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組織胚胎學(xué) 緒論

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組織胚胎學(xué) 緒論

組織學(xué)組織學(xué) 緒論緒論組胚教研室:劉玉榮組胚教研室:劉玉榮第一章組織學(xué)緒論提提 要要 組織學(xué)的內(nèi)容和意義組織學(xué)的內(nèi)容和意義 組織學(xué)發(fā)展史和當(dāng)代組織學(xué)組織學(xué)發(fā)展史和當(dāng)代組織學(xué) 組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法 組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介一、組織學(xué)的內(nèi)容和意義一、組織學(xué)的內(nèi)容和意義人體解剖學(xué)人體解剖學(xué)光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡 放大放大40倍倍 組織學(xué)研究哪些內(nèi)容?組織學(xué)研究哪些內(nèi)容?放大放大400倍倍細(xì)胞細(xì)胞什么是組織? 細(xì)胞群+細(xì)胞外基質(zhì)上皮組織上皮組織結(jié)締組織結(jié)締組織肌組織肌組織神經(jīng)組織神經(jīng)組織:四大基本組織以不同的種類、數(shù)量和方式組合形成器官。:四大基本組織以不同的種類、數(shù)量和方式組合形成器官。 器官器官小腸HE切片組組 織織學(xué)好組織學(xué)的意義學(xué)好組織學(xué)的意義 促進(jìn)了生理學(xué)的進(jìn)步促進(jìn)了生理學(xué)的進(jìn)步 是病理學(xué)的基礎(chǔ)是病理學(xué)的基礎(chǔ) 促進(jìn)人類對(duì)自身的深入了解促進(jìn)人類對(duì)自身的深入了解二、組織學(xué)發(fā)展史和當(dāng)代組織學(xué)二、組織學(xué)發(fā)展史和當(dāng)代組織學(xué)1、光學(xué)顯微鏡、光學(xué)顯微鏡簡(jiǎn)稱光鏡(簡(jiǎn)稱光鏡(light microscope,LM) 1590年前后,荷蘭眼鏡年前后,荷蘭眼鏡匠詹森(匠詹森(H.Janssen)發(fā))發(fā)明了世界上第一臺(tái)光學(xué)顯明了世界上第一臺(tái)光學(xué)顯微鏡微鏡 。 1665年英國(guó)科學(xué)家羅伯年英國(guó)科學(xué)家羅伯特特胡克改進(jìn)了復(fù)式顯微鏡,胡克改進(jìn)了復(fù)式顯微鏡,并發(fā)現(xiàn)了植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)。并發(fā)現(xiàn)了植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)。cell 意大利人馬爾比基觀意大利人馬爾比基觀察了脾、肺、腎、表察了脾、肺、腎、表皮;皮; 列文虎克發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞、列文虎克發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞、精子、肌纖維;精子、肌纖維; 格拉夫發(fā)現(xiàn)卵泡格拉夫發(fā)現(xiàn)卵泡 1801 年比沙提出年比沙提出“組組織織”概念概念精子涂片精子涂片卵泡光鏡圖卵泡光鏡圖紅細(xì)胞血涂片紅細(xì)胞血涂片提出:施萬、施萊登(提出:施萬、施萊登(1838、1839)內(nèi)容:細(xì)胞是一切動(dòng)、植物體的基本結(jié)構(gòu)內(nèi)容:細(xì)胞是一切動(dòng)、植物體的基本結(jié)構(gòu)和功能單位;細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行著復(fù)雜的化學(xué)反和功能單位;細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行著復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng);新細(xì)胞由原有細(xì)胞產(chǎn)生應(yīng);新細(xì)胞由原有細(xì)胞產(chǎn)生2、細(xì)胞學(xué)說、細(xì)胞學(xué)說3、電子顯微鏡、電子顯微鏡簡(jiǎn)稱電鏡(簡(jiǎn)稱電鏡(electron microscope, EM) 發(fā)明:發(fā)明:1932 年年 