2014高考生物一輪復習 第二講微生物的培養(yǎng)與應用配套練習 新人教版選修1

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1、選修1 第二講 微生物的培養(yǎng)與應用 一、選擇題 1．培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是(　　) ①化學消毒?、谧茻郎缇、鄹蔁釡缇、茏贤饩€滅菌　⑤高壓蒸汽滅菌?、薨褪舷痉? A．⑤③②①④⑥　　　　 B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤ 2．下列關于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是(　　) A．利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對微生物進行計數(shù) B．接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落 C．以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌 D．用大白菜腌制泡菜的過程中亞

2、硝酸鹽含量變化是先增加后減少 3．用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(　　) ①可以用相同的培養(yǎng)基 ②都需要使用接種針進行接種 ③都需要在酒精燈火焰旁進行接種 ④都可以用來計數(shù)活菌 A．①② B．③④ C．①③ D．②④ 4．用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設置的對照是(　　) A．未接種的選擇培養(yǎng)基 B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 D．接種了的選擇培養(yǎng)基 5．某實驗小組欲從土壤中篩選出能分解淀粉的芽孢桿菌。下列敘述不正確的是(　　) A．采樣與培養(yǎng)：稱量1 g土樣置于剛配制的液體培養(yǎng)基中，30℃

3、振蕩培養(yǎng) B．接種：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需經(jīng)過系列稀釋后接種 C．選擇：所用的固體培養(yǎng)基，作為唯一碳源的是淀粉 D．篩選：將適量的碘液滴加到平板中的菌落周圍，出現(xiàn)透明圈的說明此種菌能分解淀粉 6．微生物培養(yǎng)過程中，要十分重視無菌操作，現(xiàn)代生物學實驗中的許多方面也要進行無菌操作，防止雜菌污染，請分析下列操作中錯誤的是(　　) ①煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和部分芽孢?、诮臃N操作要在酒精燈火焰附近進行?、蹮o菌繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進行消毒?、芗彝ブ谱髌咸丫茣r要將容器和葡萄進行滅菌?、菖囵B(yǎng)基要進行高壓蒸汽滅菌?、藜尤肱囵B(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌 A．①③

4、B．②④ C．③⑤ D．④⑥ 二、非選擇題 7．下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請回答相關問題： (1)圖甲是利用________法進行微生物接種，圖乙是利用____________________法進行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是________和________；對這兩種接種工具進行滅菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。 (2)接種操作為什么一定要在火焰附近進行？ ________________________________________________________________________。 (3)接種后，在固體

5、培養(yǎng)基上培養(yǎng)細菌時為什么進行倒置培養(yǎng)？ ____________________________________________________________________。 (4)右圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是________(填圖甲或圖乙)。 8．選擇培養(yǎng)是微生物學中最強有力的技術手段之一。該技術主要是利用不同微生物間生命活動特點的不同，制定環(huán)境條件，使僅適應該條件的微生物生長旺盛，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從中分離到所需的特定微生物。選擇條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點，從物理、化學、生物及綜合多個方面進行選擇，如溫度、pH、紫外

6、線、高壓、光照、氧氣、營養(yǎng)等許多方面。下圖描述了采用選擇方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。 (1)本實驗所需培養(yǎng)基為______，碳源為______。 (2)實驗原理是__________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)①→③重復培養(yǎng)的目的是_______________________________________________

7、 ________________________________________________________________________。 (4)⑤的菌落中大部分是降解__________的微生物。 (5)⑥為______組，⑦為______組，設置⑥的目的是____________________________ ________________________________________________________________________。 (6)⑤→⑥采用__________法，接種到⑥的培養(yǎng)基中，在操作過程中為防止污染應注意 的事項是________

8、__________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 9．下圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程，據(jù)此回答有關問題： (1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫熱泉中尋找耐熱菌，這說明 ________________________________________________________________________ ____________

