（江蘇專用）2020版高考生物新導(dǎo)學(xué)大一輪復(fù)習(xí) 第十單元 現(xiàn)代生物科技專題 第36講 克隆技術(shù)課件 蘇教版.ppt

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1、第36講克隆技術(shù),第十單元現(xiàn)代生物科技專題,KAO GANG YAO QIU,考綱要求,1.植物的組織培養(yǎng)(B)。 2.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆(A)。 3.細(xì)胞融合與單克隆抗體(B)。 4.生物技術(shù)中的倫理問題(A)。,考點(diǎn)一植物細(xì)胞工程,01,考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與核移植技術(shù)及生物技術(shù)中的倫理問題,02,考點(diǎn)三動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備,03,NEI RONG SUO YIN,內(nèi)容索引,矯正易錯(cuò)強(qiáng)記長(zhǎng)句,04,重溫高考演練模擬,05,課時(shí)作業(yè),06,,,考點(diǎn)一,植物細(xì)胞工程,1.細(xì)胞工程 (1)操作水平： 。 (2)目的：按照人的意愿去改變細(xì)胞內(nèi)的 或獲得

2、 。 2.植物細(xì)胞的全能性 (1)概念：具有某種生物全部 的任何一個(gè)細(xì)胞，都具有發(fā)育成______ 的潛能。 (2)表達(dá)條件：具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，處于 狀態(tài)，提供一定的營(yíng)養(yǎng)、激素和其他適宜外界條件。,答案,,知識(shí)梳理,細(xì)胞或細(xì)胞器的水平,遺傳物質(zhì),細(xì)胞產(chǎn)物,遺傳信息,完整,生物體,離體,3.植物組織培養(yǎng)技術(shù) (1)原理：植物細(xì)胞具有 。 (2)過程,答案,全能性,脫分化,再分化,人工種子,4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù) (1)概念：將 的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成 的技術(shù)。 (2)過程,答案,不同種,新的植物體,原生質(zhì)體A、B,纖

3、維素酶和果膠酶,細(xì)胞壁,(3)意義：克服了 的障礙。 5.植物細(xì)胞工程的應(yīng)用 (1)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 快速繁殖：利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖植物，不受 的影響，提高了生產(chǎn)效率；屬于無性繁殖手段，可以 。 培育無病毒植物：采用培養(yǎng) 的方法或結(jié)合熱處理法，通過組織培養(yǎng)除去絕大多數(shù)植物的病毒。,答案,遠(yuǎn)緣雜交不親和,季節(jié)和惡劣天氣,莖尖生長(zhǎng)點(diǎn),保持優(yōu)良植物品種的遺傳特性,人工種子 a.人工種子的制備：以植物組織培養(yǎng)得到的 、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。,答案,b.優(yōu)點(diǎn)：不受環(huán)境因素的制約，繁殖速度快，可

4、以解決某些植物結(jié)實(shí)率低、繁殖困難的問題。,胚狀體,(2)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 植物細(xì)胞代謝產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：即利用 技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料和生物堿等。,答案,植物細(xì)胞培養(yǎng),單倍體育種,過程：花藥離體培養(yǎng) 植株 純合子植株 優(yōu)點(diǎn)：后代是純合子，能穩(wěn)定遺傳,,單倍體,1.有關(guān)植物細(xì)胞全能性與組織培養(yǎng)的判斷 (1)棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性() (2)植物的每個(gè)細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性() (3)在誘導(dǎo)離體菊花莖段形成幼苗的過程中，不會(huì)發(fā)生細(xì)胞的增殖和分化 () (4)愈傷組織是外植體通過脫分化和再分化后形成的() (

5、5)經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體用人工薄膜包裝后可得到人工種子(),常考基礎(chǔ)診斷,CHANG KAO JI CHU ZHEN DUAN,答案,,,,,,2.有關(guān)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的判斷 (1)利用物理法或化學(xué)法可以直接將兩個(gè)植物細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合() (2)用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物原生質(zhì)體失去了全能性() (3)再生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志() (4)培養(yǎng)草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是細(xì)胞雜交(),答案,,,,,(1)植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的生物學(xué)原理是什么？ 提示細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性。,據(jù)圖分析植物體細(xì)胞雜交過程,教材熱點(diǎn)拓展,JIAO CAI RE DIAN TUO Z

6、HAN,提示,(2)如何根據(jù)細(xì)胞膜表面熒光判斷該原生質(zhì)體是由番茄和馬鈴薯融合而成的？ 提示融合的細(xì)胞表面既有紅色熒光又有綠色熒光。 (3)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有n條染色體，則“番茄馬鈴薯”細(xì)胞在有絲分裂后期含有多少條染色體？ 提示2(mn)條。,提示,(4)若雜種細(xì)胞培育成的“番茄馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植株屬于幾倍體植株？ 提示單倍體植株。,提示,命題點(diǎn)一植物組織培養(yǎng)過程的分析 1.(2018宿遷高三二模)如圖所示為培育農(nóng)作物新品種的一種方式。下列說法不正確的是(多選),,命題探究,A.過程分別稱為細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化 B.該育種與傳統(tǒng)雜交育種

7、相比，最大的優(yōu)點(diǎn)是繁殖速度快 C.該育種過程說明已分化細(xì)胞中不表達(dá)的基因仍具有表達(dá)的潛能 D.該育種方式涉及到轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎移植技術(shù),答案,解析,,,,解析圖中表示基因工程技術(shù)，表示植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其中表示脫分化，表示再分化，表示在胚狀體外面加人工胚乳和人工種皮制備人工種子的過程，A錯(cuò)誤； 該育種方法為基因工程育種，其最大的優(yōu)點(diǎn)是目的性強(qiáng)，B錯(cuò)誤； 該技術(shù)依據(jù)的主要原理是植物細(xì)胞的全能性，已分化的細(xì)胞仍然能發(fā)育成完整的個(gè)體，說明其中一部分不表達(dá)的基因又開始表達(dá)，C正確； 該育種過程不涉及胚胎移植技術(shù)，D錯(cuò)誤。,2.(2019濟(jì)南調(diào)研)如圖是通過植物細(xì)胞工程技術(shù)獲得紫杉醇的途徑，下列敘述正確

