《傳染與免疫》課件

傳 染非 特 異 性 免 疫特 異 性 免 疫免 疫 學 方 法 及 其 應 用 意 義 ：-疾 病 的 預 防 和 治 療 的 基 礎-生 物 藥 物 的 研 究 和 開 發(fā)-現(xiàn) 代 分 子 的 分 析 和 測 試 技 術 中 國 是 免 疫 學 的 發(fā) 祥 地 ？ 免 疫 技 術 的 應 用 .1 傳 染一 、 傳 染 與 傳 染 病傳 染 ： 病 原 突 破 宿 主 的 免 疫 防 衛(wèi) 系 統(tǒng) ， 在 宿 主 的 特 定 部 位 生 長 繁 殖 并 引 起 一 系 列 的 病 理 生 理 變 化 過 程 。傳 染 病 ： 能 夠 從 一 個 宿 主 傳 播 到 另 一 個 宿 主 的 疾 病 。 二 、 決 定 傳 染 結 局 的 三 大 因 素（ 一 ） 病 原 體1、 毒 力1） 侵 染 力 吸 附 、 侵 入 能 力 繁 殖 擴 散 能 力 抗 宿 主 防 御 能 力 2） 毒 素外 毒 素 ： 病 原 細 菌 在 生 長 過 程 向 外 分 泌 的 一 類 毒 性 蛋 白 。內(nèi) 毒 素 ： G-細 菌 的 脂 多 糖 ， 僅 在 細 胞 死 亡 后 才 裂 解 釋 放 。 類 毒 素 ： 細 菌 外 毒 素 脫 毒 失 去 毒 性 后 ， 仍 保 持 免 疫 原 性 的 生 物 制 品 。 沙 門 氏 菌 的 侵 染 力 和 毒 力 內(nèi) 毒 素 的 測 定 -鱟 試 劑 法原 理 ： 內(nèi) 毒 素 激 活 變 形 細 胞 溶 解 物 (LAL)中 的 B因子 而 引 發(fā) 系 列 的 激 活 過 程 ， 使 可 溶 蛋 白 凝 固 成 為可 見 的 凝 膠 反 應 。 2、 病 原 菌 數(shù) 量 3、 侵 入 途 徑（ 二 ） 宿 主 的 免 疫 力（ 三 ） 環(huán) 境 因 素 三 、 傳 染 的 三 種 可 能 結 局 隱 性 傳 染 ： 病 原 侵 入 后 很 快 為 宿 主 消 滅 ， 基 本 上 不 出 現(xiàn) 癥 狀 。 帶 菌 狀 態(tài) ： 無 明 顯 感 染 癥 狀 的 感 染 個 體 。 顯 性 傳 染 ： 病 原 侵 入 后 使 宿 主 細 胞 組 織 損 害 ， 生 理 功 能 異 常 而 出 現(xiàn) 一 系 列 的 臨 床 癥 狀 。 2.非 特 異 性 免 疫 非 特 異 性 免 疫 （ nonspecific immunity） 生 物 體 在 長 期 進 化 中 形 成 ， 屬 于 先 天 即 有 、 相 對 穩(wěn) 定 、 無 特 殊 針 對 性 的 對 付 病 原 體 的 天 然 抵 抗 力 。 非 特 異 免 疫 組 成 屏 障 結 構吞 噬 細 胞 的 吞 噬 功 能正 常 組 織 和 體 液 中 的 抗 菌 物 質炎 癥 反 應 1. 皮膚和粘膜 一 、 表 皮 與 屏 障 結 構 1） 機 械 性 排 阻2） 抗 菌 物 質3） 正 常 菌 群 2 血 腦 屏 障 和 血 胎 屏 障 血 腦 屏 障 血 腦 屏 障 的 細 胞 間 連 接 緊 ， 胞 飲 作 用 微 弱 等 特 點 ，可 阻 擋 病 原 菌 及 其 毒 物 隨 血 流 透 入 腦 組 織 ， 從 而保 護 中 樞 神 經(jīng) 系 統(tǒng) 。 血 胎 屏 障 ： 由 母 體 子 宮 內(nèi) 膜 和 胎 兒 絨 毛 膜 共 同 組 成 。 不 妨 礙 母 子 物 質 交 換 ， 但 可 能 防 止 病 原 體 侵 入 。 二 、 吞 噬 細 胞 及 其 吞 噬 作 用人 體 血 細 胞 有 ： 紅 細 胞 、 白 細 胞 、 血 小 板 三 種 。 主 要 吞 噬 細 胞 ： 嗜 中 性 粒 細 胞 ； 巨 噬 細 胞 1.