《高中生物 專題一課題二 基因工程的基本操作程序課件2 新人教版選修3》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高中生物 專題一課題二 基因工程的基本操作程序課件2 新人教版選修3（40頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)( (補(bǔ)充內(nèi)容）補(bǔ)充內(nèi)容）非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 與與RNARNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)聚合酶結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子不編碼蛋白質(zhì)。不編碼蛋白質(zhì)。：編碼蛋白質(zhì)：編碼蛋白質(zhì) , ,連續(xù)不間斷連續(xù)不間斷編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)原核原核細(xì)胞細(xì)胞的的 基因基因結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)調(diào)控遺傳信息表達(dá)調(diào)控遺傳信息表達(dá), ,上上 游有啟動(dòng)子，下游有終止子游有啟動(dòng)子，下游有終止子真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)（補(bǔ)充內(nèi)容）真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)（補(bǔ)充內(nèi)容）編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與與RNARNA聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合
2、位點(diǎn)內(nèi)含子內(nèi)含子 外顯子外顯子 啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 真核真核細(xì)胞細(xì)胞的的 基因基因結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序列外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列：有調(diào)控作用有調(diào)控作用, ,上游有啟動(dòng)子，下上游有啟動(dòng)子，下游有終止子游有終止子非編碼序列：非編碼序列： 包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子原核細(xì)胞原核細(xì)胞真核細(xì)胞真核細(xì)胞不同點(diǎn)不同點(diǎn)編碼區(qū)是編碼區(qū)是_的的編碼區(qū)是間隔的、編碼區(qū)是間隔的、_的的相同點(diǎn)相同點(diǎn)都由能夠編碼蛋白質(zhì)的都由能夠編碼蛋白質(zhì)的_和具和具有調(diào)控作用的有
3、調(diào)控作用的_區(qū)組成的區(qū)組成的原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較連續(xù)連續(xù)不連續(xù)不連續(xù)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼非編碼 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 目的基因主要是指目的基因主要是指_編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因供體生物細(xì)胞供體生物細(xì)胞取出取出DNADNA用限制酶剪用限制酶剪去多余部分去多余部分目的基因目的基因即：將需要的基因從供體生物細(xì)胞內(nèi)提取出來即：將需要的基因從供體生物細(xì)胞內(nèi)提取出來目前被廣泛提取使目前被廣泛提取使用的目的基因有：蘇用的目的基因有：蘇云金桿菌抗蟲基因、云金桿菌抗蟲基因、植物抗病基因植物抗病基因人胰島人胰島素基因等。素基因等。1
4、.什么是基因文庫？2.怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因？2）2 2）利用）利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因3 3）人工合成）人工合成 種類：基因組文庫：cDNA文庫：含有一種生物的全部基因含有一種生物的部分基因根據(jù)基因的有關(guān)信息：如基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA1.1.用一定的用一定的_切割切割 質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切 口，露出口，露出_。2.2.用用_切斷目切斷目 的基因，使其產(chǎn)生的基因，使其產(chǎn)生_ _ _。 核心核心3.3.將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，處， 再加入適量再加入適量_，形成了一個(gè)重組，形成了一個(gè)重組 DNAD
5、NA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）限制酶限制酶黏性末端黏性末端同一種限制酶同一種限制酶的黏性末端的黏性末端切口切口DNADNA連接酶連接酶相同相同( (二二) )基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建質(zhì)粒質(zhì)粒DNADNA分子分子一個(gè)一個(gè)切口切口兩個(gè)兩個(gè)黏性末端黏性末端兩個(gè)兩個(gè)切口切口獲得目的基因獲得目的基因DNA DNA 連接酶連接酶重組重組DNADNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）同一種同一種 限制酶限制酶 科學(xué)家在培育抗蟲棉時(shí)，經(jīng)過了許多復(fù)雜的過程和不懈的努力，才獲得成功。 起初把蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因插入載體質(zhì)粒中，然后導(dǎo)入棉花的受精卵中，結(jié)果抗蟲基因在棉花體內(nèi)沒有表達(dá)。 然后在插入
