2019-2020年高考生物一輪規(guī)范訓(xùn)練 11.42微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(含解析).doc
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2019-2020年高考生物一輪規(guī)范訓(xùn)練 11.42微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(含解析) 1.白僵菌高孢粉是國家林業(yè)局推廣的高效生物殺蟲劑之一,應(yīng)用于多種林木和農(nóng)作物害蟲的防治。白僵菌分生孢子附著在寄主表皮、氣孔或消化道上,遇適宜條件開始萌發(fā),生出芽管。同時(shí)產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶、幾丁質(zhì)酶等溶解昆蟲的表皮,通過芽管入侵蟲體,在蟲體內(nèi)生長繁殖,消耗寄主體內(nèi)養(yǎng)分,產(chǎn)生各種毒素,形成大量菌絲和孢子,布滿蟲體全身。請回答下面的問題: (1)從自然菌樣中篩選較理想生產(chǎn)用菌種的一般步驟:采集菌樣―→富集培養(yǎng)―→________―→性能測定。白僵菌的菌樣應(yīng)從________處采集。 (2)分離白僵菌菌種的培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。在配制白僵菌培養(yǎng)基時(shí)常加入蔗糖、硫酸銨、硝酸鉀等成分,蔗糖屬于__________營養(yǎng)物質(zhì)。 (3)白僵菌純培養(yǎng)常用的接種方法是______________和______________。 (4)分離與培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基和接種工具都要進(jìn)行______處理,利用高溫可以使微生物的__________等物質(zhì)發(fā)生變性。 【答案】(1)純種分離 感病昆蟲 (2)選擇 碳源 (3)平板劃線法 稀釋涂布平板法(或稀釋混合平板法) (4)滅菌 蛋白質(zhì)和核酸 【解析】(2)選擇培養(yǎng)基用于選擇分離菌種。蔗糖屬于微生物的碳源。(4)微生物分離培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基、接種工具都要進(jìn)行滅菌處理,其原理是高溫使蛋白質(zhì)、核酸變性而使細(xì)胞失去活性。 2.(xx長沙模擬)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后,進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下: →→→→ 請回答: (1)在配制培養(yǎng)基時(shí),要加入尿素和酚紅指示劑,這是因?yàn)镠p含有________,它能以尿素作為氮源;若有Hp,則菌落周圍會出現(xiàn)______色環(huán)帶。 (2)下列對尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是____滅菌。 A.高壓蒸汽 B.紫外燈照射 C.70%酒精浸泡 D.過濾 (3)步驟X表示________。在無菌條件下操作時(shí),先將菌液稀釋,然后將菌液__________到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得__________菌落。 (4)在培養(yǎng)時(shí),需將培養(yǎng)皿倒置并放在____________中。若不倒置培養(yǎng),將導(dǎo)致__________________。 (5)臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測人體是否感染Hp,其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的______________分解為NH3和14CO2。 【答案】(1)脲酶 紅 (2)D (3)接種 涂布 單 (4)恒溫培養(yǎng)箱 無法形成單菌落 (5)尿素 【解析】(1)幽門螺桿菌含有脲酶,能分解尿素為菌體提供氮源,因此在配制培養(yǎng)基時(shí)要加入尿素;加入酚紅指示劑的目的是檢驗(yàn)是否有Hp存在,若有Hp存在會分解尿素,培養(yǎng)基pH會升高,酚紅指示劑將變紅。(2)由于尿素在高溫下會分解,所以對尿素溶液的滅菌要采用G6玻璃漏斗過濾的方法。(3)在實(shí)驗(yàn)操作過程中要先滅菌、倒平板,再進(jìn)行接種。接種時(shí)先將菌液稀釋,以獲得單菌落,再涂布到培養(yǎng)基平面上。(4)培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫箱中培養(yǎng), 倒置培養(yǎng)的目的也是為了獲得單一菌落。(5)如果人體感染了Hp,能將尿素分解為NH3和CO2,因而標(biāo)記尿素中的C,可通過呼吸產(chǎn)物來判斷是否感染Hp。 3.科學(xué)家利用基因工程技術(shù)成功地將人的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌體內(nèi),生產(chǎn)出人的胰島素。在該過程中用質(zhì)粒作為載體,已知質(zhì)粒上含有抗氨芐青霉素(簡稱氨芐)和抗四環(huán)素的基因(位于不同區(qū)段),目的基因與質(zhì)粒的結(jié)合位點(diǎn)剛好位于抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)內(nèi),且受體大腸桿菌體內(nèi)不含質(zhì)粒,也不含質(zhì)粒上的抗藥基因。導(dǎo)入完成后,實(shí)際上在得到的大腸桿菌中,有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒,有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒,只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。