2017-2018學(xué)年高中生物 第一部分 微生物的利用 實(shí)驗(yàn)1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離學(xué)案 浙科版選修1

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1、 第一部分 微生物的利用 實(shí)驗(yàn)1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 一、大腸桿菌 1.大腸桿菌屬于革蘭氏________性菌,為________型的腸道桿菌。 2.結(jié)構(gòu):屬于________生物。 3.用途:是在________技術(shù)中被廣泛采用的工具。 4.與人類的關(guān)系:它生活在人類的________中,一般對(duì)人________(“有”還是“無(wú)”)害。有一些菌株對(duì)人體能產(chǎn)生危害,因?yàn)樗鼈兛梢郧治g________并產(chǎn)生________。任何大腸桿菌如果進(jìn)入人的________系統(tǒng),都會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。 答案:1.陰 兼性厭氧 2.原核 3.基因工程 4.腸道 無(wú) 腸黏膜 毒素 泌尿 二

2、、細(xì)菌的培養(yǎng)和分離 1.細(xì)菌的培養(yǎng): (1)細(xì)菌的繁殖:細(xì)菌以________的方式繁殖,分裂速度很快,約________分裂一次。 (2)培養(yǎng)細(xì)菌的方法:培養(yǎng)細(xì)菌,需要將________________________________________________________________________ 轉(zhuǎn)移到________中,一般用________來轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。 (3)用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌的差別: 接種后,培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基類型 接種方法 接種后培養(yǎng)的時(shí)間(單位:小時(shí)) 培養(yǎng)結(jié)果 液體培養(yǎng)基 接種環(huán)直接接種 培養(yǎng)8 h后 每毫升培養(yǎng)基中有_

3、_______個(gè)細(xì)菌 固體培養(yǎng)基 用接種環(huán)在培養(yǎng)基上用________________________________________________________________________的方式接種(該法還可以用于______) 培養(yǎng)10~20 h后 一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞會(huì)繁殖成許多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞,這些細(xì)胞________________________________________________________________________________,形成____________________________________________________________

4、 2.細(xì)菌的分離: (1)分離的方法與特點(diǎn):分離細(xì)菌有________和________2種。前者方法簡(jiǎn)單,后者操作復(fù)雜,但是______________________________________________________________更易分開。 (2)本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行大腸桿菌分離,是用________法,就是在________培養(yǎng)基上進(jìn)行細(xì)菌的________。 答案:1.(1)分裂 20 min (2)已有細(xì)菌的培養(yǎng)物 新的培養(yǎng)基 接種環(huán) (3)幾億 劃線 分離細(xì)菌 緊緊聚集在一起 菌落 2.(1)劃線分離法 涂布分離法 單菌落 (2)劃線分離 固體平面 劃線培養(yǎng)

5、 三、滅菌操作 1.滅菌操作的原因:為了獲得________的培養(yǎng)物,其關(guān)鍵是防止外來________的入侵污染。因此,在培養(yǎng)微生物時(shí)必須進(jìn)行________操作。 2.無(wú)菌操作的條件: (1)首要條件是________必須是無(wú)菌的; (2)________必須是無(wú)菌的; (3)________的過程必須是無(wú)菌的等。 答案:1.純凈 雜菌 無(wú)菌 2.(1)各種器皿 (2)各種培養(yǎng)基 (3)菌轉(zhuǎn)移操作 四、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn) 1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? (1)進(jìn)行大腸桿菌的________,利用________培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的操作; (2)進(jìn)行大腸桿菌的________

6、,用________培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌的________培養(yǎng); (3)說明大腸桿菌培養(yǎng)的條件和操作要求的原理。 2.實(shí)驗(yàn)步驟 (1)滅菌:用________在________壓力下對(duì)LB液體培養(yǎng)基、LB固體培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌________min。 (2)自________向________中轉(zhuǎn)移并分裝固體培養(yǎng)基: 待冷卻至______左右,將三角錐形瓶中的______培養(yǎng)基,在______上分裝至幾個(gè)______中,制成______培養(yǎng)基。 (3)將大腸桿菌自________轉(zhuǎn)移到________中的________培養(yǎng)基中培養(yǎng): 將大腸桿菌用________在無(wú)菌操作下接種至

7、三角錐形瓶中的________培養(yǎng)基中,在________搖床振蕩培養(yǎng)________,完成大腸桿菌的培養(yǎng)。 (4)將菌液在________培養(yǎng)基上進(jìn)行________分離: 從前一步培養(yǎng)得到的菌液中獲取菌種,用________以__________法接種至第二步所制得的__________培養(yǎng)基中,在________℃恒溫箱中培養(yǎng)________h后觀察菌落。 (5)菌種保存: 在無(wú)菌操作下將________用________取出,再用________法接種在________上,________培養(yǎng)________后,________冰箱保存。 3.分離實(shí)驗(yàn)的結(jié)果及相應(yīng)結(jié)論: 觀

8、察中若看到在________的末端出現(xiàn)________,則表明菌已被分離了。 4.大腸桿菌分離的用途:________的通用方法,也是用于________的最簡(jiǎn)便方法之一。 答案:1.(1)擴(kuò)增 液體 (2)分離 固體平面 劃線 2.(1)高壓鍋 1 kg 15 (2)三角瓶 培養(yǎng)皿 60 ℃ 固體 超凈臺(tái) 培養(yǎng)皿 固體平面 (3)斜面 三角瓶 液體 接種環(huán) 液體 37 ℃ 12 h (4)固體平面 劃線 接種環(huán) 劃線 固體平面 37 12~24 (5)單菌落 接種環(huán) 劃線 斜面 37 ℃ 24 h 4 ℃ 3.劃線 不連續(xù)的單個(gè)菌落 4.消除污染雜菌 篩選高表達(dá)量菌株 3

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