高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題15 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課件.ppt

考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,專題15微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用,高考考法突破,考法1微生物的培養(yǎng)和分離,應(yīng)試基礎(chǔ)必備,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),考法2微生物的篩選與計(jì)數(shù),應(yīng)試基礎(chǔ)必備,1微生物的培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。成分：一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，還需滿足不同微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。培養(yǎng)基的制備：計(jì)算稱量溶化滅菌倒平板。(2)無(wú)菌技術(shù)關(guān)鍵：防止外來(lái)雜菌的入侵。方法：實(shí)驗(yàn)室中常用紫外線或化學(xué)藥物消毒，如用酒精擦拭雙手；滅菌的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。(3)實(shí)驗(yàn)操作制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基a步驟：計(jì)算稱量溶化滅菌倒平板。b倒平板操作時(shí)待培養(yǎng)基冷卻至50度左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板。純化大腸桿菌a原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)菌落，這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。b方法：平板劃線法、稀釋涂布平板法。,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),應(yīng)試基礎(chǔ)必備,菌種的保藏a短期保存：固體斜面培養(yǎng)基上4保存，菌種易被污染或產(chǎn)生變異。b長(zhǎng)期保存：甘油瓶中20冷凍箱中保藏。,2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)篩選菌株原理：人為提供有利目的菌生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法a原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。b方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。c缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)A原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。B計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)(CV)M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。C操作a設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(3)實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣制備培養(yǎng)基微生物的培養(yǎng)與觀察細(xì)菌的計(jì)數(shù)。,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),應(yīng)試基礎(chǔ)必備,3培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用(1)纖維素酶纖維素酶是一種復(fù)合酶，它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，具有催化分解纖維素的作用，其作用過(guò)程如下：,(2)纖維素分解菌的篩選原理以纖維素作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基上，剛果紅纖維素紅色復(fù)合物，纖維素分解菌可分泌纖維素酶，分解纖維素使紅色消失，出現(xiàn)透明圈。即：可根據(jù)透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(3)土壤中纖維素分解菌的篩選流程土壤取樣(要在富含纖維素的環(huán)境中取樣)選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。,返回考點(diǎn)目錄,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),高考考法突破,角度1對(duì)培養(yǎng)基的認(rèn)識(shí)1培養(yǎng)基的成分,考法1微生物的培養(yǎng)和分離,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),高考考法突破,2培養(yǎng)基的分類,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),3培養(yǎng)基的配制原則(1)目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等選擇原料配制培養(yǎng)基，如培養(yǎng)自養(yǎng)型的微生物就不用加入有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(2)營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。(3)pH要適宜：各種微生物適宜生長(zhǎng)的pH范圍不同。,高考考法突破,(4)自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物類型劃分的主要依據(jù)：能否以無(wú)機(jī)碳作為生長(zhǎng)的主要或唯一碳源，而與氮源無(wú)關(guān)。自養(yǎng)微生物以CO2或碳酸鹽為碳源進(jìn)行代謝生長(zhǎng)；異養(yǎng)微生物必須以有機(jī)物作為碳源進(jìn)行代謝生長(zhǎng)。(5)營(yíng)養(yǎng)成分不同,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),(6)微生物最常用的碳源和氮源：最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常用的氮源是銨鹽和硝酸鹽。對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的有機(jī)化合物既是碳源，又是氮源。4瓊脂的作用：加入培養(yǎng)基中的瓊脂只能起到凝固作用，一般不能被微生物利用。5選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基的辨析：選擇培養(yǎng)基一般只生長(zhǎng)特定的微生物，鑒別培養(yǎng)基可以存在其他微生物，而且能鑒別特定的微生物。