微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊.doc

寬城區(qū)疾病預(yù)防控制中心生物安全管理手冊微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理手冊寬城區(qū)疾病預(yù)防控制中心生物安全管理體系文件目錄 序號名稱備注1實(shí)驗(yàn)室人員和項(xiàng)目準(zhǔn)入制度2人員培訓(xùn)考核制度3人員健康監(jiān)護(hù)制度4生物安全檢查制度5實(shí)驗(yàn)室人員生物安全行為規(guī)范6事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度7實(shí)驗(yàn)室生物危險(xiǎn)標(biāo)識使用規(guī)定8實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度9實(shí)驗(yàn)室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度10實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理制度11實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度12實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案13實(shí)驗(yàn)活動生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 一、 實(shí)驗(yàn)室人員和項(xiàng)目準(zhǔn)入制度1.目的規(guī)范生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的使用和管理，保證操作人員，實(shí)驗(yàn)對象和環(huán)境安全，確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。2.適用范圍適用于生物安全二級實(shí)驗(yàn)室安全運(yùn)轉(zhuǎn)及在此環(huán)境下的所有檢測工作。3.職責(zé)進(jìn)入生物安全二級實(shí)驗(yàn)室從事檢測工作的所有人員嚴(yán)格按照本規(guī)定執(zhí)行。4.具體要求：4.1概述4.1.1生物安全二級實(shí)驗(yàn)室用于對檢驗(yàn)者和環(huán)境有中度潛在危險(xiǎn)樣品的各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，必須符合下列規(guī)定：4.1.1.1具備操作資質(zhì)的人員可在生物安全二級實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作，其他任何人未經(jīng)許可禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。4.1.1.2在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的一切活動，必須遵照生物安全手冊的規(guī)定進(jìn)行。4.1.1.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)污染的空氣需通過高效過濾器后方能排出室外。4.1.1.4實(shí)驗(yàn)室內(nèi)產(chǎn)生的污水，必須經(jīng)過消毒后方可進(jìn)入公共污水系統(tǒng)。4.1.1.5實(shí)驗(yàn)室的所有廢棄品，必須通過高壓滅菌后才能處理和清洗。必須攜出實(shí)驗(yàn)室的中間實(shí)驗(yàn)材料、更換維修的儀器設(shè)備、也只有在確保無病原微生物污染的條件下，才能攜出實(shí)驗(yàn)室。4.1.1.6實(shí)驗(yàn)室內(nèi)準(zhǔn)備二級全排式生物安全柜，所有可能造成污染的能夠置于生物安全柜內(nèi)的實(shí)驗(yàn)操作，置其內(nèi)進(jìn)行，以保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空間的安全。4.1.2實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的安全性要求本手冊規(guī)定的各項(xiàng)要求，首先是為了保證實(shí)驗(yàn)室的安全運(yùn)行，包括防止實(shí)驗(yàn)室工作人員的感染、防止實(shí)驗(yàn)室操作的病原微生物對環(huán)境的污染、防止檢測樣品的污染，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。4.1.3實(shí)驗(yàn)室工作的質(zhì)量要求本手冊規(guī)定的各項(xiàng)要求，同時(shí)也是為了保證實(shí)驗(yàn)室的工作質(zhì)量，即：實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的各項(xiàng)結(jié)果和數(shù)據(jù)，必須準(zhǔn)確可靠：實(shí)驗(yàn)室出具的檢驗(yàn)報(bào)告，必須明確完整。4.2實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程4.2.1啟動實(shí)驗(yàn)室開始工作前半小時(shí)。開啟實(shí)驗(yàn)室主電源，使實(shí)驗(yàn)室及生物安全柜投入運(yùn)行。開啟順序：開啟屋頂風(fēng)機(jī)開啟全排風(fēng)開啟空調(diào)開啟安全柜打開房間紫外線燈。4.2.2個人防護(hù)工作人員按照下列要求進(jìn)行個人防護(hù)，才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域：（1）在更衣室中換穿工作服和工作鞋。（2）在清潔區(qū)內(nèi)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求做好防護(hù)。（3）實(shí)驗(yàn)中需使用腐蝕性試劑時(shí)，在膠乳手套外加帶一次性塑料手套；需要進(jìn)行可能造成污染材料飛濺的操作時(shí)，需加戴防護(hù)面罩。4.2.3進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室4.2.3.1工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)，每進(jìn)入一道門，應(yīng)將此門關(guān)好，再開啟下一道門。4.2.3.2進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，關(guān)閉房間紫外線燈。4.2.3.3檢查實(shí)驗(yàn)室運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常。4.2.3.4做好開始實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)準(zhǔn)備。4.2.4啟用標(biāo)本、試劑一切準(zhǔn)備工作就緒后，才將標(biāo)本和試劑從冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。用完立即歸位，使其在冰箱外停留的時(shí)間盡可能短。4.2.5操作4.2.5.1嚴(yán)格按照試劑使用說明進(jìn)行操作。洗滌時(shí)避免液體材料飛濺。吸取、稀釋液體時(shí)，將吸管插入試管底部，用吸球緩慢吸取，避免產(chǎn)生汽泡或汽溶膠。4.2.5.2離心時(shí)，應(yīng)使用雙蓋封閉式離心機(jī)和全封閉試管，每管離心液總量低于最高容量1個刻度單位：平衡時(shí)不得有液體滲陋到管套中，離心機(jī)使用后立即用消毒液擦洗消毒。4.2.6觀察結(jié)果不打開容器的觀察允許在生物安全柜外進(jìn)行，否則，必須在生物安全柜內(nèi)觀察結(jié)果。4.2.7準(zhǔn)予攜出實(shí)驗(yàn)室的材料確保不含感染性的實(shí)驗(yàn)材料，才可以從實(shí)驗(yàn)室攜出。容器表面應(yīng)用75%乙醇消毒。4.2.8實(shí)驗(yàn)室清潔每一實(shí)驗(yàn)步驟完成后，均應(yīng)清理臺面。所有用過的試劑均應(yīng)歸還原位；使過的吸管等長形器材放入儲存污物的盒內(nèi)；鋒利品放入專用的污物盒；紙巾軟物品放入污物袋；在臺面上噴灑75%乙醇，保持20分鐘，然后以紙巾擦干。實(shí)驗(yàn)室的其他表面，也應(yīng)經(jīng)常用75%乙醇擦拭。4.2.9污染物品處理放置污染物品的容器裝滿時(shí)，應(yīng)更換新的容器。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對用過的污染物品進(jìn)行高壓消毒。4.2.10更換工作服。工作完畢的更衣順序是，先用消毒液浸泡手套5分鐘，然后依次除去口罩、防護(hù)服、鞋套，放入高壓消毒袋內(nèi)，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。4.2.11實(shí)驗(yàn)室消毒每次工作完畢，生物安全柜內(nèi)用75%酒精擦拭臺面，消毒液消毒地面，開啟紫外線燈照射1小時(shí)后，逐一關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室送風(fēng)和通風(fēng)設(shè)備關(guān)閉順序與開啟順序相反。4.3實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告4.3.1實(shí)驗(yàn)記錄在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)使用鉛筆書寫。