《藥物分析學(xué)：第六章 維生素類(lèi)藥物的分析》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《藥物分析學(xué)：第六章 維生素類(lèi)藥物的分析（112頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、第六章 維生素類(lèi)藥物的分析 Analysis of Vitamin Drugs2目的和要求（目的和要求（Objectives）1 1、掌握維生素類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)特征與性質(zhì)及分析、掌握維生素類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)特征與性質(zhì)及分析方法間的關(guān)系！方法間的關(guān)系！2 2、熟悉維生素類(lèi)藥物的鑒別試驗(yàn)、雜質(zhì)檢查和、熟悉維生素類(lèi)藥物的鑒別試驗(yàn)、雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定的方法原理與結(jié)果計(jì)算。含量測(cè)定的方法原理與結(jié)果計(jì)算。3 3、了解維生素類(lèi)藥物分析方法的操作要點(diǎn)。、了解維生素類(lèi)藥物分析方法的操作要點(diǎn)。3成分相互配合，協(xié)同作用，能夠促進(jìn)人體新陳代謝，吸收與分解糖分，迅速補(bǔ)充大量的能量物質(zhì)，并調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能，從而取得提神醒腦、補(bǔ)充體
2、力、抗疲勞的卓越功效?；撬?（125mg）、肌醇 （50mg）、賴(lài)氨酸（50mg） 、咖啡因 （50mg）、維生素PP（10mg） 、維生素B6（1mg） 、維生素B12（3ug）。?；撬崤；撬?: 125mg賴(lài)氨酸賴(lài)氨酸： 50mg咖啡因咖啡因： 50mg肌醇：肌醇： 50mg維生素維生素B6：1mg維生素維生素B12：3ug煙酰胺：煙酰胺： 10mg45維生素（維生素（vitamin）：）：維生素是維持人體正常生理機(jī)能所必需的維生素是維持人體正常生理機(jī)能所必需的生物活性物質(zhì)，生物活性物質(zhì)，人體不能合成維生素人體不能合成維生素。如果人體缺少某種維生素，就會(huì)引起維生素如果人體缺少某種維生素，就
3、會(huì)引起維生素缺乏癥，而影響人體的正常生理機(jī)能。缺乏癥，而影響人體的正常生理機(jī)能。例如：維生素例如：維生素A 缺乏缺乏夜盲癥夜盲癥維生素維生素B1缺乏缺乏腳氣病腳氣病維生素維生素C 缺乏缺乏？6A、D2、D3、 E、K1 等等 脂溶性脂溶性水溶性水溶性 B族族 (B1、B2、B6、B12)C、葉酸（、葉酸（B9）、煙酸、泛酸）、煙酸、泛酸維生素的分類(lèi)維生素的分類(lèi):7CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3-H 維生素維生素A醇醇-COCH3 維生素維生素A醋酸酯醋酸酯-COC15H31 維生素維生素A棕櫚酸酯棕櫚酸酯R :第一節(jié) 維生素A共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)己烯共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)己烯8溶解度溶解度