,角度2無(wú)菌技術(shù)操作的方法1滅菌的方法與原理,高考考法突破,(3)酒精燈灼燒法：適用于操作時(shí)試管口及接種環(huán)的滅菌。以上三種高溫滅菌的原理是使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性而達(dá)到殺滅細(xì)菌的目的。2消毒的方法(1)煮沸消毒法：100煮沸56min，可以殺死微生物細(xì)胞，可用于飲水和餐具的消毒。(2)巴氏消毒法：80煮15min或7075煮30min，實(shí)際生產(chǎn)中常用于鮮奶的消毒。(3)70%酒精消毒法：70%酒精殺菌能力最強(qiáng)，常用于實(shí)驗(yàn)時(shí)操作者手的消毒。體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌效果最好的原因是如果濃度過(guò)高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其中；濃度過(guò)低，則殺菌能力減弱。,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),高考考法突破,3消毒和滅菌的比較,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),角度3平板劃線法和稀釋涂布平板法對(duì)大腸桿菌的純化的比較,高考考法突破,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),高考考法突破,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),角度4分離微生物的方法(1)改變培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分，如培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí)，可以分離固氮微生物。(2)當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，如石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離出能消除石油污染的微生物的目的。(3)當(dāng)培養(yǎng)基中加入抗生素時(shí)，如加入青霉素、鏈霉素，可以抑制細(xì)菌的生存，從而分離出真菌等真核微生物。角度5關(guān)于透明圈1抗生素與透明圈的關(guān)系：抗生素是由真菌產(chǎn)生的、可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)、繁殖甚至殺死細(xì)菌的一類物質(zhì)。用含抗生素的濾紙片均勻置于平板培養(yǎng)基上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，某種細(xì)菌形成的透明圈越大，說(shuō)明該細(xì)菌對(duì)該抗生素越敏感，抑菌能力越強(qiáng)。若不出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該細(xì)菌對(duì)該抗生素不敏感。2分解圈(或透明圈)的大小與降解能力的關(guān)系：在固體培養(yǎng)基中滲入溶解性差、可被特定菌利用的營(yíng)養(yǎng)成分，造成渾濁、不透明的培養(yǎng)基背景。接種培養(yǎng)后待篩選的菌落周圍就會(huì)形成分解圈(或透明圈)，分解圈(或透明圈)的大小反映了菌落利用此物質(zhì)的能力。常作為初步篩選菌落的快速方法。如在培養(yǎng)基中摻入可溶性淀粉、酪素或原油可以分別用于檢測(cè)菌株產(chǎn)淀粉酶、產(chǎn)蛋白酶或降解原油能力的大小。,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),高考考法突破,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),1檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染的方法：將未接種的培養(yǎng)基放在適宜溫度下培養(yǎng)，若培養(yǎng)基上有菌落說(shuō)明培養(yǎng)基被污染，無(wú)菌落說(shuō)明未被污染。2兩種常用剛果紅(CR)染色法的比較,考法2微生物的篩選與計(jì)數(shù),高考考法突破,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),3菌株篩選原理的比較,4.正確的取樣方法：搖勻培養(yǎng)液再取樣。5計(jì)數(shù)時(shí)數(shù)據(jù)誤差較大的原因：一是未搖勻培養(yǎng)液，吸管在上部取樣，則數(shù)據(jù)偏小，在下部取樣，則數(shù)據(jù)偏大；二是應(yīng)統(tǒng)計(jì)這一區(qū)間的活菌個(gè)體數(shù)，若把死亡個(gè)體算進(jìn)來(lái)，數(shù)據(jù)會(huì)偏高。6影響微生物數(shù)量變化的因素：養(yǎng)分、空間、溫度、pH值變化和有毒排泄物等都是影響微生物數(shù)量持續(xù)增長(zhǎng)的限制因素，因而也影響K值(環(huán)境容納量)的大小。,本考點(diǎn)結(jié)束,考點(diǎn)49微生物的培養(yǎng),高考考法突破,應(yīng)試基礎(chǔ)必備,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,考法3果酒和果醋的制作方法及應(yīng)用,考法4腐乳的制作及條件控制,考法5泡菜制作及亞硝酸鹽含量的測(cè)定,應(yīng)試基礎(chǔ)必備,1果酒與果醋的制作,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,應(yīng)試基礎(chǔ)必備,2腐乳的制作(1)原理：毛霉等微生物能產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，作用如下：,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,(2)腐乳的制作流程,(3)影響腐乳品質(zhì)的因素鹽：a.濃度過(guò)低，不足以抑制微生物生長(zhǎng)，豆腐易腐敗變質(zhì)。b.濃度過(guò)高，會(huì)影響腐乳口味。酒的含量：一般控制在12%左右。香辛料：具調(diào)味、殺菌作用。(4)溫度：1518。3泡菜的腌制和亞硝酸鹽的測(cè)定(1)作用菌種：乳酸菌和假絲酵母。(2)原料：白菜、洋白菜等。(3)原理：在無(wú)氧的條件下，微生物利用菜中的糖和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，乳酸菌將糖分轉(zhuǎn)化為乳酸，這時(shí)需氧菌的活動(dòng)被抑制；當(dāng)乳酸增加到一定程度時(shí)，乳酸菌的活動(dòng)受到抑制，發(fā)酵活動(dòng)逐漸變緩甚至停止。(4)制作步驟,應(yīng)試基礎(chǔ)必備,返回考點(diǎn)目錄,(5)亞硝酸鹽含量的測(cè)定危害：當(dāng)攝入總量較多時(shí)，可引起中毒或死亡。在特定條件下，亞硝酸鹽可以轉(zhuǎn)變成致癌物亞硝胺。原理：亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，這一產(chǎn)物再與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色產(chǎn)物，通過(guò)目測(cè)比較，大致估算其含量。