記錄內(nèi)容應(yīng)簡明扼要，包括實(shí)驗(yàn)日期，實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)的基本條件等提示記憶的內(nèi)容，并較詳細(xì)地記載觀察到的實(shí)際現(xiàn)象及數(shù)據(jù)結(jié)果。要求字跡應(yīng)清晰，數(shù)字成行成列，以避免錄入錯誤。4.3.2實(shí)驗(yàn)記錄帶出實(shí)驗(yàn)室將上述記錄在紙張上的實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)用80福爾馬林，密閉熏蒸消毒6小時(shí)后方可帶出實(shí)驗(yàn)室?；蜷w著實(shí)驗(yàn)室玻璃窗由清潔區(qū)工作人員抄錄一份。4.3.3實(shí)驗(yàn)記錄錄入計(jì)算機(jī)實(shí)驗(yàn)記錄必須在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后24小時(shí)內(nèi)錄入計(jì)算機(jī)。記錄準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)報(bào)告和錄入時(shí)間。再按照由實(shí)驗(yàn)室?guī)С龅臅鴮懹涗洠瑴?zhǔn)確地記載實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)。錄入后，書寫記錄保存1周，以備查驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)記錄錄入后，一般不得修改。因數(shù)據(jù)記錄錯誤，錄入錯誤，或?qū)嶋H觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果改變，必須更改記錄時(shí)，不要刪除已經(jīng)錄入的描述和數(shù)據(jù)，而應(yīng)錄入新的描寫和數(shù)據(jù)，并注明更改原因。4.3.4實(shí)驗(yàn)室記錄備份每月一次，將上月計(jì)算機(jī)的實(shí)驗(yàn)記錄做出備份，備份的實(shí)驗(yàn)記錄不得修改。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期檢查實(shí)驗(yàn)記錄，核對備份與原始的實(shí)驗(yàn)記錄，對記錄中的缺陷提出修改意見。4.3.5實(shí)驗(yàn)記錄的保存年限實(shí)驗(yàn)記錄保存一年。已使用的實(shí)驗(yàn)記錄(出具報(bào)告，發(fā)表論文，或以其他方式引用)，在使用后再保存一年。如無特殊必要，備份的實(shí)驗(yàn)記錄一般永久保存。4.3.6出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告在需要出具正式實(shí)驗(yàn)報(bào)告的場合，報(bào)告由實(shí)驗(yàn)者填寫署名，交實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人記錄核對后簽字，再由單位簽發(fā)人簽字并加蓋公章發(fā)出。4.4標(biāo)本保管規(guī)則4.4.1標(biāo)本進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室4.4.1.1出實(shí)驗(yàn)室采集的標(biāo)本，本實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一登記編號，能反映出標(biāo)本的來源、種類、性質(zhì)、目的等相關(guān)信息。4.4.1.2有關(guān)單位送檢的標(biāo)本由實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一登記編號，注明送檢單位、送檢時(shí)間、種類、性質(zhì)、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡认嚓P(guān)信息。4.4.2標(biāo)本的保管根據(jù)標(biāo)本的性質(zhì)、目的進(jìn)行保存，每分標(biāo)本分兩份，一份檢測時(shí)使用，另一份備用。標(biāo)本因各種原因損失時(shí)，啟用后備標(biāo)本，并重新備份。4.4.3標(biāo)本的銷毀確定不用的標(biāo)本，采用高壓滅菌后焚燒的方式銷毀。4.5實(shí)驗(yàn)室裝備保養(yǎng)4.5.1實(shí)驗(yàn)室定期保養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的定期保養(yǎng)按照提供實(shí)驗(yàn)室設(shè)備廠商的規(guī)定進(jìn)行，主要是對機(jī)械和電器部分進(jìn)行維護(hù)。4.5.2實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的保養(yǎng)和維護(hù)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的儀器設(shè)備的保養(yǎng)由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行。維護(hù)有專業(yè)人員進(jìn)行。生物安全柜的濾器必須按說明書規(guī)定的時(shí)間定期由專業(yè)人員更換，其它儀器設(shè)備也應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要清潔保養(yǎng)。4.5.3實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的維修更換儀器設(shè)備需要更新，需要離開實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行維修，或損壞需要更換，以及必須臨時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室使用，使用完畢后必須撤出實(shí)驗(yàn)室的貴重儀器，在撤出實(shí)驗(yàn)室之前必須以恰當(dāng)?shù)姆绞絿?yán)格消毒，方可處理或重新投入使用。4.6意外情況處理4.6.1實(shí)驗(yàn)室意外事件的處理原則4.6.1.1造成或可能造成實(shí)驗(yàn)室污染，但未造成人身傷害的實(shí)驗(yàn)室報(bào)告，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。例如實(shí)驗(yàn)過程中。由于標(biāo)本、試劑益處濺落造成操作臺或地面的污染等，應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，待消毒液徹底浸泡30分鐘后，對污染的物品進(jìn)行清理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全2級實(shí)驗(yàn)室意外情況登記與處理記錄表，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)指導(dǎo)這些處理活動，并檢查處理效果。4.6.1.2實(shí)驗(yàn)室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂、離心機(jī)事故等，應(yīng)立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，張貼禁止入內(nèi)的標(biāo)識。用消毒液噴霧和紫外線照射污染的區(qū)域，24小時(shí)再進(jìn)行終末消毒，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人除立即采取對應(yīng)措施外，應(yīng)向上級部門報(bào)告，并填寫意外情況登記與處理記錄表。4.6.1.3實(shí)驗(yàn)室工作人員在沒有強(qiáng)毒微生物時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)受到意外傷害，如割傷、燒傷、燙傷等，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)昏倒或發(fā)生身體嚴(yán)重不適，也有實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損的平凡表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用無菌生理鹽水沖洗。由在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)人員或派人迅速著裝進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，清除造成傷害的原因，清理實(shí)驗(yàn)材料，幫助受傷人員緊急處理并撤離實(shí)驗(yàn)室。受到傷害的人員應(yīng)進(jìn)行治療并休息，在身體狀況未恢復(fù)之前，不得重新進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。實(shí)驗(yàn)室在經(jīng)過整理，消除了造成傷害的故障之后，方可重新使用。4.6.1.4傷害事故可能導(dǎo)致被強(qiáng)毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、黏膜暴露等途徑接觸到感染性液體，或在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面，意外接種等情況，首先進(jìn)行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂和清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。