TAHFIA 005-2018 植物提取物及其制品中總多酚含量的測(cè)定 分光光度法.doc

T/AHFIA安徽省食品行業(yè)協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)T/AHFIA 0052018植物提取物及其制品中總多酚含量的測(cè)定 分光光度法Determination of total polyphenol in plant extracts and its products Spectrophotometric method2018 - 12 - 26發(fā)布2019 - 01 - 15實(shí)施安徽省食品行業(yè)協(xié)會(huì)發(fā)布T/AHFIA 0052018 前言本標(biāo)準(zhǔn)按照 GB/T 1.1-2009 給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由安徽省食品行業(yè)協(xié)會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：安徽瑞思威爾科技有限公司、安徽古井貢酒股份有限公司、安徽潤(rùn)安信科檢測(cè)科技有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：陸瑋、劉國(guó)英、劉智慧、李安軍、王玉良、何宏魁、王錄、芮君君、楊恩賀。IT/AHFIA 0052018植物提取物及其制品中總多酚含量的測(cè)定 分光光度法A1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了植物提取物及其制品中總多酚含量的測(cè)定 分光光度法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于藥食同源植物提取物、以提取物為基本原料的相關(guān)制品總多酚含量的測(cè)定。2 規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3 方法原理本標(biāo)準(zhǔn)采用福林酚分光光度法測(cè)定植物提取物及其制品中的總多酚含量。酚類化合物在堿性條件下將磷鎢鉬酸還原，生成藍(lán)色的化合物，在一定濃度范圍內(nèi)，吸光度與酚類化合物的含量成正比，符合朗伯-比爾定律。4 試劑與材料4.1 試劑4.1.1 無水乙醇：分析純。4.1.2 福林酚試劑：分析純。4.1.3 碳酸鈉：分析純。4.1.4 水為符合 GB/T 6682 規(guī)定的一級(jí)水。4.2 試劑配制4.2.1 碳酸鈉溶液（15%）：精確稱取15 g無水碳酸鈉，用水溶解定容至100 mL。4.2.2 乙醇溶液（60%）：量取600 mL無水乙醇，用水溶解定容至1000 mL。 4.3 標(biāo)準(zhǔn)品沒食子酸（C7H6O5，CAS號(hào)：149-91-7），純度 99.0%。4.4 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制 準(zhǔn)確稱取20 mg（精確至0.1 mg）沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品，用蒸餾水溶解定容至100 mL，此溶液中沒食子酸含量為200 mg/L。于4冰箱中避光保存。5 儀器與設(shè)備5.1 紫外可見分光光度計(jì)：配1 cm比色皿。5.2 分析天平：感量0.1 mg。5.3 電熱恒溫水浴鍋：0100。6 分析步驟6.1 試樣制備6.1.1 植物提取物試樣吸取5 mL提取液于100 mL燒杯中，加入30 mL60%乙醇溶液，超聲10min，以60%乙醇溶液定容至50 mL容量瓶，搖勻，過濾，待測(cè)。6.1.2 植物提取物制品試樣準(zhǔn)確量取40 mL液體于50 mL具塞離心管中，離心，取上清液備用。當(dāng)上清液基質(zhì)較復(fù)雜時(shí)，需過濾至澄清液備用。6.2 儀器條件6.2.1 測(cè)定波長(zhǎng)：778 nm。6.2.2 比色皿：1 cm。6.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作準(zhǔn)確吸取沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（4.4）0.0，0.2，0.4，0.6，1.0，1.5 mL分別置于10 mL容量瓶中，用60%乙醇溶液（4.2.2）定容，得到?jīng)]食子酸工作液。然后分別移取沒食子酸工作液1.0 mL于10 mL比色管中，加入2.5 mL福林酚試劑（4.1.2），搖勻，加入2.5 mL15%Na2CO3溶液（4.2.1），加水定容至刻度，搖勻。在40水浴60min，靜置冷卻20min。配制成濃度為0 mg/L、4 mg/L、8 mg/L、12 mg/L、20 mg/L、30 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列，測(cè)定其吸光度值。以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。6.4 試樣溶液的測(cè)定吸取1.0 mL濾液于10 mL比色管中，加入2.5 mL福林酚試劑（4.1.2），搖勻，加入2.5 mL15%Na2CO3溶液（4.2.1），加水定容至刻度，搖勻。在40水浴60min，靜置冷卻20min，測(cè)定其吸光度值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)液中總多酚的濃度。7 分析結(jié)果表述總多酚的含量按式（1）計(jì)算： （1） 式中： X 樣品中總多酚的含量，單位為毫克每升（mg/L）； c 由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出的待測(cè)液中總多酚的含量，單位為毫克每升（mg/L）；10 濾液稀釋倍數(shù)；n 樣品稀釋倍數(shù)。所得結(jié)果應(yīng)保留至小數(shù)點(diǎn)后一位。8 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%。 B _3