檢測(cè)步驟：配制溶液制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液制備樣品處理液比色。4與發(fā)酵有關(guān)的微生物,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,高考考法突破,角度1微生物種類與產(chǎn)物的關(guān)系1酵母菌與果酒的關(guān)系：酵母菌有氧呼吸時(shí)，產(chǎn)生能量多，產(chǎn)物為二氧化碳和水，可大量繁殖；無(wú)氧呼吸時(shí)，產(chǎn)生能量少，產(chǎn)物為酒精和二氧化碳，僅能滿足自身代謝，基本不繁殖，所以用酵母菌進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)果酒時(shí)先進(jìn)行通氣，再密閉。2醋酸菌與果醋的關(guān)系：制作果醋的微生物主要是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰龠M(jìn)一步轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿?。角?制作果酒的材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，再除去枝梗，以防葡萄汁流失以及污染。沖洗以洗去灰塵為目的，不要太干凈，以防洗去野生酵母菌。角度3防止發(fā)酵液被污染的措施(1)榨汁機(jī)要清洗干凈并晾干。(2)發(fā)酵瓶要洗凈并用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒。(3)裝入葡萄汁后要封閉充氣口。,考法3果酒和果醋的制作方法及應(yīng)用,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,高考考法突破,角度4發(fā)酵條件的控制及酒精的檢測(cè)(1)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留約1/3的空間，目的是先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸快速繁殖，耗盡O2后再進(jìn)行酒精發(fā)酵；防止發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液溢出。(2)嚴(yán)格控制溫度：1825利于酵母菌的繁殖和酒精發(fā)酵；3035利于醋酸菌的繁殖和醋酸發(fā)酵。(3)充氣：酒精發(fā)酵為無(wú)氧發(fā)酵，需封閉充氣口；醋酸發(fā)酵為有氧發(fā)酵，需適時(shí)通過(guò)充氣口充氣。(4)果酒發(fā)酵要定時(shí)排氣的原因：操作過(guò)程中由于產(chǎn)生二氧化碳使瓶?jī)?nèi)氣壓增大，如果不及時(shí)排氣，導(dǎo)致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開(kāi)甚至爆炸。(5)檢驗(yàn)酒精的常用方法：重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精反應(yīng)呈灰綠色。角度5果酒和果醋的制作步驟的比較,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,高考考法突破,角度6制作果酒和果醋的裝置圖分析(1)各部位的作用充氣口：在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣。,排氣口：排出酒精發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的CO2；與排氣管相連的長(zhǎng)而彎曲的膠管，可有效阻止空氣中微生物的進(jìn)入，避免來(lái)自空氣的污染。出料口：用來(lái)取樣。(2)該裝置的使用方法使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接充氣泵，輸入氧氣。,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,高考考法突破,角度1鹽和鹵湯的作用1發(fā)酵過(guò)程中加鹽的作用：不僅可以調(diào)制風(fēng)味，而且能夠抑制雜菌等其他微生物的繁殖。2鹵湯的作用：除具有一定的防腐作用外，還能使腐乳具有獨(dú)特的風(fēng)味。角度2防止雜菌感染的措施(1)用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶洗干凈后要用沸水消毒滅菌。(2)裝瓶時(shí)操作要迅速小心，裝瓶后要用膠條密封，且最好將瓶口通過(guò)酒精燈的火焰，防止瓶口被污染，進(jìn)而影響腐乳風(fēng)味。角度3影響因素1溫度：溫度影響菌絲的生長(zhǎng)和代謝，如溫度過(guò)低，則菌絲生長(zhǎng)緩慢，不能進(jìn)入豆腐塊的深層；溫度高，菌絲易老化和死亡，影響腐乳的品質(zhì)。2發(fā)酵時(shí)間：發(fā)酵時(shí)間影響生化反應(yīng)速度及生化產(chǎn)物的量。角度4腐乳味道鮮美、易于消化吸收的原因毛霉產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為多肽和氨基酸；其產(chǎn)生的脂肪酶能將豆腐中的脂肪水解為甘油和脂肪酸。,考法4腐乳的制作及條件控制,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,高考考法突破,角度1材料的選擇及用量(1)蔬菜應(yīng)新鮮，若放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，蔬菜中的硝酸鹽易被還原成亞硝酸鹽。(2)清水和鹽的質(zhì)量比為41，鹽水要煮沸后冷卻。煮沸有兩大作用：一是除去水中的氧氣，二是殺滅鹽水中的其他細(xì)菌。角度2條件控制(1)泡菜壇要選擇透氣性差的容器，以創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵，防止蔬菜腐爛。(2)泡菜壇壇蓋邊沿的水槽內(nèi)注滿水，以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無(wú)氧環(huán)境，并注意在發(fā)酵過(guò)程中經(jīng)常補(bǔ)水。(3)發(fā)酵過(guò)程溫度控制在室溫即可。溫度過(guò)高則易滋生雜菌，溫度過(guò)低則發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)。角度3亞硝酸鹽含量的測(cè)定(1)測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法：比色法。(2)在泡菜腌制過(guò)程中定期測(cè)定亞硝酸鹽含量的目的：把握取食的最佳時(shí)間。(3)泡菜制作過(guò)程中影響亞硝酸鹽含量的因素：溫度、腌制時(shí)間、食鹽用量等。溫度高、時(shí)間短、食鹽用量低都會(huì)造成雜菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。,考法5泡菜制作及亞硝酸鹽含量的測(cè)定,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,本考點(diǎn)結(jié)束,考點(diǎn)50微生物的應(yīng)用,