4、1、不溶于水，乙醇中微溶。不溶于水，乙醇中微溶。易溶于易溶于乙醚，氯仿，異丙醇，環(huán)己烷，脂肪和油等乙醚，氯仿，異丙醇，環(huán)己烷，脂肪和油等結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)一、一、CH3CH3CH2ORCH3CH3CH39酸酸醛醛環(huán)氧化物環(huán)氧化物、氧化劑、氧化劑紫外線、紫外線、VitAVitAVitAOO2加熱或有金屬離子存在時(shí)氧化加熱或有金屬離子存在時(shí)氧化易氧化性易氧化性（1）2、聚多烯結(jié)構(gòu)、聚多烯結(jié)構(gòu)CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)己烯共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)己烯避光保存，加入合適的抗氧劑避光保存，加入合適的抗氧劑10環(huán)氧化物環(huán)氧化物OCH2OHVitA醛醛HOCVitA酸酸C
5、OOH11（2 2）形成二聚體）形成二聚體CH2OHCH2OHCH3鯨醇鯨醇（3 3）異構(gòu)化）異構(gòu)化v 存在多種立體異構(gòu)化合物（存在多種立體異構(gòu)化合物（1616）12v 共軛多烯醇側(cè)鏈，共軛多烯醇側(cè)鏈，最大吸收波長(zhǎng)在最大吸收波長(zhǎng)在325328nm）3、具有紫外吸收、具有紫外吸收維生素維生素A 325.5 100% 全反式全反式新維生素新維生素Aa 328 75%-順順新維生素新維生素Ab 320.5 24% -順順新維生素新維生素Ac 310.5 15% , 4-二順二順異維生素異維生素Aa 323 21% -順順異維生素異維生素Ab 324 24% ,6-二順二順max 相對(duì)生物效價(jià)相對(duì)生物
6、效價(jià)13二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn)CHCl31、與三氯化銻發(fā)生呈色反應(yīng)與三氯化銻發(fā)生呈色反應(yīng)紫紅紫紅藍(lán)色藍(lán)色3SbClVitA維生素維生素A或其制劑的氯仿溶液加三氯化銻或其制劑的氯仿溶液加三氯化銻TI，產(chǎn)生不穩(wěn)定的藍(lán)色。無(wú)水下進(jìn)行，產(chǎn)生不穩(wěn)定的藍(lán)色。無(wú)水下進(jìn)行14-RCOOSbCl5+CH2藍(lán)色藍(lán)色紫紅紫紅+CH2-RCOOSbCl515VitAVitAHCl去水去水無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇max為為326nm一個(gè)吸收峰一個(gè)吸收峰UV法法2、max為為350390nm三個(gè)吸收峰三個(gè)吸收峰CH3CH3CH2ORCH3CH3CH3CH2VitA去水去水VitA（VitA3）163、薄層色譜法、薄層色譜法n因
7、因VA有多種的異構(gòu)體、混合物等，用有多種的異構(gòu)體、混合物等，用TLC可以同時(shí)分離分析多種成分?？梢酝瑫r(shí)分離分析多種成分。n采用對(duì)照品對(duì)照法。采用對(duì)照品對(duì)照法。 顯色劑顯色劑 磷鉬酸磷鉬酸 規(guī)定斑點(diǎn)顏規(guī)定斑點(diǎn)顏色（綠色）色（綠色） 和和Rf值值維生素A醇及其乙酸酯、棕櫚酸酯的Rf值分別為0.1、0.45及0.717UV法法（一）（一）含量測(cè)定含量測(cè)定三、三、三點(diǎn)校正法三點(diǎn)校正法測(cè)定測(cè)定VA的酯類(lèi)含量。的酯類(lèi)含量。同時(shí)含如下雜質(zhì)：同時(shí)含如下雜質(zhì)：立體異構(gòu)體立體異構(gòu)體氧化產(chǎn)物及光照產(chǎn)物氧化產(chǎn)物及光照產(chǎn)物合成中間體合成中間體去氫維生素去氫維生素A（ VitA2）去水維生素去水維生素A（ VitA3）消
