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1、“番茄馬鈴薯”理想圖,通過長期的實驗，科學家們采用體細胞雜交技術(shù)獲得了“番茄馬鈴薯”植株。,雜種植株,篩選融合AB 的原生質(zhì)體,,再生出細胞壁,脫分化,愈傷組織,,再分化,植物細胞的融合,植物組織培養(yǎng),植物細胞A,原生質(zhì)體B,原生質(zhì)體A,,,雜種細胞AB,,去 壁,去 壁,人 工 誘 導,方法？,促進融合的方法？,融合完成的 標志,植物細胞B,植物體細胞雜交技術(shù)過程,原理？,原理？,成果和未解決的問題,成果：克服不同生物遠緣雜交的障礙，出 現(xiàn)自然界沒有的新品種。,未解決的問題：未能讓雜種植物按照人們 的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。,,如果將牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小奶牛
2、，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！,動物細胞也能融合嗎？,一、動物細胞融合,1、動物融合的過程 請同學們閱讀課本P52動物融合,不同DNA的兩個細胞,,滅活病毒誘導細胞融合,,融合后的細胞進行有絲分裂,1、動物細胞融合過程,思考題,1、植物體細胞雜交時首先應用什么方法去掉細胞壁？,酶解法，如纖維素酶或果膠酶,2、動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎？為什么？,無需，因為動物細胞無細胞壁,3、植物體細胞雜交誘導原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？,離心、電激等物理方法；PEG等化學方法,4、動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？,能 還可以利用滅活的病毒進行誘導,5、植物體細胞雜交應先進
3、行原生質(zhì)體的融合再進行組織培養(yǎng)形成完整的雜種個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？,不能,6、你能歸納出什么叫做動物細胞融合嗎？,？,2、動物細胞融合的概念,動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞形成一個細胞的過程,主要用于制備,單克隆抗體,獲得雜種植株,用途,物理、化學方法,（同左）,滅活的病毒,物理（離心、振動、電刺激）,化學（聚乙二醇）,誘導方法,使細胞分散后誘,導細胞融合,去除細胞壁后誘,導原生質(zhì)體融合,細胞融合的方法,細胞膜的流動性,細胞膜的流動性、,植物細胞全能性,原理,動物細胞融合,植物體細胞雜交,,,,,,,,,,,比較項目,,植物、動物細胞融合的比較,7、你推測
4、一下動物細胞融合有哪些方面的應用嗎？,思考題,利用動物細胞融合技術(shù)誘導形成雜交瘤細胞,,8、在生產(chǎn)實際中雜交瘤細胞有怎樣的應用？,生產(chǎn)單克隆抗體,1.抗體是由何種細胞產(chǎn)生的？ 、一個淋巴細胞(漿細胞)能分泌多種抗體嗎？ 、一種抗原侵入機體之后，引起機體免疫反應產(chǎn)生的抗體只有一種嗎？ . 簡述獲得抗體的傳統(tǒng)途徑？ 、這種方法獲得的抗體有什么缺陷？,二、單克隆抗體,,抗體不純,特異性差、純度低；,產(chǎn)量低、反應不夠靈敏,傳統(tǒng)血清抗體的制備,,抗原不純,,每個淋巴細胞只能分泌一種抗體，由一個淋巴細胞增殖產(chǎn)生的細胞群分泌的抗體化學成份是單一的。,如何獲得化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體？,體外培養(yǎng)淋巴細胞能
5、無限增殖嗎?,體外培養(yǎng)單個淋巴細胞，提取分泌的抗體,怎樣解決這個問題？,設(shè)計方案： 一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體 小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖,,雜種細胞,二、單克隆抗體,2.制備過程：,誘導其融合的方法有哪些？,融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞,怎樣篩選出雜交瘤細胞，雜交瘤細胞有何優(yōu)點,注射抗原的目的是什么,,為何要進行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，多次篩選,大量增殖雜交瘤細胞獲得單抗的方法,3.單克隆抗體的應用：,在基礎(chǔ)理論研究中具有重要意義,在疾病診斷、治療和預防方面，具有 特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。,生物導彈,二、單克隆抗體,思考題,制備單克隆抗體時，為什么要選用B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞？,假如你掌握了動物細胞融合技術(shù)，你想用它來解決什么問題？,B BB B瘤 瘤瘤 瘤,細胞融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞？,已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩條DNA合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，加PEG促融，在篩選培養(yǎng)基上篩選獲得雜種細胞。,幻燈片 15,,,,
動物體細胞雜交技術(shù)過程
