廈大微生物課件 傳染與免疫

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1、 傳染傳染非特異性免疫非特異性免疫特異性免疫特異性免疫免疫學方法及其應用免疫學方法及其應用意義:意義:-疾病的預防和治療的基礎疾病的預防和治療的基礎-生物藥物的研究和開發(fā)生物藥物的研究和開發(fā)-現(xiàn)代分子的分析和測試技術現(xiàn)代分子的分析和測試技術 中國是免疫學的發(fā)祥地?中國是免疫學的發(fā)祥地?免疫技術的應用免疫技術的應用.1 .1 傳染傳染一、傳染與傳染病一、傳染與傳染病傳染:病原突破宿主的免疫防衛(wèi)系統(tǒng),傳染:病原突破宿主的免疫防衛(wèi)系統(tǒng), 在宿主的特定部位生長繁殖并引起一在宿主的特定部位生長繁殖并引起一 系列的病理生理變化過程。系列的病理生理變化過程。傳染?。耗軌驈囊粋€宿主傳播到另一傳染病:能夠從一個

2、宿主傳播到另一 個宿主的疾病。個宿主的疾病。二、決定傳染結局的三大因素二、決定傳染結局的三大因素(一)病原體(一)病原體1 1、毒力、毒力1 1)侵染力)侵染力 吸附、侵入能力吸附、侵入能力 繁殖擴散能力繁殖擴散能力 抗宿主防御能力抗宿主防御能力2 2)毒素毒素外毒素:病原細菌在生長過程向外分泌的外毒素:病原細菌在生長過程向外分泌的 一類毒性蛋白。一類毒性蛋白。內毒素:內毒素:G G- -細菌的脂多糖,僅在細胞死亡細菌的脂多糖,僅在細胞死亡 后才裂解釋放。后才裂解釋放。 類毒素:細菌外毒素脫毒失去毒性后,仍類毒素:細菌外毒素脫毒失去毒性后,仍 保持免疫原性的生物制品。保持免疫原性的生物制品。

3、沙門氏菌的侵染力和毒力沙門氏菌的侵染力和毒力 內毒素的測定內毒素的測定-鱟試劑法鱟試劑法原理:內毒素激活變形細胞溶解物原理:內毒素激活變形細胞溶解物(LAL)(LAL)中的中的B B因因子而引發(fā)系列的激活過程,使可溶蛋白凝固成為子而引發(fā)系列的激活過程,使可溶蛋白凝固成為可見的可見的 凝膠反應。凝膠反應。 2 2、病原菌數量、病原菌數量 3 3、侵入途徑、侵入途徑(二)宿主的免疫力(二)宿主的免疫力(三)環(huán)境因素(三)環(huán)境因素三、傳染的三種可能結局三、傳染的三種可能結局隱性傳染:病原侵入后很快為宿主消滅,隱性傳染:病原侵入后很快為宿主消滅, 基本上不出現(xiàn)癥狀?;旧喜怀霈F(xiàn)癥狀。帶菌狀態(tài):無明顯感

4、染癥狀的感染個體。帶菌狀態(tài):無明顯感染癥狀的感染個體。顯性傳染:病原侵入后使宿主細胞組織顯性傳染:病原侵入后使宿主細胞組織 損害,生理功能異常而出現(xiàn)損害,生理功能異常而出現(xiàn) 一系列的臨床癥狀。一系列的臨床癥狀。 非特異性免疫(非特異性免疫(nonspecific immunitynonspecific immunity) 生物體在長期進化中形成,屬于先天生物體在長期進化中形成,屬于先天 即有、相對穩(wěn)定、無特殊針對性的對付病即有、相對穩(wěn)定、無特殊針對性的對付病 原體的天然抵抗力。原體的天然抵抗力。 非特異免疫組成非特異免疫組成屏障結構屏障結構吞噬細胞的吞噬功能吞噬細胞的吞噬功能正常組織和體液中的

