生物第12單元 現(xiàn)代生物科技 第37講 細(xì)胞工程

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1、第37講PART 37細(xì)胞工程考點互動探究教師備用習(xí)題考試說明1.植物的組織培養(yǎng)()。2動物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆()。3細(xì)胞融合與單克隆抗體()?？键c互動探究知識梳理1.細(xì)胞工程概述考點一植物細(xì)胞工程原理和方法細(xì)胞生物學(xué)和_操作水平細(xì)胞水平或_目的按照人們的意愿來改變_或獲得_分類_細(xì)胞工程和_細(xì)胞工程分子生物學(xué)細(xì)胞器水平細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)品植物動物考點互動探究2.植物細(xì)胞的全能性(1)概念：具有某種生物_的任何一個細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的_，也就是說，每個生物細(xì)胞都具有_的特點。(2)原因：細(xì)胞內(nèi)含有本物種的_。(3)表現(xiàn)條件：具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，處于_狀態(tài)，提供一定的_和其他適宜

2、的外界條件。 3.植物組織培養(yǎng)(1)原理：植物細(xì)胞的_。(2)條件：_和人工控制、人工配制的_、適宜的_。全部遺傳信息潛能全能性全部遺傳信息離體營養(yǎng)、激素全能性無菌培養(yǎng)基培養(yǎng)條件(3)過程4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)概念：指將不同種的植物體細(xì)胞在一定條件下融合成_，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。(2)原理：細(xì)胞膜的_和植物細(xì)胞的_。考點互動探究離體脫分化激素圖12371再分化無菌雜種細(xì)胞流動性全能性(3)過程(4)意義：克服_的障礙，培育作物新品種。 5.植物細(xì)胞工程的應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑微型繁殖：用于_優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)?？键c互動探究圖12372 纖維素酶、果膠原生質(zhì)體物

3、理聚乙二醇(PEG)細(xì)胞壁遠(yuǎn)緣雜交快速繁殖作物脫毒：選取作物_等無毒組織進行組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗的技術(shù)。人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的_、不定芽、頂芽、腋芽等材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，可以解決某些植物結(jié)實率低、繁殖困難等問題。(2)作物新品種的培育：單倍體育種和_的利用。(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：即利用_技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料和生物堿等?？键c互動探究莖尖、根尖胚狀體突變體植物組織培養(yǎng)考點互動探究核心講解名稱植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動性和植物細(xì)胞的全能性過程考點互動探究注意事項選材：選取根尖、莖尖、形成層等部位，最容易誘導(dǎo)脫分化光

4、照：脫分化過程不需要光照，再分化過程需要光照植物激素：培養(yǎng)基中需添加生長素和細(xì)胞分裂素，且脫分化、再分化時這兩種植物激素的比例不同去除細(xì)胞壁的方法：酶解法，所用的酶是纖維素酶和果膠酶人工誘導(dǎo)融合的方法：化學(xué)方法是用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑；物理方法包括離心、振動、電激等聯(lián)系植物體細(xì)胞雜交技術(shù)包括植物細(xì)胞融合和植物組織培養(yǎng)兩個過程，植物組織培養(yǎng)是植物體細(xì)胞雜交的一個環(huán)節(jié)，融合的植物體細(xì)胞只有通過植物組織培養(yǎng)才能發(fā)育成完整的個體12017江蘇鹽城二模 擬采用“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”的方法繁殖一種名貴花卉。下列有關(guān)敘述錯誤的是 ()A消毒的原則是既要殺死材料表面的微生物，又要減少消毒劑對細(xì)胞的傷