盧斯卡、盧斯卡、科諾爾,使分辨率提高到科諾爾,使分辨率提高到 0.2nm 超薄切片術(shù)(超薄切片術(shù)(5080nm) 超微結(jié)構(gòu)超微結(jié)構(gòu)(ultrastructure):即細(xì)):即細(xì)胞膜、細(xì)胞器、染色體等胞膜、細(xì)胞器、染色體等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)4、當(dāng)代組織學(xué)、當(dāng)代組織學(xué) 新儀器、新技術(shù)的發(fā)明和應(yīng)用新儀器、新技術(shù)的發(fā)明和應(yīng)用 免疫組織化學(xué)技術(shù)、原位雜交技術(shù)將組免疫組織化學(xué)技術(shù)、原位雜交技術(shù)將組織學(xué)引入分子水平織學(xué)引入分子水平 組織工程學(xué)技術(shù)拓展了組織學(xué)的臨床應(yīng)組織工程學(xué)技術(shù)拓展了組織學(xué)的臨床應(yīng)用前景用前景1.1. 審視角度審視角度 組織水平組織水平:層次順序、特征性結(jié)構(gòu)和細(xì)胞:層次順序、特征性結(jié)構(gòu)和細(xì)胞 細(xì)胞水平細(xì)胞水平:主要細(xì)胞的分布、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)(含重要細(xì)胞:主要細(xì)胞的分布、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)(含重要細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu))及功能的超微結(jié)構(gòu))及功能2. 形態(tài)和結(jié)構(gòu)相統(tǒng)一形態(tài)和結(jié)構(gòu)相統(tǒng)一 結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ),功能是結(jié)構(gòu)的必然表現(xiàn)結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ),功能是結(jié)構(gòu)的必然表現(xiàn)3.3.培養(yǎng)培養(yǎng)觀察能力:觀察能力:重視實(shí)習(xí)課和圖像觀察重視實(shí)習(xí)課和圖像觀察 培養(yǎng)空間思維能力:將二維圖形還原為三維構(gòu)像培養(yǎng)空間思維能力:將二維圖形還原為三維構(gòu)像三、如何學(xué)好組織學(xué)三、如何學(xué)好組織學(xué)四、組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介四、組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介(一)光鏡技術(shù)(一)光鏡技術(shù) 石蠟切片術(shù)石蠟切片術(shù)(paraffin sectioning):):取材、固定、脫取材、固定、脫水、包埋、切片(水、包埋、切片(5 10 m 厚)、染色厚)、染色 蘇木精蘇木精- 伊紅染色法伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining, HE染色法染色法):):蘇木精為堿性染料,使染色質(zhì)和核糖體著蘇木精為堿性染料,使染色質(zhì)和核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,使胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)著紅紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,使胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)著紅色色 嗜酸性嗜酸性(acidophilia) ): 易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu)易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu) 嗜堿性嗜堿性(basophilia) ):易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu)易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu) 特殊染色特殊染色 HE HE染色,垂體遠(yuǎn)側(cè)部染色,垂體遠(yuǎn)側(cè)部(二(二 )電鏡技術(shù))電鏡技術(shù)1、透射電鏡術(shù)、透射電鏡術(shù)(transmission