(精品)基因工程的工具——酶與載體

單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,DNA,重組技術(shù)的基本工具,基因工程,實(shí)例,1,.基因工程的優(yōu)點(diǎn)；,2,.基因工程成功的基礎(chǔ)；,3,.基因工程的原理；,4.,基因工程的三種工具的作用及特點(diǎn)。,指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)并通過,體外,DNA,重組,和,轉(zhuǎn)基因,等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造,出更,符合人們需要,的新的,生物類型,和,生物產(chǎn)品,。由于基因工程是在,DNA,分子水平,上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫作,DNA,重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)。,基因工程的概念,別名,操作環(huán)境,操作對象,操作水平,基本過程,原理,基因拼接技術(shù)或,DNA,重組技術(shù),生物體外,基因,DNA,分子水平,剪切拼接導(dǎo)入表達(dá),基因重組,實(shí)例：基因工程培育抗蟲棉的簡要過程,抗蟲棉的培育有哪些關(guān)鍵步驟？,蘇云金芽孢桿菌,提取,抗蟲基因,普通棉花,(,無抗蟲特性,),棉花細(xì)胞,(,含抗蟲基因,),與載體拼接，導(dǎo)入,棉花植株,(,有抗蟲特性,),表達(dá),解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟需要哪些工具？,限制性核酸內(nèi)切酶、,DNA,連接酶、載體。,“分子手術(shù)刀”,來源,主要從原核生物中分離純化而來,種類,EcoR,Sam,本質(zhì),蛋白質(zhì),特點(diǎn),識別特定序列、切割特定位點(diǎn),切割結(jié)果,黏性末端,平末端,黏性末端,黏性末端,EcoR,一、限制性核酸內(nèi)切酶,來源,主要從原核生物中分離純化而來,種類,EcoR,Sam,本質(zhì),蛋白質(zhì),特點(diǎn),識別特定序列、切割特定位點(diǎn),切割結(jié)果,黏性末端,平末端,Sma,平末端平末端,“分子手術(shù)刀”,一、限制性核酸內(nèi)切酶,中心軸線處,中心軸線兩側(cè),來源,主要從原核生物中分離純化而來,種類,EcoR,Sam,本質(zhì),蛋白質(zhì),特點(diǎn),識別特定序列、切割特定位點(diǎn),切割結(jié)果,黏性末端,平末端,“分子手術(shù)刀”,一、限制性核酸內(nèi)切酶,二、,DNA,連接酶,EcoliDNA,連接酶,大腸桿菌,連接黏性末端,T,4,DNA,連接酶,T,4,噬菌體,連接黏性末端或平末端,功能,將雙鏈,DNA,片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的,磷酸二酯鍵,。,用同種限制酶切割,DNA,連接酶,“分子縫合針”,DNA,聚合酶和,DNA,連接酶的比較,DNA,連接酶,DNA,聚合酶,連接,DNA,鏈,連接部位,雙鏈,在兩,DNA,片斷,之間形成,磷酸二脂鍵,單鏈,將,單個(gè),核苷酸加到已存在的核酸片斷,3,末端形成,磷酸二脂鍵,三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體,功能,將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞,使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行大量復(fù)制,條件,在宿主細(xì)胞內(nèi)大量復(fù)制并穩(wěn)定存在,具有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，以供外源,DNA,片段插入,具有標(biāo)記基因，供重組,DNA,的鑒定和選擇,種類,質(zhì)粒,噬菌體衍生物,動(dòng)植物病毒,去向,留在宿主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制,整合到受體細(xì)胞的染色體的,DNA,上，并隨染色體,DNA,進(jìn)行同步復(fù)制,“,分子運(yùn)輸車,”,2,、能否用,SARS,病毒作為基因載體？,3,、作為載體，若沒有切割位點(diǎn)將怎樣？,4,、攜帶目的基因的載體是否進(jìn)入了受體細(xì)胞，如何鑒定？,5,、,假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制，將怎樣？,1,、從化學(xué)組成來看，載體應(yīng)含有什么成分？,雙鏈,DNA,不能,不能進(jìn)行,DNA,的重組,載體上應(yīng)有標(biāo)記基因,可能造成基因丟失,基因工程是在,DNA,分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的。在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的步驟是（）,A.,人工合成目的基因,B.,目的基因與運(yùn)載體結(jié)合,C.,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,D.,目的基因的檢測和表達(dá),C,