6、抗蟲基因的質(zhì)粒中插入啟動(dòng)子(抗蟲基因首端)，導(dǎo)入棉花受精卵，長成的棉花植株還是沒有抗蟲能力?？茖W(xué)家又在有啟動(dòng)子、抗蟲基因的質(zhì)粒中插入終止子(抗蟲基因末端)，導(dǎo)入棉花受精卵，結(jié)果成長的植株，有了抗蟲能力。 目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。a、目的基因、目的基因b、啟動(dòng)子、啟動(dòng)子c、終止子、終止子d、標(biāo)記基因等、標(biāo)記基因等( (三三) )將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化目的基因進(jìn)入目的基因進(jìn)入_內(nèi)，并且在內(nèi)，并且在 受體細(xì)胞
7、內(nèi)維持受體細(xì)胞內(nèi)維持_和和_的過程的過程受體細(xì)胞受體細(xì)胞穩(wěn)定穩(wěn)定表達(dá)表達(dá)方法方法導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法基因槍法花粉管通道法花粉管通道法顯微注射法顯微注射法 感受態(tài)細(xì)胞吸收感受態(tài)細(xì)胞吸收DNADNA分子分子( (三三) )將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞( (四四) )目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定檢查是否成功檢查是否成功檢測檢測鑒定鑒定檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA DNA 上是否插入了目的基因上是否插入了目的基因檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRN
8、AmRNA檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法方法方法方法方法方法DNADNA分子雜交分子雜交DNA分子雜交分子雜交抗原抗原- -抗體雜交抗體雜交PCR擴(kuò)增儀擴(kuò)增儀DNA雙鏈復(fù)制的基本原理雙鏈復(fù)制的基本原理一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸一對引物一對引物熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNADNA聚合酶聚合酶( (TaqTaq酶酶）DNADNA的兩條鏈為模板的兩條鏈為模板溫度控制溫度控制類別類別項(xiàng)目項(xiàng)目復(fù)制復(fù)制轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄場所場所特點(diǎn)特點(diǎn)模板模板原料原料酶酶能量能量堿基堿基配對配對產(chǎn)
9、物產(chǎn)物細(xì)胞核細(xì)胞核只有只有DNA的一條鏈的一條鏈四種核糖核苷酸四種核糖核苷酸RNA聚合酶聚合酶ATPA-UC-GT-AG-C細(xì)胞核細(xì)胞核DNA的兩條鏈的兩條鏈四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸解旋酶、解旋酶、DNADNA聚合酶聚合酶ATPA-TC-GT-AG-C兩個(gè)雙鏈兩個(gè)雙鏈DNADNA分子分子一條單鏈一條單鏈mRNAmRNA邊解旋邊復(fù)制，邊解旋邊復(fù)制，半保留復(fù)制半保留復(fù)制邊解旋邊轉(zhuǎn)錄邊解旋邊轉(zhuǎn)錄5 5/ /3 3/ /G GG GT TC C3 3/ /5 5/ /G GA AC CC C5 5/ /3 3/ /引物引物G GG G變性變性復(fù)性復(fù)性延伸延伸1.目的基因目的基因DNA受熱變性，解鏈
10、；受熱變性，解鏈；2.引物與單鏈互補(bǔ)結(jié)合；引物與單鏈互補(bǔ)結(jié)合；3.合成鏈在合成鏈在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸。聚合酶作用下進(jìn)行延伸。5 5/ /3 3/ /A AG G引物引物利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增過程技術(shù)擴(kuò)增過程a a、DNADNA變性（變性（90-9590-95）：雙鏈）：雙鏈DNADNA模板模板 在熱作用下，在熱作用下， 斷裂，形成斷裂，形成_ _ b b、復(fù)性（、復(fù)性（55-6055-60）：系統(tǒng)溫度降低，引物）：系統(tǒng)溫度降低，引物 與與DNADNA模板結(jié)合，形成局部模板結(jié)合，形成局部_。 c c、延伸（、延伸（70-7570-75）：
