《高三生物二輪沖刺專題查補 專題8第1講 基因工程和克隆技術課件》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《高三生物二輪沖刺專題查補 專題8第1講 基因工程和克隆技術課件（31頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。
1、自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練第1講基因工程和克隆技術考綱點擊1.基因工程的誕生()。2.基因工程的原理和技術()。3.基因工程的應用()。4.植物的克隆()。5.動物的克隆()。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練限制性核酸內切酶限制性核酸內切酶 載體載體 重組重組DNA分子分子 基因工程藥物基因工程藥物 基因治療基因治療 細胞的全能性細胞的全能性 植物體細胞雜交植物體細胞雜交 培育作物新品種培育作物新品種 細胞增殖細胞增殖 動物細胞核動物細胞
2、核 克隆動物個體克隆動物個體 細胞膜流動性細胞膜流動性 自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 思維激活 1基因工程和克隆技術涉及哪些工具酶？提示：基因工程的工具酶是限制性核酸內切酶和DNA連接酶，克隆技術的工具酶是纖維素酶、果膠酶、胰蛋白酶。 2限制性核酸內切酶、DNA連接酶、載體的化學本質一樣嗎？DNA連接酶和DNA聚合酶有怎樣的區(qū)別？提示：不一樣。限制性核酸內切酶和DNA連接酶的化學本質是蛋白質，載體的化學本質是核酸。DNA連接酶連接兩個DNA片段，而DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸添加到脫氧核苷酸鏈上。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考
3、綱考綱對接對接演練演練 3細胞株與細胞系有何本質區(qū)別或聯(lián)系？提示：細胞系是泛指可傳代的細胞，細胞株是具有特殊性質的細胞系。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 自查 1基因工程的核心是 。 2 基 因 工 程 的 三 種 工 具 是 ： 、 及 ，如質粒。 3基因工程發(fā)展史上第一個成功的實驗是培養(yǎng)出了同時具有 性狀的大腸桿菌，這標志著基因工程的誕生。 4獲得目的基因通常有兩種辦法，即針對目的基因序列已知者，可用 ；若基因序列未知者，則需 。構建重組構建重組DNA分子分子DNA連接酶連接酶 限制性核酸內切酶限制性核酸內切酶 基因載體基因載體 抗四環(huán)素和抗卡那霉
4、素抗四環(huán)素和抗卡那霉素 化學方法合成目的基因化學方法合成目的基因 從基因文庫中尋找目的基因從基因文庫中尋找目的基因 自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 5用 酶和 酶水解細胞壁，可以獲得分離的植物細胞原生質體。 6細胞克隆的基本要求是：必須保證分離出來的細胞是 。 7提高細胞克隆形成率的措施包括選擇適宜的培養(yǎng)基、添加 ，以 細胞支持生長， 刺激，使用 調節(jié)pH等。纖維素纖維素 果膠果膠 一個而不是多個一個而不是多個 血清血清 滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層 激素激素 CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱 自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 自糾 1外源D
5、NA必須位于重組質粒的啟動子和終止子之間才能進行復制。(2013安徽，6B)() 2重組質粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接。(2013安徽，6C)() 3關于哺乳動物細胞體外培養(yǎng)的難易程度：乳腺癌細胞易于乳腺細胞；胚胎細胞易于脂肪細胞。(2011上海，15A)() 4將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。每個限制性核酸內切酶識別位點至少插入一個ada。(2011浙江，6C)()自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 5用質粒中的抗生素抗性基因可以篩選出含有重組DNA的植物細胞。() 6D
6、NA連接酶可把目的基因與載體的黏性末端形成氫鍵。 () 7用氯化鈣處理大腸桿菌可增加其細胞膜的通透性。() 8用不同限制性核酸內切酶切割的DNA分子一定不能連接。() 9具有包含物種完整基因組的細胞核的活細胞是生物克隆的重要條件之一。()自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 10一般血清中的抗體是一群識別不同抗原部位的抗體混合物，單抗則識別抗原分子的特殊部位，具專一性。()答案1.2.3.4.5.6.7.89.10.自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 必考點一基因工程 【典例1】 浙江大學農學院喻景權教授課題組研究發(fā)現(xiàn)，