暴露的黏膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)向上級部門報(bào)告，對受傷害者進(jìn)行隔離觀察，同時(shí)根據(jù)情況預(yù)防性用藥，并寫出職業(yè)暴露后預(yù)防感染的評價(jià)和處理方案。4.6.2實(shí)驗(yàn)室人員的隔離觀察發(fā)生可疑的實(shí)驗(yàn)室感染事故時(shí)，應(yīng)對被感染的人員進(jìn)行隔離觀察。如果判定為法定的傳染病感染，應(yīng)按傳染病防治法的規(guī)定報(bào)告，同時(shí)給予有效的隔離治療二、 人員培訓(xùn)考核制度1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員的培訓(xùn)考核2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員培訓(xùn)考核制度3.1.實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)新工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前，必須經(jīng)過培訓(xùn)，取得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的資格。培訓(xùn)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織進(jìn)行，并指定熟悉實(shí)驗(yàn)室工作的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括：（1）相關(guān)檢驗(yàn)的國家診斷標(biāo)準(zhǔn)、處理原則以及本手冊內(nèi)容。（2）實(shí)驗(yàn)室所有設(shè)備的使用方法。（3）個人防護(hù)方法。（4）實(shí)驗(yàn)室基本技術(shù)。（5）實(shí)驗(yàn)室消毒凈化的方法。3.2.實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格考試新工作人員經(jīng)過培訓(xùn)后，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織考核。通過考核后，還須與有資格的工作人員一同工作3個月，才能獲得獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室操作的正式資格。三、 人員健康監(jiān)護(hù)制度1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員的健康監(jiān)護(hù)2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員健康監(jiān)護(hù)制度3.1工作人員從事工作前必須進(jìn)行HIV抗體和甲肝、乙肝、丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測，每半年進(jìn)行一次HIV抗體復(fù)檢，并保留血樣一年以上。3.2工作人員應(yīng)每年進(jìn)行一次體檢，并將可能涉及生物安全危害的體檢結(jié)果存檔，以便判斷生物安全危害是否發(fā)生。3.3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立人員健康監(jiān)護(hù)檔案，檔案內(nèi)容包括既往病史、檢測結(jié)果、免疫接種史等，以便對從事涉及生物安全危害人員的健康狀況進(jìn)行跟蹤。3.4實(shí)驗(yàn)室工作人員的適合工作狀態(tài)實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下，才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。出現(xiàn)下列情況，不應(yīng)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室：身體出現(xiàn)開放性損傷；患發(fā)熱性疾病：感冒、上呼吸道感染；其他導(dǎo)致抵抗力下降的狀況：妊娠、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)連續(xù)工作4小時(shí)以上或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。四、 生物安全檢查制度1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室生物安全，保證設(shè)備正常運(yùn)行。2.適用范圍適用于生物安全涉及的儀器設(shè)備（比如生物安全柜等）3、生物安全檢查制度實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，每2個月以細(xì)菌培養(yǎng)的方式進(jìn)行安全性檢測。生物安全柜內(nèi)放置平板培養(yǎng)基2個，實(shí)驗(yàn)室4角和中間各放置1個，半污染區(qū)放置2個。將平皿敞開5分鐘，然后蓋上，每平板菌落數(shù)平均不得超過2個，超過標(biāo)準(zhǔn)，需要對實(shí)驗(yàn)室或污染部位進(jìn)行甲醛熏蒸消毒。五、 實(shí)驗(yàn)室人員生物安全行為規(guī)范1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室人員的生物安全行為規(guī)范2.適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3生物安全組織管理與行為規(guī)范3.1組織框架圖單位法人或授權(quán)負(fù)責(zé)人馬志馴實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人陳英生物安全員李萍、郭琳實(shí)驗(yàn)室工作人員（趙琳珊、馬玉梅、郭琳、李萍）3.2各類人員相應(yīng)行為規(guī)范3.2.1單位法人或授權(quán)負(fù)責(zé)人（1）負(fù)責(zé)組織生物安全實(shí)驗(yàn)室的立項(xiàng)、選址，施工隊(duì)的資質(zhì)驗(yàn)證。（2）負(fù)責(zé)成立生物安全委員會負(fù)責(zé)生物安全，制定管理制度，監(jiān)督有關(guān)法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行情況。（3）負(fù)責(zé)組織對造成外環(huán)境污染、實(shí)驗(yàn)室污染、人身傷害事故的調(diào)查與處理。3.2.2實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人（1）組織制定安全手冊、操作規(guī)程等文件。（2）按照上述文件要求組織實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)工作，保證實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的安全和實(shí)驗(yàn)室工作質(zhì)量的準(zhǔn)確可靠。（3）組織進(jìn)入生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的人員進(jìn)行業(yè)務(wù)培訓(xùn)，保證工作人員熟知微生物的操作規(guī)程和技術(shù)，掌握實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的特殊要求并熟練操作，對培訓(xùn)的結(jié)果進(jìn)行考核，決定進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格。3.2.3生物安全員（1）對技術(shù)方法、化學(xué)品、材料與設(shè)備定期進(jìn)行內(nèi)部安全檢查，確保其符合國家和地方的有關(guān)安全與衛(wèi)生政策與標(biāo)準(zhǔn)。一旦發(fā)現(xiàn)不安全因素，立即停止工作并上報(bào)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。（2）與有關(guān)人員討論研究安全政策的問題。（3）確認(rèn)所有工作人員都具有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作的資格。（4）為所有人員提供連續(xù)性的安全要教育與指導(dǎo)。（5）針對操作程序、技術(shù)方法和各種條件要求的變更，以及新設(shè)備的引進(jìn)，為全體工作人員提供最新的安全文獻(xiàn)和信息資料。（6）定期檢查實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)技術(shù)參數(shù)，組織對實(shí)驗(yàn)室裝備的常規(guī)保養(yǎng)。（7）所有可能涉及潛在傳染性或有毒物質(zhì)泄露的意外事件與事故，即使沒有人員受傷或暴露，也要予以調(diào)查，并向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人員和安全委員會報(bào)告調(diào)查結(jié)果和提出建議。（8）當(dāng)任何實(shí)驗(yàn)室工作人員的疾病或缺勤與工作有關(guān)，并被記錄為可能的實(shí)驗(yàn)室獲得性感染時(shí)，協(xié)助隨訪調(diào)查其疾病或缺勤情況。（9）確保在發(fā)生傳染性物質(zhì)濺灑其他事件時(shí)，監(jiān)督消毒凈化程序得到正確執(zhí)行；并對這類意外事件和事故進(jìn)行詳細(xì)的書面記錄。（10）確保任何需要修理和維護(hù)的儀器設(shè)備在消毒與凈化之后方可運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。