8、的是,解析,A.該途徑依據(jù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性 B.過程需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例 C.經(jīng)過程細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)未發(fā)生變化 D.過程需使用固體培養(yǎng)基，有利于細(xì)胞增殖,答案,,解析細(xì)胞全能性以細(xì)胞發(fā)育成個(gè)體為標(biāo)志，而圖中并沒有形成完整植物體，A項(xiàng)錯(cuò)誤； 過程是脫分化，而決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是培養(yǎng)基中植物激素的種類和比例，因此該過程需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例，B項(xiàng)正確； 過程是脫分化，經(jīng)該過程細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，成為高度液泡化的薄壁細(xì)胞，C項(xiàng)錯(cuò)誤； 過程需使用液體培養(yǎng)基，有利于細(xì)胞增殖，D項(xiàng)錯(cuò)誤。,植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值與效果,生命觀念,命題點(diǎn)二植物

9、細(xì)胞工程的綜合應(yīng)用 3.(2018江陰下學(xué)期大聯(lián)考)利用現(xiàn)代生物技術(shù)，科研人員對(duì)馬鈴薯的培育進(jìn)行了研究，請(qǐng)回答相關(guān)問題：,(1)培育馬鈴薯脫毒苗所依據(jù)的原理是_________________，該培育過程涉及_______和_______兩個(gè)階段。,答案,解析,脫分化 再分化,植物細(xì)胞的全能性,解析培育馬鈴薯脫毒苗是對(duì)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用，所依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性；該培育過程涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段。,(2)研究馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)幼苗的成苗率和脫毒率的影響，結(jié)果如圖。據(jù)圖可知：莖尖越小，脫毒率_____，成苗率______，培養(yǎng)脫毒苗莖尖的適宜大小為________。,答案,解析

10、,越低,越高,解析據(jù)圖可知：莖尖越小，脫毒率越高，成苗率越低；培養(yǎng)脫毒苗莖尖的適宜大小為0.27 mm。,0.27 mm,(3)若想培育出“番茄馬鈴薯”植株，運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交能否得到可育的雜種植株？為什么？__________________________________________。,答案,解析,否(或不能)；不同種的植物之間存在生殖隔離,解析由于番茄和馬鈴薯屬于兩個(gè)不同物種，而不同種的植物之間存在生殖隔離，所以若想培育出“番茄馬鈴薯”植株，運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交不能得到可育的雜種植株。,4.利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑

11、腐病菌的危害而患黑腐病，技術(shù)人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：,(1)該過程用到的工程技術(shù)有________________和______________。,答案,解析,植物體細(xì)胞雜交 植物組織培養(yǎng),解析據(jù)圖可知，該流程圖表示先去掉兩種植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，然后誘導(dǎo)融合獲得雜種細(xì)胞，通過植物組織培養(yǎng)獲得雜種植株。,(2)過程所需的酶是__________________，過程PEG的作用是__________ ___________，經(jīng)過操作后，需篩選出融合的雜種

12、細(xì)胞，顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。,纖維素酶和果膠酶 促進(jìn)原生質(zhì)體的融合,解析植物細(xì)胞細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁；PEG(聚乙二醇)的作用是促進(jìn)原生質(zhì)體的融合。,答案,解析,(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是____________________。原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成__________。,保持原生質(zhì)體完整性,愈傷組織,解析去掉細(xì)胞壁后獲得的原生質(zhì)體需要放在適宜濃度的甘露醇溶液中，保持原生質(zhì)體完整性，避免失水或吸水；

13、在植物組織培養(yǎng)中，經(jīng)過脫分化后形成愈傷組織。,答案,解析,(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的___________；將雜種植株栽培在含有__________的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株。,答案,解析,形態(tài)和數(shù)目,黑腐病菌,解析由于染色體在顯微鏡下能看見，因此可以制作臨時(shí)裝片，觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目，以確定是否發(fā)生染色體變異；對(duì)雜種植物進(jìn)行鑒定最簡(jiǎn)單的方法是從個(gè)體水平上進(jìn)行檢測(cè)，即接種黑腐病菌，觀察植物的性狀。,科學(xué)思維,植物體細(xì)胞雜交過程中雜種細(xì)胞類型及檢測(cè)方法 (1)誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞(假設(shè)用于雜交的兩種植物細(xì)

14、胞分別為A、B) 未融合的細(xì)胞：A和B。 兩兩融合的細(xì)胞：AA、BB和AB。 多細(xì)胞融合體。,(2)檢測(cè)方法：對(duì)誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，然后根據(jù)得到的植物性狀進(jìn)行判斷。 若得到的是一種植物的性狀，說明是未融合細(xì)胞。 若得到的是具有兩種親本性狀的植物，說明是雜種植株。 若得到的是具有兩種親本性狀的植物，且一種植物的性狀得到加強(qiáng)，則是多細(xì)胞融合體。 若得到的是一種植物的性狀且效果得到加強(qiáng)，則是同種細(xì)胞融合的結(jié)果。,,,考點(diǎn)二,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與核移植技術(shù)及生物技術(shù)中的倫理問題,1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (1)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過程,,知識(shí)梳理,答案,無菌,胰蛋白酶,懸浮細(xì)胞,組織塊,接種,生理鹽水,新培養(yǎng)

15、液,(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要用_____ 等處理組織塊，以使細(xì)胞離散，而動(dòng)物組織培養(yǎng)過程中不需要使用_____ 等。 (3)培養(yǎng)條件 環(huán)境條件： 、溫度適宜和營(yíng)養(yǎng)充足、pH適宜等。 培養(yǎng)基種類 a.天然培養(yǎng)基：主要取自 、動(dòng)物組織提取液和雞胚汁等，其特點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、成分復(fù)雜。 b.合成培養(yǎng)基：人工配制的，其成分明確，便于控制實(shí)驗(yàn)條件，使用時(shí)需加入 。,答案,胰蛋,白酶,無菌,胰蛋,白酶,動(dòng)物血清,動(dòng)物血清,(4)培養(yǎng)類型 原代培養(yǎng)：從 獲取組織與細(xì)胞后的 培養(yǎng)。 傳代培養(yǎng)：將 的細(xì)胞分離稀釋后轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)瓶中