5、抗菌物質正常組織和體液中的抗菌物質炎癥反應炎癥反應一、表皮與屏障結構一、表皮與屏障結構1 1)機械性排阻)機械性排阻2 2)抗菌物質)抗菌物質3 3)正常菌群)正常菌群2 2血腦屏障和血胎屏障血腦屏障和血胎屏障 血腦屏障血腦屏障 血腦屏障的細胞間連接緊,胞飲作用微弱等特點,血腦屏障的細胞間連接緊,胞飲作用微弱等特點,可阻擋病原菌及其毒物隨血流可阻擋病原菌及其毒物隨血流 透入腦組織,從而透入腦組織,從而保護中樞神經系統(tǒng)。保護中樞神經系統(tǒng)。 血胎屏障:血胎屏障: 由母體子宮內膜和胎兒絨毛膜共同組成。不由母體子宮內膜和胎兒絨毛膜共同組成。不 妨礙母子物質交換,但可能妨礙母子物質交換,但可能 防止病原

6、體侵入。防止病原體侵入。二、吞噬細胞及其吞噬作用二、吞噬細胞及其吞噬作用人體血細胞有:紅細胞、白細胞、血小板三種。人體血細胞有:紅細胞、白細胞、血小板三種。 主要吞噬細胞:主要吞噬細胞:嗜中性粒細胞;巨噬細胞嗜中性粒細胞;巨噬細胞 一種數量最多、血液中主要的小吞噬細胞。一種數量最多、血液中主要的小吞噬細胞。存在于血液、淋巴液和各種組織中的大型單核細胞,具有存在于血液、淋巴液和各種組織中的大型單核細胞,具有吞噬和胞飲功能。吞噬和胞飲功能。功能:功能:1 1)吞噬和殺菌作用吞噬和殺菌作用2)抗原遞呈作用:)抗原遞呈作用:抗原信息加工、傳遞給抗原信息加工、傳遞給T T 淋巴細胞。淋巴細胞。(MHCM

7、HC:主要組織相容性復合物):主要組織相容性復合物)(TCRTCR:T T細胞抗原受體細胞抗原受體 : CD4CD4:T T細胞表面特異蛋白)細胞表面特異蛋白)3 3)免疫調節(jié)作用:分泌各種活性物質)免疫調節(jié)作用:分泌各種活性物質4 4)抗癌作用:細胞毒作用)抗癌作用:細胞毒作用三、炎癥反應三、炎癥反應 吞噬細胞聚集炎癥部位吞噬細胞聚集炎癥部位血流加速使抗菌因子、血流加速使抗菌因子、 AbAb局部濃縮;局部濃縮; 死亡宿主細胞的堆集可死亡宿主細胞的堆集可 釋放出抗釋放出抗MM物質;物質;氧濃度下降、乳酸積累,氧濃度下降、乳酸積累, 可抑制多種病原菌生長;可抑制多種病原菌生長; 高溫降低病原體生

8、長速度。 四、正常體液或組織中的抗菌物四、正常體液或組織中的抗菌物 補體:一組非特異性血清蛋白補體:一組非特異性血清蛋白, ,具有擴大具有擴大 和增強抗體的功能。和增強抗體的功能。補體的性質:補體的性質: 1 1)熱不穩(wěn)定)熱不穩(wěn)定 2 2)酶原)酶原 3 3)作用的非特異性)作用的非特異性識別單位識別單位活化單位活化單位膜攻擊單位膜攻擊單位替代途徑替代途徑調節(jié)蛋白調節(jié)蛋白血清中主要血清中主要9種補體蛋白的作用種補體蛋白的作用 干擾素干擾素(IFN)(IFN):病毒或干擾素誘生劑誘導:病毒或干擾素誘生劑誘導 產生產生的蛋白,具有抑制病毒和增強機體的免疫功能。的蛋白,具有抑制病毒和增強機體的免疫

9、功能。干擾素(干擾素(IFNsIFNs)的特性)的特性1 1)化學成分為糖蛋白)化學成分為糖蛋白: : , , , , , , 2 2)廣譜的抗病毒和免疫調節(jié)活性)廣譜的抗病毒和免疫調節(jié)活性3 3)誘導產生)誘導產生4) IFN4) IFN刺激細胞合成刺激細胞合成AVPAVP降解降解mRNAmRNA產產 生抗病毒作用生抗病毒作用建議讀物3 3特異性免疫特異性免疫特異性免疫特異性免疫 生物體在生活過程中與抗原物質接觸后生物體在生活過程中與抗原物質接觸后產生的一系列防衛(wèi)功能。其特點是后天產生產生的一系列防衛(wèi)功能。其特點是后天產生的、特異性強、免疫能力具有個體的特異性、的、特異性強、免疫能力具有個體