7、一種植物激素油菜素內酯能促進農藥在植物體內的降解和代謝。用油菜素內酯處理后，許多參與農藥降解的基因(如P450基因和紅霉素抗性基因)表達和酶活性都得到提高，在這些基因“指導”下合成的蛋白酶能把農藥逐漸轉化為水溶性物質或低毒甚至無毒物質，有的則被直接排出體外。某課題組進一步進行了如下的實驗操作，請回答下面的問題。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練(1)獲得油菜素內酯合成酶基因的方法有_、_。步驟用PCR技術擴增基因時用到的耐高溫酶通常是指_；步驟用到的酶有_。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練(2)圖中導入重組質粒的方法
8、是_，在導入之前應用_處理受體細菌。(3)導入重組質粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，可用_制成探針，檢測是否導入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入_可將含有目的基因的細胞篩選出來。(4)請你為該課題命名：_。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練解析進行基因工程操作時，首先要獲取目的基因，其方法有多種：從基因文庫中獲取、人工合成目的基因或PCR合成等。在構建基因表達載體的過程中，用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。圖中的受體細胞是細菌，故用轉化法導入表達載體，導入后，需檢驗和篩選。從圖中可以看出，最終是通過對照實驗來檢驗轉基因細菌對土壤中殘留農藥的分解能力。答案(
9、1)從基因文庫中獲取人工合成目的基因或PCR合成耐熱的DNA聚合酶限制酶和DNA連接酶(2)轉化法氯化鈣溶液(3)紅霉素抗性基因紅霉素(4)油菜素內酯能否促進土壤中農藥的分解自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 【歸納提煉】 1目的基因的獲取途徑(1) ：從自然界已有的物種中分離，如從基因文庫中獲取。(2)人工合成目的基因常用方法有：化學合成法：已知核苷酸序列的 基因，直接利用 用化學方法合成， (需要，不需要)模板。人工合成法：以 為模板，在 作用下人工合成。利用 技術獲得。直接分離直接分離 較小較小 DNA合成儀合成儀 不需要不需要 RNA 逆轉錄酶逆轉
10、錄酶 PCR 自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 2將目的基因導入受體細胞原核細胞或酵原核細胞或酵母菌母菌受精卵受精卵受精卵、體細胞受精卵、體細胞受體受體細胞細胞感受態(tài)細胞法感受態(tài)細胞法(用用Ca處理處理)顯微注射技顯微注射技術術農桿菌轉化法、基因農桿菌轉化法、基因槍法、花粉管通道法槍法、花粉管通道法常用常用方法方法微生物細胞微生物細胞動物細胞動物細胞植物細胞植物細胞自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 3.目的基因的檢測和表達DNA分子雜交分子雜交 核酸分子雜交核酸分子雜交 抗原抗原抗體雜交抗體雜交 自建自建自查自查自
11、糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 4重組DNA分子的構建 (1)重組DNA分子的構建過程限制性核限制性核 酸內切酶酸內切酶 兩兩DNA連接酶連接酶 自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練(2)從“基因表達”層面理解基因表達載體的必需元件重組DNA分子的組成：目的基因啟動子終止子標記基因復制原點。啟動子和終止子：啟動子是RNA聚合酶結合位點，啟動轉錄；終止子是終止轉錄的位點。插入的目的基因只是結構基因部分，其表達需要調控序列，因而用作載體的質粒的插入部位前需要有啟動子，后需要有終止子。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱
12、對接對接演練演練 【應用1】 (2013浙江十校聯(lián)考)下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點，下列敘述錯誤的是()。限制酶限制酶BamHHind EcoRSma識別序識別序列及切列及切割位點割位點GGATCCCCTAGGAAGCTTTTCGAAGAATTCCTTAAGCCCGGGGGGCCC自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練A.圖1所示的質粒分子經Sma切割后，含2個游離的磷酸基團B對圖中質粒進行改造，插入的Sma酶切位點越多，質粒的熱穩(wěn)定性越高C用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒，可使用Sma切割D構建重組
13、質粒時，要使用DNA連接酶解析圖中顯示目的基因和質粒的抗生素抗性基因恰好位于Sma限制酶的識別序列中，若使用Sma切割則會破壞目的基因和標記基因。答案C自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 必考點二克隆技術 【典例2】 (2013義烏模擬)圖示細胞融合技術的一些過程，請回答下列問題。(1)由A、B兩種細胞人工融合成C細胞的過程，包括_和_兩方面，D細胞稱為_細胞。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練(2)若A、B細胞為植物細胞，那么這樣的細胞已經用酶降解脫掉_。這種酶可能是_酶，由此生成的A和B細胞稱為_。(3)若A細胞為
