高考生物一輪復(fù)習 第十一單元 第2講 微生物的培養(yǎng)及應(yīng)用課件.ppt

,第2講 微生物的培養(yǎng)及應(yīng)用,考點突破題型透析,考點二 微生物的分離與數(shù)量測定,考綱原生態(tài),第十一單元 生物技術(shù)實踐,備選素材,考 綱 原 生 態(tài),1.微生物的分離和培養(yǎng) 2.某種微生物數(shù)量的測定 3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用,考點一 微生物的實驗室培養(yǎng),知識梳理 考能診斷,1培養(yǎng)基 (1)概念：人們按照微生物對_的不同需求，配制出供其生長繁殖的_。,營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì),水、碳源、氮源、無機鹽,pH,氧氣,固體培養(yǎng)基,2無菌技術(shù)連線,考點一 微生物的實驗室培養(yǎng),知識梳理 考能診斷,3純化大腸桿菌的原理與方法 (1)原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是純化的細菌菌落。 (2)純化微生物的接種方法：,考點一 微生物的實驗室培養(yǎng),知識梳理 考能診斷,考點一 微生物的實驗室培養(yǎng),知識梳理 考能診斷,考點一 微生物的實驗室培養(yǎng),知識梳理 考能診斷,平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同 (1)第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。 (2)每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。 (3)劃線結(jié)束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。,(1)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌。 (2013·高考江蘇卷)( ) (2)轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線。 (2013·高考江蘇卷)( ) (3)接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (2013·高考江蘇卷)( ) (4)培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次。 (2013·高考江蘇卷)( ) (5)在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細菌。 (2011·高考重慶卷)( ),知識梳理 考能診斷,×,×,×,×,考點一 微生物的實驗室培養(yǎng),(6)在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進細菌生長，向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進破傷風桿菌的生長。 (2011·高考重慶卷)( ) (7)對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設(shè)備是高壓蒸汽滅菌鍋。實驗前需對超凈工作臺進行消毒處理。 (2010·高考山東卷)( ) (8)用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板。 (2009·高考安徽卷)( ),知識梳理 考能診斷,×,考點一 微生物的實驗室培養(yǎng),1(2015·北京市東城區(qū)聯(lián)考)細菌需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì)并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列與此有關(guān)的說法正確的是 ( ) A乳酸菌與硝化細菌所利用的碳源 是相同的 B氮源不可能作為細菌的能源物質(zhì) C瓊脂是細菌生長和繁殖中不可缺 少的一種物質(zhì) D以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長 出的不都是尿素分解菌,乳酸菌是異養(yǎng)型微生物，硝化細菌是自養(yǎng)型微生物，所利用的碳源是不同的，A錯誤。細菌的能源物質(zhì)是碳源，B錯誤。瓊脂不是細菌生長和繁殖中必需的物質(zhì)，C錯誤。,題組設(shè)計 解題技法,解析,答案,題組一 微生物的培養(yǎng),D,2隨著科技的發(fā)展，微生物在生產(chǎn)活動中得到了廣泛應(yīng)用。下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是( ) A青霉素就是抗生素，在青霉菌的 培養(yǎng)過程中不用嚴格滅菌 B培養(yǎng)基中加入的瓊脂可以作為微 生物的碳源 C為了避免污染，在微生物培養(yǎng)過 程中，操作人員的手必須經(jīng)過嚴 格滅菌 D在菌種選育過程中可以利用人工 誘變等手段,青霉素雖然是一種抗生素，但并不能消滅所有微生物，所以在青霉菌的培養(yǎng)過程中仍需要消滅雜菌；培養(yǎng)基中加入的瓊脂是凝固劑，可使培養(yǎng)基呈固態(tài)；在微生物的培養(yǎng)過程中，必須注意消毒和滅菌，滅菌是用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)所有的微生物，因此操作人員的手不能進行滅菌，只能進行消毒，即用較為溫和的理化方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物。,解析,答案,題組設(shè)計 解題技法,題組一 微生物的培養(yǎng),D,3下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述錯誤的是 ( ),答案,題組設(shè)計 解題技法,題組一 微生物的培養(yǎng),C,A.依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于 固體培養(yǎng)基；依用途劃分，該培 養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基 B由培養(yǎng)基的原料可知，所培養(yǎng)微 生物的同化作用類型是異養(yǎng)型， 培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌或毛霉 C本培養(yǎng)基中青霉素的添加滿足了微生 物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求 D若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細 菌，應(yīng)除去青霉素和NaNO3，并應(yīng)加 入尿素,由培養(yǎng)基中含有瓊脂可推測其為固體培養(yǎng)基，由培養(yǎng)基中含有青霉素可推測其為選擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中含有有機碳源，故所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型。