5、害B在愈傷組織培養(yǎng)基中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞C出芽是外植體經(jīng)細(xì)胞脫分化后再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D誘導(dǎo)叢芽分化生根時，培養(yǎng)基中通常含有NAA等植物生長調(diào)節(jié)劑考點互動探究題組訓(xùn)練答案 B考點互動探究解析消毒指用比較溫和的物理或化學(xué)方法清除或殺滅除芽孢外的所有病原微生物，使其數(shù)量減少達(dá)到無害化，A正確；愈傷組織細(xì)胞含有細(xì)胞壁，加入細(xì)胞融合誘導(dǎo)劑不會誘導(dǎo)細(xì)胞融合，因此不會得到染色體加倍的細(xì)胞，B錯誤；愈傷組織再分化形成胚狀體后，一般先形成芽，再形成根，而分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，C正確；誘導(dǎo)叢芽分化生根時，培養(yǎng)基中通常含有NAA等植物生長調(diào)節(jié)劑，D正確。2201

6、7西安一模 白菜、甘藍(lán)均為二倍體，體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18?！鞍撞烁仕{(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種，它具有生長期短、耐熱性強和易于儲藏等優(yōu)點。如圖12373是“白菜甘藍(lán)”的雜交過程示意圖，回答以下問題：(1)為了得到原生質(zhì)體需先用_和_來處理白菜細(xì)胞和甘藍(lán)細(xì)胞。(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有多種，常用的物理方法是_，融合完成的標(biāo)志是_。由雜種細(xì)胞得到“白菜甘藍(lán)”還需要經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其中需要避光培養(yǎng)的步驟是_。考點互動探究圖12373(3)如圖通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“白菜甘藍(lán)”植株體細(xì)胞的染色體數(shù)為_；通常情況下，白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的，原因是_；若對白

7、菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話，得到的后代應(yīng)含_條染色體。(4)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比的優(yōu)點是_?？键c互動探究答案 (1)纖維素酶果膠酶(2)離心、振動、電激再生出新的細(xì)胞壁脫分化(3)38存在生殖隔離19(4)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，培育作物新品種解析 (1)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，可采用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法包括：物理方法(離心、振動、電激)和化學(xué)方法(聚乙二醇)；融合完成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁；將雜種細(xì)胞培育成雜種植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，包括脫分化和再分化兩個階段，其中脫分化過程要避光，再分化

8、過程需要光。(3)如圖通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“白菜甘藍(lán)”體細(xì)胞染色體數(shù)為201838；通常情況下，由于白菜和甘藍(lán)之間存在生殖隔離，因此，白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的；若對白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話，得到的后代應(yīng)含19條染色體。(4)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比的優(yōu)點是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，培育作物新品種?？键c互動探究考點互動探究知識梳理1動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段：_、_、_、_等，其中_技術(shù)是其他工程技術(shù)的基礎(chǔ)。 2.動物細(xì)胞培養(yǎng)(1)原理：_。(2)過程考點二動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞核移植動物細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體動物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞增殖圖12374 剪碎

9、胰蛋白酶貼壁接觸抑制胰蛋白酶1050核型考點互動探究(3)培養(yǎng)條件營養(yǎng)：除糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素之外，通常還需加入_等一些天然成分。適宜的溫度：36.5 0.5 ；適宜的pH：7.27.4。抗生素培養(yǎng)液血清、血漿(4)應(yīng)用生產(chǎn)_，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。應(yīng)用于_。檢測_，判斷某種物質(zhì)的毒性；用于_等方面的研究。考點互動探究細(xì)胞代謝pH生物制品基因工程有毒物質(zhì)生理、病理、藥理1.動物細(xì)胞培養(yǎng)中兩組概念的辨析(1)細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞進行有絲分裂，數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖

10、，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(2)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)：細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，沒有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞核型正常。 傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長、增殖一定時間后，由于空間不足或細(xì)胞密度過大導(dǎo)致營養(yǎng)枯竭，影響細(xì)胞的生長，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進行分瓶擴大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。一般情況下，細(xì)胞傳至1050代后，出現(xiàn)核型異常，細(xì)胞增殖會明顯減緩，甚至完全死亡?？键c互動探究核心講解2植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較考點互動探究項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理植物細(xì)胞的全能性、細(xì)胞的增殖細(xì)胞的增殖取材較幼嫩的細(xì)胞、組織或器官胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織培養(yǎng)基成分無