11、在）：在TaqTaq酶的作用下，從酶的作用下，從 引物的引物的55端端33端延伸，合成與模板互補(bǔ)端延伸，合成與模板互補(bǔ) 的的_。 氫鍵氫鍵單鏈單鏈DNADNA雙鏈雙鏈DNADNA鏈鏈2.微生物作受體細(xì)胞原因：微生物作受體細(xì)胞原因：將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞3.轉(zhuǎn)化方法：轉(zhuǎn)化方法：大腸桿菌大腸桿菌繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對少繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對少處理細(xì)胞細(xì)胞表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 _細(xì)胞吸收DNA分子。Ca2+感受態(tài)感受態(tài)感受態(tài)感受態(tài)1.常用菌：常用菌： 目的基因插入目的基因插入TiTi質(zhì)粒的質(zhì)粒的T-DNAT-DNA上上 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌 導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入
12、植物細(xì)胞 整合到受體細(xì)胞的染色體上整合到受體細(xì)胞的染色體上 目的基因的遺傳特性得以維持穩(wěn)定和表達(dá)目的基因的遺傳特性得以維持穩(wěn)定和表達(dá) 1. 1.農(nóng)桿菌特點(diǎn)：農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物。易感染雙子葉植物和裸子植物。TiTi質(zhì)粒的質(zhì)粒的T-DNAT-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的染色體上可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的染色體上2.轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化化1.下表關(guān)于基因工程中有關(guān)基因操作下表關(guān)于基因工程中有關(guān)基因操作的名詞及對應(yīng)的內(nèi)容，正確的組合是的名詞及對應(yīng)的內(nèi)容，正確的組合是2 2、下列屬于獲取目的基因的方法的是、下列屬于獲取目的基因的方法的是( )( )利用利用mRNAmRNA反轉(zhuǎn)錄形成從基因組文庫中提取反轉(zhuǎn)錄形成
13、從基因組文庫中提取從受體細(xì)胞中提取從受體細(xì)胞中提取 利用利用PCRPCR技術(shù)技術(shù) 利用利用DNADNA轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄 人工合成人工合成A.A. B. B. C. C. D. D.3.細(xì)菌的質(zhì)粒分子帶有一個(gè)抗菌素抗性基因，該抗細(xì)菌的質(zhì)粒分子帶有一個(gè)抗菌素抗性基因，該抗性基因在基因工程中的主要作用是性基因在基因工程中的主要作用是 A提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性 B有利于對目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測C增加質(zhì)粒分子的分子量D便于與外源基因連接4.4. 有關(guān)基因工程的敘述正確的是有關(guān)基因工程的敘述正確的是A限制酶只在獲得目的基因時(shí)才用B重組質(zhì)粒的形成是在細(xì)胞內(nèi)完成的C質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體 D蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合
14、成目的基因提供資料7、構(gòu)建基因組、構(gòu)建基因組DNA文庫時(shí)，首先應(yīng)分離細(xì)胞的文庫時(shí)，首先應(yīng)分離細(xì)胞的A、染色體、染色體DNA B、線粒體、線粒體DNAC、總、總mRNA D、tRNA 8、目的基因可從基因文庫中獲得，下列有關(guān)基因文庫、目的基因可從基因文庫中獲得，下列有關(guān)基因文庫的描述正確的是的描述正確的是A、某生物的全套基因就是一個(gè)基因文庫、某生物的全套基因就是一個(gè)基因文庫B、將含有某種生物不同的許多、將含有某種生物不同的許多DNA片段，導(dǎo)入某個(gè)片段，導(dǎo)入某個(gè)生物生物 體內(nèi)，則這個(gè)生物就是一個(gè)基因文庫體內(nèi)，則這個(gè)生物就是一個(gè)基因文庫C、含有一種生物所有基因的基因文庫叫做基因組文、含有一種生物所有
15、基因的基因文庫叫做基因組文庫庫D、含有一種生物的一部分基因的基因文庫叫、含有一種生物的一部分基因的基因文庫叫cDNA文文庫庫AC9、在遺傳工程中，若有一個(gè)控制有利性狀的、在遺傳工程中，若有一個(gè)控制有利性狀的DNA分子片段為分子片段為ATGTGTACAC，要使其數(shù)量增多，可，要使其數(shù)量增多，可用用PCR技術(shù)進(jìn)行人工復(fù)制，復(fù)制時(shí)應(yīng)給予的條件是技術(shù)進(jìn)行人工復(fù)制，復(fù)制時(shí)應(yīng)給予的條件是 雙鏈雙鏈DNA分子為模板分子為模板 ATGTG或或TACAC模板鏈模板鏈 四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸 四種核苷酸四種核苷酸 DNA聚合酶聚合酶 熱熱穩(wěn)定穩(wěn)定DNA聚合酶引物聚合酶引物 溫度變化溫度變化 恒溫恒溫A BC
16、 DD10、在基因工程中，把選出的目的基因（共、在基因工程中，把選出的目的基因（共1000個(gè)脫個(gè)脫氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是460個(gè)）放入個(gè)）放入DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧代，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是A.540個(gè)個(gè)B.8100個(gè)個(gè) C.17280個(gè)個(gè)D.7560個(gè)個(gè)B11、在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的、在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是最方便方法是A、化學(xué)合成法、化學(xué)合成法 B、基因組文庫法、基因組文庫法C、cDNA文庫法文庫法 D、聚合酶鏈反應(yīng)、聚