8、除不相關(guān)雜質(zhì)的干擾消除不相關(guān)雜質(zhì)的干擾18三點(diǎn)校正法三點(diǎn)校正法1. 條件：條件：（1）雜質(zhì)的吸收在）雜質(zhì)的吸收在310340nm波長(zhǎng)波長(zhǎng)范圍內(nèi)呈一條直線，且隨波長(zhǎng)的范圍內(nèi)呈一條直線，且隨波長(zhǎng)的增大吸收度減??；增大吸收度減??；（2）物質(zhì)對(duì)光的吸收具有加和性。）物質(zhì)對(duì)光的吸收具有加和性。192. 波長(zhǎng)的選擇：波長(zhǎng)的選擇：（1） 1 VitA的的 max（328nm）（2） 2 3 分別在分別在 1的兩側(cè)各選一點(diǎn)的兩側(cè)各選一點(diǎn)20測(cè)定對(duì)象測(cè)定對(duì)象 VitA醋酸酯醋酸酯328340316328 第一法第一法 等波長(zhǎng)差法等波長(zhǎng)差法 3403163283282523AAA.A 校正校正21第二法第二法 等
9、吸收度法等吸收度法(皂化法皂化法)測(cè)定對(duì)象測(cè)定對(duì)象 VitA醇醇32176 AAA 334310325325260455528156A.A.A.A 校正校正22 方法：方法：第一法第一法酯式維生素酯式維生素AiAnm360340328316300ml/IU159S處測(cè)處測(cè)、分別于分別于溶液溶液環(huán)己烷環(huán)己烷23 判斷判斷 是否在是否在326329nm之間之間max max 在在326329nm之間之間改用第二法改用第二法“其其他維生素他維生素A”是是否否 求算求算 并與規(guī)定值比較并與規(guī)定值比較328iA/A24 299.0AA811.0AA0000.1AA907.0AA555.0AA328360
10、328340328328328316328300 規(guī)定值規(guī)定值 差值差值328iA/A25 判斷差值是否超過(guò)規(guī)定值的判斷差值是否超過(guò)規(guī)定值的02. 0 有一個(gè)以上有一個(gè)以上超過(guò)超過(guò)02. 0 無(wú)超過(guò)無(wú)超過(guò)02. 0 計(jì)算計(jì)算 A328（校正）（校正） 用用A328計(jì)算計(jì)算262728 VitAD膠丸中膠丸中VitA的含量測(cè)定的含量測(cè)定 精密稱(chēng)取本品精密稱(chēng)取本品(規(guī)格規(guī)格10000VitAIU/丸丸)裝量差異項(xiàng)下（平均裝量裝量差異項(xiàng)下（平均裝量0.08262g/丸）的丸）的內(nèi)容物內(nèi)容物 0.2399g 至至250ml量瓶中，用環(huán)己量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻；精密量取烷稀釋至刻度，搖勻；精密
11、量取2.0ml，置，置另一另一20 ml量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，量瓶中，用環(huán)己烷稀釋至刻度，搖勻。以環(huán)己烷為空白，測(cè)定最大吸收波搖勻。以環(huán)己烷為空白，測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)為長(zhǎng)為328nm，并在下列波長(zhǎng)處測(cè)得吸收度，并在下列波長(zhǎng)處測(cè)得吸收度為為29A300 ：0.354A316 ：0.561A328 ：0.628A340 ：0.523A360 ：0.216A300 /A328 ：0.555A316/A328 ：0.907A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.811A360/A328 ：0.299 求本品中維生素求本品中維生素A的含量？的含量？30A300 /A328 ：0.5
12、64A316/A328 ：0.893A328/A328 ：1.000A340/A328 ：0.833A360/A328 ：0.344 0.555 0.907 1.000 0.811 0.299 + 0.010.01 0 + 0.02 + 0.04 605052305610628025232523340316328328.AAA.A 校正校正=3132適用于維生素適用于維生素A醇醇（等吸收度法）（等吸收度法） 第一法無(wú)法消除雜質(zhì)干擾時(shí)用此法第一法無(wú)法消除雜質(zhì)干擾時(shí)用此法 皂化法、皂化法、6/7A法法 （3）其他維生素）其他維生素A測(cè)定法測(cè)定法33i/KOHAnm334325310300ml/IU