生物安全員由主管檢驗(yàn)師以上的人員承擔(dān)，必須具備如下資質(zhì)：具有實(shí)際工作的經(jīng)驗(yàn)；對操作的微生物有全面、完整的了解；具有組織實(shí)驗(yàn)室工作的能力；對工作有高度的責(zé)任心。3.2.4實(shí)驗(yàn)室工作人員（1）生物安全二級實(shí)驗(yàn)室，只允許進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室目的規(guī)定的操作，與此無關(guān)的活動一律不得進(jìn)行。（2）必須按規(guī)定進(jìn)行個人防護(hù)，方得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。（3）保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔，每項(xiàng)工作完成之后，必須清理和清潔臺面，離開實(shí)驗(yàn)室（4）注意個人的健康狀況，出現(xiàn)身體不適情況，應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。（5）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止飲食、吸煙、訪客和喧嘩。實(shí)驗(yàn)室工作人員的技術(shù)要求（1）必須了解實(shí)驗(yàn)室安全原理，熟悉本手冊的各項(xiàng)規(guī)定，熟記緊急情況下的正確應(yīng)對措施。（2）掌握病原微生物操作的基本要求，正確、安全地實(shí)用標(biāo)本，避免污染，以獲得準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（3）必須熟悉相關(guān)實(shí)驗(yàn)的國家標(biāo)準(zhǔn)，能夠完成標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的任務(wù)。（4）一旦發(fā)生意外，立即向生物安全員匯報(bào)。4、個人防護(hù)程序4.1個人防護(hù)用品的使用要求4.1.1口罩：應(yīng)使用N95型口罩或12-16層棉紗口罩，最好使用防濺口罩如31860型如有胡須應(yīng)刮去，使用應(yīng)始終保持口罩與臉緊貼。一次性使用口罩應(yīng)在使用后4小時(shí)丟棄，不能重復(fù)使用，不能與他人共同使用。如口罩遭到分泌物飛濺或弄濕，應(yīng)嚴(yán)格洗手后，帶上清潔手套更換。4.1.2防護(hù)面罩：實(shí)驗(yàn)人員在進(jìn)行工作時(shí)應(yīng)佩帶防護(hù)面罩，防護(hù)面罩要求透亮度好，有較好的防飛濺功能，重復(fù)使用前應(yīng)進(jìn)行徹底消毒。4.1.3防護(hù)服：實(shí)驗(yàn)人員工作時(shí)應(yīng)穿戴一次性防護(hù)服。最好是連體式，防水及抗靜電性能好，無過濾作用。袖口、腳踝口應(yīng)為彈性收口，面部、腰部應(yīng)有彈性收口或拉繩收口。4.1.4手套和鞋套：鞋套應(yīng)為一次性防水鞋套。手套為一次性膠乳手套，須戴兩副，外層手套應(yīng)根據(jù)需要及時(shí)更換。4.2個人防護(hù)用品的穿戴順序4.2.1進(jìn)入清潔區(qū)前穿上普通白大衣和實(shí)驗(yàn)室專用鞋。4.2.2進(jìn)入清潔區(qū)時(shí)穿戴一次性口罩，手術(shù)帽，一次性隔離衣、兩副膠乳手套和兩副一次性鞋套。注意將手套和鞋套分別套在袖口和褲口外。4.2.3戴N95口罩及防護(hù)面罩、穿防水隔離服、防水鞋套、再戴外層手套。4.3個人防護(hù)用品脫卸順序4.3.1完成實(shí)驗(yàn)后，在半污染區(qū)先用75%乙醇溶液消毒外層手套，然后脫掉外層手套在脫另一只手套時(shí)，手指只能接觸手套的里部。4.3.2著內(nèi)層手套依次脫掉防護(hù)面罩、N95口罩、防水鞋套及防水隔離服脫隔離服時(shí)，不要接觸隔離服的外表面，應(yīng)從里反脫，以保里面超外。將脫掉的物品放入專用消毒袋中就地高壓消毒。防護(hù)面罩等重復(fù)使用的物品立即放入消毒液內(nèi)，按有關(guān)規(guī)定消毒處理。4.3.3脫掉外層一次性鞋套，用75%乙醇溶液消毒內(nèi)層手套。4.3.4戴者手套脫掉一次性口罩、手術(shù)帽、內(nèi)層鞋套、然后脫掉一次性隔離衣及手套，放入消毒袋高壓消毒。4.3.5用消毒巾擦拭面部，用碘伏徹底消毒雙手，并用流動水沖洗。六、 事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度1、目的糾正檢驗(yàn)工作中的差錯，及時(shí)處理責(zé)任事故，吸取事故的教訓(xùn)，確保檢驗(yàn)設(shè)備和人員的安全。2、范圍適用于檢驗(yàn)工作中出現(xiàn)的事故分析報(bào)告、調(diào)查和處理。3、職責(zé)3.1 事故責(zé)任部門負(fù)責(zé)人填寫事故報(bào)告單，報(bào)告事故發(fā)生的原因及采取的措施。3.2 業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和有關(guān)科室負(fù)責(zé)人協(xié)助中心負(fù)責(zé)人做好事故的調(diào)查處理工作。4、工作程序4.1事故分類凡違反各項(xiàng)規(guī)定所造成的事故均為責(zé)任事故，按其經(jīng)濟(jì)損失和人身傷害和大小分為以下幾種：大小事故界限表損失情況小事故一般事故大事故重大事故經(jīng)濟(jì)損失100元1001000元100010000元10000元人身傷亡一人受傷，休工3日一人受傷，休工3 日以上兩人受傷或一人受傷，休工1-6個月三人以上受傷，休工一年以上，或一人致殘或死亡。 4.2 事故的處理4.2.1事故發(fā)生后，應(yīng)立即采取有效措施，防止事態(tài)擴(kuò)大，搶救受傷人員和儀器設(shè)備，報(bào)告上級領(lǐng)導(dǎo)。4.2.2 事故發(fā)生3日內(nèi)，事故責(zé)任人寫出事故發(fā)生原因、經(jīng)過及教訓(xùn)、責(zé)任，并由發(fā)生事故科室填寫事故報(bào)告單，報(bào)業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科。4.2.3 事故發(fā)生后5日內(nèi)，由業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科協(xié)助中心負(fù)責(zé)人主持召開事故分析會，對事故進(jìn)行分析并對事故責(zé)任人作出處理。事故責(zé)任科室采取糾正措施，防止類似事故再發(fā)生。4.2.4 重大事故發(fā)生后一周內(nèi)，由中心負(fù)責(zé)人向上級主管部門送交事故處理專題報(bào)告。4.2.5 事故報(bào)告處理單等記錄材料由業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科歸檔保存。大事故和重大事故記入事故責(zé)任人技術(shù)檔案。七、 實(shí)驗(yàn)室生物危險(xiǎn)標(biāo)識使用規(guī)定1.目的規(guī)范生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的使用和管理。2.適用范圍適用于生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。3.具體要求：3.1在具有生物安全二級實(shí)驗(yàn)室門口加貼專門的生物安全警示標(biāo)識，以避免無關(guān)人員進(jìn)入相關(guān)區(qū)域，造成感染的危險(xiǎn)。3.2在有可能對人員造成威脅的生物標(biāo)本儲存處加貼生物安全警示標(biāo)識，以防無關(guān)人員將危險(xiǎn)標(biāo)本帶入安全區(qū)域?qū)θ藛T造成威脅。八、 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度1.目的確保生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的正常運(yùn)行、實(shí)驗(yàn)人員、物品和環(huán)境的安全2.適應(yīng)范圍適應(yīng)于生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。3.職責(zé)進(jìn)入生物安全二級實(shí)驗(yàn)室工作的所有工作人員嚴(yán)格遵照本管理制度執(zhí)行。4.基本制度4.1在主實(shí)驗(yàn)室設(shè)置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。入口處貼有醒目的生物危險(xiǎn)標(biāo)志。4.2非實(shí)驗(yàn)室有關(guān)人員和物品不得進(jìn)入。4.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得進(jìn)食和飲水，或者進(jìn)行其他與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動。4.4實(shí)驗(yàn)室工作人員、外來合作者、進(jìn)修和學(xué)習(xí)人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室及其崗位之前必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的批準(zhǔn)。4.5實(shí)驗(yàn)過程中，嚴(yán)格按有關(guān)操作程序操作，降低剪除和氣溶膠的產(chǎn)生。4.6用移液器吸取液體，嚴(yán)禁口吸。4.7實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須是經(jīng)受過專業(yè)培訓(xùn)的技術(shù)人員。