16、繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)代數(shù)一般在1050代左右。,答案,供體,初次,原代培養(yǎng),2.動(dòng)物細(xì)胞核移植與體細(xì)胞克隆 (1)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程,答案,細(xì)胞培養(yǎng),去核,重組細(xì)胞,供體,(2)原理： 。 (3)結(jié)果： 。 (4)應(yīng)用：加速家畜 進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育；保護(hù) ；生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；作為異種移植的 ；用于組織器官的 。,答案,動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性,產(chǎn)生新個(gè)體,遺傳改良,瀕危物種,供體,移植,3.關(guān)注克隆人的倫理問題,答案,生殖性,治療性,治療性克隆與生殖性克隆,深化拓展,1.有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的判斷 (1)制備肝細(xì)胞懸液時(shí)先用剪刀剪碎肝組織，再

17、用胃蛋白酶處理() (2)肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸() (3)在25 的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)() (4)培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞() (5)克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變() (6)二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的(),答案,?？蓟A(chǔ)診斷,CHANG KAO JI CHU ZHEN DUAN,,,,,,,2.有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞核移植與體細(xì)胞克隆的判斷 (1)動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞必須是卵細(xì)胞() (2)克隆動(dòng)物的性狀與供體動(dòng)物完全相同() (3)與“多莉”羊等克隆哺乳動(dòng)物相關(guān)的技術(shù)有胚胎移植、細(xì)胞培養(yǎng)和

18、核移植 () (4)用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用10代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞() (5)中國(guó)政府禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆(),答案,,,,,,如圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線，圖中B、E兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。據(jù)圖分析：,教材熱點(diǎn)拓展,JIAO CAI RE DIAN TUO ZHAN,(1)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的分界點(diǎn)是哪個(gè)？ 提示B點(diǎn)之前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，之后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。,提示,(2)AB段和DE段繁殖速度緩慢的原因是什么？ 提示AB段發(fā)生了接觸抑制；DE段細(xì)胞大部分衰老失去分裂能力。 (3)E點(diǎn)后的細(xì)胞大多數(shù)具有異倍體核型，這樣的細(xì)胞有什么特點(diǎn)？ 提示E

19、點(diǎn)后的細(xì)胞屬于細(xì)胞系，能無限增殖。,提示,命題點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程的分析 1.(2018鎮(zhèn)江高三第二次調(diào)研)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述，正確的是 A.用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后，可用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液 B.少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性，是某些基因選擇性表達(dá)的結(jié)果 C.根據(jù)在高倍鏡下觀察到基因突變的比例可推知某化學(xué)藥品的毒性 D.PEG誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞，經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動(dòng)物個(gè)體,,命題探究,答案,解析,,解析用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后，可用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液，A正確； 少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性，是某些基因突變的結(jié)果，B錯(cuò)誤

20、； 基因突變?cè)诟弑剁R下是觀察不到的，C錯(cuò)誤； 由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，在現(xiàn)有條件下，動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞不能培育成動(dòng)物，D錯(cuò)誤。,2.(2019六安一中質(zhì)檢)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題： (1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面_________時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的__________。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞是________層。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用到的酶是______ _____。,答案,解析,解析細(xì)胞接觸抑制是指細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象?；谏鲜鎏匦?，瓶壁上形成的細(xì)胞是單層排列的，需要用胰蛋白酶將

21、貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來。,相互接觸,接觸抑制,單(或一),胰蛋,白酶,(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)_____________ 現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而獲得_______，該種細(xì)胞的黏著性______，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量______。,答案,解析,解析隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡現(xiàn)象，但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成不死性細(xì)胞。該種細(xì)胞由于細(xì)胞表面糖蛋白減少，其黏著性降低。,衰老甚至死亡,不死性,降低,減少,(3)現(xiàn)用某種大分子染料對(duì)細(xì)胞

22、進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞能被染色，而活細(xì)胞不能被染色，原因是__________________________________________________ ______________________________________________________________________________。,答案,解析,解析活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，大分子染料不能通過，所以活細(xì)胞不能被染色；死細(xì)胞的細(xì)胞膜失去了選擇透過性，大分子染料可以通過，所以死細(xì)胞能被大分子染料染色。,活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)(或死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠

23、進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色),(4)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用分裂___期的細(xì)胞在顯微鏡下進(jìn)行觀察。,答案,解析,解析有絲分裂中期時(shí)染色體的著絲點(diǎn)排列在赤道板上，染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰，是觀察染色體數(shù)目的最佳時(shí)期。,中,(5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在_____________________條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中____的活性降低，細(xì)胞__________的速率降低。,解析在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在冷凍(或超低溫、液氮)條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中酶的活性降低，細(xì)胞新陳代謝的速率降低。,冷凍(或超低溫、液氮),酶,新陳代謝,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的2個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)

24、(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，因?yàn)槠浞只潭鹊?，增殖能力?qiáng)，更易于培養(yǎng)。 (2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH；O2 的作用是促進(jìn)細(xì)胞有氧呼吸。,生命觀念,命題點(diǎn)二動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程的分析 3.(2018泰州高三質(zhì)量檢測(cè)) 2018年1月25日，我國(guó)研究人員在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA，經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長(zhǎng)類動(dòng)物食蟹猴，流程如圖所示，表示過程，該動(dòng)物可作為研究癌癥等人類疾病的動(dòng)物模型。請(qǐng)分析回答：,解析由于體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性較難，所以獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。,(1)2

25、001年，美國(guó)科學(xué)家已經(jīng)培育出胚胎細(xì)胞核移植猴。獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，原因是__________________，恢復(fù)其全能性較難。,答案,解析,體細(xì)胞分化程度高,解析過程表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，應(yīng)該定期更換培養(yǎng)液，以防止成纖維細(xì)胞代謝產(chǎn)物的積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。,(2)進(jìn)行過程時(shí)，為了防止____________________對(duì)細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)定期更換________。,答案,解析,細(xì)胞代謝產(chǎn)物的積累,培養(yǎng)液,解析圖中過程表示利用顯微注射法將成纖維細(xì)胞注入猴去核的M中期卵母細(xì)胞的卵細(xì)胞膜與透明帶之間。,(3)據(jù)圖分析，過程是利用__________技術(shù)，將