13、159VitAVitAS處測(cè)處測(cè)、于于稀釋至稀釋至溶解溶解異丙醇異丙醇除去植物油的干擾除去植物油的干擾甘油和脂肪酸鹽甘油和脂肪酸鹽植物油植物油醇醇醋酸酯醋酸酯皂化液皂化液揮干乙醚揮干乙醚乙醚提取乙醚提取乙醇乙醇 水溶性水溶性脂溶性脂溶性34 判斷判斷 max是否在是否在323327nm之間之間取未皂化樣品取未皂化樣品采用色譜法純采用色譜法純化后再測(cè)定化后再測(cè)定 計(jì)算計(jì)算325300AA是是否否35 判斷判斷 A300 /A325 是否大于是否大于0.73是是否否取未皂化樣品取未皂化樣品采用色譜法純采用色譜法純化后再測(cè)定化后再測(cè)定 計(jì)算計(jì)算A325(校正校正)36%100AAAf325325)(
14、325 校正校正 334310325325260455528156A.A.A.A 校正校正3703%3% 校正校正325A325A 校正校正325A382、高效液相色譜法、高效液相色譜法 正相色譜，硅膠為固定相，正己烷正相色譜，硅膠為固定相，正己烷-異丙醇為異丙醇為流動(dòng)相測(cè)定。流動(dòng)相測(cè)定。3、三氯化銻比色法、三氯化銻比色法 藍(lán)色藍(lán)色 3SbClVitAmax 618nm620nm39第二節(jié)第二節(jié) 維生素維生素B1NSCH3CH2CH2OHNNH3CNH2CH2+氨基嘧啶環(huán)氨基嘧啶環(huán)CH2噻唑環(huán)噻唑環(huán)(季銨堿季銨堿)HClCl-存在于米糠、麥麩、酵母中，治療腳氣病、多發(fā)性神經(jīng)炎和胃腸道疾病40（
15、1） 溶解性溶解性1、易溶于水、易溶于水2、水溶液呈酸性、水溶液呈酸性結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)一、一、（2） 噻唑環(huán)反應(yīng)噻唑環(huán)反應(yīng)開(kāi)環(huán)開(kāi)環(huán)-環(huán)合環(huán)合-顯色顯色 硫色素硫色素41（3） UV芳雜環(huán)，共軛雙鍵芳雜環(huán)，共軛雙鍵max = 246nm（4）含氮雜環(huán)反應(yīng)含氮雜環(huán)反應(yīng)生物堿沉淀反應(yīng)生物堿沉淀反應(yīng)（5）氯化物的反應(yīng)氯化物的反應(yīng)42鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)二、二、1硫色素反應(yīng)硫色素反應(yīng)43噻唑環(huán)在堿性介質(zhì)中開(kāi)環(huán)，再與嘧啶環(huán)上氨基環(huán)合，經(jīng)鐵氰化鉀等氧化劑氧化成具有熒光的硫色素44正丁醇或異丁醇中顯藍(lán)色熒光正丁醇或異丁醇中顯藍(lán)色熒光45463、氯化物反應(yīng)、氯化物反應(yīng)4、硝酸鉛反應(yīng)、硝酸鉛反應(yīng) 與與Na
16、OH共熱，分解生成共熱，分解生成Na2S，可與硝酸鉛生成黑色沉淀。，可與硝酸鉛生成黑色沉淀。47三、三、 含量測(cè)定含量測(cè)定喹那啶紅亞甲藍(lán)喹那啶紅亞甲藍(lán) （紫紅（紫紅天藍(lán)）天藍(lán)）（一）（一）非水溶液滴定法非水溶液滴定法維生素B1含兩個(gè)堿性的已成鹽胡伯胺和季銨基團(tuán)，均可與高氯酸反應(yīng)4849UV法法（二）（二）片劑和注射劑采用UV法246nm50片劑、注射劑片劑、注射劑= 421（每片）相當(dāng)于標(biāo)示量的（每片）相當(dāng)于標(biāo)示量的%=A = ECL規(guī)格規(guī)格g/片片g/100mlgChP51NaOH（ 三）三）硫色素?zé)晒夥蛏責(zé)晒夥?、52激發(fā)波長(zhǎng)激發(fā)波長(zhǎng)365nm發(fā)射波長(zhǎng)發(fā)射波長(zhǎng)435nm2、53+ Na