9、____________________________________________________________。 (2)某同學根據(jù)需要，配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下，整個實驗過程嚴格執(zhí)行無菌操作。 纖維 素粉 NaNO3 Na2HPO4· 7H2O KH2PO4 MgSO4· 7H2O KCl 酵母膏、 水解酪素 5 g 1 g 1.2 g 0.9 g 0.5 g 0.5 g 適量 如果將其中的纖維素粉換成________，菌落數(shù)________________________________，即可說明選擇培養(yǎng)基的作用。 (3)接種微生

10、物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實驗宜采用________法， 原因是__________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 10．為了探究土壤中的微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如下圖所示。請分析回答問題： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡

11、萄糖 尿素 瓊脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1 g 10 g 15 g 將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL (1)簡述土壤中可分解尿素的細菌的鑒定方法及原理：__________________________。 (2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________，實驗中需要振蕩培養(yǎng)，原因是_____________。 (4)轉入固體培養(yǎng)基時，常采用______接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (5)實驗結束后

12、，使用過的培養(yǎng)基應該進行________處理后，才能倒掉。 11．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑(含氮有機化合物)在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤。為修復被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細菌(已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)。 (1)制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行________處理。 (2)要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從物理性質、用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點是______________________。 (3)在劃線培養(yǎng)時，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主

13、要原因是______________________或有氧條件抑制了這些細菌的生長。 (4)在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是________，有透明帶菌落利用的氮源主要是________，據(jù)此可篩選出目的菌。 (5)科研人員用放射線處理該細菌獲得兩個突變株A和B，然后對突變株A和B進行實驗，結果如下表所示： 接種的菌種 一般培養(yǎng)基 實驗處理及結果 A 不生長 添加營養(yǎng)物質甲，能生長 B 不生長 添加營養(yǎng)物質乙，能生長 A＋B 能生長 不添加營養(yǎng)物質 甲、乙就能生長 突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長的原因是________________

14、____。突變株A和B混 合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因是________________________。 詳解答案 一、選擇題 1．解析：培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法；培養(yǎng)皿能耐高溫，用干熱滅菌法；接種環(huán)可用灼燒滅菌達到迅速徹底滅菌的效果；實驗操作者的雙手可用化學試劑進行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒；為不破壞其營養(yǎng)成分，牛奶可采用巴氏消毒法。 答案：A 2．解析：劃線接種可以將菌體分散，最后得到單個菌體細胞，經(jīng)過培養(yǎng)可以得到單個菌落；用稀釋涂布平板法可以分離微生物，也可以對微生物進行計數(shù)；在泡菜的腌制過程中，開始亞硝酸鹽含量增加，10天后含量開

15、始下降；以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌。 答案：A 3．解析：平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基；平板劃線法采用接種針進行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進行操作；純化時，要進行無菌操作，需要在酒精燈火焰旁接種，以避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基；平板劃線法一般用于分離而不是用于計數(shù)。 答案：C 4．解析：將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目，因此，用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循的原則是單一變量原則，所以與選擇培養(yǎng)基一樣，應進行接種培養(yǎng)。 答案：C 5．解析：為了確保分離出的目的菌是從土壤

16、中分離的，所用培養(yǎng)液和儀器等都要嚴格消毒，所以剛配制的培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌處理才能使用。 答案：A 6．解析：無菌操作包括消毒和滅菌。需進行消毒處理的有植物的外植體及操作人員的雙手等，需進行滅菌的有器皿、培養(yǎng)基、添加劑(指示劑或染色劑)等。煮沸可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和一部分芽孢，屬于消毒；為防止空氣中雜菌污染，接種時要在酒精燈火焰附近進行；家庭制作葡萄酒時所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能滅菌；培養(yǎng)基常進行高壓蒸汽滅菌。故④⑥操作錯誤。 答案：D 二、非選擇題 7．解析：圖甲和圖乙分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)、涂布器。由于在酒精燈