26、成纖維細(xì)胞注入猴去核的M中期卵母細(xì)胞的_________________之間。,答案,解析,顯微注射,卵細(xì)胞膜與透明帶,(4)圖中過程用到胚胎移植技術(shù)，其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在___________條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。,答案,解析,解析過程表示胚胎移植，其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理?xiàng)l件下空間位置的轉(zhuǎn)移。,相同生理,(5)研究人員在確定Kd4d(去甲基化酶)的mRNA的作用時(shí)，做了兩組實(shí)驗(yàn)，其中A組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細(xì)胞，B組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)注入了Kd4d的mRNA的融合細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖所示。分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，Kd4d的mRNA的作用是既能提高_(dá)_________________________

27、_，又能提高_(dá)_______________________。,答案,解析,融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率,囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率,注：X為融合細(xì)胞發(fā)育成的胚胎數(shù)，Y為囊胚數(shù)，Z為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)數(shù)。,解析據(jù)圖分析，B組的囊胚成活率、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)成活率都明顯高于A組，說明Kd4d的mRNA既能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率，又能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率。,4.克隆羊的成功轟動(dòng)世界，它不僅奠定了疾病克隆性治療的基礎(chǔ)，又解決了器官移植中供體不足的問題，同時(shí)也給人類帶來了一些過去尚未遇到的問題。下圖為人類對(duì)克隆羊技術(shù)的拓展和應(yīng)用，請(qǐng)據(jù)圖回答：,(1)圖中所涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有_______________和___

28、__________________等。若讓動(dòng)物1能夠產(chǎn)生出人體胰島素，還需要的技術(shù)是________________________。,答案,解析,基因工程(或DNA重組技術(shù)),動(dòng)物細(xì)胞核移植 胚胎移植(或胚胎分割),解析將細(xì)胞核與去核的卵母細(xì)胞構(gòu)建成重組細(xì)胞，采用了動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)；將重組細(xì)胞培養(yǎng)成早期胚胎，采用了早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)；將早期胚胎移植到代孕母體，采用了胚胎移植技術(shù)；從早期胚胎中分離出內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，進(jìn)而培育成胚胎干細(xì)胞，離不開動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的支持；將早期胚胎分為胚胎1和胚胎2，運(yùn)用了胚胎分割技術(shù)。若讓動(dòng)物1能夠產(chǎn)生出人體胰島素，需要借助基因工程技術(shù)將人的胰島

29、素基因?qū)胂鄳?yīng)的受體細(xì)胞，進(jìn)而培育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物1。,(2)圖中兩個(gè)克隆動(dòng)物長(zhǎng)大后，各方面特征與雄性動(dòng)物相同，這說明動(dòng)物的__________具有全能性。,答案,解析,解析克隆動(dòng)物的培育成功，說明動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。,體細(xì)胞核,(3)使用培養(yǎng)基進(jìn)行胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入一些必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，通常要加入___________等天然成分，除了保證被培養(yǎng)細(xì)胞處于無菌、無毒及充足氧氣的環(huán)境中，還需要保證細(xì)胞生活所需的___________。,答案,解析,血清、血漿,溫度和pH,解析使用培養(yǎng)基進(jìn)行胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，所以培養(yǎng)基中除了加入一些必要的

30、營(yíng)養(yǎng)成分外，通常要加入血清、血漿等一些天然成分。除了保證被培養(yǎng)細(xì)胞處于無菌、無毒及充足氧氣的環(huán)境中，還需要保證細(xì)胞生活所需的溫度和pH。,(4)圖中“從內(nèi)細(xì)胞團(tuán)到胚胎干細(xì)胞”的培養(yǎng)過程中，一般用__________處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，使之分散成單個(gè)細(xì)胞。,答案,解析,解析從“內(nèi)細(xì)胞團(tuán)到胚胎干細(xì)胞”的培養(yǎng)過程中，會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象，因此常用胰蛋白酶處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，使之分散成單個(gè)細(xì)胞。,胰蛋白酶,動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中的3個(gè)易錯(cuò)點(diǎn) (1)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性而非細(xì)胞的全能性。 (2)克隆屬于無性繁殖，產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。 (3)核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供

31、核動(dòng)物的性狀不完全相同的原因：克隆動(dòng)物線粒體中的DNA來自去核卵母細(xì)胞；性狀受環(huán)境的影響；在個(gè)體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變。,易錯(cuò)警示,命題點(diǎn)三生物技術(shù)的倫理問題辨析 5.克隆羊多莉的問世，在全世界引發(fā)了一場(chǎng)大討論，其中關(guān)于治療性克隆的問題也成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。如圖所示為人類治療性克隆的大概過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：,(1)過程A表示____________，是目前實(shí)現(xiàn)體細(xì)胞克隆的關(guān)鍵技術(shù)，該技術(shù)的主要操作是應(yīng)用患者的體細(xì)胞作為核供體，由____________________提供細(xì)胞質(zhì)，進(jìn)行人工重組。,答案,解析,解析從圖中可以看出，A是細(xì)胞核移植的過程。,細(xì)胞核移植,卵子(次級(jí)卵母細(xì)胞)

32、,(2)經(jīng)過程B得到的結(jié)構(gòu)中，是未分化的細(xì)胞，因而這些細(xì)胞被認(rèn)為是胚胎干細(xì)胞。在體外培養(yǎng)條件下，胚胎干細(xì)胞具有增殖能力并保持_______狀態(tài)。,答案,解析,解析胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的時(shí)候，能保持未分化狀態(tài)。,未分化,解析在現(xiàn)有的條件下，動(dòng)物細(xì)胞的全能性不能得到表達(dá)，但是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性可以表達(dá)出來；在分化成各種細(xì)胞的過程中，基因進(jìn)行了選擇性表達(dá)。,(3)治療性克隆的結(jié)果說明高度分化的體細(xì)胞核具有_______。相同的胚胎干細(xì)胞，“克隆”的結(jié)果各種各樣，如有的是神經(jīng)細(xì)胞，有的是血細(xì)胞，有的是肌肉細(xì)胞，究其本質(zhì)原因是________________的結(jié)果。,答案,解析,全能性,基因選擇性表達(dá),