嗜 中 性 粒 細 胞 及 其 吞 噬 作 用 一 種 數(shù) 量 最 多 、 血 液 中 主 要 的 小 吞 噬 細 胞 。 2.巨 噬 細 胞 及 其 功 能存 在 于 血 液 、 淋 巴 液 和 各 種 組 織 中 的 大 型 單 核 細 胞 ， 具 有吞 噬 和 胞 飲 功 能 。 功 能 ： 1） 吞 噬 和 殺 菌 作 用 2） 抗 原 遞 呈 作 用 ：抗 原 信 息 加 工 、 傳 遞 給 T 淋 巴 細 胞 。（ MHC： 主 要 組 織 相 容 性 復 合 物 ） （ TCR： T細 胞 抗 原 受 體 ： CD4： T細 胞 表 面 特 異 蛋 白 ） 3） 免 疫 調(diào) 節(jié) 作 用 ： 分 泌 各 種 活 性 物 質4） 抗 癌 作 用 ： 細 胞 毒 作 用 三 、 炎 癥 反 應 吞 噬 細 胞 聚 集 炎 癥 部 位 血 流 加 速 使 抗 菌 因 子 、 Ab局 部 濃 縮 ； 死 亡 宿 主 細 胞 的 堆 集 可 釋 放 出 抗 M物 質 ； 氧 濃 度 下 降 、 乳 酸 積 累 ， 可 抑 制 多 種 病 原 菌 生 長 ； 高 溫 降 低 病 原 體 生 長 速 度 。 四 、 正 常 體 液 或 組 織 中 的 抗 菌 物 補 體 ： 一 組 非 特 異 性 血 清 蛋 白 ,具 有 擴 大 和 增 強 抗 體 的 功 能 。 補 體 的 性 質 ： 1） 熱 不 穩(wěn) 定 2） 酶 原 3） 作 用 的 非 特 異 性 識別單位活化單位膜攻擊單位替代途徑調(diào)節(jié)蛋白血 清 中 主 要 9種 補 體 蛋 白 的 作 用 干 擾 素 (IFN)： 病 毒 或 干 擾 素 誘 生 劑 誘 導 產(chǎn) 生的 蛋 白 ， 具 有 抑 制 病 毒 和 增 強 機 體 的 免 疫 功 能 。 干 擾 素 （ IFNs） 的 特 性1） 化 學 成 分 為 糖 蛋 白 : ,2） 廣 譜 的 抗 病 毒 和 免 疫 調(diào) 節(jié) 活 性3） 誘 導 產(chǎn) 生4) IFN刺 激 細 胞 合 成 AVP降 解 mRNA產(chǎn) 生 抗 病 毒 作 用 建 議 讀 物 3特 異 性 免 疫 特 異 性 免 疫 生 物 體 在 生 活 過 程 中 與 抗 原 物 質 接 觸 后產(chǎn) 生 的 一 系 列 防 衛(wèi) 功 能 。 其 特 點 是 后 天 產(chǎn) 生的 、 特 異 性 強 、 免 疫 能 力 具 有 個 體 的 特 異 性 、包 括 體 液 免 疫 和 細 胞 免 疫 。 1、 中 樞 免 疫 器 官 ：（ 發(fā) 生 、 分 化 、 成 熟 ）骨 髓 、 胸 腺 、法 氏 囊 /類 囊 器 官2、 外 周 免 疫 器 官 （ 定 居 、 應 答 ）淋 巴 結 、 脾 臟一 、 免 疫 器 官 二 、 免 疫 細 胞 及 其 在 細 胞 免 疫 中 的 作 用（ 一 ） T細 胞（ 胸 腺 依 賴 性 細 胞 ） 1 來 源 多 能 干 細 胞未 分 化 淋 巴 細 胞 血 流 胸 腺 成 熟 的 T、 B細 胞 淋 巴 結 效 應 T細 胞 T細 胞 定 位 于 周 圍 淋 巴 結 的 副 皮 質 區(qū) 及 脾 臟 白 髓 部 分 ， 并 可 經(jīng) 血 液 、 組 織 液 、 淋 巴 液 釋 放 到 外 周 血 循 環(huán) 中 ， 當 遇 Ag刺 激 ， T 細 胞 進 一 步 分 化 、 增 殖 ， 以 發(fā) 揮 其 特 異 性 細 胞 免 疫 功 能 。 2 T細 胞 主 要 亞 群 （ 以 功 能 劃 分 ） 調(diào) 節(jié) T細 胞 （ TR）1)輔 助 性 T細 胞 (TH)： 輔 助 B細 胞 ， 產(chǎn) 生 抗 體 。