11、機鹽、蔗糖、維生素、植物激素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、抗生素、動物血清等結(jié)果 可以獲得植株，也可以獲得大量細(xì)胞 只能獲得大量細(xì)胞，不能得到生物個體相同點都需人工條件下的無菌操作；都需適宜的溫度、pH等條件2017四川南充一診 科學(xué)家利用基因工程和細(xì)胞核移植技術(shù)培育了綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬?；玖鞒蹋簭臒晒馑钢蝎@取目的基因，與有關(guān)載體重組，將其導(dǎo)入豬胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后再將成纖維細(xì)胞核植入去核的卵母細(xì)胞中，最后培養(yǎng)出轉(zhuǎn)基因克隆豬。(1)成纖維細(xì)胞貼壁生長分裂到表面相互接觸時，就會停止分裂，這種現(xiàn)象叫作細(xì)胞的_。若將成纖維細(xì)胞進行傳代培養(yǎng)，操作時首先用_處理成細(xì)胞懸液。

12、考點互動探究題組訓(xùn)練(2)作為核移植受體細(xì)胞的去核卵母細(xì)胞一般處在_期。供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，常通過_(物理方法)激活重組細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進程。(3)培養(yǎng)重組細(xì)胞時，將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為_培養(yǎng)基，但通常在培養(yǎng)基中還需要加入適量的_等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的主要作用是_。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的_。考點互動探究答案(1)接觸抑制胰蛋白酶(2)M中(減數(shù)第二次分裂中)電脈沖(電激)(3)合成血清(血漿)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH抗生素考點互動探究解析 (1)細(xì)胞貼壁生長分裂到表面

13、相互接觸時，就會停止分裂，這種現(xiàn)象叫作細(xì)胞的接觸抑制。若將成纖維細(xì)胞進行傳代培養(yǎng)，操作時首先用胰蛋白酶處理成細(xì)胞懸液。(2)選取處在M中(減數(shù)第二次分裂中)期的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，通過電脈沖(電激)激活重組細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育進程。(3)將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類、數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基稱為合成培養(yǎng)基。動物細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素。考點互動探究知識梳理1.理論基礎(chǔ)：

14、動物_。 2.概念：將動物一個細(xì)胞的_，移入一個已經(jīng)去掉_的_中，使其重組并發(fā)育成一個新的_，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為_。 3.核移植類型：_移植和體細(xì)胞核移植?？键c三動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物細(xì)胞核的全能性細(xì)胞核細(xì)胞核卵母細(xì)胞胚胎克隆動物胚胎細(xì)胞核考點互動探究4.過程5.應(yīng)用(1)加速家畜_，促進_。(2)保護_物種。(3)生產(chǎn)_。(4)作為異種移植的_。(5)用于組織器官的_。體細(xì)胞體細(xì)胞細(xì)胞核圖12375 去核卵母細(xì)胞細(xì)胞融合胚胎移植遺傳改良進程優(yōu)良畜群繁育瀕危醫(yī)用蛋白供體移植考點互動探究6.存在問題(1)克隆動物存在_、_、生理缺陷。(2)克隆動

15、物食品的_也有爭議。健康問題遺傳缺陷安全性問題1.關(guān)于核移植技術(shù)的幾個問題(1)選M中期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因：此類細(xì)胞體積大，易于操作；卵黃多，營養(yǎng)物質(zhì)豐富，可為發(fā)育提供充足的營養(yǎng)；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。(2)克隆動物是由重組的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)而來的，該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞，細(xì)胞核基因來源于提供細(xì)胞核的親本，其遺傳物質(zhì)來自兩個親本。(3)核移植中供體動物、提供卵母細(xì)胞的動物、代孕動物和克隆動物之間的關(guān)系：克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同，少數(shù)性狀與提供卵母細(xì)胞的動物相同，與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。(4)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)從生殖方式的角度看