10、的特異性、包括體液免疫和細胞免疫。包括體液免疫和細胞免疫。1 1、中樞免疫器官:、中樞免疫器官:(發(fā)生、分化、成熟)發(fā)生、分化、成熟)骨髓、胸腺、骨髓、胸腺、法氏囊法氏囊/ /類囊器官類囊器官2 2、外周免疫器官、外周免疫器官 (定居、應答)(定居、應答)淋巴結、脾臟淋巴結、脾臟一、免疫器官一、免疫器官二、免疫細胞及其在細胞免疫中的作用二、免疫細胞及其在細胞免疫中的作用(一)(一)T T細胞細胞(胸腺依賴性細胞)(胸腺依賴性細胞) 1 1 來源來源 多能干細胞多能干細胞未分化淋巴細胞未分化淋巴細胞 血流血流 胸腺胸腺 成熟的成熟的T T、B B細胞細胞 淋巴結淋巴結 效應效應T T細胞細胞 T

11、 T細胞定位于周圍淋巴結的副皮質區(qū)及脾臟白髓部分,并可經細胞定位于周圍淋巴結的副皮質區(qū)及脾臟白髓部分,并可經 血液、組織液、淋巴液釋放到外周血循環(huán)中,當遇血液、組織液、淋巴液釋放到外周血循環(huán)中,當遇AgAg刺激,刺激,T T 細胞進一步分化、增殖,以發(fā)揮其特異性細胞免疫功能。細胞進一步分化、增殖,以發(fā)揮其特異性細胞免疫功能。 2 2T T細胞主要亞群(以功能劃分)細胞主要亞群(以功能劃分)調節(jié)調節(jié)T T細胞(細胞( T TR R)1) 1)輔助性輔助性T T細胞細胞(T(TH H) ):輔助:輔助B B細胞,產生抗體。細胞,產生抗體。2)2)抑制性抑制性T T細胞細胞( T( TS S) ):

12、 抑制抑制T TH H,TcTc和和 B B細胞細胞 的功能。的功能。 效應效應T T細胞細胞(T(TE E) ) 1) 1)遲發(fā)型超敏遲發(fā)型超敏T T細胞細胞(T(TDTHDTH ) ):釋放淋巴因子,:釋放淋巴因子,引起遲發(fā)型超敏反應。引起遲發(fā)型超敏反應。2)2)細胞毒細胞毒T T細胞細胞( T( TC C) ):直接殺傷帶:直接殺傷帶T TC C抗原的抗原的 靶細胞靶細胞( (分泌穿孔素引起被感染細胞溶解分泌穿孔素引起被感染細胞溶解) )Granzymes:顆粒酶:顆粒酶 Perforin:穿孔素:穿孔素 apoptosis :凋亡凋亡CD (CD (白細胞分化抗原):白細胞分化抗原):

13、 白細胞不同分化階段特有的膜表面分子,具有參與活白細胞不同分化階段特有的膜表面分子,具有參與活化、介導細胞遷移等多種功能?;?、介導細胞遷移等多種功能。 3. T3. T細胞表面標志:細胞表面標志:表面受體:表面受體:綿羊紅細胞受體(綿羊紅細胞受體(E E受體),受體),E E玫瑰花結試驗玫瑰花結試驗 (檢測外周血(檢測外周血T T細胞數目,比例)。細胞數目,比例)。有絲分裂原受體(例:有絲分裂原受體(例:PHAPHA,Con ACon A等)等)抗原受體:抗原受體: T T 細 胞 抗 原 受 體細 胞 抗 原 受 體(TCR)(TCR)識別由識別由APCAPC遞呈的遞呈的AgAg(二)(二)

14、B B淋巴細胞(骨髓依賴性淋巴細胞)淋巴細胞(骨髓依賴性淋巴細胞)1 1B B細胞的表面受體細胞的表面受體 有絲分裂原受體:有絲分裂原受體: LPSLPS受體受體膜表面抗原受體:膜表面抗原受體: (膜表面免疫球蛋白:(膜表面免疫球蛋白:SmIgSmIg)補體受體:補體受體: FcFc受體:抗體可受體:抗體可結晶段受體結晶段受體 SmIgSmIg與抗與抗SmIgSmIg的抗體結合的抗體結合2 2B B細胞的表面抗原:細胞的表面抗原: SmIgSmIg3. B3. B細胞的亞群和功能細胞的亞群和功能 B1: TB1: T細胞非依賴性亞群;細胞非依賴性亞群; B2: TB2: T細胞依賴性亞群細胞依

