病原微生物支原體PPT課件

1食入未經(jīng)消毒的羊奶，最有可能引起的病是 A結(jié)核 B波浪熱 C破傷風(fēng) D肉毒中毒 E傷寒 2菌體呈卵圓形，兩端濃染的細(xì)菌是 A炭疽桿菌 B白喉棒狀桿菌 C結(jié)核分枝桿菌 D鼠疫桿菌 E傷寒沙門菌,3鼠疫桿菌在肉湯培養(yǎng)液中生長不能形成 A混濁生長 B絮狀沉淀 C形成菌膜 D鐘乳石狀下沉 E顆粒狀沉淀4.5歲患兒，發(fā)燒、咽痛、咳嗽5天急診入院。免疫接種史不祥。查體：咽后壁、鄂弓和懸雍垂等處發(fā)現(xiàn)灰白色膜狀物，用滅菌棉拭子不易擦掉。初步診斷為 A白喉 B急性喉炎 C病毒性咽炎 D扁桃腺炎 E支氣管炎,微生物的種類,性 狀,非細(xì)胞型,原核細(xì)胞型,真核細(xì)胞型,細(xì) 胞 型,測量單位,nm（最小）,核 酸,DNA or RNA,DNA & RNA,DNA & RNA,細(xì)胞結(jié)構(gòu),僅有原始核質(zhì)， 無核膜或核仁； 細(xì)胞器很不完善，只有核蛋白體,種 類,病 毒 類病毒 朊 粒,細(xì)菌、放線菌、 支原體、衣原體、立克次體、螺旋體（二菌四體）,真菌,m,沒有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長繁殖,m,細(xì)胞核分化程度高，有核膜和核仁；細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器完整,支原體 Mycoplasma,第19章,第一節(jié) 概述,定義 缺乏細(xì)胞壁 形態(tài)上呈高度多形性 能通過除菌濾器 在無生命培養(yǎng)基中能生長繁殖 最小的原核細(xì)胞型微生物 能形成有分支的長絲，故稱支原體,柔膜體綱,支原體目,肺炎支原體，人型支原體，生殖支原體，穿透支原體，發(fā)酵支原體，梨支原體,脲脲原體,支原體分類,支原體科,無膽甾原體科,螺原體科,支原體屬,脲原體屬,一、生物學(xué)性狀,（一）形態(tài)0.30.5 m無細(xì)胞壁高度多形性：球、桿、絲狀和分枝狀等一般Giemsa染色較好，染為淡紫色,（二）結(jié)構(gòu)內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類，中層為脂類（磷脂為主），凡作用于膽固醇的物質(zhì)，如皂素、毛地黃甙、二性霉素B等均能破壞細(xì)胞膜致其死亡。特殊的頂端結(jié)構(gòu)：粘附宿主上皮細(xì)胞表面，與支原體的致病有關(guān)。,（三）培養(yǎng)特性營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基：10%20%人或動(dòng)物血清以提供膽固醇與其它長鏈脂肪酸，多數(shù)還需添加酵母浸液、組織浸液、核酸提取物和輔酶。pH：適宜7.68.0（7.0易死亡），但解脲脲原體最適pH5.56.5兼性厭氧：大多寄生性支原體在37時(shí)在微氧環(huán)境（含5%CO2和90%N2）中生長最佳。繁殖方式多樣：二分裂繁殖外，還有分節(jié)、斷裂、出芽或分枝等方式,固體培養(yǎng)基：27天長出直徑約10600 m的典型的“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基：清亮，用顏色變化 單位（CCU）表示。,需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察,支原體典型菌落,支原體與細(xì)菌L型的異同點(diǎn),不同點(diǎn),缺乏細(xì)胞壁，形態(tài)多樣，能通過濾菌器。 固體培養(yǎng)菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。 臨床表現(xiàn)相似間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等,相同點(diǎn),支原體 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附細(xì)胞 致病性,肺炎支原體 + 紅細(xì)胞 肺炎、支氣管炎 人型支原體 + 泌尿生殖道感染 生殖器支原體 + 泌尿生殖道感染 穿透支原體 + + 紅細(xì)胞 條件感染CD4+T細(xì)胞 多見于艾滋病巨噬細(xì)胞 溶脲脲原體 + 泌尿生殖道感染 流產(chǎn)及不孕不育,生化反應(yīng),（四）抗原結(jié)構(gòu)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可檢測糖脂類抗原ELISA試驗(yàn)可檢測蛋白質(zhì)類抗原血清抗體可用生長抑制試驗(yàn)（growthinhibition test, GIT）和代謝抑制試驗(yàn)（metabolic inhibition test, MIT）以鑒定,抗原構(gòu)造 其主要Ag性來自細(xì)胞膜。胞膜外層蛋白質(zhì)是主要型特異性Ag。其抗 原性常用生長抑制試驗(yàn)（GIT）和代謝抑制試驗(yàn)（MIT）鑒定。,GIT：將吸有型特異性抗血清 的濾紙片貼在接種過支原體的 平板上，孵育后，如有抑制生 長現(xiàn)象出現(xiàn)，則說明該支原體 與血清同型。