33、(4)對(duì)于治療性克隆仍然存在許多爭(zhēng)論，有一男子患有白血病，后經(jīng)醫(yī)生利用其出生時(shí)保留的臍帶血進(jìn)行治療后康復(fù)，你認(rèn)為這種做法符合倫理道德嗎？______。為什么？________________________________________________________。,解析我們不支持生殖性克隆，但支持治療性克隆。治療性克隆符合倫理道德，特別是用臍帶血進(jìn)行治療(并非胚胎)更符合倫理道德。,符合 因?yàn)槟殠а皇莵碜耘咛?，其中的造血干?xì)胞屬于成體干細(xì)胞,答案,解析,,,考點(diǎn)三,動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備,1.動(dòng)物細(xì)胞融合 (1)概念：在一定的條件下將 個(gè)或 個(gè)動(dòng)物細(xì)胞融合為 個(gè)

34、細(xì)胞的過程，也稱細(xì)胞雜交。 (2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒或電激等。 (3)原理： 。 (4)結(jié)果：形成具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為 。 (5)意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段，為制造 開辟了新途徑。,,知識(shí)梳理,答案,兩,多,一,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,雜交細(xì)胞,單克隆抗體,植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合比較,深化拓展,2.單克隆抗體 (1)制備過程,答案,雜交瘤細(xì)胞,能產(chǎn)生特定抗體,(2)優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、 ，可大量制備。 (3)用途：作為 ；

35、用于治療疾病和 。,答案,靈敏度高,診斷試劑,運(yùn)載藥物,(1)植物原生質(zhì)體融合與動(dòng)物細(xì)胞融合原理是相同的() (2)體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體() (3)小鼠骨髓瘤細(xì)胞的染色體數(shù)為40，B淋巴細(xì)胞的染色體數(shù)為46，融合后形成的雜交瘤細(xì)胞DNA分子數(shù)為86() (4)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎() (5)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞融合后有三種細(xì)胞類型(若僅考慮兩兩融合的情況)(),答案,?？蓟A(chǔ)診斷,CHANG KAO JI CHU ZHEN DUAN,,,,,,教材熱點(diǎn)拓展,JIAO CAI RE DIAN TUO ZHAN,下圖為制備

36、單克隆抗體和多克隆抗體的示意圖，據(jù)圖分析：,提示,(1)與多克隆抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)有哪些？ 提示單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備。,(2)圖中第一次篩選和第二次篩選的目的有何不同？,提示,提示第一次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是篩選出能產(chǎn)生特定單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。,命題點(diǎn)一細(xì)胞融合的原理及過程分析 1.一系列實(shí)驗(yàn)證明細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，熒光抗體免疫標(biāo)記實(shí)驗(yàn)就是其中的一個(gè)典型例子。下圖表示了人、鼠細(xì)胞融合的過程，研究中分別將帶有綠色熒光、能與人體細(xì)胞膜上HLA抗原特異性結(jié)合的抗體和帶有紅色熒光、能與小鼠細(xì)胞膜上H2抗原特異性結(jié)合的抗體放入細(xì)胞培養(yǎng)液中，

37、對(duì)人、鼠細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記。下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的敘述不正確的是,,命題探究,A.要使實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象明顯，可以適當(dāng)提高細(xì)胞培養(yǎng)液的溫度 B.選取不同生物細(xì)胞進(jìn)行融合是因?yàn)椴煌锛?xì)胞表面抗原差異較大 C.實(shí)驗(yàn)表明不同種生物細(xì)胞可以雜交，而同種生物細(xì)胞不能進(jìn)行融合 D.實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以直接證明細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子可以運(yùn)動(dòng),,答案,2.(2018合肥三模)下圖表示細(xì)胞工程的流程圖(a、b表示過程)，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：,答案,解析,(1)若圖示為動(dòng)物細(xì)胞融合的過程，則a特有的誘導(dǎo)劑是____________。以動(dòng)物細(xì)胞融合為基礎(chǔ)發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)為制造單克隆抗體開辟了新途徑，通過把能產(chǎn)生抗體的__________細(xì)胞

38、與能在體外大量增殖的________細(xì)胞進(jìn)行融合，得到既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞。,滅活的病毒,B淋巴(漿),骨髓瘤,解析若a是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，則特有的誘導(dǎo)劑是滅活的病毒。在單克隆抗體的制備過程中，利用已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，形成雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞既可以迅速大量增殖，又可以產(chǎn)生專一的抗體。,(2)若圖示為植物體細(xì)胞雜交過程，則在甲、乙融合之前，需要用___________ _______(填酶)制備_________。這項(xiàng)工程的意義是________________________ _______________________。,答案,解析,解析在植物體細(xì)胞

39、雜交過程中，需要對(duì)甲、乙細(xì)胞先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，然后再誘導(dǎo)甲、乙的原生質(zhì)體融合。該技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)大親本組合的范圍。,纖維素酶和,果膠酶,原生質(zhì)體,克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障,礙，擴(kuò)大親本組合的范圍,(3)由甲、乙融合得到丙細(xì)胞的基本原理是________________。,答案,解析,解析甲、乙細(xì)胞融合形成丙細(xì)胞，利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性。,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,命題點(diǎn)二單克隆抗體制備過程的分析 3.在利用細(xì)胞融合技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體的過程中，不需要考慮 A.多次注射特定抗原蛋白，對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行免疫 B.B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞之間的免疫排斥 C.向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類

40、和處理時(shí)間 D.選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,答案,,解析,解析制備單克隆抗體過程中，要對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原，抗原進(jìn)入機(jī)體后刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)從而產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，A需要考慮； 免疫排斥是機(jī)體對(duì)移植物(異體細(xì)胞、組織或器官)通過特異性免疫應(yīng)答使其破壞的過程，細(xì)胞之間不存在免疫排斥，B不需要考慮； 向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入促融劑的種類和處理時(shí)間會(huì)影響細(xì)胞的融合，C需要考慮； 選擇特定試劑篩選能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞需要考慮，否則會(huì)影響單克隆抗體的產(chǎn)量或得到的單克隆抗體的特異性差，D需要考慮。,4.(2019德州高三模擬)雙特異性單克隆抗體是指可同時(shí)與癌細(xì)胞和藥物結(jié)合的特