15、賴性亞群小結:小結:T T細胞、細胞、B B細胞表面抗原受體的比較細胞表面抗原受體的比較T T細胞細胞 B B細胞細胞1)識別、接受抗原作用, 1)識別、接受抗原作用,又稱膜表面稱T細胞受體(TCR) 免疫球蛋白(SmIg)2 2)不識別游離抗原, 2)識別游離抗原,但對TD抗原需要TH的幫助而接受APC傳遞和加工的抗原 3 3)結構類似于Ig的Fab 3)結構為IgM或IgD4)具抗原性,與相應的抗體結合 4)具抗原性,與相應的抗體結合 (抗相應的IgM或IgD的抗體) (三)其他淋巴細胞(三)其他淋巴細胞 1 1、K K細胞:殺傷細胞:殺傷Ag-AbAg-Ab復合體復合體 2 2、NKNK

16、細胞細胞 大顆粒性淋巴細胞、可在無大顆粒性淋巴細胞、可在無Ab/AgAb/Ag致敏下,致敏下, 殺傷某些腫瘤細胞或被病毒感染細胞。殺傷某些腫瘤細胞或被病毒感染細胞。 3 3、NKTNKT細胞細胞 具具T T、NKNK細胞特性,與抑制自身免疫有關細胞特性,與抑制自身免疫有關三、免疫應答三、免疫應答 免疫應答的過程免疫應答的過程 1. 1. 感應階段:抗原識別、呈遞感應階段:抗原識別、呈遞 2. 2. 增殖分化階段:成熟漿細胞、致敏淋巴細胞;增殖分化階段:成熟漿細胞、致敏淋巴細胞; 3. 3. 效應階段:分泌抗體、淋巴因子、執(zhí)行免疫功能效應階段:分泌抗體、淋巴因子、執(zhí)行免疫功能 TD TD抗原抗原

17、 胸腺依賴性抗原。多數天然抗原為胸腺依賴性抗原。多數天然抗原為TDTD抗抗 原??梢痼w液和細胞免疫;產生原??梢痼w液和細胞免疫;產生IgGIgG為為 主的抗體;可產生免疫記憶。主的抗體;可產生免疫記憶。 TITI抗原抗原 非胸腺依賴性抗原。主要為細菌脂多糖等非胸腺依賴性抗原。主要為細菌脂多糖等 類抗原。僅引起體液免疫;產生類抗原。僅引起體液免疫;產生IgMIgM抗體;抗體; 不產生免疫記憶。不產生免疫記憶。 免疫應答的類型和過程示意圖免疫應答的類型和過程示意圖 四、免疫分子四、免疫分子 及其在體液免疫中的作用及其在體液免疫中的作用(一)抗原(一)抗原(antigenantigen,AgAg

18、) 一類能誘導機體發(fā)生免疫應答,并能與相一類能誘導機體發(fā)生免疫應答,并能與相應抗體或應抗體或T T淋巴細胞受體發(fā)生特異性免疫反淋巴細胞受體發(fā)生特異性免疫反應的大分子物質。應的大分子物質??乖咎匦裕嚎乖咎匦裕?-免疫原性免疫原性-反應原性反應原性完全抗原完全抗原半抗原:只有反應原半抗原:只有反應原 性而無免疫原性性而無免疫原性 (鄰苯二酚為半抗原)(鄰苯二酚為半抗原) 2 2免疫原性的物質基礎免疫原性的物質基礎 分子量:分子量:MM10104 4DaDa結構復雜:抗原性強弱依次為蛋白復雜結構復雜:抗原性強弱依次為蛋白復雜多糖核酸(半抗原),類脂一般不具抗原多糖核酸(半抗原),類脂一般不具

19、抗原性。性。異物性:異種異物性:異種/ /異體異體, ,種族關系越遠,組織種族關系越遠,組織結構差異結構差異 越大,抗原性越強。越大,抗原性越強。 3 3抗原決定簇(抗原表位)抗原決定簇(抗原表位) 存在于抗原表面決定其抗原特異性的特定化存在于抗原表面決定其抗原特異性的特定化 學基團。學基團??乖Y合價:抗原結合價: 與抗體分子相結合的抗原決定簇的總數。與抗體分子相結合的抗原決定簇的總數。 抗原決定簇(表位)的數目是抗原的價抗原決定簇(表位)的數目是抗原的價 4 4細菌的抗原細菌的抗原共同抗原:共同抗原: 某些天然抗原分子上含某些天然抗原分子上含有相同抗原決定簇,能夠有相同抗原決定簇,能夠促進

