（全國(guó)通用版）2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 選考部分 生物技術(shù)實(shí)踐 課時(shí)檢測(cè)（三十九）微生物的培養(yǎng)和利用

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1、（全國(guó)通用版）2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 選考部分 生物技術(shù)實(shí)踐 課時(shí)檢測(cè)（三十九）微生物的培養(yǎng)和利用 一、選擇題 1．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說(shuō)法，正確的是(　　) A．天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基 B．接種前需對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理 C．大腸桿菌的純化培養(yǎng)過(guò)程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段 D．分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源 解析：選C　天然培養(yǎng)基是指用天然物質(zhì)制成的培養(yǎng)基，但也需要加工；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手應(yīng)消毒，不能滅菌；分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含

2、氮元素的有機(jī)物(如葡萄糖)作為碳源。 2．平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法，下列敘述正確的是(　　) A．都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 B．平板劃線(xiàn)法是將不同稀釋度的菌液通過(guò)接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面 C．稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng) D．都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 解析：選D　平板劃線(xiàn)法不需要進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)♂屚坎计桨宸ㄐ枰獙⒉煌♂尪鹊木和坎嫉焦腆w培養(yǎng)基的表面。平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。 3．某學(xué)者欲研究被石油污染過(guò)的土壤中細(xì)菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯(cuò)誤的是(　　

3、) A．利用平板劃線(xiàn)法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù) B．用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選 C．采用稀釋涂布平板法分離菌種 D．稱(chēng)取和稀釋土壤樣品時(shí)應(yīng)在火焰旁 解析：選A　分離細(xì)菌常用的方法是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，但平板劃線(xiàn)法不能對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)；篩選能分解石油的細(xì)菌，要以石油作為培養(yǎng)基中唯一的碳源；篩選細(xì)菌的整個(gè)操作過(guò)程都需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，所以應(yīng)在火焰旁進(jìn)行。 4．下列關(guān)于大腸桿菌的培養(yǎng)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件 B．在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒 C．若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大

4、腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的稀釋度合適 D．使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄 解析：選B　培養(yǎng)過(guò)程中，除營(yíng)養(yǎng)條件要滿(mǎn)足需要外，還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件是否適宜；滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以，應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌而不是消毒；使用稀釋涂布平板法時(shí)要保證樣品稀釋比例合適，這樣才會(huì)有更科學(xué)的數(shù)據(jù)；有的大腸桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，所以使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 5．在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行抑菌

5、實(shí)驗(yàn)，在a、b、c處分別貼浸有不同抗生素(濃度相同)的無(wú)菌濾紙片，d處濾紙片浸有無(wú)菌水。培養(yǎng)后的結(jié)果如圖所示。以下判斷錯(cuò)誤的是(　　) A．a(chǎn)處抑菌效果小于b處 B．b處的濾紙片沒(méi)有瀝干 C．c處抗生素?zé)o效 D．d為對(duì)照 解析：選A　培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周透明圈的大小不同，透明圈越大，說(shuō)明浸有的抗生素抑菌效果越好。a處的透明圈并不小于b處；b處不是圓形的透明圈，可能是濾紙片沒(méi)有瀝干，抗生素流出濾紙片；c處無(wú)透明圈，說(shuō)明c處抗生素對(duì)大腸桿菌無(wú)效；d為空白對(duì)照。 二、非選擇題 6．(2014·江蘇高考節(jié)選)為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開(kāi)展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。

6、請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是________________________________；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該________________________________________________________________________。 (2)為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是 ________________________________________________________________________。 (3)下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是________

7、____。 (填序號(hào)) ①安全閥、放氣閥、壓力表 ②放氣閥、安全閥、壓力表 ③安全閥、放氣閥、溫度表 ④放氣閥、安全閥、溫度表 (4)為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線(xiàn)，結(jié)果其中一塊平板的各劃線(xiàn)區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng)，最可能的原因是______________________________________。 解析：(1)實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法是干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)，在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)用牛皮紙或干凈的報(bào)紙包扎器皿。(2)酵母菌是真菌，對(duì)青霉素具有抵抗能力，青霉素主要抑制細(xì)菌、放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)。(3)圖中甲為安全閥，乙為放氣閥，丙為壓力表。(4)接種的平板上未見(jiàn)菌落生

