茶籽油中苯并a芘的測定

ICS67.220.20X 09 DB52貴州省地方標(biāo)準(zhǔn)DBS52/ XXXXXXX食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)茶籽油中苯并(a)芘的測定Local food safety standardsDetermination of Benzo(a)pyrene in tea seed oilXXXX - XX - XX發(fā)布XXXX - XX - XX實(shí)施貴州省衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會發(fā)布目次前言II1范圍12高效液相色譜法1附錄A（資料性附錄）苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)高效液相色譜圖(圖A.1)4附錄B（資料性附錄）苯并(a)芘添加濃度及其平均回收率的試驗(yàn)數(shù)據(jù)(表B.1)5前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2009標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫給出的規(guī)則起草。 請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。 本標(biāo)準(zhǔn)附錄A、附錄B為資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由遵義市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測院提出。本標(biāo)準(zhǔn)由貴州省衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：遵義市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院、國家茶及茶制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(貴州)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：駱書娜、張季、李霞、向麗萍、馬昌洪、王蘭蘭、王奧、杜玲玲、蔡璐、黎亮亮。食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 茶籽油中苯并(a)芘的測定1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了茶籽油中苯并(a)芘的高效液相色譜測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于茶籽油中苯并(a)芘含量的測定。2 高效液相色譜法2.1 原理樣品加入氫氧化鉀-無水乙醇溶液，在水浴加熱皂化后用正己烷萃取，氮?dú)獯蹈珊笠砸合嗌V-熒光檢測器測定，外標(biāo)法定量。2.2 試劑和材料2.2.1 正己烷（C6H14），分析純。2.2.2 乙腈（C2H3N），色譜純。2.2.3 氫氧化鉀（KOH），分析純。2.2.4 無水乙醇（C2H5OH），分析純。2.2.5 氫氧化鉀-無水乙醇溶液稱取56 g氫氧化鉀溶于1 L無水乙醇:水（95:5，V/V）的溶液中。2.2.6 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)品，分子式C20H20，CAS號為50-32-8，純度大于99.5 %。 2.2.7 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液移取0.1 mg/mL的苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)1.0 mL，用色譜甲醇定容至100 mL，配制成1.0 g/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。此溶液于0 4 避光保存。2.2.8 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)工作溶液將標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液用色譜甲醇逐級稀釋成濃度為0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、50.0 ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。置于0 4 避光保存。2.2.9 0.45 m 微孔濾膜，有機(jī)系。2.3 儀器與設(shè)備2.3.1 高效液相色譜儀，配有熒光檢測器（FLD）。2.3.2 數(shù)顯恒溫水浴鍋。2.3.3 電子天平，感量分別為 0.0001 g 和 0.01 g。2.3.4 氮吹儀。2.3.5 旋渦混勻器。2.4 試樣的制備與保存將樣品充分振搖混勻，分裝置于潔凈容器內(nèi)作為試樣，標(biāo)明標(biāo)記；低溫下保存。2.5 測定步驟2.5.1 提取準(zhǔn)確稱取試樣0.5 g（精確至0.01g）于50 mL比色管中，加入5 mL氫氧化鉀-無水乙醇溶液，渦旋混勻，在50 水浴中加熱皂化1 h，取出后冷卻至室溫，加入5 mL水，渦旋混勻，用20 mL正己烷分2次提取，合并正己烷提取液于氮?dú)庵写蹈?，用乙腈定容?.0 mL，過0.45 m微孔濾膜，供高效液相色譜儀測定。2.5.2 測定2.5.2.1 液相色譜條件a) 色譜柱為Eclipse PAH柱，4.6 mm（內(nèi)徑）×250 mm，粒徑5 m，或同等效能色譜柱；b) 進(jìn)樣量為10 L；c) 流速為1.0 mL/min；d) 柱溫為30 e) 流動相：乙腈:超純水=88:12。2.5.2.2 高效液相色譜測定根據(jù)樣品中苯并(a)芘含量情況，選定與樣液濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，標(biāo)準(zhǔn)使用溶液和樣液中苯并(a)芘的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍內(nèi)，如果樣液中苯并(a)芘含量超出檢測的線性范圍，則稀釋后再進(jìn)樣。以保留時間定性，外標(biāo)法定量。2.5.2.3 空白試驗(yàn)除不稱取試樣外，均按2.5.1中的步驟完成空白試驗(yàn)。2.6 計(jì)算結(jié)果和表述試樣中苯并(a)芘的含量按下式進(jìn)行計(jì)算：式中：X-試樣中苯并(a)芘的含量，單位為微克每千克（g/kg）； C-從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的苯并(a)芘的濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）； V-樣品溶液最終定容體積，單位為毫升（mL）； m-樣品溶液所代表的試樣質(zhì)量，單位為克（g）；注：計(jì)算結(jié)果在0 g/kg10 g/kg之間時保留一位小數(shù)，計(jì)算結(jié)果大于10 g/kg時保留到最接近的整數(shù)。2.7 檢出限、回收率及精密度2.7.1 檢出限本方法的檢出限為0.2284 g/kg。2.7.2 回收率本方法在3.0 g/kg60.0 g/kg添加濃度水平的回收率是79.53%99.93%。參見附錄B。2.7.3 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的20%。AA附錄A （資料性附錄）苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)高效液相色譜圖（圖A.1）圖A.1 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的液相色譜圖BB附錄B （資料性附錄）苯并(a)芘添加濃度及其平均回收率的試驗(yàn)數(shù)據(jù)（表B.1）表B.1 茶籽油中苯并(a)芘的添加回收率（n=6）樣品類型化合物添加濃度/(g/kg)回收率范圍/%最大相對標(biāo)準(zhǔn)偏差/%茶籽油苯并(a)芘3.091.2799.930.118.081.9884.801.1120.079.5381.050.6430.095.4196.070.2460.094.3795.070.28_