2)抑 制 性 T細 胞 ( TS)： 抑 制 TH， Tc和 B細 胞 的 功 能 。 效 應 T細 胞 (TE) 1)遲 發(fā) 型 超 敏 T細 胞 (TDTH )： 釋 放 淋 巴 因 子 ，引 起 遲 發(fā) 型 超 敏 反 應 。 2)細 胞 毒 T細 胞 ( TC)： 直 接 殺 傷 帶 TC抗 原 的 靶 細 胞 (分 泌 穿 孔 素 引 起 被 感 染 細 胞 溶 解 ) Granzymes：顆粒酶 Perforin：穿孔素 apoptosis :凋亡 CD (白 細 胞 分 化 抗 原 ） ： 白細胞不同分化階段特有的膜表面分子，具有參與活化、介導細胞遷移等多種功能。 3. T細 胞 表 面 標 志 ： 表 面 受 體 ：綿 羊 紅 細 胞 受 體 （ E受 體 ） ， E玫 瑰 花 結 試 驗 （ 檢 測 外 周 血 T細 胞 數(shù) 目 ， 比 例 ） 。有 絲 分 裂 原 受 體 （ 例 ： PHA， Con A等 ） 抗 原 受 體 ： T 細 胞 抗 原 受 體(TCR)識 別 由 APC遞 呈 的Ag （ 二 ） B淋 巴 細 胞 （ 骨 髓 依 賴 性 淋 巴 細 胞 ）1 B細 胞 的 表 面 受 體 有 絲 分 裂 原 受 體 ： LPS受 體 膜 表 面 抗 原 受 體 ： （ 膜 表 面 免 疫 球 蛋 白 ： SmIg） 補 體 受 體 ： Fc受 體 ： 抗 體 可結 晶 段 受 體 SmIg與 抗 SmIg的 抗 體 結 合 2 B細 胞 的 表 面 抗 原 ： SmIg3. B細 胞 的 亞 群 和 功 能 B1: T細 胞 非 依 賴 性 亞 群 ； B2: T細 胞 依 賴 性 亞 群 小 結 ：T細 胞 、 B細 胞 表 面 抗 原 受 體 的 比 較 T細 胞 B細 胞1） 識 別 、 接 受 抗 原 作 用 ， 1） 識 別 、 接 受 抗 原 作 用 ,又 稱 膜 表 面稱 T細 胞 受 體 （ TCR) 免 疫 球 蛋 白 （ SmIg）2） 不 識 別 游 離 抗 原 ， 2） 識 別 游 離 抗 原 ， 但 對 TD抗 原 需 要 T H的 幫 助而 接 受 APC傳 遞 和 加 工 的 抗 原 3） 結 構 類 似 于 Ig的 Fab 3） 結 構 為 IgM或 IgD4） 具 抗 原 性 ， 與 相 應 的 抗 體 結 合 4） 具 抗 原 性 ， 與 相 應 的 抗 體 結 合 （ 抗 相 應 的 IgM或 IgD的 抗 體 ） （ 三 ） 其 他 淋 巴 細 胞 1、 K細 胞 ： 殺 傷 Ag-Ab復 合 體 2、 NK細 胞 大 顆 粒 性 淋 巴 細 胞 、 可 在 無 Ab/Ag致 敏 下 ， 殺 傷 某 些 腫 瘤 細 胞 或 被 病 毒 感 染 細 胞 。 3、 NKT細 胞 具 T、 NK細 胞 特 性 ， 與 抑 制 自 身 免 疫 有 關 三 、 免 疫 應 答 免 疫 應 答 的 過 程 1. 感 應 階 段 ： 抗 原 識 別 、 呈 遞 2. 增 殖 分 化 階 段 ： 成 熟 漿 細 胞 、 致 敏 淋 巴 細 胞 ； 3. 效 應 階 段 ： 分 泌 抗 體 、 淋 巴 因 子 、 執(zhí) 行 免 疫 功 能 TD抗 原 胸 腺 依 賴 性 抗 原 。 多 數(shù) 天 然 抗 原 為 TD抗 原 。 可 引 起 體 液 和 細 胞 免 疫 ； 產(chǎn) 生 IgG為 主 的 抗 體 ； 可 產(chǎn) 生 免 疫 記 憶 。 TI抗 原 非 胸 腺 依 賴 性 抗 原 。 主 要 為 細 菌 脂 多 糖 等 類 抗 原 。 