高考生物二輪復習 專題能力訓練16 基因工程、細胞工程（含解析）-人教版高三生物試題

專題能力訓練十六基因工程、細胞工程1.(2019全國理綜)基因工程中可以通過PCR技術擴增目的基因?；卮鹣铝袉栴}。(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀ê汀?#160;(2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是 。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。 (3)目前在PCR反應中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是。答案:(1)基因組文庫cDNA文庫(2)解旋酶加熱至9095 氫鍵(3)Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活解析:(1)基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫。(2)生物體細胞內的DNA復制開始時,由解旋酶解開DNA雙鏈。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至9095。這兩個解鏈過程都破壞了DNA雙鏈分子中的氫鍵。(3)溫度會影響酶的活性。PCR過程是在高溫條件下進行的。Taq酶耐高溫,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會變性失活。2.(2018全國理綜)某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達,某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5'末端,獲得了L1-GFP融合基因(簡稱為甲),并將其插入質粒P0,構建了真核表達載體P1,其部分結構和酶切位點的示意圖如下,圖中E1E4四種限制酶產生的黏性末端各不相同?；卮鹣铝袉栴}。(1)據圖推斷,該團隊在將甲插入質粒P0時,使用了兩種限制酶,這兩種酶是,使用這兩種酶進行酶切是為了保證,也是為了保證。 (2)將P1轉入體外培養(yǎng)的牛皮膚細胞后,若在該細胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了和過程。 (3)為了獲得含有甲的牛,該團隊需要做的工作包括:將能夠產生綠色熒光細胞的移入牛的中,體外培養(yǎng)、胚胎移植等。 (4)為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細胞中,某同學用PCR方法進行鑒定,在鑒定時應分別以該牛不同組織細胞中的(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。 答案:(1)E1和E4甲的完整甲與載體正確連接(2)轉錄翻譯(3)細胞核去核卵母細胞(4)核DNA3.下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中標注了相關限制酶的酶切位點,其中切割位點相同的酶不重復標注。請回答下列問題。限制酶BamHBclSau3AHind識別序列及切割位點(1)用圖中質粒和目的基因構建重組質粒,應選用兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過酶作用后獲得重組質粒。為了擴增重組質粒,需將其轉入處于態(tài)的大腸桿菌。 (2)為了篩選出轉入了重組質粒的大腸桿菌,應在篩選平板培養(yǎng)基中添加,平板上長出的菌落,常用PCR鑒定,所用的引物組成為圖2中。 (3)若BamH酶切的DNA末端與Bcl酶切的DNA末端連接,連接部位的6個堿基對序列為,對于該部位,這兩種酶(填“都能”“都不能”或“只有一種能”)切開。 (4)若用Sau3A切圖1質粒最多可能獲得種大小不同的DNA片段。 答案:(1)Bcl和Hind連接感受(2)四環(huán)素引物甲和引物丙(3)TGATCCACTAGGGGATCACCTAGT都不能(4)74.(2019全國理綜)植物組織培養(yǎng)技術在科學研究和生產實踐中得到了廣泛的應用?；卮鹣铝袉栴}。(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比,這種微型繁殖技術的特點是(答出2點即可)。 (2)通過組織培養(yǎng)技術,可把植物組織細胞培養(yǎng)成胚狀體,再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示),這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是。人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質,因此應含有植物激素、和等幾類物質。 (3)用脫毒苗進行繁殖,可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗,可以選取植物的進行組織培養(yǎng)。 (4)植物組織培養(yǎng)技術可與基因工程技術相結合獲得轉基因植株。將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是(用流程圖表示)。 答案:(1)能保持植物原有的遺傳特性,繁殖速度快(2)有利于胚狀體進行呼吸作用礦質元素糖(3)莖尖(4)含目的基因的細胞愈傷組織小植株解析:(1)基于植物組織培養(yǎng)技術的微型繁殖實現了植物克隆,屬于無性繁殖技術。與常規(guī)的種子繁殖方法(有性生殖)相比,微型繁殖技術可以保持植物原有的遺傳特性,快速實現種苗的大量繁殖。(2)人工種子的人工種皮要保證胚狀體正常的生命活動,一方面要有透氣性,使胚狀體能夠進行呼吸作用;另一方面要有子葉或胚乳的功能,為胚狀體生長發(fā)育提供必需的植物激素、礦質元素和糖等幾類物質。(3)植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒很少,甚至無病毒。用莖尖進行組織培養(yǎng),再生的植株就有可能不帶病毒,從而獲得脫毒苗。(4)將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株,應首先對含有目的基因的細胞進行脫分化處理獲得愈傷組織,然后誘導其再分化,即可獲得試管苗(小植株)。