（統(tǒng)考版）高考生物二輪復(fù)習(xí) 課后限時(shí)集訓(xùn)18 基因工程和細(xì)胞工程（含解析）-人教版高三生物試題

課后限時(shí)集訓(xùn)(十八)基因工程和細(xì)胞工程(建議用時(shí)：40分鐘)(教師用書獨(dú)具)非選擇題1(2018·全國(guó)卷)回答下列問題：(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá)。該研究除證明了質(zhì)?？梢宰鳛檩d體外，還證明了_(答出兩點(diǎn)即可)。(2)體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2參與的_方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；而體外重組的噬菌體DNA通常需與_組裝成完整噬菌體后，才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞。在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中，可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是_。(3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用_的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加_的抑制劑。解析(1)兩位科學(xué)家將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中并進(jìn)行了表達(dá)，因此，該研究可以證明：質(zhì)?？梢宰鳛檩d體、真核細(xì)胞的基因在原核細(xì)胞中也可以表達(dá)(不同生物共用一套密碼子)、體外重組的質(zhì)?？梢赃M(jìn)入受體細(xì)胞等。(2)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化，將質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，常用的轉(zhuǎn)化方法是用Ca2處理大腸桿菌細(xì)胞，使其處于感受態(tài)。噬菌體DNA沒有侵染能力，體外重組的噬菌體DNA通常需與外殼蛋白組裝成完整噬菌體后才能完成侵染過程。噬菌體多寄生在細(xì)菌中，但不能寄生在心肌細(xì)胞和葉肉細(xì)胞中。(3)若要使蛋白質(zhì)不被降解，則大腸桿菌體內(nèi)不能存在蛋白酶，因此，實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞。同理，在蛋白質(zhì)純化過程中，也不能使蛋白質(zhì)降解，因此，應(yīng)添加蛋白酶抑制劑。答案(1)體外重組的質(zhì)?？梢赃M(jìn)入受體細(xì)胞；真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)(2)轉(zhuǎn)化外殼蛋白(或噬菌體蛋白)細(xì)菌(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶2大腸桿菌­半乳糖苷酶(Z酶)可催化底物(X­gal)水解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。在pUC18質(zhì)粒中，lacZ編碼Z酶氨基端的一個(gè)片段(稱為­肽)，該質(zhì)粒結(jié)構(gòu)及限制酶識(shí)別位點(diǎn)如圖甲所示。已知­肽、缺失­肽的Z酶片段單獨(dú)存在時(shí)均無Z酶活性，共同存在時(shí)就會(huì)表現(xiàn)出Z酶活性。利用圖乙中的DNA片段與pUC18質(zhì)粒進(jìn)行基因工程操作。甲乙(1)限制酶能催化雙鏈DNA分子中_(填化學(xué)鍵名稱)的斷裂。本實(shí)驗(yàn)可使用限制酶_處理pUC18質(zhì)粒和圖乙中的DNA片段，再通過DNA連接酶連接，獲得含目的基因的重組質(zhì)粒。(2)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，然后將大腸桿菌接種到含氨芐青霉素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，由于未發(fā)生轉(zhuǎn)化的大腸桿菌沒有該質(zhì)粒，因而不具有_，在該培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)。從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(3)當(dāng)上述培養(yǎng)基中含有X­gal時(shí)，生長(zhǎng)出的菌落有藍(lán)色和白色兩種類型，其中含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌的菌落顏色為_，這是因?yàn)開。為保證能通過菌落顏色辨別出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，本實(shí)驗(yàn)作為受體細(xì)胞的大腸桿菌中Z酶基因應(yīng)滿足的條件是_。解析(1)限制酶能催化雙鏈DNA分子中磷酸二酯鍵的斷裂，將DNA降解。從圖中可知，限制酶Hind可破壞目的基因，而質(zhì)粒和目的基因兩側(cè)都有限制酶Sal識(shí)別位點(diǎn)，因此本實(shí)驗(yàn)可使用限制酶Sal處理pUC18質(zhì)粒和圖乙中的DNA片段。(2)重組質(zhì)粒上有氨芐青霉素抗性基因，由于未發(fā)生轉(zhuǎn)化的大腸桿菌沒有該質(zhì)粒，因而不具有氨芐青霉素抗性，在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)。從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，選擇了含重組質(zhì)粒的大腸桿菌。(3)從圖中可知，重組質(zhì)粒是用酶Sal分別處理過的質(zhì)粒和目的基因片段形成的，重組質(zhì)粒的lacZ基因被破壞，不能合成­半乳糖苷酶(Z酶)，不能催化底物(X­gal)水解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，故菌落呈白色。