17、合酶鏈反應(yīng)12、下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是、下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是從基因文庫中獲取目的基因從基因文庫中獲取目的基因 利用利用PCR技術(shù)技術(shù)擴(kuò)增目的基因擴(kuò)增目的基因 反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法 通過通過DNA合成儀利合成儀利用化學(xué)方法人工合成用化學(xué)方法人工合成A B C DAD13、目的基因主要是指、目的基因主要是指_的結(jié)構(gòu)基因的結(jié)構(gòu)基因。獲得目的基因的常見方法有三種：（。獲得目的基因的常見方法有三種：（1）從基因文庫）從基因文庫中獲取目的基因，根據(jù)基因的中獲取目的基因，根據(jù)基因的_序列，基因在序列，基因在_上的位置，基因的上的位置，基因的_產(chǎn)物產(chǎn)物mRNA，基，基因的因的_產(chǎn)
18、物蛋白質(zhì)等獲取目的基因。（產(chǎn)物蛋白質(zhì)等獲取目的基因。（2）利用）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，該技術(shù)是一項(xiàng)在技術(shù)擴(kuò)增目的基因，該技術(shù)是一項(xiàng)在_完完成的核酸合成技術(shù)，前提條件是有一段已知目的基因的成的核酸合成技術(shù)，前提條件是有一段已知目的基因的_序列，以便于合成序列，以便于合成_。（。（3）如果基）如果基因較小且核苷酸序列已知，可以通過因較小且核苷酸序列已知，可以通過_方方法。法。 編碼蛋白質(zhì)編碼蛋白質(zhì)核苷酸核苷酸染色體染色體轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄表達(dá)表達(dá)體外體外核苷酸核苷酸引物引物人工合成人工合成14、（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括、（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括A目的基因目的基因 B啟動(dòng)子啟動(dòng)子
19、 C終止子終止子 D標(biāo)記基因標(biāo)記基因ABCD15、下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是、下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是A啟動(dòng)子是與啟動(dòng)子是與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起始密碼始密碼B啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段，對短片段，對mRNA的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用C標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因從而便于篩選從而便于篩選D基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同而有所差別而有所差別A16、目前轉(zhuǎn)基因工程可以、目前轉(zhuǎn)基因工
20、程可以A.打破地理隔離但不能突破生殖隔離打破地理隔離但不能突破生殖隔離B.打破生殖隔離但不能突破地理隔離打破生殖隔離但不能突破地理隔離C. 完全突破地理隔離和生殖隔離完全突破地理隔離和生殖隔離D. 部分突破地理隔離和生殖隔離部分突破地理隔離和生殖隔離 C17、基因工程中科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物、基因工程中科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞，原因是作為受體細(xì)胞，原因是 A結(jié)構(gòu)簡單、操作方便結(jié)構(gòu)簡單、操作方便 B繁殖速度快繁殖速度快 C遺傳物質(zhì)含量少、簡單遺傳物質(zhì)含量少、簡單 D性狀穩(wěn)定、變異少性狀穩(wěn)定、變異少18、基因工程常用的受體細(xì)胞有、基因工程常用的受體細(xì)胞有 大腸桿菌大腸桿菌
21、 枯草桿菌枯草桿菌 支原體支原體 動(dòng)植物細(xì)胞動(dòng)植物細(xì)胞A B C DBD19、基因工程是在、基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的，分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的，在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的步驟在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的步驟是是A.人工合成基因人工合成基因B.目的基因與運(yùn)載體結(jié)合目的基因與運(yùn)載體結(jié)合C.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞D.目的基因的檢測和表達(dá)目的基因的檢測和表達(dá)C20. 采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的做法正確的是因的做法正確的是將毒素蛋白質(zhì)注射到棉受精卵中將毒素蛋白質(zhì)注射