41、異性抗體。下圖是科研人員通過雜交雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿(一種抗癌藥物)的雙特異性單克隆抗體的部分過程。分析回答下列問題：,(1)過程的目的是______________________________________________，制備雙特異性單克隆抗體的過程中用到的技術(shù)有____________________________(至少答出兩條)。,使小鼠產(chǎn)生能分泌識(shí)別癌胚抗原抗體的B淋巴細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),答案,解析,解析過程表示給小鼠注射抗原，目的是刺激小鼠產(chǎn)生能分泌識(shí)別癌胚抗原

42、抗體的B淋巴細(xì)胞；根據(jù)單克隆抗體制備流程可知，該過程涉及到的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。,(2)過程誘導(dǎo)融合的方法是__________________________，過程選用的骨髓瘤細(xì)胞_____(填“能”或“不能”)在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。,答案,解析,解析過程誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有聚乙二醇、滅活病毒、電激等；HAT選擇培養(yǎng)基的作用是篩選出雜交瘤細(xì)胞，而骨髓瘤細(xì)胞不能生長(zhǎng)。,聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)、電激等,不能,(3)經(jīng)過程篩選得到的細(xì)胞還需轉(zhuǎn)移至多孔培養(yǎng)板中進(jìn)行過程，原因是____________________________________________________

43、_________________________________。,答案,解析,解析從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞不止一種類型(篩選得到的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體)，因此經(jīng)過程篩選得到的細(xì)胞還需轉(zhuǎn)移至多孔培養(yǎng)板中進(jìn)行過程。,從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞不止一種類型(篩選得到的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體),(4)請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)，用箭頭和文字補(bǔ)全圖中方框內(nèi)獲取單克隆雜交雜交瘤細(xì)胞的生產(chǎn)過程。,解析單克隆抗體制備過程為：將獲得的B淋巴細(xì)胞與單克隆雜交瘤細(xì)胞融合在選擇培養(yǎng)基上篩選出雜交雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)篩選出單克隆的雜交雜交瘤細(xì)胞。,答案將獲得的B淋巴細(xì)胞與單克隆雜交瘤細(xì)胞融

44、合在選擇培養(yǎng)基上篩選出雜交雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)篩選出單克隆雜交雜交瘤細(xì)胞,答案,解析,(5)獲得的單克隆雜交雜交瘤細(xì)胞在體外條件下培養(yǎng)或____________________，均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。,解析獲得的單克隆雜交雜交瘤細(xì)胞在體外條件下培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。,注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,答案,解析,,,矯正易錯(cuò)強(qiáng)記長(zhǎng)句,命題探究,,易錯(cuò)警示突破選擇題,1.具有全能性體現(xiàn)(實(shí)現(xiàn))全能性 具有全能性：理論上，具有細(xì)胞核的活細(xì)胞都具有全能性； 體現(xiàn)(實(shí)現(xiàn))全能性：只有發(fā)育成完整個(gè)體，才能說明體現(xiàn)(實(shí)現(xiàn))了細(xì)胞的全能性。 2.有關(guān)植物

45、體細(xì)胞雜交的3個(gè)易錯(cuò)點(diǎn) (1)誤認(rèn)為植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果只是形成雜種細(xì)胞。植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果最終要經(jīng)過組織培養(yǎng)形成雜種植株。 (2)誤認(rèn)為植物體細(xì)胞雜交屬于有性生殖。植物體細(xì)胞雜交過程中沒有有性生殖細(xì)胞的結(jié)合，因此不屬于有性生殖，應(yīng)為無性生殖。 (3)誤認(rèn)為雜種植株的變異類型屬于基因重組。雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和，屬于異源多倍體，所以變異類型為染色體變異。,3.B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程，才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，所以，與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞實(shí)際上是漿細(xì)胞。 4.在單克隆抗體制備過程中，有兩次篩選：第一次是篩選出雜交瘤細(xì)胞(用選擇培養(yǎng)基)；第二次是進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生人們

46、所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞(用抗原抗體結(jié)合法)。,命題探究,,長(zhǎng)句應(yīng)答突破簡(jiǎn)答題,1.植物組織培養(yǎng)的過程主要包括脫分化和再分化兩個(gè)階段，脫分化的結(jié)果是形成愈傷組織，再分化的結(jié)果是形成根和芽。 2.植物體細(xì)胞雜交需要用酶解法制備原生質(zhì)體，所用的酶包括纖維素酶和果膠酶。 3.無論是植物體細(xì)胞雜交還是動(dòng)物細(xì)胞融合，都需要誘導(dǎo)。 4.植物組織培養(yǎng)需要各種營(yíng)養(yǎng)成分和植物激素，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)也需要各種營(yíng)養(yǎng)成分及血清。 5.植物體細(xì)胞雜交可用于作物育種，動(dòng)物細(xì)胞融合可用于單克隆抗體的制備。 6.產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，它既能產(chǎn)生單克隆抗體又能無限增殖。,,,重溫高考演練模擬,1.(2018江蘇，8)花藥

47、離體培養(yǎng)是重要的育種手段。下圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是,答案,解析,A.為了防止微生物污染，過程所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30 min B.過程的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化 C.過程逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體 D.過程應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖的多種植物激素的基質(zhì)上,,1,2,3,4,5,解析為了防止微生物污染，花藥通常需在體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇中浸泡大約30 s，A錯(cuò)誤； 要促進(jìn)根的分化，需添加較高濃度的生長(zhǎng)素，而不是細(xì)胞分裂素，過程應(yīng)添加比例適中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素以促進(jìn)愈傷組織形成，B錯(cuò)誤； 經(jīng)秋水仙素處理后，可使細(xì)胞

48、中染色體數(shù)加倍，能形成純合的二倍體，C正確； 植物能利用基質(zhì)中的無機(jī)鹽合成有機(jī)物，不能直接吸收利用蔗糖，D錯(cuò)誤。,1,2,3,4,5,2.(2018江蘇，22)如圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述正確的是(多選),答案,解析,A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合 B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn) C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性有關(guān) D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因,,,1,2,3,4,5,解析若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，應(yīng)先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，然后再誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤； a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理，使植物細(xì)胞融合的促融方法有