已知­肽、缺失­肽的Z酶片段單獨(dú)存在時(shí)均無Z酶活性，共同存在時(shí)就會(huì)表現(xiàn)出Z酶活性，為保證能通過菌落顏色辨別出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，本實(shí)驗(yàn)作為受體細(xì)胞的大腸桿菌中Z酶基因應(yīng)滿足的條件是編碼­肽的DNA序列缺失，其他序列正常。答案(1)磷酸二酯鍵Sal(2)氨芐青霉素抗性選擇(3)白色目的基因與質(zhì)粒連接后使lacZ被破壞，不能合成­肽編碼­肽的DNA序列缺失，其他序列正常3(2019·全國(guó)卷)培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示。 回答下列問題。(1)利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有_。(2)步驟切取的組織塊中要帶有形成層，原因是_。(3)從步驟到步驟需要更換新的培養(yǎng)基，其原因是_。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細(xì)胞的_過程，最終可形成試管苗。(4)步驟要進(jìn)行照光培養(yǎng)，其作用是_。(5)經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的_，這種繁殖方式屬于_繁殖。解析(1)分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株，這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有全能性。(2)在本實(shí)驗(yàn)中，切取胡蘿卜塊時(shí)要切取含有形成層的部分，原因是形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。(3)決定植物細(xì)胞脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，步驟(誘導(dǎo)愈傷組織形成)和步驟(誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗)所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同，故從步驟到步驟需更換培養(yǎng)基。愈傷組織通過細(xì)胞的再分化過程形成試管苗。(4)步驟需要進(jìn)行光照培養(yǎng)，其作用是誘導(dǎo)葉綠素的形成，使試管苗能夠進(jìn)行光合作用。(5)組織培養(yǎng)沒有經(jīng)過兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合，因此屬于無性繁殖，組織培養(yǎng)得到的植株保持了原品種的遺傳特性。答案(1)全能性(或形成完整植株所需的全部基因)(2)形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織(3)誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同分化(或再分化)(4)誘導(dǎo)葉綠素的形成，使試管苗能夠進(jìn)行光合作用(5)遺傳特性無性4下表表示高等動(dòng)植物親代個(gè)體產(chǎn)生新個(gè)體的3種不同途徑，請(qǐng)據(jù)表分析并回答問題：生物途徑主要流程動(dòng)植物甲親代個(gè)體受精卵胚新個(gè)體植物乙親代個(gè)體體細(xì)胞胚狀體新個(gè)體動(dòng)物丙親代個(gè)體核移植細(xì)胞早期胚胎新個(gè)體(1)甲、乙、丙途徑中屬于有性生殖的是_，三種途徑中由胚(胚狀體或早期胚胎)發(fā)育成新個(gè)體都需要經(jīng)過細(xì)胞的_。(2)相比于甲，乙、丙途徑在應(yīng)用上的優(yōu)點(diǎn)是_。乙途徑依據(jù)的原理是_，動(dòng)物一般采用丙而不采用乙途徑繁殖新個(gè)體的原因是_。(3)丙途徑中，從早期胚胎新個(gè)體的流程中還需要進(jìn)行的生物工程技術(shù)是_。該途徑獲得的新個(gè)體與供核的親代個(gè)體性狀不完全相同的原因是_。(4)若從乙、丙途徑獲得的新個(gè)體中各取一小塊組織進(jìn)行體外培養(yǎng)。下列敘述錯(cuò)誤的有_(填字母)。a前者需先用鹽酸解離，后者需先用胰蛋白酶處理b前者培養(yǎng)基中一般加入蔗糖，后者一般加入葡萄糖c前者培養(yǎng)過程需要持續(xù)光照，后者可在暗處培養(yǎng)d.兩者培養(yǎng)過程中均需要保證無菌條件防止雜菌污染解析(1)分析題表可知：甲表示動(dòng)植物正常有性生殖的過程；乙表示植物組織培養(yǎng)產(chǎn)生新個(gè)體的過程，為無性繁殖；丙表示通過核移植產(chǎn)生新個(gè)體的方式，生殖方式為無性繁殖。三種途徑中由胚(胚狀體或早期胚胎)發(fā)育成新個(gè)體都需要經(jīng)過細(xì)胞的分裂、分化才能完成新個(gè)體的發(fā)育過程。(2)相比于甲，乙、丙途徑在應(yīng)用上的優(yōu)點(diǎn)是快速繁殖優(yōu)良品種。乙途徑為植物組織培養(yǎng)，該過程的原理是植物體細(xì)胞的全能性，由于高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制，分化潛能弱，故動(dòng)物繁殖新個(gè)體一般采用丙途徑。(3)丙途徑中，從早期胚胎新個(gè)體的流程中還需要進(jìn)行的生物工程技術(shù)是胚胎移植。胚胎移植是動(dòng)物細(xì)胞工程產(chǎn)生新個(gè)體的最后一步，該途徑獲得的新個(gè)體的遺傳物質(zhì)由供核親代的核基因和供質(zhì)親代的質(zhì)基因共同組成，進(jìn)而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，故新個(gè)體性狀與供核親本不完全相同。