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1、
第一部分 微生物的利用 實(shí)驗(yàn)1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離
一、大腸桿菌
1.大腸桿菌屬于革蘭氏________性菌,為________型的腸道桿菌。
2.結(jié)構(gòu):屬于________生物。
3.用途:是在________技術(shù)中被廣泛采用的工具。
4.與人類的關(guān)系:它生活在人類的________中,一般對(duì)人________(“有”還是“無(wú)”)害。有一些菌株對(duì)人體能產(chǎn)生危害,因?yàn)樗鼈兛梢郧治g________并產(chǎn)生________。任何大腸桿菌如果進(jìn)入人的________系統(tǒng),都會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害。
答案:1.陰 兼性厭氧
2.原核
3.基因工程
4.腸道 無(wú) 腸黏膜 毒素 泌尿
二
2、、細(xì)菌的培養(yǎng)和分離
1.細(xì)菌的培養(yǎng):
(1)細(xì)菌的繁殖:細(xì)菌以________的方式繁殖,分裂速度很快,約________分裂一次。
(2)培養(yǎng)細(xì)菌的方法:培養(yǎng)細(xì)菌,需要將________________________________________________________________________
轉(zhuǎn)移到________中,一般用________來轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。
(3)用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌的差別:
接種后,培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基類型
接種方法
接種后培養(yǎng)的時(shí)間(單位:小時(shí))
培養(yǎng)結(jié)果
液體培養(yǎng)基
接種環(huán)直接接種
培養(yǎng)8 h后
每毫升培養(yǎng)基中有_
3、_______個(gè)細(xì)菌
固體培養(yǎng)基
用接種環(huán)在培養(yǎng)基上用________________________________________________________________________的方式接種(該法還可以用于______)
培養(yǎng)10~20 h后
一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞會(huì)繁殖成許多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞,這些細(xì)胞________________________________________________________________________________,形成____________________________________________________________
4、
2.細(xì)菌的分離:
(1)分離的方法與特點(diǎn):分離細(xì)菌有________和________2種。前者方法簡(jiǎn)單,后者操作復(fù)雜,但是______________________________________________________________更易分開。
(2)本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行大腸桿菌分離,是用________法,就是在________培養(yǎng)基上進(jìn)行細(xì)菌的________。
答案:1.(1)分裂 20 min (2)已有細(xì)菌的培養(yǎng)物 新的培養(yǎng)基 接種環(huán) (3)幾億 劃線 分離細(xì)菌 緊緊聚集在一起
菌落
2.(1)劃線分離法 涂布分離法 單菌落 (2)劃線分離
固體平面 劃線培養(yǎng)
5、
三、滅菌操作
1.滅菌操作的原因:為了獲得________的培養(yǎng)物,其關(guān)鍵是防止外來________的入侵污染。因此,在培養(yǎng)微生物時(shí)必須進(jìn)行________操作。
2.無(wú)菌操作的條件:
(1)首要條件是________必須是無(wú)菌的;
(2)________必須是無(wú)菌的;
(3)________的過程必須是無(wú)菌的等。
答案:1.純凈 雜菌 無(wú)菌
2.(1)各種器皿 (2)各種培養(yǎng)基 (3)菌轉(zhuǎn)移操作
四、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
(1)進(jìn)行大腸桿菌的________,利用________培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的操作;
(2)進(jìn)行大腸桿菌的________
6、,用________培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌的________培養(yǎng);
(3)說明大腸桿菌培養(yǎng)的條件和操作要求的原理。
2.實(shí)驗(yàn)步驟
(1)滅菌:用________在________壓力下對(duì)LB液體培養(yǎng)基、LB固體培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌________min。
(2)自________向________中轉(zhuǎn)移并分裝固體培養(yǎng)基:
待冷卻至______左右,將三角錐形瓶中的______培養(yǎng)基,在______上分裝至幾個(gè)______中,制成______培養(yǎng)基。
(3)將大腸桿菌自________轉(zhuǎn)移到________中的________培養(yǎng)基中培養(yǎng):
將大腸桿菌用________在無(wú)菌操作下接種至
7、三角錐形瓶中的________培養(yǎng)基中,在________搖床振蕩培養(yǎng)________,完成大腸桿菌的培養(yǎng)。
(4)將菌液在________培養(yǎng)基上進(jìn)行________分離:
從前一步培養(yǎng)得到的菌液中獲取菌種,用________以__________法接種至第二步所制得的__________培養(yǎng)基中,在________℃恒溫箱中培養(yǎng)________h后觀察菌落。
(5)菌種保存:
在無(wú)菌操作下將________用________取出,再用________法接種在________上,________培養(yǎng)________后,________冰箱保存。
3.分離實(shí)驗(yàn)的結(jié)果及相應(yīng)結(jié)論:
觀
8、察中若看到在________的末端出現(xiàn)________,則表明菌已被分離了。
4.大腸桿菌分離的用途:________的通用方法,也是用于________的最簡(jiǎn)便方法之一。
答案:1.(1)擴(kuò)增 液體 (2)分離 固體平面 劃線
2.(1)高壓鍋 1 kg 15 (2)三角瓶 培養(yǎng)皿 60 ℃
固體 超凈臺(tái) 培養(yǎng)皿 固體平面 (3)斜面 三角瓶 液體
接種環(huán) 液體 37 ℃ 12 h (4)固體平面 劃線 接種環(huán)
劃線 固體平面 37 12~24 (5)單菌落 接種環(huán) 劃線 斜面 37 ℃ 24 h 4 ℃
3.劃線 不連續(xù)的單個(gè)菌落
4.消除污染雜菌 篩選高表達(dá)量菌株
3