由于青霉素能抑制細菌的生長而不抑制真菌的生長，故能培養(yǎng)酵母菌或毛霉。若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細菌，則應(yīng)以尿素為唯一氮源，即應(yīng)除去NaNO3，同時還應(yīng)除去青霉素以防止其抑制目的菌的生長。,解析,題組設(shè)計 解題技法,題組一 微生物的培養(yǎng),1篩選微生物的原理 人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時抑制或阻止其他微生物的生長。因此，可以通過配制選擇培養(yǎng)基、控制培養(yǎng)條件等選擇目的微生物。 2選擇培養(yǎng)基的設(shè)計原理和功能 根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某些物理、化學因素(如溫度、pH等)的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。此類培養(yǎng)基能使混合菌株中的目的菌株變?yōu)閮?yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選效率。,題組設(shè)計 解題技法,題組一 微生物的培養(yǎng),3選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實例 (1)在培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。 (2)在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可分離出金黃色葡萄球菌。 (3)培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮微生物，因為非固氮微生物不能在此培養(yǎng)基上生存。 (4)當培養(yǎng)基的某種化學成分為特定營養(yǎng)成分時，也具有分離效果。如當培養(yǎng)基中石油是唯一碳源時，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達到分離能消除石油污染的微生物的目的。 (5)改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)能得到耐高溫的微生物。,題組設(shè)計 解題技法,題組一 微生物的培養(yǎng),4有關(guān)平板劃線操作正確的是 ( ) A使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿， 操作過程中不再滅菌 B打開含菌種的試管后要通過火焰 滅菌，取出菌種后要馬上塞上棉 塞 C將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平 板內(nèi)，劃三至五條平行線即可 D最后將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中 培養(yǎng),在培養(yǎng)基上接種時，一定要做到無菌操作，以防止雜菌污染影響實驗或研究的結(jié)果。微生物無處不在，包括空氣中也充滿了各種微生物，所以無菌操作顯得很困難，因而含有菌種的試管和待接種試管管口不能離開火焰附近，接種環(huán)、棉塞也不能離開火焰附近。接種完畢之后為了防止菌體污染，保證安全要用火焰灼燒管口和接種環(huán)，立即蓋上皿蓋。為防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，應(yīng)將平板倒置。,解析,答案,題組設(shè)計 解題技法,題組二 微生物純化的方法分析,D,5苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了能降解利用苯酚的細菌菌株篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯誤的是 ( ),答案,題組設(shè)計 解題技法,題組二 微生物純化的方法分析,C,A圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng) 基中應(yīng)加入苯酚作為碳源 B如果要測定中活細菌數(shù)量，常 采用稀釋涂布平板法 C若圖中為對照實驗，則其中應(yīng) 以苯酚作為唯一的碳源 D使用平板劃線法可以在上獲得 單菌落,用苯酚作為選擇培養(yǎng)基的特殊的碳源可以選出目的菌株。測定培養(yǎng)液中細菌數(shù)目多用稀釋涂布平板法。若為對照實驗，則應(yīng)含除苯酚外的其他碳源，以苯酚作為唯一碳源。使用稀釋涂布平板法或平板劃線法都可以在上獲得單菌落。,解析,題組設(shè)計 解題技法,題組二 微生物純化的方法分析,微生物純化的三種途徑 (1)單菌落挑取法：利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體 平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的 方法獲得目的微生物。 (2)選擇培養(yǎng)法：利用選擇培養(yǎng)基對微生物進行選擇培養(yǎng)，直接獲 得目的微生物。 (3)鑒定培養(yǎng)法：利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特 征，然后篩選目的微生物。,題組設(shè)計 解題技法,題組二 微生物純化的方法分析,考點二 微生物的分離與數(shù)量測定,知識梳理 考能診斷,1土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù) (1)分離原理 土壤中細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成_，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機物的過程中起到_作用。 (2)統(tǒng)計菌落數(shù)目 統(tǒng)計樣品中的活菌一般用_法。 (3)實驗流程 土壤取樣 _微生物的培養(yǎng)與觀察細菌的_。,脲酶,催化,稀釋涂布平板,樣品的稀釋,計數(shù),2分解纖維素的微生物的分離 (1)纖維素酶 組成：纖維素酶是一種_，一般認為它至少包括三種組分，即_。 作用：,考點二 微生物的分離與數(shù)量測定,知識梳理 考能診斷,葡萄糖,復(fù)合酶,C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,(2)纖維素分解菌的篩選 原理： 纖維素分解菌 篩選方法：_染色法，即通過是否產(chǎn)生_來篩選纖維素分解菌。 培養(yǎng)基：以_為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。,考點二 微生物的分離與數(shù)量測定,知識梳理 考能診斷,紅色復(fù)合物,透明圈,剛果紅,透明圈,纖維素,實驗流程： 土壤取樣：富含_的環(huán)境 選擇培養(yǎng)：用_培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度 _：制備系列稀釋液 涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生_的菌落,考點二 微生物的分離與數(shù)量測定,知識梳理 考能診斷,纖維素,選擇培養(yǎng)基,梯度稀釋,透明圈,(1)分離微生物所用的選擇培養(yǎng)基一定是固體培養(yǎng)基，因為菌落只能在固體培養(yǎng)基上形成。 (2)平板劃線法只適合用于微生物的提純，不適合進行計數(shù)，并且在最后一次劃線的末端處的菌種最純。,知識梳理 考能診斷,考點二 微生物的分離與數(shù)量測定,(1)要從土壤中分離獲取纖維素分解菌，應(yīng)選用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。 (2013·太原五中月考)( ) (2)在纖維素分解菌培養(yǎng)過程中，對培養(yǎng)基和接種環(huán)常采用的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌。 (2013·許昌二次調(diào)研)( ) (3)透明圈是剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物，可根據(jù)是否出現(xiàn)透明圈來判斷有無纖維素分解菌。 (2011·高考山東卷改編)( ) (4)測定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用顯微鏡直接計數(shù)法。 (2010·高考山東卷)( ),知識梳理 考能診斷,×,考點二 微生物的分離與數(shù)量測定,(5)在“檢測土壤中細菌總數(shù)”的實驗中，確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)。 (2009·高考安徽卷)( ) (6)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的比例合適。 (2009·高考寧夏卷)( ),知識梳理 考能診斷,×,考點二 微生物的分離與數(shù)量測定,1欲從土壤中分離出能分解尿素的細菌，下列實驗操作中，不正確的是 ( ) A將土壤用無菌水進行一系列的梯 度稀釋 B同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂 布三個平板 C可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件 下培養(yǎng)作為對照 D用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可 篩選出分解尿素的細菌,為了獲得單個菌落，應(yīng)將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋，A正確；為了使結(jié)果更加準確，同一濃度的土壤稀釋液至少要涂布3個平板進行重復(fù)實驗，然后計算平均值，B正確；可篩選出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，D錯誤。,題組設(shè)計 解題技法,解析,答案,題組一 對分離分解尿素細菌及纖維素分解菌的篩選分析,D,2(2015·泰州質(zhì)檢)利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇，生產(chǎn)過程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，其主要技術(shù)流程如下圖所示，下列相關(guān)說法錯誤的是 ( ) A可用剛果紅染色法篩選過程所需的纖 維素分解菌 B過程加入的纖維素酶是葡萄糖苷酶 C酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無氧條件下 發(fā)酵 D酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌,篩選纖維素分解菌可采用剛果紅染色法；纖維素酶為復(fù)合酶，至少包含三種組分，C1酶、和CX酶和葡萄糖苷酶；酒精發(fā)酵需在無氧條件下進行；酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌。,解析,答案,題組設(shè)計 解題技法,題組一 對分離分解尿素細菌及纖維素分解菌的篩選分析,B,篩選微生物的兩種方法比較,題組設(shè)計 解題技法,題組一 對分離分解尿素細菌及纖維素分解菌的篩選分析,3(2015·北京市海淀區(qū)高三期中)下列關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述中，不正確的是 ( ) A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng) 基，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后倒平板 B取104、105、106倍土壤稀釋液和 無菌水各0.1 ml涂布不同平板 C將實驗組和對照組平板倒置， 37 恒溫培養(yǎng)2448小時 D確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù) 在300以上的平板進行計數(shù),制備培養(yǎng)基時，需要將培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌，故A正確；接種方法為稀釋涂布平板法，即需要制備不同的土壤稀釋液后才能倒平板，故B正確；對照組和實驗組需要放置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，故C正確；在計數(shù)時，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)，故D錯。,解析,答案,題組設(shè)計 解題技法,題組二 微生物的計數(shù)分析,D,4(2014·高考新課標全國卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過_滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。,題組設(shè)計 解題技法,題組二 微生物的計數(shù)分析,(3)示意圖A和圖B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_的利用率。,題組設(shè)計 解題技法,題組二 微生物的計數(shù)分析,為了檢測培養(yǎng)基滅菌平板是否合格，應(yīng)對空白平板先行培養(yǎng)一段時間。每升水樣中的活菌數(shù)為(393837)÷3÷0.1×100×1 0003.8×107(個)。對接種環(huán)應(yīng)進行灼燒滅菌。為了將聚集的菌體逐步稀釋以獲得單個菌落，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。A表示的是平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果，B表示的是用稀釋涂布平板法接種后得到的結(jié)果。,解析,答案,題組設(shè)計 解題技法,題組二 微生物的計數(shù)分析,(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8×107 (2)灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 (3)B (4)溶解氧 營養(yǎng)物質(zhì),