2019年高中生物 單元測(cè)評(píng)一 基因工程 新人教版選修3.doc

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2019年高中生物 單元測(cè)評(píng)一 基因工程 新人教版選修3 (時(shí)間：90分鐘　滿分：100分) 一、選擇題(每題2分，共48分) 1．下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化，圖中依次表示限制核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確順序是(　　) A．①②③④ B．①②④③ C．①④②③ D．①④③② 解析　本題考查幾種工具酶的作用，解題關(guān)鍵是能正確區(qū)分各種酶的作用部位與特點(diǎn)。分析題圖可知，①是切割DNA分子雙鏈產(chǎn)生黏性末端的過(guò)程，用到的酶是限制性核酸內(nèi)切酶；②是末端連接的過(guò)程，需要DNA連接酶；③是DNA分子解旋的過(guò)程，需要解旋酶；④是DNA復(fù)制過(guò)程，需要DNA聚合酶。 答案　C 2．下列關(guān)于基因工程中有關(guān)基因操作的名詞及對(duì)應(yīng)的內(nèi)容，正確的組合是(　　) 解析　基因工程的供體是提供目的基因的生物，受體是目的基因?qū)氲纳铩? 答案　C 3．某線性DNA分子含有3 000個(gè)堿基對(duì)(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如下圖所示。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是(　　) A．在該DNA分子中，a酶與b酶的識(shí)別序列分別有3個(gè)和2個(gè) B. a酶與b酶切出的黏性末端不能相互連接 C. a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵不相同 D．用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)該DNA分子進(jìn)行反復(fù)切割、連接操作，若干循環(huán)后，序列會(huì)明顯增多 解析　a酶切割后形成3個(gè)片段，說(shuō)明a酶的切割位點(diǎn)有2個(gè)，則識(shí)別序列有2個(gè)。b酶切割a酶的切割產(chǎn)物后得到800 bp、300 bp的片段，說(shuō)明在a酶的產(chǎn)物中，1 600 bp中有一個(gè)切割位點(diǎn)，被切成兩個(gè)800 bp片段，1 100 bp中有一個(gè)切割位點(diǎn)，被切成800 bp片段和300 bp片段，即b酶的識(shí)別序列有2個(gè)。a酶與b酶切出的黏性末端可互補(bǔ)，因而能相互連接。a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵均為磷酸二酯鍵。a酶切割后形成的黏性末端 答案　D 4．在已知某小片段基因堿基序列的情況下，獲得該基因的最佳方法是(　　) A．用mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成DNA B．以4種脫氧核苷酸為原料人工合成 C．將供體DNA片段轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中，再進(jìn)一步篩選 D．先建立基因文庫(kù)，再?gòu)闹泻Y選 解析　本題考查目的基因的獲取方法，解題關(guān)鍵是理解不同獲取方法的特點(diǎn)。目的基因的獲取方法主要有三種：從基因文庫(kù)中獲取、PCR技術(shù)擴(kuò)增、人工合成。對(duì)于比較小、核苷酸序列已知的目的基因，可以直接通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法人工合成。 答案　B 5．我國(guó)中科院上海生化所合成了一種具有鎮(zhèn)痛作用而又不會(huì)像嗎啡那樣使病人上癮的藥物——腦啡肽多糖(類似于人體中的糖蛋白)。在人體細(xì)胞中糖蛋白必須經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的進(jìn)一步加工才能形成。如果要采用基因工程和發(fā)酵工程技術(shù)讓微生物來(lái)生產(chǎn)腦啡肽多糖，下列微生物能用來(lái)作受體細(xì)胞的是(　　) A．大腸桿菌 B．酵母菌 C．T4噬菌體 D．大腸桿菌質(zhì)粒 解析　腦啡肽多糖的化學(xué)本質(zhì)類似于人體中的糖蛋白。從題中可以看出，糖蛋白合成必須經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的進(jìn)一步加工，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體只存在于真核生物細(xì)胞內(nèi)，大腸桿菌是原核生物，只有核糖體，沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體；T4噬菌體屬于病毒，沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，自己不能合成蛋白質(zhì)；酵母菌是真核生物，其細(xì)胞中有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可以合成糖蛋白。 