僅 引 起 體 液 免 疫 ； 產(chǎn) 生 IgM抗 體 ； 不 產(chǎn) 生 免 疫 記 憶 。 免 疫 應 答 的 類 型 和 過 程 示 意 圖 四 、 免 疫 分 子 及 其 在 體 液 免 疫 中 的 作 用（ 一 ） 抗 原 （ antigen， Ag） 一 類 能 誘 導 機 體 發(fā) 生 免 疫 應 答 ， 并 能 與 相應 抗 體 或 T淋 巴 細 胞 受 體 發(fā) 生 特 異 性 免 疫 反應 的 大 分 子 物 質 。 抗 原 基 本 特 性 ： -免 疫 原 性-反 應 原 性 完 全 抗 原 半 抗 原 ： 只 有 反 應 原 性 而 無 免 疫 原 性 （鄰苯二酚為半抗原） 2 免 疫 原 性 的 物 質 基 礎 分 子 量 ： M 104Da 結 構 復 雜 ： 抗 原 性 強 弱 依 次 為 蛋 白 復 雜多 糖 核 酸 （ 半 抗 原 ） ， 類 脂 一 般 不 具 抗 原性 。 異 物 性 ： 異 種 /異 體 ,種 族 關 系 越 遠 ， 組 織結 構 差 異 越 大 ， 抗 原 性 越 強 。 3 抗 原 決 定 簇 （ 抗 原 表 位 ） 存 在 于 抗 原 表 面 決 定 其 抗 原 特 異 性 的 特 定 化 學 基 團 。 抗 原 結 合 價 ： 與 抗 體 分 子 相 結 合 的 抗 原 決 定 簇 的 總 數(shù) 。 抗 原 決 定 簇 （ 表 位 ） 的 數(shù) 目 是 抗 原 的 價 4 細 菌 的 抗 原 5.共 同 抗 原 與 交 叉 反 應共同抗原： 某些天然抗原分子上含有相同抗原決定簇，能夠促進機體產(chǎn)生 共同的抗體而產(chǎn)生交叉反應。吸收反應：利用交叉發(fā)應除去共同抗體，用于制備單價抗血清。 (二 )抗 體 （ antibody, Ab）在 抗 原 刺 激 下 產(chǎn) 生 一 類能 夠 與 該 抗 原 發(fā) 生 反 應的 免 疫 球 蛋 白 。( Immunoglobulin, Ig ) Ab特 征 ：1） 由 脊 椎 動 物 漿 細 胞 產(chǎn) 生 ；2） Ag刺 激 ；3） 特 異 性 結 合 ；4） 一 類 具 有 免 疫 功 能 的 球 蛋 白 （ Ig） ； 5） 抗 抗 體 2 免 疫 球 蛋 白 的 基 本 結 構 Ig鏈 ： H鏈 ， L鏈 區(qū) ： V區(qū) ， C區(qū) ， 鉸 鏈 區(qū) 類 ： IgG、 IgA、 IgM、 IgD、 IgE、 型 ： 和 型 肽 鏈 的 a.a數(shù) ： L： 220； H： 440 IgG的 酶 解 和 化 學 分 解 片 段 木 瓜 蛋 白 酶 ：Fab： 抗 原 結 合 片段FC(可 結 晶 片 段 ):結 合 補 體 ,抗 原 種屬 特 異 性胃 蛋 白 酶 ：F（ ab ) 2: 2價 抗 原 種 屬 的 特 異 性 ： 來 源 同 種 動 物 的 任 何 抗 體 免 疫 其它 動 物 產(chǎn) 生 的 抗 抗 體 均 可 與 該 動 物產(chǎn) 生 的 任 何 抗 體 產(chǎn) 生 特 異 反 應 。 Ig的 體 和 抗 原 結 合 價 ： 單 體 ： -2價 雙 體 ： -4價 五 體 ： -5價 Ig的 功 能 區(qū) H鏈 : L鏈 : 抗 原 結 合 部 位 由 VL、 C L、 VH、 CH1四 個功 能 區(qū) 組 成 Ig的 構 象 變 化 Ag與 Fab結 合 引起 構 象 變 化 ,利于 補 體 的 結 合 與作 用 4 產(chǎn) 抗 體 細 胞 的 激 活 和 抗 體 的 形 成 相 關 的 細 胞 表 面 標 志 和 受 體-MHCII： 主 要 組 織 相 容 性 復 合 物 II（ 抗 原 呈 遞 ） -TCR： T細 胞 受 體 （ 識 別 特 異 性 抗 原 ）-CD 4： T細 胞 表 面 抗 原 （ 識 別 MHCII） 參 與 的 相 關 細 胞 及 作 用（ 1） 巨 噬 細 胞 ： 處 理 和 傳 遞 抗 原 ， 但 無 特 異 性 識 別 抗 原 的 功 能 。