5.菊天牛是菊花的主要害蟲之一?？蒲腥藛T將抗蟲基因轉入菊花,培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉基因菊花的技術流程,請據圖回答下列問題。注卡那霉素抗性基因(kanR)作為標記基因,菊花葉片對卡那霉素高度敏感。(1)為了促進土壤農桿菌吸收重組質粒,可用處理土壤農桿菌,使其處于以便吸收重組質粒。 (2)將重組質粒導入土壤農桿菌的目的是利用農桿菌能夠的特點,使目的基因進入受體細胞中,并插入菊花細胞的上,最終形成轉基因植株。 (3)將愈傷組織轉移到添加一定濃度植物激素和的培養(yǎng)基中,在適宜條件下進行培養(yǎng),篩選轉基因菊花。 (4)用PCR方法檢測轉基因菊花是否含有目的基因時,需根據的核苷酸序列設計特異引物,以為模板進行第一輪擴增。 (5)將轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲,實驗結果如下表所示。組別死亡率/%實驗組轉基因植株160.00轉基因植株253.33對照組13.33對照組應飼喂等量的。 據表分析,差異顯著,說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。 答案:(1)Ca2+(或CaCl2)感受態(tài)(2)感染菊花(或植物)細胞,并將T-DNA轉移至受體細胞染色體(3)卡那霉素(4)抗蟲基因(目的基因)轉基因菊花的DNA(或“含目的基因的菊花的DNA”)(5)非轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料的混合物實驗組與對照組死亡率6.科學家利用植物體細胞雜交技術成功獲得了番茄馬鈴薯雜種植株,為了便于雜種細胞的篩選和鑒定,科學家利用紅色熒光和綠色熒光分別標記番茄和馬鈴薯的原生質體膜上的蛋白質,其培育過程如下圖所示。(1)植物體細胞雜交依據的生物學原理有。 (2)過程常用的酶是,細胞融合完成的標志是。 (3)植物原生質體融合常利用(化學試劑)誘導,在鑒定雜種原生質體時可用顯微鏡觀察,根據細胞膜表面的熒光的不同可觀察到種不同的兩兩融合類型的原生質體,當觀察到時,可判斷該原生質體是由番茄和馬鈴薯融合而成的。 (4)過程和過程依次為,過程中的培養(yǎng)基常添加的植物激素是。 (5)若番茄體細胞內有m條染色體,馬鈴薯體細胞內有n條染色體,則“番茄馬鈴薯”細胞在有絲分裂后期含條染色體。若雜種細胞培育成的“番茄馬鈴薯”植株為四倍體,則此雜種植株的花粉經離體培育得到的植株屬于植株。 答案:(1)細胞膜的流動性、植物細胞的全能性(2)纖維素酶和果膠酶形成了新的細胞壁(3)聚乙二醇(PEG)3融合的細胞表面既有紅色熒光又有綠色熒光(4)脫分化和再分化生長素和細胞分裂素(5)2(m+n)單倍體解析:(1)植物體細胞雜交要將不同種的植物細胞誘導融合成一個雜種細胞,再利用植物組織培養(yǎng)技術將雜種細胞培育成植株,體現的生物學原理為細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。(2)植物細胞融合時需先用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞的細胞壁獲得原生質體,雜種細胞再生出新的細胞壁是細胞融合完成的標志。(3)植物原生質體融合過程常利用化學試劑聚乙二醇(PEG),融合后有3種不同的兩兩融合類型的原生質體,分別是番茄細胞自身融合細胞(紅色熒光)、馬鈴薯細胞自身融合細胞(綠色熒光)、番茄馬鈴薯融合細胞(紅色+綠色熒光)三類。(4)雜種細胞形成愈傷組織的過程屬于植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化,愈傷組織形成植物體的過程屬于再分化。(5)雜種細胞的染色體數為融合前兩種細胞染色體數之和,即(m+n)。細胞有絲分裂后期,由于著絲點分裂,姐妹染色單體分開,使得雜種細胞中的染色體數目加倍為2(m+n),經過花粉離體培養(yǎng)形成的植株不論細胞中含有幾個染色體組均屬于單倍體。7.(2017全國理綜).幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內,可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}。(1)在進行基因工程操作時,若要從植物體中提取幾丁質酶的mRNA,常選用嫩葉而不選用老葉作為實驗材料,原因是。提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是。 (2)以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是。 (3)若要使目的基因在受體細胞中表達,需要通過質粒載體而不能直接將目的基因導入受體細胞,原因是(答出兩點即可)。 (4)當幾丁質酶基因和質粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是。 (5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據中心法則分析,其可能的原因是。 .Rag2基因缺失小鼠不能產生成熟的淋巴細胞。科研人員利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如下圖所示。(1)步驟中,在核移植前應去除卵母細胞的(結構)。 (2)培養(yǎng)細胞過程中,要置于CO2培養(yǎng)箱中,其中CO2的主要作用是。 (3)步驟中,需要構建含有Rag2基因的表達載體?？梢愿鶕ag2基因的設計引物,利用PCR技術擴增Rag2基因片段。用Hind 和Pst限制酶分別在片段兩側進行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達載體,所選擇的表達載體上應具有酶的酶切位點。 (4)為檢測Rag2基因的表達情況,可提取治療后小鼠骨髓細胞的,用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。 答案:.(1)嫩葉組織細胞易破碎防止RNA降解(2)在逆轉錄酶的作用下,以mRNA為模板按照堿基互補配對的原則可以合成cDNA(3)目的基因無復制原點;目的基因無表達所需啟動子(4)磷酸二酯鍵(5)目的基因的轉錄或翻譯異常.(1)細胞核(2)維持培養(yǎng)液的pH(3)核苷酸序列Hind和Pst(4)蛋白質