22、到棉受精卵中 將編碼毒素蛋白將編碼毒素蛋白的的DNA序列注射到棉受精卵中序列注射到棉受精卵中 將編碼毒素蛋白的將編碼毒素蛋白的DNA序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進(jìn)入受精序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵中卵中 將編碼毒素蛋白的將編碼毒素蛋白的DNA序列與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入序列與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng)細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng)A B C DC21. 下列屬于基因工程中導(dǎo)入目的基因方法的是下列屬于基因工程中導(dǎo)入目的基因方法的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法基因槍法 花粉管道法花粉管道法 顯微注顯微注射法射法 胚胎移植胚胎移植 DNA分子雜交法分
23、子雜交法A BC DC2525、（、（多選）人們利用基因工程的方法，用大腸桿菌生產(chǎn)多選）人們利用基因工程的方法，用大腸桿菌生產(chǎn)人類胰島素，這一過程涉及到（人類胰島素，這一過程涉及到（ ）A.用適當(dāng)?shù)拿笇σ葝u素基因與運(yùn)載體進(jìn)行切割并連接用適當(dāng)?shù)拿笇σ葝u素基因與運(yùn)載體進(jìn)行切割并連接B.把重組后的把重組后的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)菌內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)增分子導(dǎo)入受體細(xì)菌內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)增C.檢測重組檢測重組DNA分子是否導(dǎo)入受體細(xì)菌內(nèi)并表達(dá)出性狀分子是否導(dǎo)入受體細(xì)菌內(nèi)并表達(dá)出性狀D.篩選出能產(chǎn)生胰島素的篩選出能產(chǎn)生胰島素的“工程菌工程菌” 2626、下列哪項(xiàng)不屬于基因工程技術(shù)的步驟下列哪項(xiàng)不屬于基因工程技術(shù)的步驟 （ ）
24、A基因轉(zhuǎn)移基因轉(zhuǎn)移 B基因擴(kuò)增基因擴(kuò)增C基因檢測基因檢測 D基因表達(dá)基因表達(dá) 嘗試設(shè)計(jì)嘗試設(shè)計(jì) 思考探究思考探究思考：思考：作為基因工程表達(dá)載體，只作為基因工程表達(dá)載體，只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎？為什么？為什么？不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用，不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用，還需要有其他控制元件，如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。還需要有其他控制元件，如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是：必須構(gòu)建上述元件的主要理由是：（1）生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用受體生物自身基因
25、受體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)；的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)；（2）通過通過cDNA文庫獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子，只將編碼文庫獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子，只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無法轉(zhuǎn)錄；序列導(dǎo)入受體生物中無法轉(zhuǎn)錄；（3）目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記；目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記；（4）為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；（5）有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位，往往要加上可以標(biāo)識(shí)存在
26、部位的基因（或做成目的基部位，往往要加上可以標(biāo)識(shí)存在部位的基因（或做成目的基因與標(biāo)識(shí)基因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因等。因與標(biāo)識(shí)基因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因等。思考與探究：思考與探究：2.根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理,你能分你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎?若將一個(gè)抗病基因?qū)魧⒁粋€(gè)抗病基因?qū)胄←溨腥胄←溨?理論上講你應(yīng)該怎樣做理論上講你應(yīng)該怎樣做?要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株，因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株，因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都可以侵染單子葉植物；要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì)，一