,MIT：是將支原體接種在含有抗血清的葡萄糖（酚紅）培養(yǎng)基中，若抗體與支原體型一致，則抑制該支原體不能分解葡萄糖產(chǎn)酸，酚紅不變色。 用GIT和MIT可將支原體分成若干血清型。,若相應(yīng)，則支原體生長、代謝受抑制，酚紅不變色,代謝抑制試驗(yàn)（MIT）,生長抑制試驗(yàn)（GIT）,（五）抵抗力對(duì)化學(xué)消毒劑敏感，對(duì)結(jié)晶紫、醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力；對(duì)影響細(xì)胞壁合成的抗生素如青霉素類天然耐受，但對(duì)干擾蛋白質(zhì)合成的抗生素如強(qiáng)力霉素、交沙霉素等敏感。,二、致病性與免疫性,（一）致病機(jī)制莢膜或微莢膜：抗吞噬作用毒性代謝產(chǎn)物：神經(jīng)毒素、磷脂酶C、核酸酶、過氧化氫和超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細(xì)胞或紅細(xì)胞的病理損傷超抗原：免疫調(diào)節(jié)其它：如穿透支原體粘附侵入CD4 T細(xì)胞引起損傷粘附素：粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮細(xì)胞,二、致病性與免疫性,致病性支原體 致病性 肺炎支原體 原發(fā)性非典型肺炎、支氣管炎 表面感染 人型支原體 泌尿生殖道感染 表面感染 生殖支原體 泌尿生殖道感染 表面感染 穿透支原體 多見于艾滋病 入血 溶脲脲原體 泌尿生殖道感染 表面感染,（二）所致疾病存在廣泛，多不致病肺炎支原體引起原發(fā)性非典型性肺炎溶脲脲原體、人型支原體和生殖支原體可引起泌尿生殖系統(tǒng)感染和不育癥穿透支原體和發(fā)酵支原體為艾滋病的 輔助致病因素,二、致病性與免疫性,（三）免疫性體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括IgM、IgG和SIgA細(xì)胞免疫：主要是特異性CD4Th1細(xì)胞分泌細(xì)胞因子,二、致病性與免疫性,0.20.3m，高度多形性，如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀； 初次分離應(yīng)在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中，一般10天左右長出菌落；多次傳代后生長加快，菌落呈“油煎蛋”狀； 能發(fā)酵葡萄糖，不能利用精氨酸與尿素； 對(duì)美藍(lán)、醋酸鉈、青霉素不敏感。,第二節(jié) 肺炎支原體,一、生物學(xué)性狀,（一）致病性1.主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏末秋初，515歲青少年發(fā)病率最高。2.含特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170 kDa）和P30（32 kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。3.肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細(xì)胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起組織損傷。,二、致病性與免疫性,（二）所致疾病原發(fā)性非典型性肺炎（primary atypical pneumonia），臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主，有時(shí)并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。,二、致病性與免疫性,（三）免疫性血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞；呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對(duì)防止再感染有較強(qiáng)保護(hù)作用；出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作,（一）分離培養(yǎng)痰或咽拭子接種在SP-4培養(yǎng)基，挑選可疑菌落，經(jīng)形態(tài)學(xué)、糖發(fā)酵、溶血性、血細(xì)胞吸附試驗(yàn)進(jìn)行初步鑒定，進(jìn)一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實(shí)驗(yàn)。,三、微生物學(xué)檢查法,三、微生物學(xué)檢查法,（二）血清學(xué)檢查冷凝集試驗(yàn)：即用病人血清與人O型血紅細(xì)胞或自身紅細(xì)胞混合，4過夜時(shí)可發(fā)生凝集，而在37時(shí)這種凝集又分散解離開，但僅50左右的患者才出現(xiàn) 陽性。此反應(yīng)為非特異性?？