16、屬于無性生殖，重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵，需要動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。考點互動探究核心講解科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進行克隆(如圖12376所示)，請結(jié)合圖示回答下列問題：(1)在進行細(xì)胞培養(yǎng)時，要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進行分離，形成單個細(xì)胞，這個過程中需要利用_酶處理。(2)形成重組細(xì)胞時應(yīng)選用_期的卵母細(xì)胞，并去掉其細(xì)胞核的原因是_。考點互動探究題組訓(xùn)練圖12376 (3)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞，則在進行原代培養(yǎng)時，會表現(xiàn)出_和_等特點。(4)圖中犢牛并非是對體細(xì)胞核供體母牛100%的復(fù)制，其原因主要有_。(

17、5)圖中所示的生物技術(shù)整體被稱為_，其 包 括 的 具 體 生 物 技 術(shù) 有 _ _ _ _ _ _ 、_等。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動物_具有全能性。考點互動探究答案 (1)胰蛋白(膠原蛋白)(2)M中(減數(shù)第二次分裂中)使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞(避免卵細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)對后代造成干擾) (3)貼壁生長(細(xì)胞貼壁)接觸抑制 (4)生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制；生物的性狀受環(huán)境因素的影響 (5)核移植(體細(xì)胞核移植)動物細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植體細(xì)胞的細(xì)胞核考點互動探究解析 (1)在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，一般用胰蛋白酶將細(xì)胞分散開，獲得細(xì)胞懸液。(2)在細(xì)胞核移

18、植形成重組細(xì)胞的過程中一般選用處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞，去除其細(xì)胞核是為了保證克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞。(3)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞，在進行原代培養(yǎng)時，會表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制等特點。(4)克隆出的個體細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自卵母細(xì)胞，并且生物性狀的表達(dá)還受到環(huán)境因素的影響，所以題圖中犢牛并非是對體細(xì)胞核供體母牛100%的復(fù)制。(5)題圖中所示技術(shù)為動物體細(xì)胞核移植技術(shù)，其中應(yīng)用到的生物技術(shù)包括動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、胚胎移植等。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。考點互動探究知識梳理1.動物細(xì)胞融合考點四動物細(xì)胞融合和單克隆抗體 滅活的

19、病毒流動性有性雜交圖12377考點互動探究 2.單克隆抗體的制備(1)過程圖12378骨髓瘤體外體內(nèi)考點互動探究(2)單克隆抗體的優(yōu)點：_、_，并可大量制備。(3)單克隆抗體的應(yīng)用：作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、_、簡易、_的優(yōu)點；用于治療疾病和_。特異性強靈敏度高高效快速運載藥物 1.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較考點互動探究核心講解項目動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交培養(yǎng)條件葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、血清或血漿等天然成分營養(yǎng)物質(zhì)(水、無機鹽、蔗糖、氨基酸和有機酸等)、激素(如細(xì)胞分裂素、生長素等)及其他條件(無菌、適宜的溫度和pH等)細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞增殖細(xì)胞膜的

20、流動性、細(xì)胞的全能性考點互動探究項目動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞融合前提用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合誘導(dǎo)手段物理、化學(xué)法：與植物體細(xì)胞雜交的相同生物法：滅活的病毒物理法：離心、振動、電激等；化學(xué)法：用聚乙二醇(PEG)處理結(jié)果獲得雜種細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品獲取雜種植株用途制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙2單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的考點互動探究項目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導(dǎo)融合后得到多種融合細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜

21、交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞1.圖12379為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答：(1)植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有_。動物細(xì)胞工程的各技術(shù)手段中的基礎(chǔ)是_。(2)若圖中A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前應(yīng)用_處理，除去_；A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的化學(xué)方法是_；融合完成的標(biāo)

22、志是_。(3)與植物細(xì)胞相比，動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是用_處理?？键c互動探究題組訓(xùn)練圖12379 (4)若利用動物細(xì)胞融合技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體，應(yīng)采用_和_進行融合，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到能產(chǎn)生特異抗體的 雜 交 瘤 細(xì) 胞 ， 第 一 次 篩 選 一 般 利 用_進行，第二次篩選需對細(xì)胞進行反復(fù)的_，以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。(5)少量生產(chǎn)單克隆抗體時，可將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)進行增殖，該方法的優(yōu)點是_?？键c互動探究答案 (1)植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞培養(yǎng) (2)纖維素酶、果膠酶細(xì)胞壁PEG誘導(dǎo)再生出細(xì)胞壁 (3)滅活的病毒 (4)經(jīng)免疫的B