49、離心、振動(dòng)、電激、聚乙二醇誘導(dǎo)等，使動(dòng)物細(xì)胞融合的促融方法有聚乙二醇誘導(dǎo)、滅活的病毒誘導(dǎo)、電激等，B正確； 細(xì)胞的融合與細(xì)胞膜的流動(dòng)性有關(guān)，C正確； 融合后的c細(xì)胞中的基因進(jìn)行選擇性表達(dá)，只能表達(dá)a、b兩細(xì)胞中的部分基因，D錯(cuò)誤。,1,2,3,4,5,答案,解析,3.(2016江蘇，9)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是 A.PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合 B.用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂 C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體 D.核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體DNA來自供卵母體,,解析PEG是促細(xì)胞融合劑，但植物細(xì)胞不能直接融合，需先去掉細(xì)胞壁形成原生質(zhì)體才能融合

50、，A錯(cuò)誤； 制備人工種子應(yīng)用完整的植物細(xì)胞，不需制備原生質(zhì)體，B錯(cuò)誤； 骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體，C錯(cuò)誤； 核移植克隆動(dòng)物的線粒體來自卵細(xì)胞，即線粒體DNA來自供卵母體，D正確。,1,2,3,4,5,4.(2018全國(guó)，38)2018年細(xì)胞期刊報(bào)道，中國(guó)科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}： (1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指_______________ _____________________________________。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目______(填

51、“減半”“加倍”或“不變”)。,胞核移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,將動(dòng)物的一個(gè)細(xì),不變,答案,解析,1,2,3,4,5,解析核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，形成重組細(xì)胞。重組細(xì)胞形成的早期胚胎可移植到受體子宮內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育，最終分娩得到克隆動(dòng)物。因?yàn)槿旧w在細(xì)胞核中，所以克隆動(dòng)物體細(xì)胞的染色體數(shù)目與提供細(xì)胞核的個(gè)體的體細(xì)胞相同。,1,2,3,4,5,(2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度______(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其原因是_________________________________

52、_______。,小于,答案,解析,解析由于動(dòng)物的胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物的體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性十分困難，因此，動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯大于胚胎細(xì)胞核移植。,胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易,1,2,3,4,5,(3)在哺乳動(dòng)物核移植的過程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目______(填“相同”或“不同”)，性染色體組合______(填“相同”或“不同”)。,答案,解析,解析哺乳動(dòng)物雌雄個(gè)體的體細(xì)胞中，細(xì)胞核內(nèi)常染色體的數(shù)目是相同的，性染色體組合是不同的。若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為

53、核供體，則得到的克隆動(dòng)物的體細(xì)胞中常染色體的數(shù)目相同，性染色體組合不同。,相同,不同,1,2,3,4,5,5.(2016全國(guó)，40)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。,答案,解析,回答下列問題： (1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為_________。過程表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用__________的方法。代表的過程是__________。,XX或XY,顯微操作,胚胎移植,1,2,3,4,5,解析因供體的性別不確定，故其細(xì)胞核內(nèi)的性染色體組成為XX或XY；一般將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到M中期，用顯微

54、操作法將其細(xì)胞核去除；代表的過程是胚胎移植。,1,2,3,4,5,(2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中__________的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。,遺傳物質(zhì),解析傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞可以保持正常的二倍體核型，超過10代以后，供體細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會(huì)降低。,答案,解析,1,2,3,4,5,(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_________________________________________________________。,答案,解析,解析克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)對(duì)克隆動(dòng)物

55、的性狀會(huì)產(chǎn)生影響。,卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響,1,2,3,4,5,(4)與克隆羊“多莉”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了_____ __________________________________。,解析克隆動(dòng)物的成功可以證明動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。,動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性,答案,解析,1,2,3,4,5,,,課時(shí)作業(yè),一、選擇題 1.(2018連云港高三二模)下列實(shí)驗(yàn)中，不能達(dá)成實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖?A.用H2O2酶探究pH對(duì)酶活性的影響 B.用Taq DNA聚合酶構(gòu)建表達(dá)載體 C.用胰蛋白酶制備動(dòng)物細(xì)胞懸液 D.用纖維素酶和

56、果膠酶制備植物原生質(zhì)體,答案,解析,1,2,3,4,5,6,7,,解析H2O2分解基本不受pH的影響，所以可以用H2O2酶探究pH對(duì)酶活性的影響，A不符合題意； 構(gòu)建表達(dá)載體不需要DNA聚合酶，Taq DNA聚合酶是PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因所需的一種耐高溫的酶，B符合題意； 在制備動(dòng)物細(xì)胞懸液時(shí)用胰蛋白酶是為了分解粘連在細(xì)胞之間的蛋白質(zhì)，使之變成游離的單個(gè)細(xì)胞，C不符合題意； 由于植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，所以需要用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，從而得到植物原生質(zhì)體，D不符合題意。,1,2,3,4,5,6,7,A.過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理 B.過程能定向

57、誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變 C.過程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能 D.過程需用適宜配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素處理,2.(2019南京一中月考)下圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是,答案,解析,,1,2,3,4,5,6,7,解析紫外線照射可誘導(dǎo)原生質(zhì)體發(fā)生突變，但突變是不定向的。,3.利用某些調(diào)控細(xì)胞分化的因子，可誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞分化為多種組織細(xì)胞。該過程與植物組織培養(yǎng)的共同點(diǎn)是 A.細(xì)胞全能性都得到體現(xiàn) B.都有信息分子與受體結(jié)合的過程 C.都要分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng) D.都需要蔗糖作為培養(yǎng)基的碳源,答案,解析,,1,2,3,4,5,6,7,解析誘導(dǎo)人胚

58、胎干細(xì)胞分化為多種組織細(xì)胞的過程不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，A錯(cuò)誤； 誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞分化為多種組織細(xì)胞的過程中有控制細(xì)胞分化的因子與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合的過程，植物組織培養(yǎng)過程中有植物激素與受體結(jié)合的過程，B正確； 植物組織培養(yǎng)過程中不需要將細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)，C錯(cuò)誤； 誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞分化為多種組織細(xì)胞的過程，需要以葡萄糖作為培養(yǎng)基的碳源，D錯(cuò)誤。,1,2,3,4,5,6,7,4.(2018蘇州高三月考)2018年3月14日物理學(xué)家霍金去世，他曾經(jīng)患有肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥即“漸凍癥”。有研究表明該病是由于突變的基因使神經(jīng)元合成了某種毒蛋白，從而阻礙了軸突內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流動(dòng)。也有最新研究結(jié)果表明，