焖僭\斷ELISA：檢測P1和P30蛋白mAbsPCR：從痰標(biāo)本中檢測16S rRNA或P1蛋白基因,防治原則大環(huán)內(nèi)酯類藥物喹諾酮類藥物,四、防治原則,第三節(jié) 解脲脲原體,形態(tài)：0.50.3 m，單個(gè)或成雙排列 固體培養(yǎng)：48 h后長出直徑1530 m“油煎蛋”狀菌落。最適pH為5.56.5。 生化反應(yīng)：分解尿素，不分解糖類和精氨酸 抵抗力：對(duì)1:2000醋酸鉈不敏感 抗原：MB抗原是其主要膜抗原，將解脲脲原體分為A、B兩大群，14個(gè)血清型,一、生物學(xué)性狀,（一）致病機(jī)制-粘附于宿主細(xì)胞表面，引起細(xì)胞膜損傷；-產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對(duì)宿主細(xì)胞有急性毒性作用；-磷脂酶損傷宿主的細(xì)胞膜。,二、致病性與免疫性,二、致病性與免疫性,（二）所致疾病非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睪炎等泌尿生殖道疾病，還與自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和男性不孕有關(guān)。,病原體檢測 接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；再取0.2 ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于固體培養(yǎng)基，在5%CO2和90%N2的環(huán)境中經(jīng)37培養(yǎng)2448h，用低倍鏡觀察菌落，進(jìn)一步鑒定需用特異抗血清做GIT與MIT。,三、微生物學(xué)檢查法,核酸檢測 PCR檢測：檢測尿素酶基因、多帶抗原（MB-Ag）基因和16S rRNA基因。此法快速、特異，適宜于大批量標(biāo)本檢測。,三、微生物學(xué)檢查法,加強(qiáng)宣傳教育，注意性衛(wèi)生，切斷傳播途徑。四環(huán)素類、喹諾酮類藥物治療，但有耐藥株產(chǎn)生。,四、防治原則,第四節(jié) 人型支原體,-分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。最適pH7.27.4。固體培養(yǎng)基上形成200300 m的較大菌落，呈典型的“油煎蛋”狀。 -寄居于泌尿生殖道，通過性接觸傳播，可引起附睪炎、盆腔炎、產(chǎn)褥熱等。 -微生物學(xué)檢測和防治原則同解脲脲原體。人型支原體對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素不敏感，對(duì)1:2000醋酸鉈與紅霉素（100 mg/L）不敏感。,第五節(jié) 生殖支原體,-生殖支原體基本形態(tài)為燒瓶狀，能發(fā)酵葡萄糖使培養(yǎng)基變酸，不分解尿素和精氨酸。 -培養(yǎng)基上不生長，須在無醋酸鉈SP-4培養(yǎng)基生長但緩慢，菌落呈典型的“油煎蛋”狀。 -頂端結(jié)構(gòu)有粘附素MgPa，140 kDa，與肺炎支原，能粘附在人泌尿生殖道上皮，主要引起尿道炎。 -較難培養(yǎng)，生長慢，不適宜于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)室最好的診斷方法是核酸檢測。,第六節(jié) 穿透支原體,1991年Lo首次從1例艾滋病患者尿中分離出一種新支原體，其形態(tài)為桿狀或長燒瓶狀，一端為頂端結(jié)構(gòu)，具有粘附與穿入的作用。,穿透支原體發(fā)酵葡萄糖，分解精氨酸，不分解尿素，在SP-4培養(yǎng)基上生長較慢，形成典型的“油煎蛋”狀菌落。頂端結(jié)構(gòu)能粘附于人紅細(xì)胞、單核細(xì)胞、CD4T淋巴細(xì)胞及人尿道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致宿主細(xì)胞受損或死亡。目前認(rèn)為穿透支原體可能是AIDS發(fā)病的一個(gè)輔助因素。,思考題,1、細(xì)菌L型與支原體在生物學(xué)性狀方面有何相似之處？其主要區(qū)別是什么？ 2、簡述支原體形態(tài)結(jié)構(gòu)的主要特征。 3、簡述致病性支原體的種類及其致病性。 4、名詞解釋：支原體(mycoplasma)、冷凝集試驗(yàn),38,1. 有關(guān)細(xì)菌L型與支原體的共同點(diǎn)，錯(cuò)誤的是 A具有多形態(tài)性 B均能通過濾菌器 C在固體培養(yǎng)基上均能形成“荷包蛋”樣菌落 D培養(yǎng)時(shí)均需1020的動(dòng)物血清 E脫離誘導(dǎo)因素后均可回復(fù)為原來的細(xì)菌型 2能夠通過胎盤感染胎兒的支原體是 A肺炎支原體 B發(fā)酵支原體 C唾液支原體 D溶脲脲原體 E穿透支原體 3能在無生命培養(yǎng)基上生長繁殖的最小的原核細(xì)胞型微生物是 A細(xì)菌 B衣原體 C支原體 D立克次體 E病毒 4肺炎支原體 5溶脲脲原體 A呼吸道傳播 B消化道傳播 C皮膚粘膜傳播 D性接觸傳播 E蚊蟲傳播,39,