有很多，圖中過(guò)程所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌數(shù)落時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量(單位：個(gè)/mL)，這里的n6。(3)在抗藥性檢驗(yàn)過(guò)程中，如果在含某種抗生素的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明的圓圈，說(shuō)明此種抗生素可抑制該細(xì)菌，因此該致病菌對(duì)抗生素A敏感；含C濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，且透明圈出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素C的耐藥菌。答案：(1)維生素調(diào)pH(2)稀釋涂布平板法6分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠(3)敏感抗生素C的耐藥菌真題體驗(yàn)| 感悟高考淬煉考能1(多選)(2016·江蘇高考)漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類(lèi)，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是()A生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過(guò)菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落 C在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過(guò)劃線(xiàn)進(jìn)一步純化D斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株答案：BC2(2016·全國(guó)卷)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；制作無(wú)菌平板；設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于_。若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是_。(2)步驟中，實(shí)驗(yàn)組的操作是_。(3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象。若將30(即366)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法_(填“正確”或“不正確”)。解析：(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮來(lái)源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步驟，需要進(jìn)行倒平板操作，用到的是固體培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中要有瓊脂。(2)該實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照組為不進(jìn)行處理的無(wú)菌平板，實(shí)驗(yàn)組的操作為將各無(wú)菌平板分別放置在教室不同高度的位置上，開(kāi)蓋暴露相同時(shí)間。(3)若空白對(duì)照組的平板上出現(xiàn)了菌落，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象?？瞻讓?duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)變量不唯一，不能確定實(shí)驗(yàn)組平板上的菌落是否僅由教室內(nèi)不同高度空氣中的微生物形成，因此不能求出實(shí)驗(yàn)組的菌落平均數(shù)。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開(kāi)蓋暴露相同時(shí)間 (3)污染不正確3(2014·全國(guó)卷)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_分解成_。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成_色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見(jiàn)下表)：酵母膏無(wú)機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙注：“”表示有，“”表示無(wú)。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養(yǎng)基乙_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_。解析：(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅是一種染料，可以與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中就會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(3)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，而用于分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，并且培養(yǎng)基中需含有纖維素，才能與CR形成紅色復(fù)合物，有纖維素分解菌時(shí)才能形成以纖維素分解菌為中心的透明圈。答案：(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成CR纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌4(2018·全國(guó)卷)回答下列與酵母菌有關(guān)的問(wèn)題：(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用_(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用_滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線(xiàn)接種在平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀(guān)察到菌落，菌落的含義是_。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，可促進(jìn)_(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，可促進(jìn)_(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時(shí)，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是_。解析：(1)酵母菌為異養(yǎng)型生物，通常使用麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)；培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體稱(chēng)為菌落。(2)酵母菌為兼性厭氧型生物，有氧條件利于其繁殖，無(wú)氧條件下其進(jìn)行酒精發(fā)酵。(3)酵母菌分解葡萄糖可產(chǎn)生二氧化碳，使面包松軟多孔。答案：(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會(huì)產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟- 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