《高三生物二輪沖刺專(zhuān)題查補(bǔ) 專(zhuān)題8第1講 基因工程和克隆技術(shù)課件》由會(huì)員分享，可在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)《高三生物二輪沖刺專(zhuān)題查補(bǔ) 專(zhuān)題8第1講 基因工程和克隆技術(shù)課件（31頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練第1講基因工程和克隆技術(shù)考綱點(diǎn)擊1.基因工程的誕生()。2.基因工程的原理和技術(shù)()。3.基因工程的應(yīng)用()。4.植物的克隆()。5.動(dòng)物的克隆()。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶 載體載體 重組重組DNA分子分子 基因工程藥物基因工程藥物 基因治療基因治療 細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性 植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交 培育作物新品種培育作物新品種 細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖 動(dòng)物細(xì)胞核動(dòng)物細(xì)胞
2、核 克隆動(dòng)物個(gè)體克隆動(dòng)物個(gè)體 細(xì)胞膜流動(dòng)性細(xì)胞膜流動(dòng)性 自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 思維激活 1基因工程和克隆技術(shù)涉及哪些工具酶？提示：基因工程的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，克隆技術(shù)的工具酶是纖維素酶、果膠酶、胰蛋白酶。 2限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、載體的化學(xué)本質(zhì)一樣嗎？DNA連接酶和DNA聚合酶有怎樣的區(qū)別？提示：不一樣。限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，載體的化學(xué)本質(zhì)是核酸。DNA連接酶連接兩個(gè)DNA片段，而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸添加到脫氧核苷酸鏈上。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考
3、綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 3細(xì)胞株與細(xì)胞系有何本質(zhì)區(qū)別或聯(lián)系？提示：細(xì)胞系是泛指可傳代的細(xì)胞，細(xì)胞株是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 自查 1基因工程的核心是 。 2 基 因 工 程 的 三 種 工 具 是 ： 、 及 ，如質(zhì)粒。 3基因工程發(fā)展史上第一個(gè)成功的實(shí)驗(yàn)是培養(yǎng)出了同時(shí)具有 性狀的大腸桿菌，這標(biāo)志著基因工程的誕生。 4獲得目的基因通常有兩種辦法，即針對(duì)目的基因序列已知者，可用 ；若基因序列未知者，則需 。構(gòu)建重組構(gòu)建重組DNA分子分子DNA連接酶連接酶 限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶 基因載體基因載體 抗四環(huán)素和抗卡那霉
4、素抗四環(huán)素和抗卡那霉素 化學(xué)方法合成目的基因化學(xué)方法合成目的基因 從基因文庫(kù)中尋找目的基因從基因文庫(kù)中尋找目的基因 自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 5用 酶和 酶水解細(xì)胞壁，可以獲得分離的植物細(xì)胞原生質(zhì)體。 6細(xì)胞克隆的基本要求是：必須保證分離出來(lái)的細(xì)胞是 。 7提高細(xì)胞克隆形成率的措施包括選擇適宜的培養(yǎng)基、添加 ，以 細(xì)胞支持生長(zhǎng)， 刺激，使用 調(diào)節(jié)pH等。纖維素纖維素 果膠果膠 一個(gè)而不是多個(gè)一個(gè)而不是多個(gè) 血清血清 滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層 激素激素 CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱 自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 自糾 1外源D
5、NA必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行復(fù)制。(2013安徽，6B)() 2重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)镈NA分子脫氧核糖和磷酸交替連接。(2013安徽，6C)() 3關(guān)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的難易程度：乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞；胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞。(2011上海，15A)() 4將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過(guò)質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)ada。(2011浙江，6C)()自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 5用質(zhì)粒中的抗生素抗性基因可以篩選出含有重組DNA的植物細(xì)胞。() 6D
6、NA連接酶可把目的基因與載體的黏性末端形成氫鍵。 () 7用氯化鈣處理大腸桿菌可增加其細(xì)胞膜的通透性。() 8用不同限制性核酸內(nèi)切酶切割的DNA分子一定不能連接。() 9具有包含物種完整基因組的細(xì)胞核的活細(xì)胞是生物克隆的重要條件之一。()自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 10一般血清中的抗體是一群識(shí)別不同抗原部位的抗體混合物，單抗則識(shí)別抗原分子的特殊部位，具專(zhuān)一性。()答案1.2.3.4.5.6.7.89.10.自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 必考點(diǎn)一基因工程 【典例1】 浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn)，