electron microscopy, TEM) 用于觀察組織細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)用于觀察組織細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu) 戊二醛、鋨酸雙重固定戊二醛、鋨酸雙重固定樹脂包埋樹脂包埋超薄切片(超薄切片(50 80nm 厚)厚)電子染色(醋酸鈾、檸檬酸鉛)電子染色(醋酸鈾、檸檬酸鉛) 根據(jù)電子束在不同結(jié)構(gòu)上被散射程度的差異表現(xiàn)為根據(jù)電子束在不同結(jié)構(gòu)上被散射程度的差異表現(xiàn)為電子密度高(黑或深灰色)和電子密度低(淺灰色)電子密度高(黑或深灰色)和電子密度低(淺灰色)透射電鏡圖,漿細(xì)胞透射電鏡圖,漿細(xì)胞2、掃描電鏡術(shù)、掃描電鏡術(shù)(scanning electron microscopy, SEM) 用于觀察組織細(xì)胞表面結(jié)構(gòu),具有真實(shí)的用于觀察組織細(xì)胞表面結(jié)構(gòu),具有真實(shí)的立體感,無需制備切片立體感,無需制備切片圖圖8 8 掃描電鏡掃描電鏡圖圖,血細(xì)胞,血細(xì)胞 1、一般組織化學(xué)術(shù):一般組織化學(xué)術(shù):組織中的某種結(jié)構(gòu)成分與所加試劑發(fā)組織中的某種結(jié)構(gòu)成分與所加試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)、并呈現(xiàn)某種顏色,在顯微鏡下可觀察到。生化學(xué)反應(yīng)、并呈現(xiàn)某種顏色,在顯微鏡下可觀察到。糖類:糖類: PAS(過碘酸(過碘酸-希夫)反應(yīng),顯示多糖和糖蛋白,呈希夫)反應(yīng),顯示多糖和糖蛋白,呈紫紅色。紫紅色。 (三)組織化學(xué)術(shù)(三)組織化學(xué)術(shù)過碘酸過碘酸紫紅色的反應(yīng)產(chǎn)物紫紅色的反應(yīng)產(chǎn)物糖糖 多醛多醛品紅硫酸復(fù)合物品紅硫酸復(fù)合物 (希夫試劑,無色)(希夫試劑,無色)圖圖9 PAS9 PAS反應(yīng),小腸上皮杯狀細(xì)胞的黏原顆粒反應(yīng),小腸上皮杯狀細(xì)胞的黏原顆粒2 2、免疫組織化學(xué)術(shù)、免疫組織化學(xué)術(shù):圖圖10 10 免疫組織化學(xué)原理模式圖免疫組織化學(xué)原理模式圖圖圖11 11 免疫組織化學(xué)(熒光素標(biāo)記)免疫組織化學(xué)(熒光素標(biāo)記)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈vWFvWF陽性陽性 圖圖12 12 免疫組織化學(xué)(辣根過氧化物酶標(biāo)記免疫組織化學(xué)(辣根過氧化物酶標(biāo)記)胰島胰島B B細(xì)胞呈胰島素陽性細(xì)胞呈胰島素陽性圖圖13 13 免疫組織化學(xué)電鏡免疫組織化學(xué)電鏡圖圖示上皮細(xì)胞膜示上皮細(xì)胞膜MAMMAM6 6蛋白蛋白 (A A 膠體金標(biāo)記膠體金標(biāo)記 B B 辣根過氧化物酶標(biāo)記)辣根過氧化物酶標(biāo)記)圖圖14 14 原位雜交原位雜交 主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞呈彈性蛋白主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞呈彈性蛋白mRNAmRNA陽性陽性即核酸分子雜交組織化學(xué)術(shù),檢測(cè)基因(即核酸分子雜交組織化學(xué)術(shù),檢測(cè)基因(DNA片段)的有無、基因的表達(dá)活性(片段)的有無、基因的表達(dá)活性(mRNA)3、原位雜交術(shù)、原位雜交術(shù)圖圖17 17 體外培養(yǎng)的體外培養(yǎng)的HeLaHeLa細(xì)胞相差顯微鏡圖細(xì)胞相差顯微鏡圖4、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)圖圖18 18 體外培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞 (免疫組織化學(xué)染色顯示肌動(dòng)蛋白)(免疫組織化學(xué)染色顯示肌動(dòng)蛋白)圖圖19 19 實(shí)驗(yàn)中的組織工程耳實(shí)驗(yàn)中的組織工程耳5、組織工程、組織工程

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