17、OH + 鐵氰化鉀鐵氰化鉀 + 異丁醇異丁醇+ NaOH + 異丁醇異丁醇+ NaOH + 鐵氰化鉀鐵氰化鉀 + 異丁醇異丁醇+ NaOH + 異丁醇異丁醇SdAb對(duì)照液對(duì)照液供試液供試液543、（1）靈敏度高，線性范圍寬）靈敏度高，線性范圍寬（2）操作繁瑣，熒光受干擾因素多）操作繁瑣，熒光受干擾因素多（3）代謝產(chǎn)物不干擾，適用于）代謝產(chǎn)物不干擾，適用于 體液分析體液分析55654321OOHHOO C OHHCH2OHL抗壞血酸抗壞血酸第三節(jié)第三節(jié) 維生素維生素C（Vitamin C）56易溶于水易溶于水結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)一、一、（1） 溶解性溶解性654321OOHHOO C O
18、HHCH2OH57OOHHOO C OHHCH2OH123456C3OH的的pKa = 4.17C2OH的的pKa = 11.57酸性酸性（2）一元酸一元酸58O二烯醇結(jié)構(gòu)二烯醇結(jié)構(gòu)二酮基結(jié)構(gòu)二酮基結(jié)構(gòu)二烯醇結(jié)構(gòu)二烯醇結(jié)構(gòu)（3）、）、 還原性還原性O(shè)HOHCCOOCC5960OOHHOO C OHHCH2OH123456L(+)抗壞血酸抗壞血酸活性最強(qiáng)活性最強(qiáng)手性手性C（C4、C5）（4） 旋光性旋光性*61與堿反應(yīng)與堿反應(yīng)（5）、）、 水解性水解性6263糖類(lèi)的顯色反應(yīng)糖類(lèi)的顯色反應(yīng)50結(jié)構(gòu)與糖類(lèi)相似結(jié)構(gòu)與糖類(lèi)相似（6）糖類(lèi)性質(zhì)糖類(lèi)性質(zhì)64（7）UV特征特征OHOO C OHHCH2OHHO
19、65利用還原性利用還原性1、鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)二、二、CH2OHOOOO C OHH6667NClHOClONClHOClOHH（玫瑰色）玫瑰色）（無(wú)色）（無(wú)色）682、利用糖的性質(zhì)、利用糖的性質(zhì)或鹽酸或鹽酸50吡咯吡咯69OO C OHHCH2OHHOOHCH2OHOO C OHHHHOOCCOHO OCHOH3CH2OHH2O7071UV 30.01mol/L HCl72三、雜質(zhì)檢查（三、雜質(zhì)檢查（Purity）1、溶液澄清度與顏色檢查、溶液澄清度與顏色檢查2、銅、鐵離子的檢查、銅、鐵離子的檢查73指示劑指示劑 淀粉指示液淀粉指示液原理原理（1）、）、碘量法碘量法1含量測(cè)定含量測(cè)定四、四、7
20、4OO C OHHOOCH2OHHI2+OHOO C OHHCH2OHHOH+75 取本品約取本品約0.2g，精密稱(chēng)定，加新，精密稱(chēng)定，加新沸過(guò)的冷水沸過(guò)的冷水100ml與稀醋酸與稀醋酸10ml使溶使溶解，加淀粉指示液解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴，立即用碘滴定液（定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)）滴定，至溶液顯藍(lán)色，在色，在30秒內(nèi)不褪。每秒內(nèi)不褪。每1ml碘滴定液碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于8.806mg的的C6H8O6方法方法（2）、）、7677（1）酸性環(huán)境）酸性環(huán)境（2）新沸冷）新沸冷H2O減慢減慢VitC被被O2氧化速度氧化速度討論討論（3）立即滴定）立即滴
