關于HPLC測定阿司匹林腸溶片中阿司匹林的含量探

關于HPLC測定阿司匹林腸溶片中阿司匹林的含量探阿司匹林腸溶片是一種非甾體類抗炎藥，臨床上可用于抗血栓，也可用于治療不穩(wěn)定性心絞痛，是國家基本藥物目錄列入的品種。本文采用高效液相色譜法測定阿司匹林腸溶片中阿司匹林的含量，該方法簡單，快速，重現(xiàn)性好，回收率高，可用于該制劑的質量控制。1儀器與試藥1.1儀器：大連依利特P230型高效液相色譜儀;UV230+紫外可見檢測器;手動進樣器;超聲儀(型號KQ5200E，功率200W，頻率40KHz);電子天平(賽多利斯科學儀器有限公司，0.0001g)。1.2試藥：阿司匹林對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：100113);阿司匹林腸溶片(亞寶藥業(yè)太原制藥有限公司，批號：131210;石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號：121037;神威藥業(yè)集團有限公司，批號：1306072)，甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。2方法與結果2.1色譜條件：色譜柱為HypersilODS2柱(250mm4.6mm，5m);流動相：甲醇0.5%乙酸溶液(3763);流速：0.8mlmin-1;柱溫：25;檢測波長：267nm;理論板數(shù)按阿司匹林計不得少于3000。2.2溶液的制備：對照品溶液的制備：精密稱取一定量阿司匹林對照品，置100ml量瓶中，加1%醋酸甲醇溶解并定容制成100gml-1的對照品溶液。供試品溶液的制備：取供試品(石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號：121037)約0.03g，精密稱定，置100ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液溶解并定容，過濾，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。陰性樣品溶液的制備：按處方比例取輔料制成空白制劑，按供試品溶液制備方法制成陰性樣品溶液。2.3專屬性實驗：在“2.1”色譜條件下，分別吸取供試品溶液、對照品溶液、陰性樣品溶液各10L，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果顯示阿司匹林與其他組分色譜峰可完全分離，且陰性樣品無干擾。2.4線性范圍：精密吸取對照品溶液(100gml-1)2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml，分別置于10ml量瓶中，用1%醋酸甲醇稀釋至刻度，搖勻。濃度分別為20、40、60、80、100、120和150gml-1，在上述色譜條件下分別進樣10L，測定峰面積A積分值，以濃度(Cgml-1)為橫坐標、峰面積(A)為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程為：A=5.0611C-11.278，r2=0.9991。試驗結果表明:阿司匹林在20150gml-1濃度范圍內與峰面積呈良好的線性關系。2.5穩(wěn)定性試驗：取供試品溶液(石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號：121037)，分別于0、2、4、6、8、10h進樣，進樣量為10L，測定峰面積，RSD為1.2%。結果表明：供試品溶液在10h內穩(wěn)定性良好，符合含量測定要求。2.6重復性試驗：取供試品(石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號：121037)約0.03g，精密稱定，共6份，分別按供試品溶液制備方法制備，并測定含量，平均含量，RSD為1.1%。結果表明：該方法的重復性好，符合含量測定要求。2.7精密度試驗：分別精密吸取對照品溶液(100gml-1)和供試品溶液(石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號：121037)各10L，連續(xù)進樣6次，分別測定其峰面積A，結果對照品溶液RSD為1.4%，供試品溶液RSD為1.5%。結果表明：該方法精密度良好，符合含量測定要求。2.8加樣回收試驗：取已知含量的供試品(石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號：121037)6份，每份約0.015g，精密稱定，置量瓶中，分別精密加入阿司匹林對照品3.6、4.5、5.4mg各兩份，按上述供試品溶液制備方法制備，分別測定，計算回收率。結果平均加樣回收率為101.2%，RSD為0.94%。結果表明：該方法的準確度良好，符合含量測定要求。2.9供試品的測定：分別取三個不同批號供試品約0.03g，各兩份，精密稱定，按供試品溶液的制備方法制備溶液，分別測定，記錄峰面積，計算阿司匹林的含量。供試品標示量均為25mg/片-1，按照中國藥典2010版二部的規(guī)定，阿司匹林腸溶片含阿司匹林應為標示量的95%105%。3討論3.1提取時間的選擇：實驗對超聲提取的時間進行了考察，比較了30min、40min、50min結果，實驗結果顯示，超聲40min已基本提取完全，故確定超聲提取時間為40min。3.2流動相的選擇：通過參考文獻，比較了不同的流動相：甲醇0.5%乙酸溶液(2080)、甲醇0.2%磷酸溶液(2773)、甲醇乙腈0.7%磷酸溶液(26272)，結果表明：用甲醇0.5%乙酸溶液(3763)為流動相保留時間適合，分離效果好。參考文獻1李克慶.測定阿司匹林腸溶片中阿司匹林的含量及游離水楊酸J.中國藥師，2006，9(10)：925-927.2李飛玲.HPLC與UV法測定阿司匹林腸溶片中阿司匹林及水楊酸含量J.長治醫(yī)學院學報，2011，25(1)：11-12.3鄭凱，潘延寧.高效液相色譜法測定阿司匹林腸溶片中阿司匹林含量J.微生物學雜志，2009，29(1)：110-112.4徐新，廖思嘉，廖先智，等，高效液相色譜法測定阿司匹林含量J.廣州化工，2012，40(8).