2019屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 第十二單元 生物技術(shù)實(shí)踐 隨堂真題演練40 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用.doc

隨堂真題演練40 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 (2016高考全國卷)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；制作無菌平板；設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；將各組平板置于37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}：(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于_。若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是_。(2)步驟中，實(shí)驗(yàn)組的操作是_。(3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象。若將30(即366)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法_(填“正確”或“不正確”)。解析：(1)牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物，都可以作為氮源；觀察菌落需利用固體培養(yǎng)基，因此可推知若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是凝固劑，如瓊脂。(2)實(shí)驗(yàn)組的各組構(gòu)成對(duì)比實(shí)驗(yàn)，設(shè)計(jì)要依據(jù)單一變量原則，結(jié)合實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河闷桨迨占淌铱諝庵械奈⑸?，以了解教室?nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況，可知步驟中，實(shí)驗(yàn)組的操作是將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間。(3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象。該污染菌可能對(duì)空氣中的其他微生物的生長(zhǎng)無影響也可能有影響，因此將30(即366)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法不正確。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間(3)污染不正確 (2015高考全國卷)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問題：(1)顯微觀察時(shí)，微生物A菌體中的油脂通常可用_染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用_(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(3)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在35 、40 、45 溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg，則上述三個(gè)溫度中，_條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞_設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。解析：(1)生物組織中的油脂能被蘇丹(或蘇丹)染成橘黃色(或紅色)。(2)為了篩選出能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，我們應(yīng)選用只能讓該菌落生長(zhǎng)的選擇性培養(yǎng)基，因此只能選用以油脂作為唯一碳源的固體培養(yǎng)基。(3)溫度影響酶的活性，在三個(gè)溫度中，45 時(shí)需酶量最高，說明酶活性最低；在三個(gè)溫度實(shí)驗(yàn)中40 時(shí)所需酶量最少，35 時(shí)和45 時(shí)所用酶量多，說明酶的最適溫度介于35 和45 之間，因此應(yīng)圍繞40 設(shè)計(jì)不同溫度梯度，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。答案：(1)蘇丹(或蘇丹)萃取法(2)油脂(3)4540 (高考全國卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過_滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。(3)示意圖A和B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)的利用率。解析：(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照：隨機(jī)取若干滅菌后的不接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成，若無菌落生成說明滅菌合格；0.1 mL稀釋液中平均有(393837)/338個(gè)活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1380，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為3801003.8104，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.81041 0003.8107。(2)接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后每次劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。(3)由題圖可知，B圖菌落分布相對(duì)均勻，應(yīng)為稀釋涂布平板法接種的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng)，另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。答案：(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì) 課時(shí)作業(yè)1(2018武漢調(diào)研)如表所示為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)回答有關(guān)問題：KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖尿素蒸餾水1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g定容至1 000 mL(1)該培養(yǎng)基只允許分解尿素的細(xì)菌生長(zhǎng)，這種培養(yǎng)基稱為_培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基會(huì)抑制其他種類微生物生長(zhǎng)，其原因是該培養(yǎng)基_。(2)若要通過統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是_，接種時(shí)應(yīng)采用_法，該方法接種培養(yǎng)后的菌落，不可能是圖中的_。(3)從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對(duì)其做進(jìn)一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入_指示劑，培養(yǎng)該菌后，如果指示劑變_，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。(4)某同學(xué)用0.1 mL稀釋液在稀釋倍數(shù)為106的平板中測(cè)得菌落數(shù)的平均值為163，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是_個(gè)。答案：(1)選擇以尿素為唯一的氮源(2)瓊脂稀釋涂布平板D(3)酚紅紅(4)1.631092(2018黑龍江大慶中學(xué)模擬)回答與微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)有關(guān)的問題：(1)在制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入的常用凝固劑是_。若培養(yǎng)基需調(diào)節(jié)pH，則應(yīng)在滅菌之_(填“前”或“后”)調(diào)節(jié)。(2)為防止外來雜菌入侵，對(duì)_等可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌。(3)如圖為平板劃線法接種后的示意圖。在劃線接種的整個(gè)操作過程中，對(duì)接種環(huán)至少需進(jìn)行_次灼燒滅菌。