20、機體產生促進機體產生 共同的抗體共同的抗體而產生交叉反應。而產生交叉反應。吸收反應:吸收反應:利用交叉發(fā)應除去共同抗利用交叉發(fā)應除去共同抗體,用于制備單價抗血清。體,用于制備單價抗血清。( (二二) )抗體(抗體(antibody, Abantibody, Ab)在抗原刺激下產生一類在抗原刺激下產生一類能夠與該抗原發(fā)生反應能夠與該抗原發(fā)生反應的免疫球蛋白。的免疫球蛋白。( Immunoglobulin, Ig ) Ab Ab特征:特征:1 1)由脊椎動物漿細胞產生;)由脊椎動物漿細胞產生;2 2)AgAg刺激;刺激;3 3)特異性結合;)特異性結合;4 4)一類具有免疫功能)一類具有免疫功能

21、的球蛋白(的球蛋白( Ig Ig);); 5 5)抗抗體)抗抗體 2 2免疫球蛋白的基本結構免疫球蛋白的基本結構 Ig Ig鏈:鏈: H H鏈,鏈,L L鏈鏈 區(qū):區(qū):V V區(qū),區(qū),C C區(qū),鉸鏈區(qū)區(qū),鉸鏈區(qū) 類:類:IgGIgG、 IgAIgA、 IgMIgM、 IgDIgD、 IgEIgE、 型:型:和和型型 肽鏈的數:肽鏈的數: L L:220220; H H:440440 IgG IgG的酶解和化學分解片段的酶解和化學分解片段 木瓜蛋白酶:木瓜蛋白酶:FabFab:抗原結合片:抗原結合片段段FC(FC(可結晶片段可結晶片段): ):結合補體結合補體, ,抗原種抗原種屬特異性屬特異性胃蛋

22、白酶:胃蛋白酶:F F(ab)ab)2 2: 2: 2價價抗原種屬的特異性:抗原種屬的特異性: 來源同種動物的任何抗體免疫其來源同種動物的任何抗體免疫其它動物產生的抗抗體均可與該動物它動物產生的抗抗體均可與該動物產生的任何抗體產生特異反應。產生的任何抗體產生特異反應。 Ig Ig的體和抗原結合價:的體和抗原結合價: 單體:單體: -2-2價價 雙體:雙體: -4-4價價 五體:五體: -5-5價價 Ig Ig的功能區(qū)的功能區(qū) H H鏈鏈: : L L鏈鏈: : 抗原結合部位由抗原結合部位由V VL L、 C CL L、V VH H、C CH H1 1四個四個功能區(qū)組成功能區(qū)組成 Ig Ig的構

23、象變化的構象變化 AgAg與與Fab結合引結合引起構象變化起構象變化, ,利利于補體的結合與于補體的結合與作用作用 4 4產抗體細胞的激活和抗體的形成產抗體細胞的激活和抗體的形成 相關的細胞表面標志和受體相關的細胞表面標志和受體-MHCII-MHCII:主要組織相容性復合物:主要組織相容性復合物II II(抗原呈遞)(抗原呈遞) -TCR-TCR:T T細胞受體(識別特異性抗原)細胞受體(識別特異性抗原)-CD-CD4 4:T T細胞表面抗原(識別細胞表面抗原(識別MHCIIMHCII) 參與的相關細胞及作用參與的相關細胞及作用(1 1)巨噬細胞:處理和傳遞抗原,但無特異)巨噬細胞:處理和傳遞

24、抗原,但無特異 性識別抗原的功能性識別抗原的功能 。(2 2)T T細胞:在抗體形成過程起調節(jié)細胞的作細胞:在抗體形成過程起調節(jié)細胞的作 用,有特異性識別抗原作用。用,有特異性識別抗原作用。(3 3)B B細胞:產生抗體的效應細胞,有特異識細胞:產生抗體的效應細胞,有特異識 別別AgAg的功能。的功能??贵w形成過程:抗體形成過程:1、M抗原遞呈作用抗原遞呈作用 2、T細胞對細胞對B細胞激活細胞激活3、漿細胞產生抗體、漿細胞產生抗體 初次應答:初次應答:潛伏期長潛伏期長,效價低效價低,IgM為主為主再次應答:再次應答:潛伏期短潛伏期短,效價高效價高,IgG為主為主 Burnet Burnet的克