23、細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)基克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢驗 (5)節(jié)約培養(yǎng)基(成本)，易于控制培養(yǎng)條件等考點互動探究解析 (1)植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交。動物細(xì)胞工程的各技術(shù)手段中的基礎(chǔ)是動物細(xì)胞培養(yǎng)。(2)植物體細(xì)胞雜交前，先采用酶解法去除細(xì)胞壁，即采用纖維素酶、果膠酶處理除去細(xì)胞壁；誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用的化學(xué)方法是PEG誘導(dǎo)；原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁。(3)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法(離心、振動、電激等)、化學(xué)法(聚乙二醇)，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有物理法(離心、振動、電激等)、化學(xué)法(聚乙二醇)和生物法(滅活的病毒)，故與植物細(xì)胞相比，動物細(xì)胞融合特有的

24、誘導(dǎo)融合的方法是用滅活的病毒處理?？键c互動探究(4)若利用動物細(xì)胞融合技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體，應(yīng)將經(jīng)免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進行融合，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細(xì)胞，第一次篩選一般利用選擇培養(yǎng)基進行，第二次篩選需對細(xì)胞進行反復(fù)的克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢驗，以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。(5)少量生產(chǎn)單克隆抗體時，可將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)繁殖，該方法的優(yōu)點是節(jié)約培養(yǎng)基(成本)，易于控制培養(yǎng)條件等。22017沈陽示范協(xié)作校一模 如圖123710為制備多克隆抗體和單克隆抗體的示意圖，回答下列問題：(1)將抗原注射到小鼠體內(nèi)時，小鼠體內(nèi)發(fā)生了_免疫過程。圖中選用經(jīng)

25、免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，與植物體細(xì)胞雜交相比，其特有的融合方法是_?？键c互動探究圖123710(2)圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選過程需進行_和_，目的是篩選出_。將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)時，需將其置于_的混合氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。(3)與多克隆抗體相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點在于其_，并能大量制備。從目前臨床試驗來看，單克隆抗體主要用于治療癌癥，例如可以將抗癌細(xì)胞的單克隆抗體與放射性同位素、藥物等結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”，利用單克隆抗體的_作用，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。考點互動探究答案 (1)體液用滅活的病毒處理(2)克隆化培養(yǎng)

26、抗體檢測能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞含95%的空氣和5%的CO2(3)特異性強、靈敏度高導(dǎo)向考點互動探究解析 (1)將抗原注射到小鼠體內(nèi)時，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了抗體，屬于體液免疫過程。題圖中選用經(jīng)免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，與植物體細(xì)胞雜交相比，其特有的融合方法是用滅活的病毒處理。(2)題圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選過程需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，目的是篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)時，需將其置于含95%的空氣和5%的CO2的混合氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。(3)與多克隆抗體相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點在于其特異性強、靈敏度高，并能大量制備。從目前臨

27、床試驗來看，單克隆抗體主要用于治療癌癥，例如可以將抗癌細(xì)胞的單克隆抗體與放射性同位素、藥物等結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”，利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。考點互動探究12017海南卷 甲、乙兩同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?；卮鹣铝袉栴}：(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是_。(2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入了一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到_。若要用細(xì)胞作為材料進行培養(yǎng)獲得幼苗，該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是_(填“具有完整的細(xì)胞核”

28、“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。歷年真題明考向考點互動探究(3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是_。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)_形成的。(4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)方法來繁殖，在培養(yǎng)時，_(填“能”或“不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉作為外植體，原因是_。圖123711考點互動探究答案 (1)綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性，在一定條件下能發(fā)育成完整植株(2)葡萄糖、果糖具有完整的細(xì)胞核 (3)細(xì)胞分裂素、生長素脫分化(4)不能對雜合體