在獨(dú)立進(jìn)行工作前還需在中高級實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員指導(dǎo)下進(jìn)行上崗培訓(xùn)，達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)，方可開始工作。4.8實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須被告知實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)并接受實(shí)驗(yàn)室安全教育，自愿從事實(shí)驗(yàn)室工作。4.9實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的所有制度、規(guī)定和操作規(guī)程。4.10實(shí)驗(yàn)室的工作人員在開始工作前必須留本底血清進(jìn)行有關(guān)的檢測，以后定期復(fù)檢。如有疫苗必須進(jìn)行免疫注射。4.11所有培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室前必須經(jīng)可行的消毒方法進(jìn)行消毒。4.12工作前應(yīng)消毒，活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒。5.實(shí)驗(yàn)室特殊管理制度5.1進(jìn)行感染性實(shí)驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)禁止他人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意方可入內(nèi)，免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的人員不許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)同意方可入內(nèi)。5.2實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前必須進(jìn)行有效的培養(yǎng)和模擬訓(xùn)練。掌握預(yù)防暴露和暴露后的消毒處理程序。5.3實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)接受必要的免疫接種和相應(yīng)的抗體水品測定。5.4實(shí)驗(yàn)室事故處理：工作人員在操作過程中發(fā)生意外，如針刺和切傷、皮膚污染、感染性標(biāo)本濺及體表和口鼻眼內(nèi)、衣物污染實(shí)驗(yàn)臺面等均視為安全事故，應(yīng)視事故類型的不同情況，立即進(jìn)行緊急處理。具體措施按實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案執(zhí)行。5.5填寫意外情況登記與處理記錄表，并按規(guī)定報(bào)告給有關(guān)部門。5.6處特殊情況外，禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用銳器。5.7剩余的標(biāo)本應(yīng)密封后置于適當(dāng)條件下保存。5.8實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)使用鑒定合格的二級生物安全柜。5.9實(shí)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維修前必須嚴(yán)格消毒，方可運(yùn)出。九、 實(shí)驗(yàn)室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度1.目的規(guī)范實(shí)驗(yàn)室菌（毒）種和生物樣本的保管和檔案管理2.適用范圍實(shí)驗(yàn)室菌（毒）種和生物樣本的處理和檔案管理3、實(shí)驗(yàn)室菌（毒）種和生物樣本的保管3.1按國家規(guī)定可以保存的菌（毒）種，由指定的專人負(fù)責(zé)登記、保存和管理。按期傳代、鑒定，必須在無菌室或接種罩內(nèi)進(jìn)行，并做好有關(guān)記錄。在保存過程中發(fā)現(xiàn)菌（毒）種變異或死亡，應(yīng)及時(shí)上報(bào)科長和中心主任。3.2本區(qū)檢出的地方菌（毒）株應(yīng)及時(shí)上報(bào)，因工作需要暫時(shí)保留的菌（毒）株也應(yīng)按上級規(guī)定的時(shí)間進(jìn)行銷毀處理。新發(fā)現(xiàn)的菌（毒）株，要做好原始記錄，并上報(bào)主管部門復(fù)核確認(rèn)。3.3菌（毒）種必須每種設(shè)一記錄卡，其內(nèi)容包括：名稱、編號、來源、分離日期、引進(jìn)日期、鑒定日期、鑒定結(jié)果、鑒定者、審核者、傳代情況、所用培養(yǎng)基、保存方法、溫度、使用轉(zhuǎn)移及銷毀情況、保存者、部門負(fù)責(zé)人等。3.4向上級主管部門申請索取菌（毒）種和向下級有關(guān)部門發(fā)放菌（毒）種時(shí)，應(yīng)有2人參加辦理，嚴(yán)格執(zhí)行國家有關(guān)規(guī)定，手續(xù)要完備，并認(rèn)真做好記錄備查。3.5一、二類菌（毒）種，應(yīng)派專人向提供單位領(lǐng)取，不得郵寄；三類菌（毒）種的郵寄必須持有郵寄單位證明，并按照菌（毒）種郵寄與包裝的有關(guān)規(guī)定辦理。3.6未經(jīng)上級批準(zhǔn)，任何單位及個人不得以工作之便，進(jìn)行國際間各類菌（毒）種交流，做好菌（毒）種安全防范工作。4、檔案管理制度4.1、非實(shí)驗(yàn)室人員不得隨意查看實(shí)驗(yàn)室記錄4.2、實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)妥善保存各種樣品登記本、報(bào)告單及實(shí)驗(yàn)室原始記錄，不得擅自修改和銷毀4.3、專人負(fù)責(zé)保管感染者檔案4.4、未經(jīng)領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)不得向無關(guān)人員或單位提供任何實(shí)驗(yàn)室及感染者信息4.5、HIV抗體初篩實(shí)驗(yàn)室檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果，須進(jìn)一步確認(rèn)，確認(rèn)前不得出具陽性報(bào)告及告知受檢者本人或有關(guān)單位十、 實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理制度1.目的規(guī)范廢棄物處理2.適用范圍尖銳器具和其他廢棄物的處理。3.具體方法：3.1尖銳器具的處理3.1.1尖銳器具，如針、注射器等，除特殊情況外，禁止在實(shí)驗(yàn)室使用，盡可能用塑料器材代替玻璃器材。3.1.2注射和吸取感染性材料時(shí)，盡可能使用一次性注射器。用過的針頭禁止折段、剪段、折段、重新蓋帽或從注射器上取下，禁止用手直接操作。用過的針頭、注射器直接放入防刺破的盛廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅(jiān)壁容器中，進(jìn)行高壓消毒處理。3.1.3盡可能使用帶針頭套的的注射器、無針頭的系統(tǒng)和其他安全裝置。3.1.4打碎的玻璃器具，禁止用手直接清理，必須使用其他工具，如掃把、簸箕、夾子或鑷子等。盛污染針、銳器及碎玻璃的容器在丟棄前必須徹底消毒。3.2廢棄物的處理3.2.1實(shí)驗(yàn)后的廢棄物如不及時(shí)處置則會污染環(huán)境，從而對人造成危害，因此有關(guān)人員必須嚴(yán)格按照規(guī)定執(zhí)行。3.2.2實(shí)驗(yàn)樣本在處理和進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測時(shí)產(chǎn)生的廢棄物，如一次性針頭、離心管、平皿等應(yīng)放入適當(dāng)?shù)娜萜骱蛧?yán)格防漏的高壓袋內(nèi)，待實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即就地高壓消毒。3.2.3實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的污染性液體物質(zhì)、廢棄的液體標(biāo)本等放在盛有消毒液的嚴(yán)格防滲漏的專用容器中，并及時(shí)加蓋。3.2.4進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所必須使用的容器，如針頭、一次性注射器、玻璃器具、手術(shù)刀片等，放入專用的堅(jiān)壁容器內(nèi)，加蓋密封。3.2.5以上所有盛裝廢棄物的容器，在每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，就地高壓消毒。3.2.6高壓鍋應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，嚴(yán)格按使用說明操作，確保在121 條件下，高壓30分鐘，以達(dá)到消毒要求。3.2.7所有實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物，必須經(jīng)嚴(yán)格高壓消毒后方能運(yùn)出實(shí)驗(yàn)區(qū)，并送至指定地點(diǎn)集中焚燒處理。十一、實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度1.目的規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室和生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的消毒隔離工作。2.適用范圍微生物實(shí)驗(yàn)室和生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。3.職責(zé)所有工作人員都必須遵從本規(guī)程。4.