答案　B 6．下列有關(guān)基因表達(dá)的選項(xiàng)中，不可能的是(　　) 選項(xiàng) 基因 表達(dá)的細(xì)胞 表達(dá)產(chǎn)物 A 細(xì)菌抗蟲蛋白基因 抗蟲棉葉肉細(xì)胞 細(xì)菌抗蟲蛋白 B 人酪氨酸酶基因 正常人皮膚細(xì)胞 人酪氨酸酶 C 動(dòng)物胰島素基因 大腸桿菌工程菌細(xì)胞 動(dòng)物胰島素 D 兔血紅蛋白基因 兔成熟紅細(xì)胞 兔血紅蛋白 解析　本題通過(guò)基因表達(dá)的知識(shí)考查基因工程，解題關(guān)鍵是理解哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核。抗蟲棉葉肉細(xì)胞中存在細(xì)菌抗蟲蛋白基因，細(xì)菌抗蟲蛋白基因能夠表達(dá)產(chǎn)生細(xì)菌抗蟲蛋白；正常人皮膚細(xì)胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能夠表達(dá)產(chǎn)生人酪氨酸酶；大腸桿菌工程菌細(xì)胞存在動(dòng)物胰島素基因，動(dòng)物胰島素基因能夠表達(dá)產(chǎn)生動(dòng)物胰島素；兔成熟的紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核，所以不能表達(dá)產(chǎn)生兔血紅蛋白。 答案　D 7．阻止病人的致病基因傳給子代的方法通常是將正?；?qū)氩∪说?　　) A．體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì) B．生殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì) C．體細(xì)胞的細(xì)胞核 D．生殖細(xì)胞的細(xì)胞核 解析　本題考查基因治療和遺傳物質(zhì)在親代與子代之間的遺傳情況，解題時(shí)要注意，只有生殖細(xì)胞的細(xì)胞核中的基因能穩(wěn)定地遺傳給后代。 答案　D 8．下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物 B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶 C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性 D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá) 解析　基因工程中目的基因來(lái)源于自然界中的含有目的性狀的一切生物，可以是動(dòng)物、植物，也可以是真菌、細(xì)菌，還可以是人等；在基因工程中獲取目的基因以及將目的基因和載體結(jié)合構(gòu)成基因表達(dá)載體必須使用同一種限制酶進(jìn)行切割，以獲得相同的黏性末端，再在DNA連接酶的作用下，將目的基因和載體連接，構(gòu)成基因表達(dá)載體；人的胰島素原基因可以在大腸桿菌體內(nèi)得以表達(dá)，但是由于大腸桿菌是原核生物，沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器的加工，合成的胰島素原不具有胰島素的功能，即沒(méi)有生物活性；作為標(biāo)記基因，有利于重組基因在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的鑒定篩選，但對(duì)于目的基因的表達(dá)沒(méi)有促進(jìn)等調(diào)控作用。 答案　D 9．如圖所示有關(guān)工具酶功能的敘述，不正確的是(　　) A．連接b處的酶為RNA聚合酶 B．連接a處的酶為DNA連接酶 C．切斷b處的酶為解旋酶 D．切斷a處的酶為限制性核酸內(nèi)切酶 解析　從圖可以看出其為DNA片段，所以連接b處的酶不是RNA聚合酶。 答案　A 10．已知某種限制性核酸內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn)，如圖中箭頭所指。如果該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被酶切斷，則會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的DNA片段?，F(xiàn)有多個(gè)上述線性DNA分子，若在每個(gè)DNA分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷，則從理論上講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的DNA片段種類數(shù)是(　　) A．3種 B．4種 C．9種 D．12種 解析　本題考查限制酶的作用與識(shí)圖分析能力。若該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)切斷，得到4種長(zhǎng)度不同的DNA片段；若在2個(gè)酶切位點(diǎn)切斷，得到3種長(zhǎng)度不同的DNA片段；若在1個(gè)酶切位點(diǎn)切斷，得到2種長(zhǎng)度不同的DNA片段。因此最多能產(chǎn)生4＋3＋2＝9(種)長(zhǎng)度不同的DNA片段。 答案　C 11．