21、定 趕走水中趕走水中O2減少減少O2的干擾的干擾782，6 - 二氯靛酚鈉滴定法法二氯靛酚鈉滴定法法（二）（二）USPJP原理原理1、79自身指示終點(diǎn)法自身指示終點(diǎn)法方法方法2、80（2）快速滴定）快速滴定 2min內(nèi)內(nèi) （1）酸性環(huán)境）酸性環(huán)境 HPO3-HAc 穩(wěn)定穩(wěn)定VitC防止其他還原性物質(zhì)干擾防止其他還原性物質(zhì)干擾（3）剩余比色測(cè)定）剩余比色測(cè)定 （定量過(guò)量）（定量過(guò)量）（測(cè)剩余染料）（測(cè)剩余染料）討論討論3、81（4）缺點(diǎn)）缺點(diǎn) 需經(jīng)常標(biāo)定需經(jīng)常標(biāo)定貯存貯存一周一周不穩(wěn)定不穩(wěn)定干擾多干擾多 氧化力較強(qiáng)氧化力較強(qiáng)82n是一類(lèi)抗佝僂病維生素的總稱(chēng)是一類(lèi)抗佝僂病維生素的總稱(chēng)n目前已知的維
22、生素目前已知的維生素D D類(lèi)物質(zhì)至少有十類(lèi)物質(zhì)至少有十種之多，它們都是甾醇的衍生物。種之多，它們都是甾醇的衍生物。 第四節(jié)第四節(jié) 維生素維生素D8384維生素D3（C27H44O，384.65） 85n1 1性狀性狀 均為無(wú)色針狀結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無(wú)均為無(wú)色針狀結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末；無(wú)臭，無(wú)味；遇光或空氣均易變質(zhì)。臭，無(wú)味；遇光或空氣均易變質(zhì)。n2 2溶解性溶解性 維生素維生素D2D2在氯仿中極易溶解，在乙醇、在氯仿中極易溶解，在乙醇、丙酮或乙醚中易溶；丙酮或乙醚中易溶； 維生素維生素D3D3在乙醇、丙酮、氯仿或乙醚中在乙醇、丙酮、氯仿或乙醚中極易溶解；二者均在植物油中略溶，在水極易溶解；
23、二者均在植物油中略溶，在水中不溶。中不溶。86n3 3不穩(wěn)定性不穩(wěn)定性 維生素維生素D2D2、D3D3因含有多個(gè)烯鍵，所以極不因含有多個(gè)烯鍵，所以極不穩(wěn)定，遇穩(wěn)定，遇光光或或空氣及其他氧化劑空氣及其他氧化劑均發(fā)生氧均發(fā)生氧化而變質(zhì)，使效價(jià)降低，毒性增強(qiáng)。本品化而變質(zhì)，使效價(jià)降低，毒性增強(qiáng)。本品對(duì)對(duì)酸酸也不穩(wěn)定。也不穩(wěn)定。n4 4旋光性旋光性 維生素維生素D D2 2具有具有 6 6個(gè)手性碳原子，個(gè)手性碳原子， 維生素維生素D D3 3有有5 5個(gè)手性碳原子個(gè)手性碳原子87n5 5顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 本品的氯仿溶液，加醋酐與硫酸，初顯本品的氯仿溶液，加醋酐與硫酸，初顯黃黃色，色，漸變漸變紅紅色，迅
24、即變?yōu)樯?，迅即變?yōu)樽献仙?，最后變?yōu)樯詈笞優(yōu)榫G綠色。本色。本反應(yīng)為甾類(lèi)化合物的共有反應(yīng)。反應(yīng)為甾類(lèi)化合物的共有反應(yīng)。n6 6紫外吸收特性紫外吸收特性 在在265nm265nm的波長(zhǎng)的波長(zhǎng) 維生素維生素D D2 2的吸收系數(shù)為的吸收系數(shù)為460-490460-490； 維生素維生素D D3 3的吸收系數(shù)為的吸收系數(shù)為465-495465-495。88二二、1 1與與醋酐醋酐-濃硫酸反應(yīng)濃硫酸反應(yīng) 維生素維生素D2或或D3，加氯仿溶解后，加醋酐與硫酸，加氯仿溶解后，加醋酐與硫酸 維生素維生素D2初顯黃色，漸變紅色，迅即變?yōu)樽仙?，初顯黃色，漸變紅色，迅即變?yōu)樽仙?，最后成綠色。最后成綠色。 維生素維