具體步驟4.1實(shí)驗(yàn)室基本要求4.1.1實(shí)驗(yàn)室相對獨(dú)立，實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)包括實(shí)驗(yàn)間及緩沖間，明確劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，并有明顯標(biāo)識。4.1.2各區(qū)域交叉處應(yīng)設(shè)置有效氯2000的含氯消毒劑溶液浸濕的腳墊。4.1.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有物品應(yīng)專用，須帶出時(shí)必須嚴(yán)格消毒。4.1.4實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿戴好個人防護(hù)用品，如隔離衣、防護(hù)眼睛、口罩、一次性手套等。實(shí)驗(yàn)過程中注意自身防護(hù)，并防止操縱過程中的交叉污染。4.1.5培養(yǎng)基、組織、體液等必須放在防漏密閉的容器中儲運(yùn)。4.1.6血清學(xué)試驗(yàn)、樣品的處理和分裝應(yīng)在BSL-2安全柜內(nèi)進(jìn)行。4.1.7樣品離心使用密封的離心杯，以防濺出。4.1.8實(shí)驗(yàn)過程中使用的器材、實(shí)驗(yàn)廢棄物均應(yīng)按廢棄物處理程序進(jìn)行消毒處理。4.1.9當(dāng)傳染性標(biāo)本溢出或?yàn)R出后，應(yīng)有專業(yè)人員立即消毒和清理。4.1.10實(shí)驗(yàn)完畢，先消毒物體表面，再按規(guī)定程序脫下個人防護(hù)用品放入包裝袋內(nèi)就地高壓消毒，并進(jìn)行空氣消毒。4.1.11離開實(shí)驗(yàn)室前，必須按有關(guān)規(guī)定消毒雙手。4.2消毒方法4.2.1儀器等表面消毒：工作結(jié)束后，用含有效氯1000的消毒液或75%乙醇溶液擦拭消毒，作用20分鐘以上。4.2.2實(shí)驗(yàn)器材的分類消毒：將使用后的銳器方入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內(nèi)，121高壓消毒30分鐘。其他器材方入有效氯為2000mg/L的含氯消毒液內(nèi)浸泡1小時(shí)以上。處理時(shí)應(yīng)避免皮膚損傷。4.2.3工作臺等物體表面消毒：工作完畢，用含有效氯2000mg/L的消毒液或75乙醇溶液擦拭消毒，作用20分鐘以上。4.2.4個人防護(hù)用品消毒：實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121高壓消毒30分鐘。防護(hù)鏡浸泡在75乙醇或有效氯為1000mg/L的含氯消毒劑中，作用30-60分鐘。4.2.5手的消毒：用典伏或75的乙醇擦拭，作用1-3分鐘。4.2.6空氣消毒：每次實(shí)驗(yàn)前后用紫外燈照射消毒，每次不少于1小時(shí)，每立方米空間安裝紫外燈瓦數(shù)1.5W，距紫外燈1米處照射強(qiáng)度70W/。4.2.7這張消毒：應(yīng)用80ml/m3福爾馬林，密閉熏蒸消毒6小時(shí)后方可帶出。4.2.8地面消毒：工作結(jié)束，應(yīng)用含有有效2000mg/L的消毒液噴灑拖地。4.2.9廢棄物的處理：實(shí)驗(yàn)的廢棄物應(yīng)放入適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)，就地121高壓消毒30分鐘，消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。5.實(shí)驗(yàn)室高壓消毒安全操作5.1使用前應(yīng)了解并掌握高壓鍋的原理及操作規(guī)則，以及不正確使用而導(dǎo)致的災(zāi)難性后果。5.2按照操作規(guī)程使用高壓鍋5.2.1接通電源，合上高壓滅菌器左側(cè)總電源開關(guān)。5.2.2注入加熱用水，注水至加熱器罩的水位水準(zhǔn)器配件尖端浸入水中為止。5.2.3設(shè)定滅菌溫度，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需溫度，然后按“實(shí)行”鍵，把所設(shè)溫度存進(jìn)程序。5.2.4設(shè)定滅菌時(shí)間，先按“編集”鍵，然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需時(shí)間，然后按“實(shí)行”鍵，把所設(shè)時(shí)間存進(jìn)程序。5.2.5按“實(shí)行”鍵執(zhí)行滅菌程序，此時(shí)“滅菌”燈閃爍。5.2.6當(dāng)滅菌程序執(zhí)行完成，滅菌程序自動停止運(yùn)行。5.2.7在確認(rèn)壓力表的顯示壓力降到0刻度時(shí)，打開高壓滅菌器頂蓋，取出滅菌樣品。5.3高壓鍋操作人員在使用高壓鍋時(shí)不得離開崗位；在日常使用過程中，必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，并按照規(guī)定進(jìn)行設(shè)備的維護(hù)。每1年保養(yǎng)一次，每月檢測一次消毒效果。5.4高壓鍋的物品不得放的過滿，否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后，高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。5.5定期檢查高壓鍋，以確保其正常工作，防止意外事故發(fā)生，保證消毒滅局效果。5.6高壓滅菌安全操作步驟5.6.1在滅菌前將雙層的高壓滅菌帶包好，廢物在滅菌袋中的體積不能超過袋子體積的3/4，滅菌袋用橡皮帶捆好，但不能扎得太死，否則蒸汽不能進(jìn)入所料袋內(nèi)影響滅菌效果。5.6.2實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的所有廢物應(yīng)該及時(shí)就地滅菌處理。如果滅菌器正在使用或優(yōu)于其它原因不能馬上使用，則廢物必須放在滅菌袋內(nèi)捆好并放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，在存放期間確保袋子無損壞。5.6.3當(dāng)高壓鍋消毒滅菌盜時(shí)間后，取出物品放在廢物收集處。5.6.4當(dāng)開始滅菌時(shí)必須確信滅菌國內(nèi)水量合適，高壓溫度和時(shí)間設(shè)置正確。滅菌應(yīng)保持在12130分鐘，時(shí)間和溫度不得超過設(shè)定值，否則滅菌袋會融化，清理困難。十二、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案1目的規(guī)范緊急情況的處理工作。2適用范圍微生物實(shí)驗(yàn)室和微生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。3職責(zé)遇有緊急情況所有工作人員嚴(yán)格按此規(guī)程處理。4具體要求：4.1造成或可能造成實(shí)驗(yàn)室污染，但未造成人身傷害的實(shí)驗(yàn)室事故，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。例如實(shí)驗(yàn)過程中，由于標(biāo)本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等，應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，等消毒液徹底浸泡30分鐘后，對污染的物品進(jìn)行處理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全二級實(shí)驗(yàn)室意外情況登記與處理記錄表，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)指導(dǎo)這些處理行動，并檢查處理效果。4.2在沒有強(qiáng)毒微生物時(shí)，再實(shí)驗(yàn)室內(nèi)受到意外傷害，例如割傷、燒傷、燙傷等，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人處理。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損的皮膚表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器反復(fù)沖洗。有在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員或派人迅速著裝進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，清除造成傷害的原因，清理實(shí)驗(yàn)材料，幫助受傷人員緊急處理并撤離實(shí)驗(yàn)室。受到傷害的人員應(yīng)立即就醫(yī)，并將受傷原因及接觸微生物的情況通報(bào)負(fù)責(zé)人。對其進(jìn)行恰當(dāng)而完整的病史記錄。在其身體狀況未恢復(fù)之前，不得重新進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。實(shí)驗(yàn)室在經(jīng)過整理，消除了造成傷害的故障之后，方可重新使用。4.3傷害事故可能導(dǎo)致被強(qiáng)毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途徑接觸到感染性液體，首先進(jìn)行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂或清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面等情況，首先使用噴淋裝置，盡快將污染物沖洗掉，然后再進(jìn)行局部處理。