《食品中硼砂的測定 分光光度法》

吉林省食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 食品中硼砂的測定 分光光度法 編制說明 一 、 研究背景 硼是人體必需的微量元素。 微量硼對人體新陳代謝起到一定積極的作用，如防止骨質(zhì)疏松、促進(jìn)鈣在人體內(nèi)的代謝等。但其含量 過 高就會(huì)呈現(xiàn)毒性，嚴(yán)重危害人體健康 。 食品中除了本底硼外 ， 一些不法商販為了增加食品的韌性、脆度、保水性及保存期 ， 在某些食品中非法添加硼砂或硼酸 ， 以達(dá)到 改良口感、 改善色澤和防腐的功效 。 食品中加入硼砂后，短鏈的淀粉中羥基與硼原子形成絡(luò)合物，這些不規(guī)則的交聯(lián)形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，具有交聯(lián)增粘作用。硼砂經(jīng)由食品被人體攝取后，與胃 酸作用產(chǎn)生硼酸，硼酸不易被排出，妨礙消化酵素作用，引起食欲減退、消化不良、抑制營養(yǎng)素吸收、促進(jìn)脂肪分解最終體重減輕 ， 具有積存性的硼砂可引發(fā)脫發(fā)、禿頂?shù)?。 人體大量攝入硼砂，會(huì)出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、紅斑、循環(huán)系統(tǒng)障礙、休克及昏迷等中毒癥狀 。 硼砂作為防腐劑添加至食品中增強(qiáng)口感，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明硼砂具有致癌性，致死量成人約為 20g、兒童約為 5g。國外已制定出相關(guān)法律，禁止在食品中檢出硼砂?，F(xiàn)有國家標(biāo)準(zhǔn)對硼砂的檢測方法其檢測周期相對較長，因此有必要建立快速有效的方法檢測出食品中硼砂含量，以期為質(zhì)量監(jiān)管部門提供技術(shù)依據(jù)。 二 、 任 務(wù)來源 任務(wù)來源：吉林省 衛(wèi)生廳 任務(wù)編號(hào)： 35口單位： 吉林省衛(wèi)生廳 起草單位： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 三、 制定標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義 硼砂添加至食品中可有效的增加韌性和粘稠性，有一定的防腐作用。 添加硼砂后的 食品 可顯著延長保質(zhì)期、增強(qiáng)產(chǎn)品的口感。由于硼砂的添加成本較低， 且地方尚無完善的法律法規(guī)及文件規(guī)定硼砂的添加量及檢測方法，商家為節(jié)約生產(chǎn)成本違法過量添加， 使消費(fèi) 2 者的利益受到損害 。我 國 居民對硼砂 相關(guān) 知識(shí)了解甚少，導(dǎo)致 硼砂食物中毒事件屢屢發(fā)生。長期攝入的硼砂在人 體蓄積后會(huì)對 機(jī)體 器官 造成一定的傷害， 潛在的危害公民的健康 。 2、為食品安全監(jiān)管工作提供技術(shù)保障的需要 由于國家法律法規(guī)及相關(guān)文件的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與地方職能部門的配套設(shè)施存在一定的差異，國家標(biāo)準(zhǔn)在地方的執(zhí)行情況不容樂觀。 公民對硼砂的危害意識(shí)淡薄，食品的安全需要執(zhí)法部門的嚴(yán)格執(zhí)法， 完善地方法規(guī)對硼砂的檢測標(biāo)準(zhǔn)制定，能夠使職能部門 及時(shí)應(yīng)對食品安全突發(fā)事件，維護(hù)廣大消費(fèi)者的利益，保護(hù)消費(fèi)者身體健康 。制定完善的標(biāo)準(zhǔn)可 為執(zhí)法機(jī)構(gòu)的監(jiān)督提供科學(xué)理論依據(jù)和技術(shù)支撐 ， 建立食品中硼砂的快速簡便的檢測方法，嚴(yán)格控制在食品中的添 加使用。 本標(biāo)準(zhǔn)的制定為國家政府部門 對 食品安全監(jiān)管提供 理論依據(jù) 。 3、完善國家標(biāo)準(zhǔn)的需要 國家標(biāo)準(zhǔn)中使用姜 黃 素分光光度法測定硼砂含量，該檢測方法 在目前實(shí)際運(yùn)用中 操作較繁瑣 、 檢測周期長 。 