29、的植株來說，其體細(xì)胞的基因型相同，而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株考點互動探究解析 (1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。(2)蔗糖是一種二糖，可水解成葡萄糖、果糖。細(xì)胞具有完整的細(xì)胞核即可作為材料進行組織培養(yǎng)獲得幼苗。(3)植物組織培養(yǎng)過程中，生長素用量與細(xì)胞分裂素用量比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；比例適中時，促進愈傷組織的生長。(4)要用組織培養(yǎng)方法獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，培養(yǎng)時不能采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉作為外植體，因為對雜合體的植株來說，其體細(xì)胞的基因型相

30、同，而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株。考點互動探究22016全國卷 圖123712表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為_。過程表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時期再進行，去核時常采用_的方法。代表的過程是_。圖123712考點互動探究(2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中_的穩(wěn)定性會降低。因此，選材時必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_。(4)與克隆羊“多莉(利)”培育成

31、功一樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了_。答案 (1)XX或XY顯微操作胚胎移植 (2)遺傳物質(zhì) (3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的性狀產(chǎn)生影響 (4)動物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性考點互動探究解析 (1)二倍體哺乳動物的性別決定方式為XY型，A的性別未知，其性染色體組成可能為XX，也可能為XY。核移植時，要通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核。早期胚胎可通過胚胎移植移入受體子宮中。(2)一般來說，細(xì)胞傳代培養(yǎng)至1050代左右時，增殖會逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會發(fā)生變化。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。(3)克

32、隆動物的遺傳物質(zhì)主要來自于供體核，但卵母細(xì)胞的線粒體中也含有一部分遺傳物質(zhì)。(4)克隆動物的成功獲得證明動物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性?？键c互動探究32014新課標(biāo)全國卷 某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如圖123713所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中，再加入、聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。圖1237

33、13考點互動探究回答下列問題：(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是_小鼠，理由是_。(2)細(xì)胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有_，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_。(3)雜交瘤細(xì)胞中有_個細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_?？键c互動探究答案 (1)四YY小鼠的血清抗體效價最高 (2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞

34、融合是隨機的，且融合率達(dá)不到100%(3)1100 (4)不能無限增殖考點互動探究解析 (1)據(jù)圖分析，第四次免疫后小鼠Y的血清抗體效價達(dá)到 16 000 以上。達(dá)到要求后的 X、Y、Z 這3只小鼠中，小鼠 Y 的 B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和 B 淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物，由于細(xì)胞融合是隨機的，且融合率達(dá)不到100%，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)雜交瘤細(xì)胞形成后，由于核膜具有流動性，故小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞核會融合形成一個雜交的細(xì)胞核，因此染色體數(shù)目最多是100條。(4)

35、未融合的 B 淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然是不能無限增殖的細(xì)胞，同時 B淋巴細(xì)胞不可能渡過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程中的兩次“危機”而達(dá)到細(xì)胞系水平。12017天津六校高三期中 在現(xiàn)代生物科技的應(yīng)用中，不需要進行檢測與篩選的是 ()A對植物的離體組織進行培養(yǎng)，大規(guī)模培育優(yōu)良品種B將鼠的骨髄瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，制備單克隆抗體C利用植物細(xì)胞工程技術(shù)培育“白菜甘藍(lán)”D將抗蟲基因?qū)胫参锛?xì)胞，培育具有抗蟲特性的新植株教師備用習(xí)題答案 A解析對植物的離體組織進行培養(yǎng)，大規(guī)模培育優(yōu)良品種，不需要進行檢測與篩選。細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞不一定是所需要的，需進行篩選。植物細(xì)胞工程培育的雜種植株不一定能表達(dá)出相

36、應(yīng)的性狀，需進行檢測。轉(zhuǎn)基因植株不一定能表現(xiàn)出所需要的性狀，需進行檢測與篩選。22017江蘇常州模擬 下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是 ()A動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中往往使用液體培養(yǎng)基B動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是為了培養(yǎng)動物個體C在培養(yǎng)過程中通常要通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸D動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中可用胃蛋白酶將動物組織分散成單個細(xì)胞教師備用習(xí)題答案 A解析動物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，A正確；動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得細(xì)胞和細(xì)胞產(chǎn)物，通過核移植技術(shù)才能獲得克隆動物，B錯誤；CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，C錯誤；動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中常要用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶，用來分散細(xì)胞，D錯誤。32017天津紅