暴露的粘膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)向上級部門報(bào)告，對受傷害者進(jìn)行隔離觀察，同時(shí)根據(jù)情況預(yù)防性用藥，并寫出職業(yè)暴露后預(yù)防感染的評價(jià)和處理方案。4.4實(shí)驗(yàn)室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂等，立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，疏散現(xiàn)場的所有人員，對所有暴露人員提出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)建議。立即通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全員。至少在1小時(shí)內(nèi)，任何人員不得進(jìn)入現(xiàn)場，以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。張貼禁止入內(nèi)的警示標(biāo)志。在生物安全員的監(jiān)督下進(jìn)行消毒、凈化處理；執(zhí)行這項(xiàng)工作時(shí)應(yīng)當(dāng)穿戴合適的防護(hù)服及呼吸防護(hù)用具。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人員除立即采取對應(yīng)措施外，應(yīng)向上級部門報(bào)告，填寫意外情況登記與處理記錄表。4.5培養(yǎng)物等傳染性物質(zhì)的破碎被傳染性物質(zhì)物質(zhì)污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時(shí)，用布或紙巾覆蓋，爾后將消毒劑傾倒其上，放置30分鐘。其后即可清除掉，玻璃碎片應(yīng)當(dāng)用鑷子清理。污染區(qū)域應(yīng)當(dāng)用消毒劑清洗。破碎物品清理時(shí)如果使用了簸箕，應(yīng)將其進(jìn)行高壓滅菌或用有效的消毒劑浸泡24小時(shí)。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把，放入污染廢棄物容器中。上述步驟均應(yīng)佩戴手套。4.6如果實(shí)驗(yàn)室的紀(jì)錄表格、其他印刷品或書面材料遭到污染，在妥善轉(zhuǎn)抄后或烤后，應(yīng)當(dāng)將其棄入污染廢棄物容器。4.7試管破碎于密閉式安全離心杯中所有密閉式安全離心杯在生物安全過程中裝載和卸載。如果懷疑發(fā)生了破損，應(yīng)當(dāng)將其蓋子擰松；爾后，將整個離心杯高壓滅菌。4.8蓄意破壞堅(jiān)固、厚重的門、牢靠的鎖具以及限制出入，都是合適的防范措施。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全員，視破壞種類按照上述方法進(jìn)行處理，并詳細(xì)填寫意外情況登記與處理記錄表。十三、實(shí)驗(yàn)活動生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（一）艾滋病初篩檢測實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程1.目的保證艾滋病病毒抗體ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。2.適用范圍艾滋病病毒抗體ELISA實(shí)驗(yàn)。3.具體要求3.1樣品采集樣品采集安試劑盒要求采集。采血時(shí)注意安全，用一次性注射器謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。血樣如即時(shí)用可存于普通冰箱，如要長期保存，分離血清置于-20及以下。同時(shí)做好記錄。3.2樣品運(yùn)送樣品轉(zhuǎn)送，除特殊需要外，必須是血清或血漿，置于帶有蓋帽的試管內(nèi)，或?qū)⑺芰显嚬苡镁凭珶舴馑?，防止樣品流出。試管上?biāo)明姓名、時(shí)間、編號，將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì)，以免碰碎，容器外標(biāo)有HIV檢測專用字樣和生物危害標(biāo)志。路途較遠(yuǎn)或氣候炎熱時(shí)，容器應(yīng)置于4以下運(yùn)送。這樣同時(shí)附送檢單。3.3樣品登記和處理3.3.1收到樣品后，及時(shí)填寫標(biāo)本登記記錄表，送樣人、收樣人簽字，如已進(jìn)行過初檢，登記初檢結(jié)果和實(shí)驗(yàn)方法及所用試劑情況。3.3.2對從其他實(shí)驗(yàn)室送來的樣品，檢查并注明送檢單與標(biāo)本記錄的符合、樣品管破損、溢漏等情況。如有溢漏應(yīng)立即將尚存的血樣移出，并對管壁和盛器消毒。檢查并記錄樣品的質(zhì)量有無嚴(yán)重溶血、細(xì)菌污染、血脂過多以及黃疸等情況。3.3.3對實(shí)驗(yàn)室自采的樣品，最好將血液先放置1-2個小時(shí)，再用3000 離心15分鐘，吸出上清液備用，如在幾天內(nèi)檢測可放在2-8冰箱中，如要貯存，置于-20冰箱。3.4實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備3.4.1將試劑從冰箱中取出，按試劑盒要求時(shí)間恢復(fù)室溫。3.4.2檢查并記錄冰箱、溫箱溫度。3.4.3按照試劑盒要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)原始記錄表，標(biāo)明空白、陰性對照、陽性對照、外部質(zhì)控血清以及檢測樣本的位置：登記日期和實(shí)驗(yàn)起止時(shí)間，記錄環(huán)境條件及試劑盒廠家、批號、效期：整個實(shí)驗(yàn)過程中每一步操作都要在原始記錄表上詳細(xì)登記。3.4.4按照試劑盒的要求配置洗液及其他所需要的試劑。3.5加樣和稀釋根據(jù)樣品數(shù)量將合適數(shù)量的酶標(biāo)板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機(jī)，每道上的酶標(biāo)板條必須保持完整不足部分可用廢棄的微孔添充，檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符，按照原始記錄表表明的位置加入各種質(zhì)控品和檢測樣品，注意：空白只加標(biāo)本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴(yán)格按照試劑盒說明書規(guī)定的操作，一般先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要準(zhǔn)確，小心不要使吸頭碰著酶標(biāo)板空上是包被抗原。為保證加樣的準(zhǔn)確，最好使用多孔道加樣器，使用時(shí)注意防止吸頭間的交叉污染。3.6溫育 貼好封板膜，按照試劑盒要求的溫度和時(shí)間進(jìn)行溫育，最好選擇濕育方法。3.7洗板開啟洗板機(jī)前，先檢查洗板機(jī)廢液瓶是否已排空，開啟后先用蒸餾水沖洗管道，再換上洗液瓶。按照試劑盒的要求，選擇、修改洗扳方式、洗滌次數(shù)和浸泡時(shí)間，根據(jù)所用酶標(biāo)板的條數(shù)確定洗板道數(shù)，根據(jù)酶標(biāo)板的位置調(diào)節(jié)洗頭的位置，然后開始洗板，洗板結(jié)束后用蒸餾水沖洗管道。3.8加酶結(jié)合物對于二步法ELISA實(shí)驗(yàn)需加酶結(jié)合物，按試劑盒要求完成。3.9加底物洗好板后應(yīng)立即加底物，需加自配的底物應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。3.10終止反應(yīng) 在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)用試劑盒中的或根據(jù)要求自行配置的終止液終止反應(yīng)。3.11酶標(biāo)儀讀物 按照試劑盒的要求選擇濾光片，確定空白孔位置，選擇合適達(dá)的打印報(bào)告格式，讀數(shù)并打印結(jié)果。3.12所用儀器在使用后及時(shí)填寫使用記錄。3.13結(jié)果判斷計(jì)算3.13.1根據(jù)試劑盒說明書要求的陰陽對照OD值范圍判斷實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，陰陽性對照OD值在范圍之內(nèi)，試驗(yàn)方可成立，超出范圍，試驗(yàn)失敗，整個實(shí)驗(yàn)重做。3.13.2在指控圖上標(biāo)出外部指控血清的S/CO值，判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否被接受。3.13.3以上兩個條件俊被接受后，根據(jù)試劑盒要求計(jì)算cutoff值。小于cutoff值的標(biāo)本為陰性，大于或等于cutoff值得標(biāo)本為陽性，在cutoff10%的標(biāo)本為灰色帶反應(yīng)。陽性及灰色反應(yīng)區(qū)標(biāo)本，用原有的試劑盒另一種試劑重復(fù)試驗(yàn)。3.14 結(jié)果登記和報(bào)告將試驗(yàn)結(jié)果登記在級路標(biāo)和標(biāo)本試劑表上，將OD值打印結(jié)果貼在原始記錄表上，檢查原始記錄表是否填寫完整，操作者，復(fù)核者簽字。陰性結(jié)果出具HIV抗體篩查報(bào)考，陰性結(jié)果填寫HIV抗體篩查陽性送檢單。3.15標(biāo)本留存轉(zhuǎn)送 陰性標(biāo)本收集血清冷凍保存一年。并填寫陰性血清保存記錄表，陽性標(biāo)本收集血清封口包好，冷藏運(yùn)送送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。4. 支持性文件全國艾滋病監(jiān)測工作規(guī)范艾滋病實(shí)驗(yàn)室安全操作及防護(hù)措施（二）、結(jié)核桿菌實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)程1.