隨著現(xiàn)代化合物合成 及快速檢測方法 研究的深入， 直接用顏色反應(yīng)便可 快速檢測 。本標(biāo)準(zhǔn)的制定是基于國家檢測標(biāo)準(zhǔn)做進(jìn)一步的完善，以實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)與實(shí)際的統(tǒng)一。 制定出 的 標(biāo)準(zhǔn) 可 協(xié)助質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督職能部門順利完成檢測工作 ，做到有標(biāo)準(zhǔn)可依，有數(shù)據(jù)可參考，避免漏檢、錯(cuò)檢等情況發(fā)生，在 完善國家地方標(biāo)準(zhǔn)體系 的同時(shí)，保障了消費(fèi)者的合法權(quán)益 。 四、標(biāo)準(zhǔn)化過 程 1、 前期工作 我們課題研究人員在制定標(biāo)準(zhǔn)的時(shí)候，通過查閱最新的資料和技術(shù)文獻(xiàn)，確定了使姜黃試紙和甲亞胺 H 酸測定食品中硼砂的的技術(shù)路線，對方法的檢出限、精密度進(jìn)行了系統(tǒng)研究，建立了一個(gè)操作簡單、靈敏度高、選擇性好、能為我省大多數(shù)的檢測機(jī)構(gòu)所使用的方法，為食品中硼砂的檢測提供了技術(shù)依據(jù)。由于目前國家標(biāo)準(zhǔn)和地方標(biāo)準(zhǔn)中沒有測定食品中硼砂的方法，據(jù)此我們向吉林省衛(wèi)生廳提出食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)制定申請。 2、實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證工作 2012 年 11 月，我們進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室間的驗(yàn)證工作。通過統(tǒng)計(jì)分析各個(gè)實(shí)驗(yàn)室的檢測數(shù)據(jù)，驗(yàn)證了方法的 準(zhǔn)確度和精密度、最低檢出限等。參加驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)室一致認(rèn)為：該方法適用于測定食品硼砂的含量，具有測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠、操作簡單、快速等特點(diǎn)。 五、 制標(biāo)原則 本標(biāo)準(zhǔn)編制遵循 “ 先進(jìn)性、實(shí)用性、統(tǒng)一性、規(guī)范性 ” 的原則，盡可能與國際通行標(biāo) 3 準(zhǔn)接軌，注重標(biāo)準(zhǔn)的可操作性，嚴(yán)格按照 準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第 1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則和 準(zhǔn)編寫規(guī)則 第 4部分：化學(xué)分析方法的要求編寫的。 六、 標(biāo)準(zhǔn)主要條款的說明 1 標(biāo)準(zhǔn)的名稱 故標(biāo)準(zhǔn)命名為 食品中硼砂的測定 分光光 度法 。 2 標(biāo)準(zhǔn)的范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于 奶粉、糧食及其固態(tài)加工制品 中硼砂 的測定 ， 檢測樣品為保質(zhì)期內(nèi)合格、無開封及包裝完好 的產(chǎn)品 。 3 方法原理 硼砂的化學(xué)成分是四硼酸鈉，在酸性條件下以硼酸的形式存在。硼酸與甲亞胺 其顏色與硼的濃度在一定范圍內(nèi)成線性關(guān)系 。在波長 420標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。 4 前處理?xiàng)l件 樣品測試前進(jìn)行灰化，時(shí)間為 8h，灰化前使樣品為堿性。 5 儀器分析條件 根據(jù)不同類型的樣品，分別按 5524 的要求制備試樣 。 