2022年高三生物總復(fù)習(xí) 13-3DNA的粗提取與鑒定學(xué)案

2022年高三生物總復(fù)習(xí) 13-3DNA的粗提取與鑒定學(xué)案【具體要求】具體內(nèi)容考綱學(xué)習(xí)要求嘗試對(duì)植物或動(dòng)物組織中的DNA進(jìn)行粗提取A理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。了解DNA的物理化學(xué)性質(zhì)A知道生物大分子的性質(zhì)及一般的提取方法，明確DNA的粗提取和鑒定方法理解DNA粗提取以及DNA鑒定的原理B能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理。能對(duì)實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂。【基礎(chǔ)知識(shí)】一、原理提取生物大分子的基本思路是 。對(duì)于DNA的粗提取而言，就是要利用 、 等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。1）DNA的溶解性 DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使 充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。此外，DNA不溶于 溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離?！舅伎肌浚喝绾斡米鴺?biāo)表示DNA隨NaCl溶液變化的溶解性曲線？2）DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是對(duì) 沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫，而DNA在 以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解 ，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。3）DNA的鑒定 在 條件下，DNA遇 會(huì)被染成 色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實(shí)驗(yàn)步驟1）實(shí)驗(yàn)材料的選取 凡是含有 的生物材料都可以考慮，但是使用 的生物組織，成功的可能性更大?！舅伎肌吭谙旅娴纳锊牧现羞x取適合的實(shí)驗(yàn)材料：魚(yú)卵、豬肝、菜花（花椰菜）、香蕉、雞血、哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液 動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的 ，同時(shí)用 攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可?！舅伎肌浚喝绻麑?shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用 溶解細(xì)胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液。3）去除濾液中的雜質(zhì) 【思考】用高鹽濃度的溶液和用低鹽濃度的NaC溶液為什么能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)？4）DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積 、冷卻的 ，靜置 ，溶液中會(huì)出現(xiàn) ，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。DNA溶解在2 mol/l的NaCl溶液中 + 二苯胺試劑 溶液顏色變 。 【思考】鑒定粗提取的DNA為什么要進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)？三【典型例題】1(09通州)“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是A利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液，可將DNA與蛋白質(zhì)分離B利用高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對(duì)DNA沒(méi)有影響的特性，可將DNA與蛋白質(zhì)分離C在DNA濾液中加入一定量蛋白酶，可將DNA與蛋白質(zhì)分離D在溶有DNA的2molL氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，攪拌后取濾液進(jìn)行以后實(shí)驗(yàn)2（09南通）下列對(duì)“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是 A利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液，可將DNA與蛋白質(zhì)分離B利用85的高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對(duì)DNA沒(méi)有影響的特性，可將DNA與蛋白質(zhì)分離C利用DNA在0.14 mol·L1NaCl溶液中溶解度最大的特點(diǎn)，可將DNA與雜質(zhì)分離D在DNA濾液中加入嫩肉粉，通過(guò)木瓜蛋白酶的作用，可將DNA與蛋白質(zhì)分離3（09揚(yáng)州）下列關(guān)于 DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述中，正確的是 A選材：雞血，因?yàn)殡u血紅細(xì)胞有細(xì)胞核，其它動(dòng)物紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核BDNA粗提取：不同濃度的NaCl溶液，因?yàn)镈NA在其中溶解度不同 C提純：酒精，因?yàn)镈NA溶于酒精，蛋白質(zhì)不溶于酒精D鑒定：二苯胺試劑，因?yàn)镈NA溶液加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色4下列操作可以達(dá)到目的的選項(xiàng)是選項(xiàng)操作目的A溶解海藻酸鈉時(shí)用大火加熱海藻酸鈉可以快速溶解B將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋（玻璃紙制成）放入透析液中蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離C在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，雞血中加入蒸餾水稀釋血液，防止凝固D洋蔥根尖解離后漂洗使細(xì)胞分散，有利觀察5（多選 09蘇北四市）“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是A利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液，可將DNA與蛋白質(zhì)分離B利用高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對(duì)DNA沒(méi)有影響的特性，可將DNA與蛋白質(zhì)分離C在DNA濾液中加入一定量蛋白酶，可將DNA與蛋白質(zhì)分離D在溶有DNA的2molL氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，攪拌后取濾液進(jìn)行以后實(shí)驗(yàn)6.（09興化）某同學(xué)以菜花為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，步驟如下：步驟一：稱取30g菜花，去梗取花，切碎。步驟二：將碎菜花放入研缽中，倒入10mL研磨液，充分研磨10min。步驟三：在漏斗中墊上濾紙，將菜花研磨液過(guò)濾到燒杯中。在冰箱中放置幾分鐘，取上清液。步驟四：將一倍體積的上清液倒入兩倍體積的某溶液中，并用玻璃棒緩緩、輕輕地?cái)嚢枞芤?。將絮狀物纏繞在玻璃棒上。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）請(qǐng)指出并改正該同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中的錯(cuò)誤：_。（2）步驟二的目的是使菜花細(xì)胞破碎，釋放DNA，加入研磨液的主要成分有_和_等。（3）如要使步驟三所得上清液中雜質(zhì)減少，可進(jìn)行_操作后再置于冰箱。（4）步驟四中所用兩倍體積的某溶液為_(kāi)，需“緩緩、輕輕地”攪拌溶液的原因是_ _。（5）簡(jiǎn)要說(shuō)明鑒定步驟四所得絮狀物是DNA的基本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路：_（1）濾紙應(yīng)改為紗布（或尼龍布） （2）洗滌劑 NaCl （3）離心（4）體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精 防止DNA斷裂（5）將絮狀物溶于0.015mol/L（或2mol/L）的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴加熱，觀察顏色變化，同時(shí)用相應(yīng)濃度的NaCl做對(duì)照實(shí)驗(yàn)。（2分）