25、生素D3初顯黃色，漸變紅色，迅即變?yōu)樽仙?、初顯黃色，漸變紅色，迅即變?yōu)樽仙?、藍(lán)綠色，最后變?yōu)榫G色。藍(lán)綠色，最后變?yōu)榫G色。鑒 別 試 驗(yàn)(一) 顯色反應(yīng)892 2與三氯化銻反應(yīng)與三氯化銻反應(yīng)n溶液顯橙紅色，逐漸變?yōu)榉奂t色。溶液顯橙紅色，逐漸變?yōu)榉奂t色。3 3其它顯色反應(yīng)其它顯色反應(yīng)n維生素維生素D + D + 三氯化鐵三氯化鐵 橙黃色橙黃色n維生素維生素D + D + 二氯丙醇和乙酰氯試劑二氯丙醇和乙酰氯試劑 綠色，綠色，均可用于鑒別，但專(zhuān)屬性不強(qiáng)。均可用于鑒別，但專(zhuān)屬性不強(qiáng)。90n維生維生素素D2，在無(wú)水乙醇中。比旋度為，在無(wú)水乙醇中。比旋度為102.5107.5；n維生素維生素D3，比旋度為
26、比旋度為105112 2、比旋度鑒別比旋度鑒別91n可用薄層色譜法、可用薄層色譜法、HPLC法和制備衍生物測(cè)法和制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)進(jìn)行鑒別。熔點(diǎn)進(jìn)行鑒別。n此外，亦可通過(guò)其紅外、紫外吸收光譜的此外，亦可通過(guò)其紅外、紫外吸收光譜的特征加以鑒別。特征加以鑒別。3、其它鑒別方法其它鑒別方法92n取維生素取維生素D10mg，溶于，溶于96乙醇乙醇10ml中。取中。取此液此液0.1ml，加乙醇，加乙醇1ml和和85硫酸硫酸5ml。維生維生素素D2顯紅色，顯紅色，在在570nm波長(zhǎng)處波長(zhǎng)處有最大吸收；有最大吸收；維生素維生素D3顯黃色，在顯黃色，在495nm波長(zhǎng)波長(zhǎng)處有最大吸處有最大吸收。此反應(yīng)用于收。此反
27、應(yīng)用于D2和和D3的含量測(cè)定。的含量測(cè)定。（四）（四） 維生素維生素D2、D3的的區(qū)別反應(yīng)區(qū)別反應(yīng)93三三nChP（2010年版）規(guī)定維生素年版）規(guī)定維生素D2檢查麥角甾檢查麥角甾醇，而維生素醇，而維生素D3則不作要求。則不作要求。雜雜 質(zhì)質(zhì) 檢檢 查查1、 麥角甾醇的檢查2、 前維生素D的光照產(chǎn)物nD族維生素都是甾醇的衍生物，只是側(cè)鏈有族維生素都是甾醇的衍生物，只是側(cè)鏈有所不同。所不同。9495四四可采用可采用HPLCHPLC法法無(wú)無(wú)維生素維生素A醇及其他雜質(zhì)干擾的供試品可用醇及其他雜質(zhì)干擾的供試品可用第一第一法法測(cè)定，否則應(yīng)按測(cè)定，否則應(yīng)按第二法第二法處理后測(cè)定；處理后測(cè)定；n如果按第二法
28、處理后，前維生素如果按第二法處理后，前維生素D峰仍受雜質(zhì)峰仍受雜質(zhì)干擾，僅有維生素干擾，僅有維生素D峰可以分離時(shí)，則應(yīng)按峰可以分離時(shí)，則應(yīng)按第第三法三法測(cè)定。測(cè)定。n具體過(guò)程自學(xué)。具體過(guò)程自學(xué)。含含 量量 測(cè)測(cè) 定定96苯并二氫吡喃醇苯并二氫吡喃醇OHO第五節(jié)第五節(jié) 維生素維生素E97生物效價(jià)生物效價(jià) 右旋體右旋體 ：消旋體：消旋體 = 1.4 ：10（天然品）（合成品）CH3COOCH3CH3CH3CH3CH3CH3H3CH3COdl生育酚醋酸酯*98OR1HOR2CH3名名 稱(chēng)稱(chēng)R1R2相對(duì)活性相對(duì)活性-生育酚生育酚-生育酚生育酚 -生育酚生育酚 -生育酚生育酚CH3CH3HHCH3HCH