常溫下，檢測 儀器開機(jī)預(yù)熱穩(wěn)定 15 6 實(shí)驗(yàn)步驟 樣制備與保存 黃試紙 的制備 稱取 黃粉 （ 精確至 g）， 研細(xì)后，用 100 置棕色瓶備用 。 取 1 8量濾紙條 ， 在密封條件下 ， 用上述姜黃乙醇上清液浸泡 2 3d， 空氣中 自然 晾干 ， 置棕色玻璃瓶中 密封 備用。 品的處理 稱取試樣 3 5g 于瓷坩堝中 （ 精確至 在 電爐上炭化至無煙 ， 然后放入馬弗爐 中 525 灰化 8 小時(shí)， 加入 5解灰分 ， 轉(zhuǎn)移至聚丙烯瓶中 ，加水定容到 25搖勻 待 測。 同時(shí)做樣品空白。 性和定量 測定 性測定 姜黃試紙靈敏度試驗(yàn) ： 稱取 0、 精確至 硼砂 ， 分別 溶解 于 鹽酸 溶液中，然后 將姜黃試紙直接浸入 該 溶液中 4 潤濕 ，取出試紙 在微火上烘干 ， 觀察試紙顏色 , 在 變色部分 滴加 1 滴 10%氨水 , 硼砂濃度由低到高所用試紙的顏色應(yīng)為藍(lán)色至紫色 。 量測定 標(biāo)準(zhǔn)曲線 的繪制： 分別吸取硼酸標(biāo)準(zhǔn)使用液 0、 25丙烯 比色 管中 ，分別加入 乙酸 - 乙酸胺緩沖溶液 后 加水至 刻度， 搖勻 ，于 25 下 放置 90在 420用 1 比色皿 測定吸光度。 試樣吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量或代入線性回歸方程求出硼砂含量。 樣品的 測定：取 樣品 測 試溶液 25丙烯 比色 管中 ，分別加入 乙酸 - 乙酸胺緩沖溶液 顯色劑 各 加水 至刻度， 搖勻放置 90在 420測定吸光度。 白試驗(yàn) 除不加 測 試 樣品 外，采用完全相同的分析步驟 。 7 結(jié)果計(jì)算 料中分析物的含量，結(jié)果按式 (1)計(jì) 算： ( （ 1） (1)式中： C 樣品中硼砂含量 ( A 標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取的硼酸 濃度 µg/ M 樣品質(zhì)量 ( g )； 樣品處理液的總體積 ( 硼酸與硼砂的轉(zhuǎn)換系數(shù)。 行測定結(jié)果用算術(shù)平均值表示，數(shù)值修約按照 8170 執(zhí)行，保留 兩位 有效數(shù)字。 8 方法檢出限 以樣品取樣量為 3 5g，確定 硼砂 檢出限為 9 方法的回收率 根據(jù) 分別以 硼砂 為加標(biāo)對象 ， 分別 加入三個(gè)水平 樣品中進(jìn)行測定 ，按照送審稿的樣品處理方法及相同的 實(shí)驗(yàn)條件 ，進(jìn)行回收率的測定，每個(gè)樣品重復(fù) 8次，計(jì)算出每個(gè)添加水平的回收率和相應(yīng)的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（ 。方法回收率結(jié)果見表 1。 5 表 1 樣品含量測定及回收率數(shù)據(jù) 樣品名稱 添加 量 (g) 實(shí)測值 (g) 回收率 (%) 平均回收率 （ %） 豆?jié){ 粉 芝麻糊 養(yǎng)麥片 奶粉 6 0 方法的精密度 各 送檢單位各樣品精密度分別見表 2 4。 表 2 長春市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院 精密度實(shí)驗(yàn) (mg/重復(fù)次數(shù) 燕麥片 黑芝麻糊 豆奶粉 奶粉 豆?jié){ 1 均值 對偏差 3 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究中心精密度實(shí)驗(yàn) (mg/重復(fù)次數(shù) 燕麥片 黑芝麻糊 豆奶粉 奶粉 豆?jié){ 1 均值 對偏差 7 表 4 吉林省農(nóng)科院 農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所 精密度實(shí)驗(yàn) (mg/重復(fù)次數(shù) 燕麥片 黑芝麻糊 豆奶粉 奶粉 豆?jié){ 1 均值 相對偏差 方法驗(yàn)證 由我實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一制備樣品 ， 發(fā)送同一樣品至其他三個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行驗(yàn)證 ， 每個(gè)實(shí)驗(yàn)室均對同一樣品測定 7 次，結(jié)果見下表。 