25、隆選擇學說的克隆選擇學說 (識別(識別記憶記憶自身禁忌)自身禁忌)抗體的多樣性分子機制抗體的多樣性分子機制 抗體基因重排抗體基因重排7 7淋巴細胞雜交瘤技術與單克隆抗體(淋巴細胞雜交瘤技術與單克隆抗體(McAbMcAb)常規(guī)技術制備的抗血清:多克隆抗體常規(guī)技術制備的抗血清:多克隆抗體單克隆抗體(單克隆抗體(McAbMcAb):): 由純系由純系B B淋巴細胞克隆經分化、增殖的漿細胞淋巴細胞克隆經分化、增殖的漿細胞 產生的單一成分、單一特異性的免疫球蛋白。產生的單一成分、單一特異性的免疫球蛋白。 B B淋巴細胞淋巴細胞 (小白鼠脾臟,產生(小白鼠脾臟,產生AbAb,但無,但無法在體外繁殖、傳代)

26、法在體外繁殖、傳代) 骨髓骨髓癌癌細胞細胞 (癌變的漿細胞,(癌變的漿細胞, 快速繁殖,產生快速繁殖,產生 Ig,Ig,但不能與但不能與AgAg特異性結合)特異性結合) 雜種細胞雜種細胞 能在體內外大量能在體內外大量增殖增殖能產生大量單克能產生大量單克隆隆AbAb 融合融合 淋巴細胞雜交瘤技術淋巴細胞雜交瘤技術制備淋巴細胞雜交瘤的實驗方法:制備淋巴細胞雜交瘤的實驗方法: 1 1)選擇親本)選擇親本2 2)混合)混合3 3)促融)促融4 4)撿出)撿出5 5)擴大培養(yǎng))擴大培養(yǎng)雜交瘤技術雜交瘤技術建議讀物3 3免疫學方法及其應用免疫學方法及其應用 一、抗原、抗體反應的一般規(guī)律一、抗原、抗體反應的

27、一般規(guī)律1 1)特異性)特異性2 2)可逆性)可逆性 3 3)定比性)定比性 4 4)階段性)階段性5 5)條件依賴性)條件依賴性利用利用“兩對半試驗兩對半試驗”檢測乙肝病檢測乙肝病毒毒 1 1)凝集反應)凝集反應顆粒性抗原與抗體顆粒性抗原與抗體產生可見的凝集塊產生可見的凝集塊現(xiàn)象?,F(xiàn)象。直接凝集反應直接凝集反應間接凝集反應間接凝集反應2 2)沉淀反應)沉淀反應 :可溶性抗原與抗體發(fā)生可可溶性抗原與抗體發(fā)生可 見沉淀物的反應。見沉淀物的反應。雙向瓊脂擴散法雙向瓊脂擴散法免疫電泳免疫電泳3)補體結合實驗)補體結合實驗酶聯(lián)免疫吸附法(酶聯(lián)免疫吸附法(ELISAELISA)基本原理:酶與抗體(抗原)

28、結合,不改基本原理:酶與抗體(抗原)結合,不改 變變Ag-AbAg-Ab特異性和酶活性。當酶結合物與被特異性和酶活性。當酶結合物與被 檢樣品相應抗原(抗體)結合后,形成檢樣品相應抗原(抗體)結合后,形成Ag-Ag- Ab- Ab-酶復合物,在相應底物存在時,酶催化酶復合物,在相應底物存在時,酶催化 底物反應。底物反應。標記物:標記物:HRPHRP(辣根過氧化物酶)(辣根過氧化物酶)底物:底物:DAPDAP(二苯基聯(lián)苯胺)(二苯基聯(lián)苯胺)酶聯(lián)免疫吸附法測定方法酶聯(lián)免疫吸附法測定方法1 1)抗體包被)抗體包被2 2)加待測抗)加待測抗 原原3 3)加酶聯(lián)抗)加酶聯(lián)抗 體體4 4)加底物)加底物5 5)檢測)檢測

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