7、一種植物激素油菜素內(nèi)酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后，許多參與農(nóng)藥降解的基因(如P450基因和紅霉素抗性基因)表達(dá)和酶活性都得到提高，在這些基因“指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無(wú)毒物質(zhì)，有的則被直接排出體外。某課題組進(jìn)一步進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)操作，請(qǐng)回答下面的問(wèn)題。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練(1)獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有_、_。步驟用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)用到的耐高溫酶通常是指_；步驟用到的酶有_。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練(2)圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法
8、是_，在導(dǎo)入之前應(yīng)用_處理受體細(xì)菌。(3)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用_制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入_可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。(4)請(qǐng)你為該課題命名：_。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練解析進(jìn)行基因工程操作時(shí)，首先要獲取目的基因，其方法有多種：從基因文庫(kù)中獲取、人工合成目的基因或PCR合成等。在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中，用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。圖中的受體細(xì)胞是細(xì)菌，故用轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入表達(dá)載體，導(dǎo)入后，需檢驗(yàn)和篩選。從圖中可以看出，最終是通過(guò)對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因細(xì)菌對(duì)土壤中殘留農(nóng)藥的分解能力。答案(
9、1)從基因文庫(kù)中獲取人工合成目的基因或PCR合成耐熱的DNA聚合酶限制酶和DNA連接酶(2)轉(zhuǎn)化法氯化鈣溶液(3)紅霉素抗性基因紅霉素(4)油菜素內(nèi)酯能否促進(jìn)土壤中農(nóng)藥的分解自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 【歸納提煉】 1目的基因的獲取途徑(1) ：從自然界已有的物種中分離，如從基因文庫(kù)中獲取。(2)人工合成目的基因常用方法有：化學(xué)合成法：已知核苷酸序列的 基因，直接利用 用化學(xué)方法合成， (需要，不需要)模板。人工合成法：以 為模板，在 作用下人工合成。利用 技術(shù)獲得。直接分離直接分離 較小較小 DNA合成儀合成儀 不需要不需要 RNA 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)
10、錄酶 PCR 自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 2將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞原核細(xì)胞或酵原核細(xì)胞或酵母菌母菌受精卵受精卵受精卵、體細(xì)胞受精卵、體細(xì)胞受體受體細(xì)胞細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞法感受態(tài)細(xì)胞法(用用Ca處理處理)顯微注射技顯微注射技術(shù)術(shù)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法槍法、花粉管通道法常用常用方法方法微生物細(xì)胞微生物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞植物細(xì)胞植物細(xì)胞自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 3.目的基因的檢測(cè)和表達(dá)DNA分子雜交分子雜交 核酸分子雜交核酸分子雜交 抗原抗原抗體雜交抗體雜交 自建自建自查自查自
11、糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 4重組DNA分子的構(gòu)建 (1)重組DNA分子的構(gòu)建過(guò)程限制性核限制性核 酸內(nèi)切酶酸內(nèi)切酶 兩兩DNA連接酶連接酶 自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練(2)從“基因表達(dá)”層面理解基因表達(dá)載體的必需元件重組DNA分子的組成：目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因復(fù)制原點(diǎn)。啟動(dòng)子和終止子：?jiǎn)?dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄；終止子是終止轉(zhuǎn)錄的位點(diǎn)。插入的目的基因只是結(jié)構(gòu)基因部分，其表達(dá)需要調(diào)控序列，因而用作載體的質(zhì)粒的插入部位前需要有啟動(dòng)子，后需要有終止子。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱
12、對(duì)接對(duì)接演練演練 【應(yīng)用1】 (2013浙江十校聯(lián)考)下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是()。限制酶限制酶BamHHind EcoRSma識(shí)別序識(shí)別序列及切列及切割位點(diǎn)割位點(diǎn)GGATCCCCTAGGAAGCTTTTCGAAGAATTCCTTAAGCCCGGGGGGCCC自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練A.圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma切割后，含2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Sma酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高C用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，可使用Sma切割D構(gòu)建重組
13、質(zhì)粒時(shí)，要使用DNA連接酶解析圖中顯示目的基因和質(zhì)粒的抗生素抗性基因恰好位于Sma限制酶的識(shí)別序列中，若使用Sma切割則會(huì)破壞目的基因和標(biāo)記基因。答案C自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 必考點(diǎn)二克隆技術(shù) 【典例2】 (2013義烏模擬)圖示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過(guò)程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)由A、B兩種細(xì)胞人工融合成C細(xì)胞的過(guò)程，包括_和_兩方面，D細(xì)胞稱(chēng)為_(kāi)細(xì)胞。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練(2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞，那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉_。這種酶可能是_酶，由此生成的A和B細(xì)胞稱(chēng)為_(kāi)。(3)若A細(xì)胞為