表 5 實(shí)驗(yàn)室 1#各樣品 精密度 (mg/重復(fù)次數(shù) 燕麥片 黑芝麻糊 豆奶粉 奶粉 豆?jié){ 1 均值 對偏差 6 實(shí)驗(yàn)室 2#各樣品精密度 (mg/重復(fù)次數(shù) 燕麥片 黑芝麻糊 豆奶粉 奶粉 豆?jié){ 1 8 5 均值 對偏差 7 實(shí)驗(yàn)室 3#各樣品精密度 (mg/重復(fù)次數(shù) 燕麥片 黑芝麻糊 豆奶粉 奶粉 豆?jié){ 1 均值 對偏差 . 驗(yàn)證結(jié)論 經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：修訂后的新方法在精密度、重現(xiàn)性、再現(xiàn)性、檢出限等方面完全達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)的 測定 的要求，其方法方便、快捷，應(yīng) 在省內(nèi) 廣泛應(yīng)用。 九 實(shí)際樣品測定 表 10 實(shí)際樣品測試結(jié)果匯總表 樣品名稱 測定值 (mg/平均值 (mg/中老年多維高鈣粉 鈣 維 E 女士奶粉 老年奶粉 芝麻糊 9 營養(yǎng)麥片 鈣豆奶粉 士豆奶粉 他型豆奶粉 磨黑芝麻糊 豆?jié){ 漿 老年豆奶粉 鈣豆奶粉 味豆?jié){粉 溶豆粉 . 實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的建議 如果本標(biāo)準(zhǔn)被批準(zhǔn)并發(fā)布，建議 有關(guān)部門對方法進(jìn)行宣貫 ，講解分析方法的技術(shù)要領(lǐng)和關(guān)鍵步驟。 十一 、 參考文獻(xiàn) 1 鄭彬，鄭春梅 . 分光光度法測定食品中硼砂 J. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)， 2004, 31(3)：446 10 2 閆劍勇，胡加文，胡子謙等 . 醬油中硼酸的測定方法研究及本底值調(diào)查 J. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué) ， 2005, 32(5): 4933 王德榮，趙靜，米長虹等 . 灌溉水中硼的標(biāo)準(zhǔn)分析方法，姜黃素分光光度法 J 1998, 3: 14 ， R， . , 3- . 1972,12(44)： 2015 5L， C。 ， B， S, K， l， a . om p 1994,7: 59 6D, M on o e in an l . 1991, 91: 558 7 黃玉玲，陳梅秀等 . 梅州市食品中硼砂檢測情況分析 J2006， 22(9)：6638 2191食品中硼酸的測定 . 9 S， H. of of J1958， 18： 23110 L. to H in J. 21997, 346： 37311 吳芳英，黃堅(jiān)鋒等 . 熒光測定硼的研究 J. 分析試驗(yàn)室， 1998, 17(6)： 1712 闞斌 . 姜黃素光度法測定硼量國際標(biāo)準(zhǔn)的共同試驗(yàn) J. 冶金分析， 2002， 22(2)：6513 邢小茹，吳國平，徐琳等 . 人體硼暴露及其代謝的研究進(jìn)展 J. 安全與環(huán)境學(xué)報(bào)，2006， 6(1): 13114 閆春燕，伊文濤，馬培華等。微量硼的測定方法研究進(jìn)展 J. 理化檢驗(yàn)化學(xué)分冊，2008, 44: 19715 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局 . 21918S中國標(biāo)準(zhǔn)出版社， 2009. 16 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局。 8538驗(yàn)方 11 法 S中國標(biāo)準(zhǔn)出版社， 2009. 17 ， ， ， et of in 1999， 12: 26318 , . of of . 2009,115: 71119 , , , et of a . 2009， 101: 1200