37、橋區(qū)一模 從同一頭牛中取多個供體細(xì)胞培養(yǎng)出多頭克隆牛，這些牛在性狀上卻并不完全相同，下列有關(guān)其原因的敘述，錯誤的是 ()A基因可能發(fā)生變異 B核基因發(fā)生基因重組C受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因不同D性狀變異可由環(huán)境條件引起教師備用習(xí)題答案 B解析克隆牛在性狀上卻不完全相同的原因可能有基因可能發(fā)生變異，受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因不同，性狀變異可由環(huán)境條件引起等，A、C、D正確；克隆屬于無性生殖，該過程中核基因不會發(fā)生基因重組，B錯誤。42017北京西城區(qū)高三期末 如圖K371是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖，沒有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時間后被機體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成

38、，對正常細(xì)胞也有一定毒性。下列說法不正確的是 ()A單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的B活化阿霉素能抑制細(xì)胞中DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程C在治療中，應(yīng)先注射非活化磷酸阿霉素再注射“生物導(dǎo)彈”D單克隆抗體特異性強，能減輕阿霉素對正常細(xì)胞的傷害教師備用習(xí)題教師備用習(xí)題解析單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的，A正確；根據(jù)題意可知，“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制細(xì)胞中DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程，B正確；在治療中，應(yīng)同時注射非活化磷酸阿霉素和“生物導(dǎo)彈”，C錯誤；單克隆抗體特異性強，能減輕阿霉素對正常細(xì)胞的傷害，D正確。答案 C5科學(xué)家利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)成功獲得了番茄馬鈴薯雜

39、種植株，為了便于雜種細(xì)胞的篩選和鑒定，科學(xué)家利用紅色熒光和綠色熒光分別標(biāo)記番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體膜上的蛋白質(zhì)，其培育過程如圖所示：(1)植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的生物學(xué)原理有_。(2)過程常用的酶是_，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是_。教師備用習(xí)題(3)植物原生質(zhì)體融合過程常利用化學(xué)試劑_誘導(dǎo)融合，在鑒定雜種原生質(zhì)體時可用顯微鏡觀察，根據(jù)細(xì)胞膜表面熒光的不同可觀察到_種不同的原生質(zhì)體，當(dāng)觀察到_時，可判斷該原生質(zhì)體是由番茄原生質(zhì)體和馬鈴薯原生質(zhì)體融合而成的。(4)過程和過程依次為_，過程的培養(yǎng)基中常添加的植物激素是_。(5)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞中含n條染色體，則番茄馬鈴薯細(xì)胞在有絲分裂后期含_

40、條染色體。若雜種細(xì)胞培育成的番茄馬鈴薯植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植株屬于_植株。教師備用習(xí)題教師備用習(xí)題答案 (1)細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性 (2)纖維素酶和果膠酶形成了新的細(xì)胞壁 (3)聚乙二醇(PEG)3原生質(zhì)體表面既有紅色熒光又有綠色熒光(4)脫分化和再分化生長素和細(xì)胞分裂素 (5)2(mn)單倍體解析 (1)植物體細(xì)胞雜交包括原生質(zhì)體融合和培育雜種植株兩大步驟，兩者的原理分別是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。(2)去除細(xì)胞壁常用的酶是纖維素酶和果膠酶，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁。(3)化學(xué)促融劑是聚乙二醇，兩兩融合的原生質(zhì)體有三種：番茄番茄、馬鈴薯番茄、馬鈴薯馬鈴薯，其中雜種原生質(zhì)體表面有兩種顏色的熒光。(4)過程和過程分別表示脫分化和再分化，誘導(dǎo)細(xì)胞分化所用的植物激素主要是生長素和細(xì)胞分裂素。(5)番茄馬鈴薯體細(xì)胞有mn條染色體，有絲分裂后期染色體數(shù)目加倍。由配子發(fā)育成的個體均為單倍體。