14、骨髓瘤細胞，B細胞為淋巴細胞，那么D細胞稱為_細胞，由D細胞連續(xù)分裂產生大量細胞的過程，稱為_過程。這種細胞既能無限繁殖，又能產生_。(4)若A為人細胞，B為鼠細胞，并分別用熒火染料標記細胞膜上的蛋白質，在C細胞時，細胞一半發(fā)紅色熒光，一半發(fā)綠色熒光。到D細胞階段，兩種顏色的熒光均勻分布，其原因是_。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練解析(1)細胞融合應包括膜融合與核融合兩方面，D細胞應為雜種細胞。(2)若A、B為植物細胞，則已用纖維素酶和果膠酶脫掉了細胞壁，稱為原生質體。(3)若A、B分別為骨髓瘤和B淋巴細胞則D為雜交瘤細胞，D細胞經克隆培養(yǎng)可產生單克隆
15、抗體。(4)由于細胞膜具流動性，故人鼠細胞的熒光標記會“混雜”。答案(1)膜融合核融合雜種(2)細胞壁纖維素酶和果膠原生質體(3)雜交瘤克隆單一抗體(4)細胞膜具有流動性自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 【歸納提煉】 1植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理原理細胞細胞 .細胞細胞 .培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的物理性質物理性質 (合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基)培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的成分成分水、無機鹽、維生素、蔗水、無機鹽、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂、糖、氨基酸、瓊脂、 等等葡萄糖、氨基酸、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、無機鹽、維生
16、素、 等等全能性全能性 增殖增殖 固體固體 液體液體 植物激素植物激素 動物血清動物血清 自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)結果結果新的植株或組織新的植株或組織新的細胞系或細胞株新的細胞系或細胞株應用應用微型繁殖微型繁殖作物脫毒作物脫毒生產人工種子生產人工種子單倍體育種單倍體育種突變體的利用突變體的利用細胞產物的工廠化生產細胞產物的工廠化生產蛋白質生物制品的生蛋白質生物制品的生產產皮膚移植材料的培育皮膚移植材料的培育檢測有毒物質檢測有毒物質生理、病理、藥理學生理、病理、藥理學研究研究條件條件均需無毒環(huán)境均需無
17、毒環(huán)境 操作，適宜的營養(yǎng)、操作，適宜的營養(yǎng)、 、 、O2等等續(xù)表續(xù)表 無菌無菌 溫度溫度 pH 自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 2.細胞工程的幾個過程流程圖比較自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 【特別提醒】 影響植物細胞再分化的因素(1)外植體的遺傳特征、取材的位置都會影響愈傷組織的再分化能力。(2)培養(yǎng)基的成分和物理性質都會對器官的發(fā)生有一定的影響，但起決定作用的是植物激素，特別是生長素和細胞分裂素的配比。(3)培養(yǎng)環(huán)境中的光照和溫度也會影響愈傷組織的分化能力。 自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用
18、考綱考綱對接對接演練演練 【應用2】 (2013紹興二次模擬)下列有關動、植物克隆技術的敘述錯誤的是()。A離體的植物組織塊放在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)后獲得愈傷組織B細胞株一般具有恒定的染色體組型C幾乎所有的植物體組織細胞經誘導可再生出新植株D在培養(yǎng)基中加入適量的滋養(yǎng)細胞可提高動物細胞克隆的形成率解析植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基為“固體培養(yǎng)基”。答案A自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練 【應用3】 (2013浙江名校聯(lián)盟二次聯(lián)考)下圖為克隆羊“多莉”的形成流程圖，下面有關敘述錯誤的是()。自建自建自查自查自糾自糾考點考點方法方法應用應用考綱考綱對接對接演練演練A重組卵細胞需要體外培養(yǎng)一段時間才能移植到丙羊子宮內B重組卵細胞在每次分裂前都伴隨著細胞核中相關基因的轉錄C與試管動物相比，圖示繁殖過程特有的技術手段是核移植技術D該實驗證明在胚胎和個體發(fā)育中，細胞質具有調控異源細胞核發(fā)育的作用解析重組卵細胞在分裂過程中既有核基因的轉錄，也有質基因的轉錄。答案B
高三生物二輪沖刺專題查補 專題8第1講 基因工程和克隆技術課件