在基因工程中，把選出的目的基因(共1 000個(gè)脫氧核苷酸對(duì)，其中腺嘌呤脫氧核苷酸460個(gè))放在DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是(　　) A．540個(gè) B．8 100個(gè) C．17 280個(gè) D．7 560個(gè) 解析　擴(kuò)增4代即擴(kuò)增4次，共產(chǎn)生新的DNA為(2n－1)個(gè)，即15個(gè)，其中每個(gè)DNA中含有的胞嘧啶為1 000－460＝540個(gè)，所以需要的胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)為15540＝8 100個(gè)。 答案　B 12．下列關(guān)于基因工程的敘述中錯(cuò)誤的是(　　) A．基因工程的出現(xiàn)使人類有可能按照自己的意愿定向改造生物，培育新品種 B．基因工程技術(shù)能沖破遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙，培育生物新物種 C．基因工程的基本工具是：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和基因的運(yùn)載體 D．基因工程的研究成果，目前大多需要通過(guò)微生物的旺盛代謝來(lái)實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化 解析　基因工程技術(shù)能沖破遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙，培育生物新類型，但改變的是少數(shù)基因，還不能稱為新物種。 答案　B 13．基因工程技術(shù)也稱為DNA重組技術(shù)，其實(shí)施必須具備四個(gè)必要的條件是(　　) A．目的基因、限制性內(nèi)切酶、運(yùn)載體、體細(xì)胞 B．重組DNA、RNA聚合酶、內(nèi)切酶、連接酶 C．模板DNA、信使RNA、質(zhì)粒、受體細(xì)胞 D．工具酶、目的基因、運(yùn)載體、受體細(xì)胞 解析　基因工程操作工程中用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，還有目的基因、運(yùn)載體、受體細(xì)胞。 答案　D 14．在基因工程技術(shù)中，限制性核酸內(nèi)切酶主要用于(　　) A．目的基因的獲取和導(dǎo)入 B．目的基因的導(dǎo)入和檢測(cè) C．目的基因的獲取和重組DNA分子 D．基因表達(dá)載體的構(gòu)建和導(dǎo)入 解析　限制性核酸內(nèi)切酶主要用于切割目的基因片斷和環(huán)狀雙鏈質(zhì)粒DNA。 答案　C 15．在基因工程操作中，運(yùn)載體的本質(zhì)是雙鏈DNA分子，下列功能不能由運(yùn)載體完成的是(　　) A．目的基因的轉(zhuǎn)運(yùn) B．目的基因的擴(kuò)增 C．目的基因的表達(dá) D．目的基因的定位 解析　目的基因的表達(dá)只與目的基因有關(guān)，即中心法則，與運(yùn)載體無(wú)關(guān)。 答案　C 16．如圖為四種限制性核酸內(nèi)切酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的識(shí)別序列。它們切割出來(lái)的DNA黏性末端可以互補(bǔ)配對(duì)的是 A．BamHⅠ和BglⅡ B．BamHⅠ和HindⅢ C．BamHⅠ和EcoRⅠ D．EcoRⅠ和HindⅢ 解析　只有互補(bǔ)的黏性末端才能配對(duì)。 答案　A 17．鐮刀型細(xì)胞貧血癥的病因是血紅蛋白基因的堿基序列發(fā)生了改變。檢測(cè)這種堿基序列改變必須使用的酶是(　　) A．解旋酶 B．DNA連接酶 C．限制性核酸內(nèi)切酶 D．RNA聚合酶 解析　鐮刀型細(xì)胞貧血癥的病因是編碼血紅蛋白的基因堿基序列發(fā)生了改變，而限制性核酸內(nèi)切酶具有特異性識(shí)別某種序列的特點(diǎn)。 答案　C 18．限制性核酸內(nèi)切酶的作用實(shí)際上就是把DNA上某些化學(xué)鍵打斷，一種能對(duì)GAATTC專一識(shí)別的限制酶切斷的化學(xué)鍵是(　　) A．G與A之間的鍵 B．G與C之間的鍵 C．T與A之間的鍵 D．磷酸與脫氧核糖之間的鍵 解析　限制性核酸內(nèi)切酶切割的是磷酸二酯鍵，因此切割的也就是磷酸與脫氧核糖之間的鍵。 答案　D 19．如圖是獲得抗蟲棉的技術(shù)流程示意圖。卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下列敘述正確的是(　　) A．構(gòu)建重組質(zhì)粒過(guò)程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 B．愈傷組織的分化產(chǎn)生了不同基因型的植株 C．卡那霉素抗性基因(kanr)中有該過(guò)程所利用的限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn) D．抗蟲棉有性生殖后代能保持抗蟲性狀的穩(wěn)定遺傳 答案　A 20．1982年，世界上第一例體型比普通小鼠大1.8倍的“超級(jí)小鼠”培育成功。下列相關(guān)敘述不正確的是(　　) A．該“超級(jí)小鼠”是采用顯微注射技術(shù)獲得成功的 B．