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1、組織學組織學 緒論緒論組胚教研室：劉玉榮組胚教研室：劉玉榮第一章組織學緒論提提 要要 組織學的內(nèi)容和意義組織學的內(nèi)容和意義 組織學發(fā)展史和當代組織學組織學發(fā)展史和當代組織學 組織學的學習方法組織學的學習方法 組織學技術(shù)簡介組織學技術(shù)簡介一、組織學的內(nèi)容和意義一、組織學的內(nèi)容和意義人體解剖學人體解剖學光學顯微鏡光學顯微鏡 放大放大40倍倍 組織學研究哪些內(nèi)容？組織學研究哪些內(nèi)容？放大放大400倍倍細胞細胞什么是組織？ 細胞群+細胞外基質(zhì)上皮組織上皮組織結(jié)締組織結(jié)締組織肌組織肌組織神經(jīng)組織神經(jīng)組織：四大基本組織以不同的種類、數(shù)量和方式組合形成器官。：四大基本組織以不同的種類、數(shù)量和方式組合形成器官
2、。 器官器官小腸HE切片組組 織織學好組織學的意義學好組織學的意義 促進了生理學的進步促進了生理學的進步 是病理學的基礎(chǔ)是病理學的基礎(chǔ) 促進人類對自身的深入了解促進人類對自身的深入了解二、組織學發(fā)展史和當代組織學二、組織學發(fā)展史和當代組織學1、光學顯微鏡、光學顯微鏡簡稱光鏡（簡稱光鏡（light microscope，LM） 1590年前后，荷蘭眼鏡年前后，荷蘭眼鏡匠詹森（匠詹森（H.Janssen）發(fā)）發(fā)明了世界上第一臺光學顯明了世界上第一臺光學顯微鏡微鏡 。 1665年英國科學家羅伯年英國科學家羅伯特特胡克改進了復式顯微鏡，胡克改進了復式顯微鏡，并發(fā)現(xiàn)了植物細胞結(jié)構(gòu)。并發(fā)現(xiàn)了植物細胞結(jié)構(gòu)。
3、cell 意大利人馬爾比基觀意大利人馬爾比基觀察了脾、肺、腎、表察了脾、肺、腎、表皮；皮； 列文虎克發(fā)現(xiàn)紅細胞、列文虎克發(fā)現(xiàn)紅細胞、精子、肌纖維；精子、肌纖維； 格拉夫發(fā)現(xiàn)卵泡格拉夫發(fā)現(xiàn)卵泡 1801 年比沙提出年比沙提出“組組織織”概念概念精子涂片精子涂片卵泡光鏡圖卵泡光鏡圖紅細胞血涂片紅細胞血涂片提出：施萬、施萊登（提出：施萬、施萊登（1838、1839）內(nèi)容：細胞是一切動、植物體的基本結(jié)構(gòu)內(nèi)容：細胞是一切動、植物體的基本結(jié)構(gòu)和功能單位；細胞內(nèi)進行著復雜的化學反和功能單位；細胞內(nèi)進行著復雜的化學反應；新細胞由原有細胞產(chǎn)生應；新細胞由原有細胞產(chǎn)生2、細胞學說、細胞學說3、電子顯微鏡、電子顯微
4、鏡簡稱電鏡（簡稱電鏡（electron microscope, EM） 發(fā)明：發(fā)明：1932 年年 盧斯卡、盧斯卡、科諾爾，使分辨率提高到科諾爾，使分辨率提高到 0.2nm 超薄切片術(shù)（超薄切片術(shù)（5080nm） 超微結(jié)構(gòu)超微結(jié)構(gòu)（ultrastructure）：即細）：即細胞膜、細胞器、染色體等胞膜、細胞器、染色體等亞細胞結(jié)構(gòu)亞細胞結(jié)構(gòu)4、當代組織學、當代組織學 新儀器、新技術(shù)的發(fā)明和應用新儀器、新技術(shù)的發(fā)明和應用 免疫組織化學技術(shù)、原位雜交技術(shù)將組免疫組織化學技術(shù)、原位雜交技術(shù)將組織學引入分子水平織學引入分子水平 組織工程學技術(shù)拓展了組織學的臨床應組織工程學技術(shù)拓展了組織學的臨床應用前景用
5、前景1.1. 審視角度審視角度 組織水平組織水平：層次順序、特征性結(jié)構(gòu)和細胞：層次順序、特征性結(jié)構(gòu)和細胞 細胞水平細胞水平：主要細胞的分布、結(jié)構(gòu)特點（含重要細胞：主要細胞的分布、結(jié)構(gòu)特點（含重要細胞的超微結(jié)構(gòu)）及功能的超微結(jié)構(gòu)）及功能2. 形態(tài)和結(jié)構(gòu)相統(tǒng)一形態(tài)和結(jié)構(gòu)相統(tǒng)一 結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)，功能是結(jié)構(gòu)的必然表現(xiàn)結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)，功能是結(jié)構(gòu)的必然表現(xiàn)3.3.培養(yǎng)培養(yǎng)觀察能力：觀察能力：重視實習課和圖像觀察重視實習課和圖像觀察 培養(yǎng)空間思維能力：將二維圖形還原為三維構(gòu)像培養(yǎng)空間思維能力：將二維圖形還原為三維構(gòu)像三、如何學好組織學三、如何學好組織學四、組織學技術(shù)簡介四、組織學技術(shù)簡介（一）光鏡技術(shù)（