(4)植物組織離體后直接進(jìn)行組織培養(yǎng)操作，不需先用鹽酸解離，后者為動(dòng)物細(xì)胞需先用胰蛋白酶處理，分散成單個(gè)細(xì)胞再進(jìn)行培養(yǎng)，a錯(cuò)誤；前者培養(yǎng)過程為植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中一般加入蔗糖，后者為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中一般加入葡萄糖，b正確；前者為植物組織培養(yǎng)，前期不需要光，后期需要持續(xù)光照，后者為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，可在適宜條件下培養(yǎng)，c錯(cuò)誤；兩者培養(yǎng)過程中均需要保證無菌條件，這是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵，d正確。答案(1)甲分裂和分化(或分裂、分化、衰老、凋亡等)(2)快速繁殖優(yōu)良品種植物體細(xì)胞的全能性高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制，分化潛能弱(3)胚胎移植卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響(4)ac5(2020·山東等級(jí)考)水稻胚乳中含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強(qiáng)?？蒲腥藛T將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對(duì)直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動(dòng)子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了3個(gè)突變品系。(1)將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，所需的酶是_，重組載體進(jìn)入水稻細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為_。(2)根據(jù)啟動(dòng)子的作用推測(cè)，Wx基因啟動(dòng)子序列的改變影響了_，從而改變了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平。與野生型水稻相比，3個(gè)突變品系中Wx基因控制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列_(填“發(fā)生”或“不發(fā)生”)改變，原因是_。(3)為檢測(cè)啟動(dòng)子變化對(duì)Wx基因表達(dá)的影響，科研人員需要檢測(cè)Wx基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA(Wx mRNA)的量。檢測(cè)時(shí)分別提取各品系胚乳中的總RNA，經(jīng)_過程獲得總cDNA。通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性地?cái)U(kuò)增出Wx基因的cDNA，原因是_。(4)各品系Wx mRNA量的檢測(cè)結(jié)果如圖所示，據(jù)圖推測(cè)糯性最強(qiáng)的品系為_，原因是_。解析(1)限制性核酸內(nèi)切酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；DNA連接酶能將DNA片段拼接起來。將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí)，需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與。轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。(2)啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。Wx基因啟動(dòng)子序列的改變影響了RNA聚合酶與啟動(dòng)子的識(shí)別和結(jié)合，從而改變了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平，使直鏈淀粉合成酶基因的表達(dá)量改變。根據(jù)題干信息可知，基因編輯系統(tǒng)是對(duì)啟動(dòng)子序列進(jìn)行定點(diǎn)編輯，由于編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動(dòng)子，所以與野生型水稻相比，3個(gè)突變品系中Wx基因控制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列沒有發(fā)生變化。(3)用提取的各品系胚乳中的總RNA合成總cDNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與。由于引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合，故通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性地?cái)U(kuò)增出Wx基因的cDNA。(4)mRNA是蛋白質(zhì)合成的直接模板，根據(jù)題圖分析可知，4個(gè)品系中品系3的Wx mRNA量最低，控制合成的直鏈淀粉合成酶最少，直鏈淀粉合成量最少，糯性最強(qiáng)。答案(1)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶轉(zhuǎn)化(2)RNA聚合酶與啟動(dòng)子的識(shí)別和結(jié)合不發(fā)生編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動(dòng)子(3)逆轉(zhuǎn)錄(或：反轉(zhuǎn)錄)引物是根據(jù)Wx基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的(或：引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合)(4)品系3品系3的Wx mRNA最少，控制合成的直鏈淀粉合成酶最少，直鏈淀粉合成量最少，糯性最強(qiáng)