將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法中采用最多，也是最有效的方法是顯微注射技術(shù) C．將目的基因?qū)胄∈蠹?xì)胞前要將含有該目的基因的運(yùn)載體提純 D．培育該“超級(jí)小鼠”所用的受體細(xì)胞可以是小鼠的受精卵，也可以是小鼠的體細(xì)胞 解析　高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，不能完全表現(xiàn)出來(lái)，所以培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物所用到的受體細(xì)胞只能用動(dòng)物的受精卵，不能用體細(xì)胞。 答案　D 21．下列不是獲得目的基因方法的是(　　) A．構(gòu)建基因文庫(kù)，從基因文庫(kù)中獲取 B．利用人工合成法 C．利用PCR技術(shù)大量獲得 D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得 解析　獲取目的基因的方法中對(duì)于已知基因用人工化學(xué)合成或PCR擴(kuò)增，對(duì)于未知基因則構(gòu)建基因文庫(kù)。 答案　D 22．水母發(fā)光蛋白由236個(gè)氨基酸構(gòu)成，其中有三種氨基酸構(gòu)成發(fā)光環(huán)，現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標(biāo)記。在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，這種蛋白質(zhì)的作用是(　　) A．促使目的基因成功導(dǎo)入宿主細(xì)胞中 B．使目的基因的成功導(dǎo)入容易被檢測(cè)出來(lái) C．使目的基因在宿主細(xì)胞中更容易復(fù)制 D．使目的基因更容易成功表達(dá) 解析　標(biāo)記基因的目的是便于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入成功。 答案　B 23．質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標(biāo)記基因(如圖所示)，通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況也不同，下表是外源基因插入位置(插入點(diǎn)有a、b、c)請(qǐng)根據(jù)表中提供細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，推測(cè)①②③三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn)，正確的一組是(　　) A．①是c；②是b；③是a B．①是a和b；②是a；③是b C．①是a和b；②是b；③是a D．①是c；②是a；③是b 解析　只有在抗性基因不被破壞的情況下，帶有重組DNA分子的細(xì)胞才能在含有相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。 答案　A 24．科學(xué)家將β干擾素基因進(jìn)行定點(diǎn)誘變導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)，使干擾素第17位的半胱氨酸改變成絲氨酸，結(jié)果大大提高β干擾素的抗病性活性，并且提高了儲(chǔ)存穩(wěn)定性。該生物技術(shù)為(　　) A．基因工程 B．蛋白質(zhì)工程 C．基因突變 D．細(xì)胞工程 解析　基因工程是通過(guò)對(duì)基因的操作，將符合人們需要的目的基因?qū)脒m宜的生物體內(nèi)，使其高效表達(dá)，從中提取所需的基因控制合成的蛋白質(zhì)，或表現(xiàn)某種性狀，蛋白質(zhì)產(chǎn)品仍然為天然存在的蛋白質(zhì)。而蛋白質(zhì)工程卻是對(duì)控制蛋白質(zhì)合成的基因進(jìn)行改造，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)其編碼的蛋白質(zhì)的改變，所得到的已不是天然的蛋白質(zhì)。題目中的操作涉及的基因顯然不再是原來(lái)的基因，其合成的β干擾素也不是天然β干擾素，而是經(jīng)過(guò)改造的、具有人類所需優(yōu)點(diǎn)的蛋白質(zhì)，因而整個(gè)過(guò)程利用的生物技術(shù)應(yīng)為蛋白質(zhì)工程。 答案　B 二、綜合題(52分) 25．(14分)轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻對(duì)于緩解糧食危機(jī)具有重要意義。 (1)轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻能有效地殺死特定害蟲，從而降低該種害蟲的________。能達(dá)到這個(gè)目的的手段還有：利用性引誘劑誘殺害蟲種群中的雄性個(gè)體，破壞害蟲種群正常的________；或者通過(guò)________進(jìn)行生物防治。 (2)在目的基因序列已知的情況下，如果要獲取豇豆細(xì)胞中的抗蟲基因，一般是采用________________________的方法。 (3)為了能把該抗病基因轉(zhuǎn)入到水稻細(xì)胞中，常用的載體是________________________________________________________________________。 (4)要使載體與該抗病基因連接，首先應(yīng)使用________________________酶進(jìn)行切割。假如載體被切割后得到的分子末端序列為，則能與該載體連接的抗病基因分子末端是________；切割完成后，采用________酶將載體與該抗病基因連接，連接后得到重組DNA。 (5)將連接得到的重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌，然后用該農(nóng)桿菌去感染水稻細(xì)胞，利用________的表達(dá)來(lái)檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入，再利用植物細(xì)胞具有的________進(jìn)行組織培養(yǎng)。 (6)基因工程成功的標(biāo)志是________的成功表達(dá)。 (7)如果目的基因?qū)氤晒Γ遗c某條染色體的DNA整合起來(lái)，則該轉(zhuǎn)基因水稻可視為雜合子。該轉(zhuǎn)基因水稻自交，理論上子代中抗蟲植株占________。 答案　(1)種群密度(種群數(shù)量)　性別比例　引入天敵 (2)化學(xué)合成法或PCR (3)Ti質(zhì)粒(植物根瘤土壤桿菌菌株中存在的質(zhì)粒) (4)(同種)限制性核酸內(nèi)切　　DNA連接 (5)標(biāo)記基因　全能性 (6)目的基因 (7)3/4 26．(15分)如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動(dòng)子，T為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。 據(jù)圖回答： (1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個(gè)DNA片段連接形成的產(chǎn)物有________________________、________________________、________________________三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行________________________。 (2)用上述3種連接產(chǎn)物與無(wú)任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是________________；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是__________________________________。 (3)目的基因表達(dá)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是________，其合成的產(chǎn)物是________。 (4)在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是________________。 解析　在基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程中用同種限制酶來(lái)切割目的基因和質(zhì)粒，使之產(chǎn)生相同的黏性末端，以利于DNA片段的連接。將切割后的目的基因和質(zhì)粒，用DNA連接酶進(jìn)行連接，它們之間隨機(jī)連接，可有三種產(chǎn)物：目的基因—載體連接物、載體—載體連接物和目的基因—目的基因連接物。從圖中可以看出，目的基因的插入位點(diǎn)在抗四環(huán)素基因上，可推知：目的基因—載體連接物的抗四環(huán)素基因被破壞，喪失了抗四環(huán)素的能力，但保留了抗青霉素的能力；載體—載體連接物既保留了抗四環(huán)素的能力也保留了抗青霉素的能力；目的基因—目的基因連接物既無(wú)抗青霉素基因也無(wú)抗四環(huán)素基因，不具備抗性。獲得DNA連接產(chǎn)物以后，必須通過(guò)篩選方能獲得所需的基因表達(dá)載體。導(dǎo)入宿主細(xì)胞后方能表達(dá)獲得基因產(chǎn)物。目的基因表達(dá)過(guò)程中，RNA聚合酶首先與啟動(dòng)子結(jié)合，指導(dǎo)目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA，mRNA再指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。從圖中可看出抗四環(huán)素基因上有兩個(gè)不同的切割位點(diǎn)，所以在實(shí)際操作過(guò)程中，為避免切割后的末端任意連接，可用EcoRⅠ和BamHⅠ同時(shí)對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，使同一切割產(chǎn)物的黏性末端不同。 答案　(1)目的基因—載體連接物　載體—載體連接物　目的基因—目的基因連接物　分離純化 (2)載體—載體連接物　目的基因—載體連接物、載體—載體連接物 (3)啟動(dòng)子　mRNA (4)EcoRⅠ和BamHⅠ 27．