接種后蓋上皿蓋，將平板_放入恒溫箱中培養(yǎng)，這樣放置的目的是_。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí)，每隔一個(gè)“時(shí)間間隔”統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，最后選取_作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目。解析：(1)制備固體培養(yǎng)基通常加入的凝固劑是瓊脂。培養(yǎng)基若在滅菌后調(diào)pH，可造成污染，故培養(yǎng)基調(diào)pH應(yīng)在滅菌前進(jìn)行。(2)滅菌的方法通常有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌三種。采用干熱滅菌的通常有玻璃器皿和金屬用具。(3)平板劃線法接種過程中需在接種前、每次劃線后對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌。圖中共接種5個(gè)區(qū)域，故接種環(huán)至少需要進(jìn)行6次灼燒滅菌處理。微生物培養(yǎng)過程中，易產(chǎn)生冷凝水，為防止水珠滴在培養(yǎng)基表面造成污染，培養(yǎng)時(shí)需將平板倒置。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí)，要以菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄為最終結(jié)果，這樣可以防止因遺漏而導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果偏小。答案：(1)瓊脂前(2)玻璃器皿和金屬用具(3)6倒置避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過快揮發(fā)(4)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄3臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用_法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素A_；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素B_；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明_；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素_。解析：(1)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)微生物純化培養(yǎng)時(shí)，常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個(gè)菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖，常用玻璃涂布器把稀釋的菌液均勻涂滿整個(gè)平板。(3)對(duì)某種抗生素越敏感的致病菌，在該抗生素存在的范圍內(nèi)，越不易生存，形成的透明圈就越大。但是，如果在透明圈中還有菌落生存，則說明這個(gè)菌落的細(xì)菌耐藥性很強(qiáng)。(4)通過(3)可知，在應(yīng)用時(shí)，要想殺死某致病菌，就得選擇能使該致病菌大量死亡，即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。答案：(1)平板劃線稀釋涂布平板(2)稀釋涂布平板(3)敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱耐藥菌(4)A4(2018吉林長(zhǎng)春模擬)下面是篩選抗鏈霉素大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)步驟及相關(guān)圖解。實(shí)驗(yàn)步驟：把大量對(duì)鏈霉素敏感的大腸桿菌接種在不含鏈霉素的培養(yǎng)基1的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。待其長(zhǎng)出密集的小菌落后，用影印法接種到不含鏈霉素的培養(yǎng)基2上，隨即再影印到含有鏈霉素的培養(yǎng)基3上，進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)基3上出現(xiàn)了個(gè)別抗鏈霉素的菌落，將其挑選出。請(qǐng)回答下列問題：(1)配制培養(yǎng)基時(shí)除了滿足基本的營養(yǎng)條件外，還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)特殊營養(yǎng)物質(zhì)、_、_的要求。(2)從功能上看，含有鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。若在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，則培養(yǎng)皿中長(zhǎng)出的菌落顏色為_。由圖可知，1號(hào)培養(yǎng)基接種的方法為_。(3)對(duì)培養(yǎng)基2和3進(jìn)行比較，在培養(yǎng)基2上找到與3上相應(yīng)的菌落，挑取其中一個(gè)菌落接種到_(填“含鏈霉素”或“不含鏈霉素”)的培養(yǎng)基上，如果有較多的菌落出現(xiàn)，則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之_(填“前”或“后”)。(4)培養(yǎng)基3中的菌落比1、2中的菌落少很多，這說明基因突變具有_的特點(diǎn)。解析：(1)配制培養(yǎng)基時(shí)在提供幾種基本營養(yǎng)條件的基礎(chǔ)上，還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。(2)鏈霉素是抗生素，對(duì)大腸桿菌具有選擇作用。在伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顏色為黑色。由題圖可知，1號(hào)培養(yǎng)基接種的方法為稀釋涂布平板法。(3)培養(yǎng)基2和培養(yǎng)基3上相同的菌落，是具有相同性狀的大腸桿菌形成的，將培養(yǎng)基2中一個(gè)相應(yīng)菌落接種到含鏈霉素的培養(yǎng)基上，若出現(xiàn)較多的菌落，則說明該抗性基因突變發(fā)生在該菌接觸鏈霉素之前。(4)抗鏈霉素性狀是大腸桿菌基因突變后獲得的性狀，3號(hào)培養(yǎng)皿中的菌落比1號(hào)、2號(hào)中的菌落少很多，這說明基因突變頻率很低。答案：(1)pH氧氣(2)選擇黑色稀釋涂布平板法(3)含鏈霉素前(4)低頻性5(2018河北邯鄲一模)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答下列問題：(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的_。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”的代謝類型是_。(3)在上述實(shí)驗(yàn)操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí)，常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種，此過程中所用的接種工具是_，操作時(shí)采用的滅菌方法是_。(5)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是_。(6)某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用104、105、106稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿，從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)是_，此對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是_。解析：(1)該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選“目的菌”，故培養(yǎng)基中添加的化合物A起選擇作用。(2)微生物正常生長(zhǎng)需要碳源、氮源、無機(jī)鹽等，由培養(yǎng)基中添加的物質(zhì)種類知：化合物A應(yīng)該給微生物生長(zhǎng)提供碳源、氮源。培養(yǎng)過程需振蕩，說明目的菌是需氧型微生物。(6)統(tǒng)計(jì)污水池中的“目的菌”時(shí)應(yīng)設(shè)置空白對(duì)照，以用于檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌嚴(yán)格。答案：(1)篩選目的菌選擇(2)化合物A異養(yǎng)需氧型(3)防止外來雜菌污染(4)接種環(huán)灼燒滅菌(5)防止造成環(huán)境污染(6)不接種的空白培養(yǎng)基檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格