59、利用誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞(IPS細(xì)胞)制作前驅(qū)細(xì)胞，然后移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠，能延長(zhǎng)其壽命。下列相關(guān)描述正確的是(多選) A.將控制合成破壞運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的毒蛋白基因替換，可以起到一定的治療作用 B.植入神經(jīng)干細(xì)胞，使受損的運(yùn)動(dòng)功能得到恢復(fù)，也可以起到一定的治療作用 C.誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞分化成多種細(xì)胞的過程中核遺傳物質(zhì)不完全相同 D.誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞的分化實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞種類增多,答案,解析,,1,2,3,4,5,6,7,,,解析替換毒蛋白基因，導(dǎo)致神經(jīng)元不能合成破壞神經(jīng)元的毒蛋白，從而達(dá)到治療的目的，A項(xiàng)正確； 植入神經(jīng)干細(xì)胞，可增殖分化形成相應(yīng)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元，使受損的運(yùn)動(dòng)功能得到恢復(fù)，B項(xiàng)

60、正確； 誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞分化成多種細(xì)胞屬于細(xì)胞分化過程，細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)不變，故C項(xiàng)錯(cuò)誤、D項(xiàng)正確。,1,2,3,4,5,6,7,二、非選擇題 5.藍(lán)莓中富含的花青素能有效地改善視力，下面為科學(xué)家利用植物組織培養(yǎng)的方法大量培養(yǎng)藍(lán)莓的具體流程的文字圖解。請(qǐng)回答下列問題：,1,2,3,4,5,6,7,(1)用于離體培養(yǎng)的藍(lán)莓組織叫做_______，該技術(shù)的原理是_________________。,答案,解析,外植體,植物細(xì)胞的全能性,解析植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，用于離體培養(yǎng)的組織叫做外植體。,(2)配制MS培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)加入一定量的瓊脂、蔗糖、無機(jī)鹽

61、、維生素、有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，蔗糖除作為碳源外，還具有______________________的功能。常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，這三種培養(yǎng)基的主要差異是_____________________________________。,答案,1,2,3,4,5,6,7,提供能量和維持滲透壓,解析,解析配制MS培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)加入一定量的瓊脂、蔗糖、無機(jī)鹽、維生素、有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，蔗糖除作為碳源外，還具有提供能量和維持滲透壓的功能。常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，這三種培養(yǎng)基的主要差異是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的用量及比例不同。,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的用量及比例不

62、同,(3)圖中藍(lán)莓組織要經(jīng)過消毒處理后才能進(jìn)行培養(yǎng)。其過程中，細(xì)胞的分化程度會(huì)______(填“升高”“降低”或“不變”)。,答案,1,2,3,4,5,6,7,解析,解析圖中過程是脫分化形成愈傷組織的過程，高度分化的細(xì)胞恢復(fù)分裂能力，則分化程度會(huì)降低。,降低,(4)愈傷組織經(jīng)過過程重新分化成根或叢芽的過程叫做________。,1,2,3,4,5,6,7,答案,解析,解析圖中過程是愈傷組織經(jīng)過再分化形成叢芽或根的過程。,再分化,(5)藍(lán)莓花青素在60 以下的熱穩(wěn)定性較好，將含花青素的粗品經(jīng)真空干燥(可使水的沸點(diǎn)降低40 )制成成品。采用該方法的主要原因是_________________ __

63、_______________。,答案,1,2,3,4,5,6,7,解析,解析含花青素的粗品經(jīng)真空干燥(可使水的沸點(diǎn)降至40 )制成成品，采用該方法的主要原因是避免干燥時(shí)溫度過高導(dǎo)致花青素分解。,避免干燥時(shí)溫度過高導(dǎo)致花青素分解,6.已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。將這兩種細(xì)胞在培養(yǎng)皿中混合，加促融劑促進(jìn)細(xì)胞融合，獲得雜種細(xì)胞，并生產(chǎn)單克隆抗體。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：,1,2,3,4,5,6,7,(1)生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，一般不直接利用B淋巴細(xì)胞，主要原因是___

64、_________ __________。,答案,解析,B淋巴細(xì)胞不能無限增殖,解析B淋巴細(xì)胞不能無限增殖，故生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，一般不直接利用一個(gè)B淋巴細(xì)胞。,1,2,3,4,5,6,7,(2)過程中，常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是__________。,答案,1,2,3,4,5,6,7,聚乙二醇,解析,解析誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇。,(3)過程為______培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體物質(zhì)，其中通入CO2的目的是________________。,答案,1,2,3,4,5,6,7,細(xì)胞,維持培養(yǎng)液的pH,解析,解析過程為細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體，其

65、中通入CO2的目的主要是維持培養(yǎng)液的pH。,(4)表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠_____內(nèi)培養(yǎng)，體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是____________________________ _______________。,答案,1,2,3,4,5,6,7,腹腔,無需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡(jiǎn)便,解析,解析表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是無需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡(jiǎn)便。,(5)為了從培養(yǎng)液中分離出雜交瘤細(xì)胞，需要過程向培養(yǎng)液中加入_________，理由是雜交瘤細(xì)胞可利用_____

66、__________途徑合成DNA，從而才能在該培養(yǎng)液中增殖。,答案,1,2,3,4,5,6,7,氨基嘌呤,淋巴細(xì)胞中的S,解析,解析在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，培養(yǎng)后收集增殖細(xì)胞，加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，淋巴細(xì)胞一般不分裂增殖，因此培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，不能生長(zhǎng)的細(xì)胞有骨髓瘤細(xì)胞、融合的淋巴細(xì)胞、融合的骨髓瘤細(xì)胞、淋巴細(xì)胞。人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖。,1,2,3,4,5,6,7,7.(2018安陽高三第三次模擬)中國(guó)科學(xué)家成功突破了克隆猴這個(gè)世界生物學(xué)前沿的難題，率先建立起可有效模擬人類疾病的動(dòng)物模型，實(shí)現(xiàn)了我國(guó)在非人靈長(zhǎng)類研究領(lǐng)域由國(guó)際“并跑”到“領(lǐng)跑”的轉(zhuǎn)變。據(jù)此回答下列問題： (1)克隆猴的誕生，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的________具有全能性。相對(duì)于植物組織培養(yǎng)而言，動(dòng)物尤其是高等動(dòng)物的克隆比較困難的原因是_________________ _______________________________________________________________