（ 2） T細 胞 ： 在 抗 體 形 成 過 程 起 調(diào) 節(jié) 細 胞 的 作 用 ， 有 特 異 性 識 別 抗 原 作 用 。（ 3） B細 胞 ： 產(chǎn) 生 抗 體 的 效 應 細 胞 ， 有 特 異 識 別 Ag的 功 能 。 抗體形成過程：1、M抗原遞呈作用 2、T細胞對B細胞激活3、漿細胞產(chǎn)生抗體 5.機 體 產(chǎn) 生 抗 體 的 一 般 規(guī) 律 初 次 應 答 ：潛伏期長,效價低,IgM為主再 次 應 答 ：潛伏期短,效價高,IgG為主 6.抗 體 形 成 的 機 制 Burnet的 克 隆 選 擇 學 說 （ 識 別 記 憶 自 身 禁 忌 ） 抗 體 的 多 樣 性 分 子 機 制 抗 體 基 因 重 排 7 淋 巴 細 胞 雜 交 瘤 技 術 與 單 克 隆 抗 體 （ McAb） 常 規(guī) 技 術 制 備 的 抗 血 清 ： 多 克 隆 抗 體 單 克 隆 抗 體 （ McAb） ： 由 純 系 B淋 巴 細 胞 克 隆 經(jīng) 分 化 、 增 殖 的 漿 細 胞 產(chǎn) 生 的 單 一 成 分 、 單 一 特 異 性 的 免 疫 球 蛋 白 。 B淋 巴 細 胞 （ 小 白 鼠 脾 臟 ， 產(chǎn) 生 Ab， 但 無法 在 體 外 繁 殖 、 傳 代 ） 骨 髓 癌 細 胞 （ 癌 變 的 漿 細 胞 ， 快 速 繁 殖 ， 產(chǎn) 生 Ig,但 不 能 與 Ag特 異 性 結 合 ） 雜 種 細 胞 能 在 體 內(nèi) 外 大 量增 殖能 產(chǎn) 生 大 量 單 克隆 Ab 融 合 淋 巴 細 胞 雜 交 瘤 技 術 制 備 淋 巴 細 胞 雜 交 瘤 的 實 驗 方 法 ： 1） 選 擇 親 本2） 混 合3） 促 融4） 撿 出5） 擴 大 培 養(yǎng) 雜交瘤技術 建 議 讀 物 3免 疫 學 方 法 及 其 應 用 一 、 抗 原 、 抗 體 反 應 的 一 般 規(guī) 律1） 特 異 性2） 可 逆 性 3） 定 比 性 4） 階 段 性5） 條 件 依 賴 性 利 用 “ 兩 對 半 試 驗 ” 檢 測 乙 肝 病毒 1.抗 原 抗 體 主 要 反 應1） 凝 集 反 應顆 粒 性 抗 原 與 抗 體產(chǎn) 生 可 見 的 凝 集 塊現(xiàn) 象 。 直 接 凝 集 反 應 間 接 凝 集 反 應 2） 沉 淀 反 應 ： 可 溶 性 抗 原 與 抗 體 發(fā) 生 可 見 沉 淀 物 的 反 應 。雙向瓊脂擴散法 免疫電泳 3） 補 體 結 合 實 驗 二 .免 疫 標 記 技 術酶 聯(lián) 免 疫 吸 附 法 （ ELISA） 基 本 原 理 ： 酶 與 抗 體 （ 抗 原 ） 結 合 ， 不 改 變 Ag-Ab特 異 性 和 酶 活 性 。 當 酶 結 合 物 與 被 檢 樣 品 相 應 抗 原 （ 抗 體 ） 結 合 后 ， 形 成 Ag- Ab-酶 復 合 物 ， 在 相 應 底 物 存 在 時 ， 酶 催 化 底 物 反 應 。 標 記 物 ： HRP（ 辣 根 過 氧 化 物 酶 ） 底 物 ： DAP（ 二 苯 基 聯(lián) 苯 胺 ） 酶 聯(lián) 免 疫 吸 附 法 測 定 方 法1） 抗 體 包 被2） 加 待 測 抗 原3） 加 酶 聯(lián) 抗 體4） 加 底 物5） 檢 測