某科研機(jī)構(gòu)想從培養(yǎng)基上篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌(即“目的菌種”),他們設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)方案: 第一步:將得到的大腸桿菌接種在含__________的培養(yǎng)基上,篩選出含有質(zhì)粒的大腸桿菌。 第二步:為選出“目的菌種”,將第一步篩選出的大腸桿菌用“影印法”分離。 (1)采用涂布平板法,將第一步篩選出的大腸桿菌以合適的稀釋度涂布到含________質(zhì)粒的大腸桿菌和含________質(zhì)粒的大腸桿菌都能生長的培養(yǎng)基上,經(jīng)培養(yǎng)后形成單菌落,如圖B所示。 (2)通過消毒的“印章”(如圖A所示),將培養(yǎng)基上的菌落分別按原位印到下圖所示的非選擇培養(yǎng)基________和選擇培養(yǎng)基________上(順序不能顛倒,C培養(yǎng)基成分與B相同,D上含有氨芐青霉素)。 (3)培養(yǎng)后對照觀察C、D培養(yǎng)基上的單菌落。 (4)在C培養(yǎng)基上挑取D培養(yǎng)基上____________的位置上的單菌落,從而獲得含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,即“目的菌種”。 【答案】四環(huán)素 (1)普通 重組 (2)C D (4)不長菌落 【解析】因?yàn)槟康幕蚺c質(zhì)粒的結(jié)合位點(diǎn)剛好位于抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)內(nèi),因此重組質(zhì)粒只含有完整的抗四環(huán)素的基因,含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌可以在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。C培養(yǎng)基不含氨芐青霉素,D培養(yǎng)基含有氨芐青霉素。故“目的菌種”可在C培養(yǎng)基上生長,而D培養(yǎng)基相應(yīng)位置上無菌落產(chǎn)生。 4.某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟如下,請給予合理的補(bǔ)充。 (1)采樣與培養(yǎng):將采集的土樣混勻后稱取1 g,置于經(jīng)過滅菌處理的__________________ (填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中,28 ℃振蕩培養(yǎng)。 (2)接種與選擇:為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高,需將培養(yǎng)液進(jìn)行__________處理。之后,將菌液涂布接種于以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,30 ℃條件下培養(yǎng)。為避免污染,需將培養(yǎng)皿呈________狀態(tài)放置。此外,為排除其他因素的影響,提高實(shí)驗(yàn)可信度,本步驟需設(shè)計(jì)________________作為空白對照。 (3)篩選與純化:將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍,如果菌落周圍的現(xiàn)象是________,則說明此種菌能夠________________。從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株,采用________法接種于新的培養(yǎng)基平板,可對菌株進(jìn)行進(jìn)一步純化。 【答案】(1)液體 (2)系統(tǒng)稀釋(或“梯度稀釋”) 淀粉 倒置 未接種的空白培養(yǎng)基(或“接種等量無菌水的培養(yǎng)基”) (3)出現(xiàn)透明圈 分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解 平板劃線 【解析】(1)因?yàn)楹竺嬉M(jìn)行涂布,所以應(yīng)該用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)。(2)減小培養(yǎng)液菌體濃度一般用稀釋方法。由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌,所以培養(yǎng)基就應(yīng)只以淀粉為碳源。倒置可以減少培養(yǎng)基污染,為排除其他因素影響,需要設(shè)置來接種的空白的培養(yǎng)基作對照組。(3)淀粉被水解,培養(yǎng)基會出現(xiàn)透明圈的現(xiàn)象。用平板劃線法來培養(yǎng),可進(jìn)一步純化菌種。 5.某化工廠的污水池中,含有一種有害的、難于降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示。請分析回答問題: (1)接種前需要對培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿等進(jìn)行滅菌,常用的滅菌方法是________。培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選__________。 (2)實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌”的代謝類型是________。 (3)培養(yǎng)若干天后,應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量________的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌”的數(shù)量__________。 (4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí),為獲得單菌落進(jìn)行繼續(xù)篩選,常采用平板劃線法或______________法,接種后,應(yīng)將培養(yǎng)皿______(填“正放”或“倒置”)。 (5)下列有關(guān)平板劃線操作的敘述,錯(cuò)誤的是( ) A.在操作的第一步以及每次劃線之前都要將接種環(huán)放在火焰上灼燒 B.將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液 C.蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行 D.劃線時(shí)要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連 (6)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行________處理后,才能倒掉。 (7)若用水葫蘆來去除該污染物,是否可行?為什么? ________________________________________________________________________。 【答案】(1)高壓蒸汽滅菌法 目的菌 (2)異養(yǎng)需氧型 (3)減少 增加 (4)稀釋涂布平板 倒置 (5)D (6)滅菌 (7)否。水葫蘆會造成外來物種的入侵 【解析】培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿等常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法;培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選到能降解化合物A的目的菌;振蕩培養(yǎng)可以增加培養(yǎng)液中的氧含量,再依據(jù)培養(yǎng)液中含有有機(jī)化合物可以推出“目的菌”的代謝類型是異養(yǎng)需氧型;培養(yǎng)若干天后,應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng),目的是使“目的菌”的數(shù)量增加;轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí),為獲得單菌落進(jìn)行繼續(xù)篩選,常采用平板劃線法或稀釋涂布平板法,接種后,應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置,以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染;利用平板劃線法獲得單菌落,劃線時(shí)不能將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連,這樣做不能得到單個(gè)菌落;實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后,才能倒掉,以防止污染環(huán)境;用水葫蘆來去除該污染物是不可取的,因?yàn)樗J會造成外來物種的入侵。 6.(xx中山模擬)為了探究土壤中的微生物對尿素是否有分解作用,設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示,實(shí)驗(yàn)步驟如下圖所示。請分析回答問題。 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1 g 10 g 15 g 將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1 000 mL (1)簡述土壤中可分解尿素的細(xì)菌的鑒定方法及原理:_______________________ ___________________________________________________________________________。 (2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選________,這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________,實(shí)驗(yàn)中需要振蕩培養(yǎng),原因是______________________________________________。 (4)轉(zhuǎn)入固體培養(yǎng)基時(shí),常采用________________接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (5)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行________處理后,才能倒掉。 【答案】(1)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH升高,使酚紅指示劑變?yōu)榧t色 (2)目的菌 選擇 (3)尿素 葡萄糖 為目的菌提供氧氣 (4)稀釋涂布平板法(或平板劃線法) (5)滅菌 【解析】尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源,因此原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠在此培養(yǎng)基上生長。由于細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH升高,故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑將變成紅色;這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,可篩選目的菌;目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的尿素和葡萄糖;振蕩培養(yǎng)的目的是提供氧氣;固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)的接種方法常用稀釋涂布平板法或平板劃線法;倒掉培養(yǎng)基之前應(yīng)對其進(jìn)行滅菌處理。- 1.請仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對于不預(yù)覽、不比對內(nèi)容而直接下載帶來的問題本站不予受理。
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