實(shí)驗(yàn)室管理制度（1）實(shí)驗(yàn)室入口處必須貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志，注明危險(xiǎn)因子，生物安全級別，試驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和相關(guān)負(fù)責(zé)人姓名和電話。（2）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有明顯的區(qū)域劃分，清潔區(qū)，辦污染區(qū)和污染區(qū)。（3）無論進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)間長短，必須填寫工作日志。要嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的一切操作規(guī)程。（4）進(jìn)行結(jié)核菌操作時(shí)，需有兩名工作人員同時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，盡量避免單獨(dú)工作。（5）在對大批量的痰標(biāo)本和菌株進(jìn)行分離培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)前，英語中心新主任和實(shí)驗(yàn)室主任討論，必要時(shí)加強(qiáng)預(yù)防措施。（6）試驗(yàn)室人員應(yīng)做結(jié)核菌素試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)，應(yīng)接種卡介苗，并做好登記記錄。（7）外來進(jìn)修，參觀人員必須學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室的一切規(guī)章制度和有關(guān)操作規(guī)程，經(jīng)試驗(yàn)室主任批準(zhǔn)方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。2.標(biāo)本采集人員安全要求（1） 標(biāo)本采集人員的防護(hù)：痰標(biāo)本有病人自行留取，采集咽拭子等特殊標(biāo)本，采集人員應(yīng)穿防護(hù)服，戴一次性口罩，帽子，戴醫(yī)用手術(shù)手套。（2）采集標(biāo)本污染器材的處理：采集標(biāo)本的痰盒，試管等污染器材軍需高壓處理。3.標(biāo)本運(yùn)送安全要求痰標(biāo)本需留置在特制的痰盒內(nèi)（直徑4cm，高2cm的光口蓋密閉的塑料盒），并放置在專用的痰標(biāo)本運(yùn)送箱內(nèi),運(yùn)送過程中切勿倒置,嚴(yán)防痰液外溢。由有專人送至痰檢實(shí)驗(yàn)室,標(biāo)本送達(dá)后痰標(biāo)本運(yùn)送箱及時(shí)用乙醇或是碳酸等化學(xué)消毒劑或高壓的辦法徹底消毒。4.實(shí)驗(yàn)操作安全要求（1）結(jié)核病細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室要求結(jié)核病細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)為生物安全級實(shí)驗(yàn)室,用于臨床診斷,教學(xué),屬中度危險(xiǎn).應(yīng)具備安全設(shè)備,緩沖間實(shí)驗(yàn)室條件應(yīng)滿足工作任務(wù)的要求,有完善的試驗(yàn)設(shè)施,試驗(yàn)室的環(huán)境應(yīng)清潔,衛(wèi)生,安靜,無污染,試驗(yàn)室內(nèi)的管線設(shè)置應(yīng)整齊,要有安全管理措施和報(bào)警,應(yīng)積及急救設(shè)施,房間數(shù)量不少于七間,包括實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備室,培養(yǎng)機(jī)制備室,顯微鏡檢查室,圖片檢查室,接種室,培養(yǎng)室高壓消毒室等。具備完善的質(zhì)量保證體系中應(yīng)有明確的分級責(zé)任制度,以確保檢驗(yàn)的工作質(zhì)量,保證檢驗(yàn),復(fù)核,科研結(jié)果等各項(xiàng)報(bào)告的準(zhǔn)確可靠性。（2）實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備及功能的要求結(jié)核菌素檢查時(shí)必須在二級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行,無菌操作內(nèi)禁放雜物,并應(yīng)制定地面,門窗,墻壁,設(shè)施等的定期清潔,滅菌規(guī)程,操作間沒有紫外線燈;實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)光線明亮.具備性能良好的型生物安全柜,恒溫培養(yǎng)儀器,雙目生物顯微鏡,蒸汽凝固滅菌箱,高壓蒸汽滅菌鍋等儀器設(shè)備,并對各種儀器專人管理,定期叫閻檢定,對不合格,待修,待檢的儀器,要有明顯德狀態(tài)標(biāo)志,并應(yīng)及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)的處理。一起使用人應(yīng)經(jīng)考核合格后方可操作儀器。（3）對檢驗(yàn)人員的安全要求:從事結(jié)核菌工作的人員須經(jīng)培訓(xùn)后方能參加操作,并嚴(yán)格按照操作規(guī)則和其他國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn),準(zhǔn)確治療試驗(yàn)結(jié)果.培訓(xùn)標(biāo)準(zhǔn)由各等級的實(shí)驗(yàn)室根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定自行制訂,通過考核后,還須與有資格的工作人員一同工作3個月,才能獲得操作資格.非專業(yè)技師人員,無專業(yè)技術(shù)職稱者不得從事檢驗(yàn)的技術(shù)工作。（4）進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度a.非實(shí)驗(yàn)室工作人員一律禁止進(jìn)入試驗(yàn)區(qū)。b.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止飲食,吸煙,接待訪客和喧嘩。c.進(jìn)行結(jié)核菌操作時(shí),需有兩名工作人員同時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。d.工作人員如有皮膚損傷,發(fā)熱,感冒和妊娠六個月以上者,不能進(jìn)入菌毒實(shí)驗(yàn)室。e.工作完畢,檢查各實(shí)驗(yàn)室水,電,防火設(shè)備,打開防盜報(bào)警裝置。f.從事與毒菌有關(guān)的工作后,7日內(nèi)不可離開實(shí)驗(yàn)室所在城市。如出現(xiàn)身體不適現(xiàn)象,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室所在地進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察.因工作原因必須離開時(shí),用口服抗結(jié)核藥物預(yù)防。（5）意外事故及處理a.實(shí)驗(yàn)過程中,操作臺或地面的污染,如菌液溢出,打破結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)皿和藥敏管等,應(yīng)立即噴灑消毒液,待消毒液徹底浸泡30分鐘后,進(jìn)行清理.清理后的物品,高壓滅菌。b.實(shí)驗(yàn)過程中,如污染物濺落在身體表面,或有割傷,燒傷,燙傷,感染動物咬傷等情況,應(yīng)立即進(jìn)行緊急處理:皮膚表面用消毒液清洗,傷口以碘酒究竟消毒,眼睛用無菌生理鹽水沖洗。事故的情況應(yīng)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主任和上級領(lǐng)導(dǎo)。c.實(shí)驗(yàn)過程中,如發(fā)生氣溶膠污染,應(yīng)立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室,用消毒液噴霧和紫外線照射污染的區(qū)域,24小時(shí)后再進(jìn)行終末消毒。d.進(jìn)行毒菌操作后,有疑似癥狀出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即向?qū)嶒?yàn)室主任報(bào)告,觀察就醫(yī)。（6）污染物處理及消毒a.試驗(yàn)用試管,吸管及其他器械,需裝載加蓋不漏的容器內(nèi),經(jīng)高壓滅菌后,拿出實(shí)驗(yàn)室。b.培養(yǎng)物及污物,經(jīng)高壓滅菌后,拿出實(shí)驗(yàn)室。c.出實(shí)驗(yàn)室的更衣順序:先用消毒液浸泡手套5分鐘,依次除去口罩,眼鏡,防護(hù)服,三角頭巾,鞋,在浸泡手套后脫去手套。d.洗手后以75%酒精棉球擦面部裸露部位,用3%硼酸水漱口,離開實(shí)驗(yàn)室。e.實(shí)驗(yàn)室內(nèi),未經(jīng)消毒的污水禁止直接排入公共排水系統(tǒng).以消毒的污物集中倒入專用污物坑(污物坑的深度2-3米),不許混入居民生活垃圾。5、生物標(biāo)本保管安全要求結(jié)核分枝桿菌菌株必須由專人負(fù)責(zé),按照衛(wèi)生部（1985）中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理辦法規(guī)定執(zhí)行。應(yīng)在4專用冰箱內(nèi)保存,并要求雙人雙鎖,有嚴(yán)格的菌株領(lǐng)取和銷毀制度。42