8、長(zhǎng)，說(shuō)明接種不成功，原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻，使菌株因溫度過(guò)高而被殺死。 答案：(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)　用牛皮紙(報(bào)紙)包扎器皿　(2)抑制細(xì)菌(放線(xiàn)菌)生長(zhǎng)　(3)①　(4)接種環(huán)溫度過(guò)高，菌被殺死 7．如圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題： (1)圖甲是利用__________法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用____________________法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是________和________；對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。 (2)接種操作為什么一定要在酒精燈火焰附近進(jìn)

9、行？ ________________________________________________________________________。 (3)接種后，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是________(填“圖

10、甲”或“圖乙”)。 解析：圖甲和圖乙分別是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域，因此接種常在火焰附近進(jìn)行。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生水，對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成影響，故需要倒置培養(yǎng)。 答案：(1)平板劃線(xiàn)　稀釋涂布平板　接種環(huán)　涂布器　灼燒滅菌　(2)火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域　(3)避免培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng)　 (4)圖乙 8．(2018·江西贛中南五校聯(lián)考)如表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)根據(jù)表格和所學(xué)知識(shí)回答下列相關(guān)問(wèn)題： 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示劑

11、瓊脂 含量(g) 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL (1)從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看，大腸桿菌屬于______________________________。 (2)若根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于________(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。若要用上述培養(yǎng)基來(lái)篩選出土壤中的尿素分解菌，培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分必需怎樣更改？________________，并用________作為指示劑。 (3)在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中，為防止雜菌污染，需要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_______

12、_。 (4)圖1和圖2是培養(yǎng)某細(xì)菌的結(jié)果圖，其對(duì)應(yīng)的接種方法分別是：____________和____________，這兩種方法接種后培養(yǎng)基上都可以得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖所形成的________。圖1所用的接種方法可用來(lái)對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。此外，測(cè)定微生物數(shù)目的另一種方法是________________________________________________________________________。 (5)以下過(guò)程中所利用的主要微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌較相似的有________。 A．制作果酒 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜 D．制作腐乳 解析：(1)大腸

13、桿菌只能從環(huán)境中攝取有機(jī)物，不能自己合成有機(jī)物，屬于分解者。(2)該培養(yǎng)基中含有指示劑，屬于鑒別培養(yǎng)基。尿素分解菌可以分解尿素，而其他微生物不能，因此可將培養(yǎng)基中的蛋白胨改為尿素，用于篩選土壤中的尿素分解菌，并用酚紅作為指示劑。(3)培養(yǎng)微生物時(shí)，培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要滅菌，操作者雙手需要進(jìn)行消毒。(4)圖1采用的是稀釋涂布平板法，圖2采用的是平板劃線(xiàn)法。單個(gè)微生物細(xì)胞繁殖所形成的細(xì)胞群叫菌落。(5)A、B、C、D中所利用的主要微生物是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌、毛霉，醋酸菌、大腸桿菌和乳酸菌都是原核細(xì)胞，結(jié)構(gòu)相似。 答案：(1)分解者　(2)鑒別　將蛋白胨改成尿素　酚紅　(3)滅菌　消毒　(4)稀

14、釋涂布平板法　平板劃線(xiàn)法　菌落　顯微鏡直接計(jì)數(shù)法　(5)BC 9．臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________________________________________________________________________ 法或________________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當(dāng)稀釋?zhuān)胈_____________法接種于固體培養(yǎng)基表面，在

15、37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿(mǎn)平板。 (3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A________；含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B________；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明______________________________________________；含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。 (4)根

16、據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素________。 解析：(1)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)微生物純化培養(yǎng)時(shí)，常用的接種方法有平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個(gè)菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖，常用稀釋涂布平板法。(3)對(duì)某種抗生素越敏感的致病菌，在該抗生素存在的范圍內(nèi)，越不易生存，形成的透明圈就越大。如果在透明圈中還有菌落生存，則說(shuō)明這個(gè)菌落的細(xì)菌耐藥性很強(qiáng)。(4)通過(guò)(3)可知，在應(yīng)用時(shí)，要想殺死某致病菌，就得選擇能使該致病菌大量死亡，即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。 答案：(1)平板劃線(xiàn)　稀釋涂布平板　(2)稀釋涂布平板　(3)敏感　不敏感　該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的