6、一）光鏡技術(shù) 石蠟切片術(shù)石蠟切片術(shù)（paraffin sectioning）：）：取材、固定、脫取材、固定、脫水、包埋、切片（水、包埋、切片（5 10 m 厚）、染色厚）、染色 蘇木精蘇木精- 伊紅染色法伊紅染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法染色法）：）：蘇木精為堿性染料，使染色質(zhì)和核糖體著蘇木精為堿性染料，使染色質(zhì)和核糖體著紫藍色；伊紅為酸性染料，使胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)著紅紫藍色；伊紅為酸性染料，使胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)著紅色色 嗜酸性嗜酸性（acidophilia) )： 易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu)易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu) 嗜堿性嗜堿性(basophilia) )：
7、易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu)易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu) 特殊染色特殊染色 HE HE染色，垂體遠側(cè)部染色，垂體遠側(cè)部（二（二 ）電鏡技術(shù)）電鏡技術(shù)1、透射電鏡術(shù)、透射電鏡術(shù)（transmission electron microscopy, TEM） 用于觀察組織細胞的超微結(jié)構(gòu)用于觀察組織細胞的超微結(jié)構(gòu) 戊二醛、鋨酸雙重固定戊二醛、鋨酸雙重固定樹脂包埋樹脂包埋超薄切片（超薄切片（50 80nm 厚）厚）電子染色（醋酸鈾、檸檬酸鉛）電子染色（醋酸鈾、檸檬酸鉛） 根據(jù)電子束在不同結(jié)構(gòu)上被散射程度的差異表現(xiàn)為根據(jù)電子束在不同結(jié)構(gòu)上被散射程度的差異表現(xiàn)為電子密度高（黑或深灰色）和電子密度低（淺灰色）電子密度高（
8、黑或深灰色）和電子密度低（淺灰色）透射電鏡圖，漿細胞透射電鏡圖，漿細胞2、掃描電鏡術(shù)、掃描電鏡術(shù)（scanning electron microscopy, SEM） 用于觀察組織細胞表面結(jié)構(gòu)，具有真實的用于觀察組織細胞表面結(jié)構(gòu)，具有真實的立體感，無需制備切片立體感，無需制備切片圖圖8 8 掃描電鏡掃描電鏡圖圖，血細胞，血細胞 1、一般組織化學術(shù)：一般組織化學術(shù)：組織中的某種結(jié)構(gòu)成分與所加試劑發(fā)組織中的某種結(jié)構(gòu)成分與所加試劑發(fā)生化學反應、并呈現(xiàn)某種顏色，在顯微鏡下可觀察到。生化學反應、并呈現(xiàn)某種顏色，在顯微鏡下可觀察到。糖類：糖類： PAS（過碘酸（過碘酸-希夫）反應，顯示多糖和糖蛋白，呈希夫
9、）反應，顯示多糖和糖蛋白，呈紫紅色。紫紅色。 （三）組織化學術(shù)（三）組織化學術(shù)過碘酸過碘酸紫紅色的反應產(chǎn)物紫紅色的反應產(chǎn)物糖糖 多醛多醛品紅硫酸復合物品紅硫酸復合物 （希夫試劑，無色）（希夫試劑，無色）圖圖9 PAS9 PAS反應，小腸上皮杯狀細胞的黏原顆粒反應，小腸上皮杯狀細胞的黏原顆粒2 2、免疫組織化學術(shù)、免疫組織化學術(shù)：圖圖10 10 免疫組織化學原理模式圖免疫組織化學原理模式圖圖圖11 11 免疫組織化學（熒光素標記）免疫組織化學（熒光素標記）毛細血管內(nèi)皮細胞呈毛細血管內(nèi)皮細胞呈vWFvWF陽性陽性 圖圖12 12 免疫組織化學（辣根過氧化物酶標記免疫組織化學（辣根過氧化物酶標記）胰
10、島胰島B B細胞呈胰島素陽性細胞呈胰島素陽性圖圖13 13 免疫組織化學電鏡免疫組織化學電鏡圖圖示上皮細胞膜示上皮細胞膜MAMMAM6 6蛋白蛋白 （A A 膠體金標記膠體金標記 B B 辣根過氧化物酶標記）辣根過氧化物酶標記）圖圖14 14 原位雜交原位雜交 主動脈平滑肌細胞呈彈性蛋白主動脈平滑肌細胞呈彈性蛋白mRNAmRNA陽性陽性即核酸分子雜交組織化學術(shù)，檢測基因（即核酸分子雜交組織化學術(shù)，檢測基因（DNA片段）的有無、基因的表達活性（片段）的有無、基因的表達活性（mRNA）3、原位雜交術(shù)、原位雜交術(shù)圖圖17 17 體外培養(yǎng)的體外培養(yǎng)的HeLaHeLa細胞相差顯微鏡圖細胞相差顯微鏡圖4、細胞培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)圖圖18 18 體外培養(yǎng)的平滑肌細胞體外培養(yǎng)的平滑肌細胞 （免疫組織化學染色顯示肌動蛋白）（免疫組織化學染色顯示肌動蛋白）圖圖19 19 實驗中的組織工程耳實驗中的組織工程耳5、組織工程、組織工程
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