27、般為乙可以侵染單子葉植物；要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì)，一般為乙酰丁香酮等，目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏（酰丁香酮等，目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏（趨化性）和激活農(nóng)桿菌的趨化性）和激活農(nóng)桿菌的Vir區(qū)（誘導(dǎo)）的基因，使區(qū)（誘導(dǎo)）的基因，使T-DNA轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移并插入到染色體移并插入到染色體DNA上。上。3.3.利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素，聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素，聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功能的知識(shí)，結(jié)合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要能的知識(shí)，結(jié)合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生產(chǎn)人的糖蛋白，可以用大腸桿菌嗎？生產(chǎn)人的糖蛋白，可以用大腸桿
28、菌嗎？有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價(jià)結(jié)合的糖鏈，這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價(jià)結(jié)合的糖鏈，這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體上加工完成的，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在和高爾基復(fù)合體上加工完成的，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在于真核細(xì)胞中，大腸桿菌不存在這兩種細(xì)胞器，因此，在大于真核細(xì)胞中，大腸桿菌不存在這兩種細(xì)胞器，因此，在大腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能的。腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能的。4.-4.-珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白的重要組成成分。當(dāng)它的成分異珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白的重要組成成分。當(dāng)它的成分異常時(shí)，動(dòng)物有可能患某種疾病，如鐮刀形細(xì)胞貧血癥。假如常時(shí)，動(dòng)物有可能患某種疾病，如鐮刀形細(xì)胞貧血癥。假如讓
29、你用基因工程的方法，使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的讓你用基因工程的方法，使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的-珠蛋白，珠蛋白，想一想，應(yīng)如何進(jìn)行設(shè)計(jì)？想一想，應(yīng)如何進(jìn)行設(shè)計(jì)？（1 1）從小鼠中克隆出）從小鼠中克隆出-珠蛋白基因的編碼序列（珠蛋白基因的編碼序列（cDNA)cDNA)。（2 2）將）將cDNAcDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動(dòng)子，另外前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動(dòng)子，另外加上抗四環(huán)素的基因，構(gòu)建成一個(gè)表達(dá)載體。加上抗四環(huán)素的基因，構(gòu)建成一個(gè)表達(dá)載體。（3 3）將表達(dá)載體導(dǎo)入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在）將表達(dá)載體導(dǎo)入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達(dá)載體未進(jìn)入含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達(dá)載體未進(jìn)入大腸桿菌中，大腸桿菌會(huì)不含有抗四環(huán)素基因而死掉；如果大腸桿菌中，大腸桿菌會(huì)不含有抗四環(huán)素基因而死掉；如果培養(yǎng)基上長出大腸桿菌菌落，則表明培養(yǎng)基上長出大腸桿菌菌落，則表明-珠蛋白基因已進(jìn)入珠蛋白基因已進(jìn)入其中。其中。（4 4）培養(yǎng)進(jìn)入了）培養(yǎng)進(jìn)入了-珠蛋白基因的大腸桿菌，收集菌體，破珠蛋白基因的大腸桿菌，收集菌體，破碎后從中提取碎后從中提取-珠蛋白。珠蛋白。
高中生物 專題一課題二 基因工程的基本操作程序課件2 新人教版選修3
