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1、
第一部分 微生物的利用 實驗2 分離以尿素為氮源的微生物
一、以尿素為氮源的微生物
1．尿素：又稱________，是________的產(chǎn)物。在人和其他哺乳動物如家畜的________中都含有尿素，大量尿素的存在對環(huán)境造成污染。
2．以尿素為氮源的微生物：
這些細菌可以尿素為氮源，是因為其含有________，通過________尿素作為其生長的氮源。其利用尿素的方程為：
3．分離以尿素為氮源的微生物所依據(jù)的原理：在氮源只有尿素時，這些微生物能利用尿素獲得氮源而存活；而其他微生物卻不能利用尿素，最終因為缺乏氮源而死亡。
答案：1.脲 蛋白質(zhì)降解 尿
2．脲酶 降解
2、
二、從土壤中分離出以尿素為氮源的微生物實驗
1．實驗?zāi)康模?
(1)使用________的培養(yǎng)基(含有尿素)分離________的細菌(含有脲酶的細菌)。
(2)使用____________檢知酶(脲酶)所催化的反應(yīng)。
2．實驗內(nèi)容：
(1)從________中________能利用尿素的細菌。
(2)觀察________。
3．實驗步驟：
(1)采用倒平板技術(shù)，在超凈臺上的________旁制得固體平面________培養(yǎng)基與________培養(yǎng)基；
(2)制備細菌懸浮液：
將________1 g，在________條件下加到________mL無菌水的三角瓶中，振蕩_
3、_______min，制成________稀釋液；從該稀釋液中取________mL懸液加到________mL無菌水的三角瓶中，經(jīng)振蕩就制成________稀釋液；再從該稀釋液中取________mL懸液加到________mL無菌水的三角瓶中，經(jīng)振蕩就制成________稀釋液；依此法可依次制備出10－5、10－6……土壤稀釋液。
(3)用________法分離細菌：
取________mL稀釋10－4和10－5的________，分別加到有________培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，再將保存在______中的玻璃刮刀放在________上灼燒，待________后，在_
4、_____旁打開培養(yǎng)皿，將菌液涂布到________上。
(4)培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿________，在________℃恒溫箱中培養(yǎng)________h。
(5)觀察、計數(shù)菌落。
培養(yǎng)基
細菌懸浮液稀釋度
________
________
______固體培養(yǎng)基
______固體培養(yǎng)基
答案：1.(1)專一 專一 (2)指示劑顏色的變化
2．(1)土壤 分離出 (2)菌落數(shù)
3．(1)酒精燈 LB全營養(yǎng) 尿素 (2)土樣 無菌 99 10 10－2 0.5 4.5 10－3 0.5 4.5 10－4 (3)涂布 0.1 土壤稀釋液 LB 尿素 70%酒精 酒精燈火焰 刮刀上火焰熄滅 酒精燈火焰 整個平面 (4)倒置 37 24～48 (5)10－4 10－5 LB全營養(yǎng) 尿素
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