(12分)科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進(jìn)行基因工程的操作過(guò)程中，需使用特定的限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制性核酸內(nèi)切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—，據(jù)圖回答： (1)過(guò)程①所需要的酶是________。 (2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程中，應(yīng)用限制性核酸內(nèi)切酶________切割質(zhì)粒，用限制性核酸內(nèi)切酶________切割目的基因。用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體后形成的黏性末端通過(guò)________原則進(jìn)行連接。人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是__________________ _____________________________________________________。 (3)在過(guò)程③一般將受體大腸桿菌用________處理，以增大________的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn)入受體細(xì)胞。 (4)將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上得到如圖a的結(jié)果(黑點(diǎn)表示菌落)，能夠生長(zhǎng)的細(xì)菌中已導(dǎo)入了________________，反之則沒(méi)有導(dǎo)入；再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基a上，使絨布表面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖b的結(jié)果(空圈表示與a對(duì)照無(wú)菌落的位置)。與圖b空圈相對(duì)應(yīng)的圖a中的菌落表現(xiàn)型是________________________________________，這些細(xì)菌中導(dǎo)入了________。 (5)人體的生長(zhǎng)激素基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)是因?yàn)開(kāi)_______________。寫出目的基因?qū)爰?xì)菌中表達(dá)的過(guò)程________________________________________。 答案　(1)逆轉(zhuǎn)錄酶 (2)Ⅰ?、颉A基互補(bǔ)配對(duì)　人的基因與大腸桿菌DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)相同 (3)CaCl2　細(xì)胞壁 (4)普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)?！】拱逼S青霉素和四環(huán)素抗性　重組質(zhì)粒 (5)共用一套密碼子　生長(zhǎng)激素基因mRNA生長(zhǎng)激素 28．(11分)如圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程，據(jù)圖回答： (1)在基因工程中，A→B為_(kāi)_______技術(shù)，利用的原理是________，其中①為_(kāi)_______過(guò)程。 (2)加熱至94 ℃的目的是使DNA中的________鍵斷裂，這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)________的作用來(lái)完成的。 (3)當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板末端結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板鏈延伸，最終合成兩條DNA分子，此過(guò)程中原料是________________，遵循的原則是________________。 (4)目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞常用________________技術(shù)。 (5)B→D為抗蟲棉的培育過(guò)程，其中④過(guò)程常用的方法是__________________，要確定目的基因(抗蟲基因)導(dǎo)入受體細(xì)胞后，是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá)，需進(jìn)行檢測(cè)和鑒定工作，請(qǐng)寫出在個(gè)體生物學(xué)水平上的鑒定過(guò)程：__________________________。 答案　(1)PCR　DNA復(fù)制　DNA解旋 (2)氫　解旋酶 (3)4種脫氧核苷酸　堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 (4)顯微注射 (5)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法　讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉子，觀察害蟲的存活情況，以確定性狀