17、火焰附近存在著無菌區(qū)域，因此接種常在火焰附近進行。在微生物培養(yǎng)過程中會產(chǎn)生水，對微生物的生長造成影響，故需要倒置培養(yǎng)。 答案：(1)平板劃線　稀釋涂布平板　接種環(huán)　涂布器　灼燒滅菌 (2)火焰附近存在著無菌區(qū)域 (3)避免培養(yǎng)過程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長 (4)圖乙 8．解析：選擇培養(yǎng)又稱為增殖培養(yǎng)，主要是利用不同微生物的生長繁殖對環(huán)境和培養(yǎng)基的特殊要求進行富集培養(yǎng)和分離。要從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物，必須根據(jù)該微生物的特點，采用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)。設置對照實驗的目的是說明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標微生物。 答案：(1)選擇

18、培養(yǎng)基　對羥基苯甲酸　(2)利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物　(3)增大分解對羥基苯甲酸微生物的比例　(4)對羥基苯甲酸　(5)對照　實驗　說明通過富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標微生物　(6)單細胞挑取　接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在火焰旁冷卻，同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物 9．解析：(1)因為纖維素分解菌與耐熱菌有不同的生活習性，生活在不同的環(huán)境中，故要根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境中去尋找。(2)因為葡萄糖是能被微生物直接利用的有機小分子，所以如果將其中的纖

19、維素粉換成葡萄糖，纖維素分解菌及其他細菌會生長繁殖得更快，故菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基。(3)因為稀釋涂布平板法要將菌液進行一系列的梯度稀釋，故該法可根據(jù)稀釋體積計算每克樣品中的細菌數(shù)，而平板劃線法則不能這樣，所以本實驗宜采用稀釋涂布平板法。 答案：(1)根據(jù)目的菌株對生存環(huán)境的要求，到相應的環(huán)境中去尋找 (2)葡萄糖　明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù) (3)稀釋涂布平板　平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計算每克樣品中的細菌數(shù) 10．解析：尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源，因此原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠在此培養(yǎng)基上生長。由于細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH升高，故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加

20、入的酚紅指示劑將變成紅色；這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，可篩選目的菌；目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的尿素和葡萄糖；振蕩培養(yǎng)的目的是提供氧氣；固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時的接種方法常用稀釋涂布平板法或平板劃線法；倒掉培養(yǎng)基之前應對其進行滅菌處理。 答案：(1)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH升高，使酚紅指示劑變?yōu)榧t色　(2)目的菌　選擇　(3)尿素　葡萄糖　為目的菌提供氧氣　(4)稀釋涂布平板法(或平板劃線法) (5)滅菌 11．解析：(1)制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理。(2)從物理狀態(tài)來看，題圖培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于

21、固體培養(yǎng)基；從用途方面來看，該培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。該除草劑為含氮有機化合物，降解該除草劑的細菌可以除草劑為氮源，故該培養(yǎng)基中除加入除草劑外，不再含有其他氮源，以選擇出能降解該除草劑的細菌。(3)在以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上，不能降解該除草劑的細菌(除具有固氮能力的細菌外)是不能生長的。(4)含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明，形成透明圈是由于該除草劑被某些細菌降解。(5)突變株A的生長依賴于營養(yǎng)物質甲，突變株B的生長依賴于營養(yǎng)物質乙。不添加營養(yǎng)物質甲和乙，二者混合培養(yǎng)時都能生長，最可能的原因是突變株A為突變株B提供了營養(yǎng)物質乙，突變株B為突變株A提供了營養(yǎng)物質甲。 答案：(1)稀釋　(2)在無氮固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑　(3)培養(yǎng)基中缺少這些細菌可利用的氮源　(4)氮氣　該除草劑　(5)突變株A缺乏合成營養(yǎng)物質甲所需要的酶　突變株A生長需要營養(yǎng)物質甲，突變株B可以提供；突變株B生長需要營養(yǎng)物質乙，突變株A可以提供