14、骨髓瘤細(xì)胞，B細(xì)胞為淋巴細(xì)胞，那么D細(xì)胞稱(chēng)為_(kāi)細(xì)胞，由D細(xì)胞連續(xù)分裂產(chǎn)生大量細(xì)胞的過(guò)程，稱(chēng)為_(kāi)過(guò)程。這種細(xì)胞既能無(wú)限繁殖，又能產(chǎn)生_。(4)若A為人細(xì)胞，B為鼠細(xì)胞，并分別用熒火染料標(biāo)記細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，在C細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞一半發(fā)紅色熒光，一半發(fā)綠色熒光。到D細(xì)胞階段，兩種顏色的熒光均勻分布，其原因是_。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練解析(1)細(xì)胞融合應(yīng)包括膜融合與核融合兩方面，D細(xì)胞應(yīng)為雜種細(xì)胞。(2)若A、B為植物細(xì)胞，則已用纖維素酶和果膠酶脫掉了細(xì)胞壁，稱(chēng)為原生質(zhì)體。(3)若A、B分別為骨髓瘤和B淋巴細(xì)胞則D為雜交瘤細(xì)胞，D細(xì)胞經(jīng)克隆培養(yǎng)可產(chǎn)生單克隆
15、抗體。(4)由于細(xì)胞膜具流動(dòng)性，故人鼠細(xì)胞的熒光標(biāo)記會(huì)“混雜”。答案(1)膜融合核融合雜種(2)細(xì)胞壁纖維素酶和果膠原生質(zhì)體(3)雜交瘤克隆單一抗體(4)細(xì)胞膜具有流動(dòng)性自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 【歸納提煉】 1植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理原理細(xì)胞細(xì)胞 .細(xì)胞細(xì)胞 .培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的物理性質(zhì)物理性質(zhì) (合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基)培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的成分成分水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、蔗水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂、糖、氨基酸、瓊脂、 等等葡萄糖、氨基酸、葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、無(wú)機(jī)鹽、維生
16、素、 等等全能性全能性 增殖增殖 固體固體 液體液體 植物激素植物激素 動(dòng)物血清動(dòng)物血清 自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果結(jié)果新的植株或組織新的植株或組織新的細(xì)胞系或細(xì)胞株新的細(xì)胞系或細(xì)胞株應(yīng)用應(yīng)用微型繁殖微型繁殖作物脫毒作物脫毒生產(chǎn)人工種子生產(chǎn)人工種子單倍體育種單倍體育種突變體的利用突變體的利用細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品的生蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)產(chǎn)皮膚移植材料的培育皮膚移植材料的培育檢測(cè)有毒物質(zhì)檢測(cè)有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學(xué)生理、病理、藥理學(xué)研究研究條件條件均需無(wú)毒環(huán)境均需無(wú)
17、毒環(huán)境 操作，適宜的營(yíng)養(yǎng)、操作，適宜的營(yíng)養(yǎng)、 、 、O2等等續(xù)表續(xù)表 無(wú)菌無(wú)菌 溫度溫度 pH 自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 2.細(xì)胞工程的幾個(gè)過(guò)程流程圖比較自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 【特別提醒】 影響植物細(xì)胞再分化的因素(1)外植體的遺傳特征、取材的位置都會(huì)影響愈傷組織的再分化能力。(2)培養(yǎng)基的成分和物理性質(zhì)都會(huì)對(duì)器官的發(fā)生有一定的影響，但起決定作用的是植物激素，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比。(3)培養(yǎng)環(huán)境中的光照和溫度也會(huì)影響愈傷組織的分化能力。 自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用
18、考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 【應(yīng)用2】 (2013紹興二次模擬)下列有關(guān)動(dòng)、植物克隆技術(shù)的敘述錯(cuò)誤的是()。A離體的植物組織塊放在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)后獲得愈傷組織B細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型C幾乎所有的植物體組織細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)可再生出新植株D在培養(yǎng)基中加入適量的滋養(yǎng)細(xì)胞可提高動(dòng)物細(xì)胞克隆的形成率解析植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基為“固體培養(yǎng)基”。答案A自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練 【應(yīng)用3】 (2013浙江名校聯(lián)盟二次聯(lián)考)下圖為克隆羊“多莉”的形成流程圖，下面有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()。自建自建自查自查自糾自糾考點(diǎn)考點(diǎn)方法方法應(yīng)用應(yīng)用考綱考綱對(duì)接對(duì)接演練演練A重組卵細(xì)胞需要體外培養(yǎng)一段時(shí)間才能移植到丙羊子宮內(nèi)B重組卵細(xì)胞在每次分裂前都伴隨著細(xì)胞核中相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄C與試管動(dòng)物相比，圖示繁殖過(guò)程特有的技術(shù)手段是核移植技術(shù)D該實(shí)驗(yàn)證明在胚胎和個(gè)體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控異源細(xì)胞核發(fā)育的作用解析重組卵細(xì)胞在分裂過(guò)程中既有核基因的轉(zhuǎn)錄，也有質(zhì)基因的轉(zhuǎn)錄。答案B
高三生物二輪沖刺專(zhuān)題查補(bǔ) 專(zhuān)題8第1講 基因工程和克隆技術(shù)課件