17、弱　耐藥菌　(4)A 10．某市衛(wèi)生計(jì)生委發(fā)布的衛(wèi)生監(jiān)測(cè)信息顯示一些美容美發(fā)場(chǎng)所的毛巾、理發(fā)(美容)用具大腸桿菌嚴(yán)重超標(biāo)。如圖甲為大腸桿菌含量檢測(cè)操作簡(jiǎn)圖，圖乙為伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基配方?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題： (1)圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)________(填“大于”或“小于”)大腸桿菌。受此啟發(fā)，對(duì)某些不耐高溫的試劑可以怎樣除菌？________________。 (2)配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，除了水分、無(wú)機(jī)鹽以外，還應(yīng)加入________(一種營(yíng)養(yǎng)成分)，以及____________。待各成分都溶化后和分裝前，要進(jìn)行的是____________和滅菌，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用器具是______

18、________。倒平板時(shí)要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要目的是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)深紫色，從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (3)用平板劃線(xiàn)法分離樣液中的大腸桿菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)灼燒滅菌，在第二次及以后劃線(xiàn)時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線(xiàn)的目的是____

19、____________________________________________________________________。 要檢測(cè)樣液中的大腸桿菌含量，取25 cm2毛巾樣本，加5 mL蒸餾水，浸潤(rùn)半小時(shí)，然后在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL樣液；在37 ℃的培養(yǎng)箱中放置48小時(shí)，3個(gè)平板上的黑色菌落數(shù)分別為49、48和47。據(jù)此可得出25 cm2毛巾樣液中的活菌數(shù)為_(kāi)_______。 解析：(1)圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌，濾膜過(guò)濾才能獲得大腸桿菌，對(duì)不耐高溫的試劑除菌時(shí)無(wú)法用高壓蒸汽滅菌法，可以用濾膜過(guò)濾達(dá)到除菌目的。(2)配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，除了水分

20、、無(wú)機(jī)鹽以外，還應(yīng)加入氮源以及瓊脂。配制的培養(yǎng)基在溶化后和分裝前需要先調(diào)整pH和滅菌，高壓蒸汽滅菌法常用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。倒平板后將平板倒置的主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。從功能上劃分，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。(3)接種環(huán)灼燒滅菌后，在第二次及以后劃線(xiàn)時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈深紫色，據(jù)題意可知，25 cm2毛巾樣本中的活菌數(shù)為(49＋48＋47)÷3÷0.1×5＝2.4×103。 答案：(1)小于　用濾膜過(guò)濾除菌　(2)氮源　瓊脂　調(diào)整pH　高壓蒸汽滅菌鍋　防止

21、培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染　鑒別　(3)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落　2.4×103 11．(2018·惠州模擬)日前微博傳言手機(jī)細(xì)菌比馬桶多。如圖，央視和北京衛(wèi)視通過(guò)實(shí)驗(yàn)展示調(diào)查結(jié)果?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題： (1)該實(shí)驗(yàn)需制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、________________等。 (2)據(jù)圖，兩電視臺(tái)均采用__________________法接種，該方法需要________(多選)。 A．接種環(huán) B．酒精燈　C．移液管　D．涂布器　E．無(wú)菌水 (3)通過(guò)觀(guān)察菌落的__________________，可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電

22、視臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但報(bào)道結(jié)果截然不同，你認(rèn)為原因是： ________________________________________________________________________。 (4)按圖操作取樣面積，實(shí)驗(yàn)員測(cè)定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量，將10 mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)謩e取0.1 mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個(gè)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為48、50、52，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為_(kāi)___________個(gè)/平方厘米。該實(shí)驗(yàn)對(duì)照組該如何設(shè)置？ _______________________________________________

23、_________________________。 解析：(1)微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。(2)據(jù)圖分析可知，該實(shí)驗(yàn)的接種方法為稀釋涂布平板法，該方法用到的工具有酒精燈、移液管、涂布器、無(wú)菌水等。(3)不同的菌落形態(tài)、大小不同，圖示兩個(gè)電視臺(tái)調(diào)查的手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都有多種形態(tài)的菌落，即存在多種微生物。兩電視臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但報(bào)道結(jié)果截然不同，可能是因?yàn)槭謾C(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)根據(jù)提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)＝(48＋50＋52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)＝2×104(個(gè)/平方厘米)。 答案：(1)氮源和無(wú)機(jī)鹽　(2)稀釋涂布平板　 BCDE (3)形態(tài)、大小　手機(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同 (4)2×104　取培養(yǎng)基涂布0.1 mL無(wú)菌水進(jìn)行培養(yǎng)