29、3H1.00.50.20.1*99結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)一、一、苯環(huán)苯環(huán) + 二氫吡喃環(huán)二氫吡喃環(huán) + 飽和烴鏈飽和烴鏈1、易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水、易溶于有機(jī)溶劑，不溶于水2、UV3、酯鍵、酯鍵 易水解易水解 OorOHHVitE醌型化合物醌型化合物生育酚生育酚100OHNO3VitE生育紅生育紅生育酚生育酚75151、硝酸反應(yīng)硝酸反應(yīng)橙紅色橙紅色鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)二、二、101OOCH3C16H33H3CCH3O（橙紅色）（橙紅色）生育紅生育紅CH3HOOCH3C16H33CH3H3C生育酚生育酚HNO3強(qiáng)氧化劑強(qiáng)氧化劑102三氯化鐵反應(yīng)三氯化鐵反應(yīng)紅色紅色生育醌生育醌對(duì)對(duì)生育酚生育酚
30、聯(lián)吡啶聯(lián)吡啶 2FeKOHFeVitE3O2、103OOH3CCH3OHCH3C16H33CH3CH3HOOCH3C16H33CH3H3C生育酚生育酚對(duì)對(duì)-生育醌生育醌+3FeO弱氧化弱氧化劑劑104紅色紅色+23Fe3+2FeNNNN105 = 41.045.5%cmE11max = 284nmmin = 254nm0.01%無(wú)水乙醇中無(wú)水乙醇中UV法法3、106107薄層板薄層板 硅膠硅膠G展開(kāi)劑展開(kāi)劑 環(huán)己烷環(huán)己烷 -乙醚（乙醚（4 ：1）顯色劑顯色劑 硫酸（硫酸（105 5） VitE Rf = 0.7TLC法法4、108游離生育酚游離生育酚 硫酸鈰滴定液（硫酸鈰滴定液（0.01mol
31、/L）二苯胺（亮黃二苯胺（亮黃灰紫）灰紫）生育醌生育醌對(duì)對(duì)生育酚生育酚 3422CeCe 利用游離生育酚的還原性，利用游離生育酚的還原性，將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰將硫酸鈰還原成硫酸亞鈰 雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查 三、三、原理原理（一）（一）試劑試劑（二）（二）109四、四、 含量測(cè)定含量測(cè)定GC法法1、選擇性好選擇性好靈敏度高靈敏度高速度快速度快分離效能好分離效能好揮發(fā)性低、不揮發(fā)性低、不穩(wěn)定、極性強(qiáng)穩(wěn)定、極性強(qiáng)衍生化易受衍生化易受樣品蒸氣壓限樣品蒸氣壓限制制RP - HPLC法法2、110思考題思考題n平時(shí)吃混合維生素好，還是單一維生素好？平時(shí)吃混合維生素好，還是單一維生素好？n挑食或偏食的人容易缺少哪種維生素？挑食或偏食的人容易缺少哪種維生素？n城里和農(nóng)村比較，哪種維生素的攝取有區(qū)別？城里和農(nóng)村比較，哪種維生素的攝取有區(qū)別？111重點(diǎn)重點(diǎn)n結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系。結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系。n維生素維生素A的三點(diǎn)校正法的三點(diǎn)校正法n維生素維生素B的硫色素反應(yīng)（特征）的硫色素反應(yīng)（特征）n維生素維生素C結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、分析方法結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、分析方法n維生素維生素D2和和D3的區(qū)別的區(qū)別n維生素維生素E有關(guān)生育酚的部分有關(guān)生育酚的部分112 Thank You for Your Attention! 2016-5-14
藥物分析學(xué)：第六章 維生素類(lèi)藥物的分析
