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1、專題二十六克隆技術專題二十六克隆技術考點一植物細胞工程考點一植物細胞工程1.植物組織培養(yǎng)技術植物組織培養(yǎng)技術(1)原理：植物細胞具有原理：植物細胞具有。全能性全能性(2)過程：過程：脫分化脫分化再分化再分化人工種子人工種子2.植物體細胞雜交技術植物體細胞雜交技術3.植物克隆技術的應用植物克隆技術的應用植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)愈傷組織愈傷組織植物體細胞雜交過程中雜種細胞類型及檢測方法植物體細胞雜交過程中雜種細胞類型及檢測方法(1)誘導結果誘導結果(假設用于雜交的兩種植物細胞分別為假設用于雜交的兩種植物細胞分別為A、B)：未融合的細胞：未融合的細胞：A和和B。兩兩融合的細胞：兩兩融合的細胞：AA、
2、BB和和AB。多細胞融合體。多細胞融合體。(2)檢測方法：對誘導產物中的細胞進行植物組織培養(yǎng)，然后根檢測方法：對誘導產物中的細胞進行植物組織培養(yǎng)，然后根據得到的植物性狀進行判斷。據得到的植物性狀進行判斷。若只表現出一種植物的性狀，說明是未融合細胞。若只表現出一種植物的性狀，說明是未融合細胞。若得到的是具有兩種親本性狀的植物，說明是雜種植株。若得到的是具有兩種親本性狀的植物，說明是雜種植株。若得到的是兩種親本性狀的植物，且一種植物的性狀得到加若得到的是兩種親本性狀的植物，且一種植物的性狀得到加強，則是多細胞融合體。強，則是多細胞融合體。若得到的是一種植物的性狀，但是效果得到加強，則是同種若得到的
3、是一種植物的性狀，但是效果得到加強，則是同種細胞融合的結果。細胞融合的結果。(3)植物體細胞雜交后的遺傳物質分析植物體細胞雜交后的遺傳物質分析遺傳特性：雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質，故雜種植遺傳特性：雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質，故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。株具備兩種植物的遺傳特性。染色體組數染色體組數a.染色體組數兩種植物體細胞內染色體組數之和。染色體組數兩種植物體細胞內染色體組數之和。b.植物體細胞雜交形成的雜種植株，有幾個染色體組就稱為幾植物體細胞雜交形成的雜種植株，有幾個染色體組就稱為幾倍體。倍體。植物組織培養(yǎng)與植物體細胞雜交的比較植物組織培養(yǎng)與植物體細胞雜交的比較名稱名
4、稱植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交植物體細胞雜交原理原理細胞的全能性細胞的全能性細胞膜具有一定的流動性和細細胞膜具有一定的流動性和細胞的全能性胞的全能性過程過程應用應用培育新品種培育新品種生產細胞產品生產細胞產品克服遠緣雜交的不親和性，克服遠緣雜交的不親和性，培育作物新品種培育作物新品種考點二動物細胞工程考點二動物細胞工程1.動物細胞培養(yǎng)過程及條件動物細胞培養(yǎng)過程及條件培養(yǎng)液培養(yǎng)液用具用具更換更換清除清除2.動物體細胞核移植技術和克隆動物動物體細胞核移植技術和克隆動物(1)動物體細胞核移植技術的過程動物體細胞核移植技術的過程細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)去核去核重組細胞重組細胞供體供體(2)動物體細胞
5、核移植技術的原理、結果及應用動物體細胞核移植技術的原理、結果及應用得到克隆動物得到克隆動物遺傳改良遺傳改良3.動物細胞融合與單克隆抗體制備技術動物細胞融合與單克隆抗體制備技術細胞膜的流動性細胞膜的流動性B淋巴細胞淋巴細胞單克隆抗體單克隆抗體運載運載判斷正誤判斷正誤(1)連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型(2014浙江，浙江，3A)( )(2)制備肝細胞懸液時先用剪刀剪碎肝組織，再用胃蛋白酶處理制備肝細胞懸液時先用剪刀剪碎肝組織，再用胃蛋白酶處理( )動物細胞培養(yǎng)與動物體細胞核移植技術的比較動物細胞培養(yǎng)與動物體細胞核移植技術的比較 動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物體
6、細胞核移植動物體細胞核移植原理原理細胞增殖細胞增殖動物細胞核的全能性動物細胞核的全能性過程過程結果結果獲得細胞群獲得細胞群獲得與供體遺傳物質基本相同的個體獲得與供體遺傳物質基本相同的個體動物細胞融合與單克隆抗體制備的歸納動物細胞融合與單克隆抗體制備的歸納(1)制備單克隆抗體時選用一種抗原處理的制備單克隆抗體時選用一種抗原處理的B淋巴細胞與骨髓瘤淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融合，產生雜交瘤細胞，雜交瘤細胞兼有兩個親細胞進行細胞融合，產生雜交瘤細胞，雜交瘤細胞兼有兩個親本細胞的特性本細胞的特性在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時能產生在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時能產生出某種特異性的抗體。出某種特異
7、性的抗體。(2)進行動物細胞的誘導融合，形成的雜種細胞有三種：進行動物細胞的誘導融合，形成的雜種細胞有三種：AA型、型、BB型、型、AB型。只有型。只有AB型才是我們所需要的雜種細胞，所以需型才是我們所需要的雜種細胞，所以需要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選。要用選擇性培養(yǎng)基進行篩選。(3)單克隆抗體制備過程中的兩次篩選單克隆抗體制備過程中的兩次篩選1.不清楚動物細胞培養(yǎng)時，為何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白不清楚動物細胞培養(yǎng)時，為何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶酶點撥進行動物細胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散細胞，說明點撥進行動物細胞傳代培養(yǎng)時用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質主要是蛋白質。分散細胞時不能用胃蛋
8、白酶，細胞間的物質主要是蛋白質。分散細胞時不能用胃蛋白酶，因為胃蛋白酶作用的適宜因為胃蛋白酶作用的適宜pH約為約為1.8。胰蛋白酶作用的適宜。胰蛋白酶作用的適宜pH為為7.27.8，而多數動物細胞培養(yǎng)的適宜，而多數動物細胞培養(yǎng)的適宜pH為為7.27.4。2.誤認為動物細胞培養(yǎng)液中加入誤認為動物細胞培養(yǎng)液中加入5%CO2的目的是維持氣體平衡的目的是維持氣體平衡或用于呼吸或用于呼吸點撥動物的細胞培養(yǎng)時，需向培養(yǎng)液中加入點撥動物的細胞培養(yǎng)時，需向培養(yǎng)液中加入5%CO2(95%空氣空氣)，加入，加入CO2的目的是的目的是“維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)液的pH”。3.不清楚動物細胞克隆化培養(yǎng)時為何常選不清楚動物
9、細胞克隆化培養(yǎng)時為何常選10代以內的細胞，而代以內的細胞，而“瘤細胞瘤細胞”卻為卻為“50代以后代以后”點撥取供體動物的體細胞培養(yǎng)，一般選用傳至點撥取供體動物的體細胞培養(yǎng)，一般選用傳至10代以內的細代以內的細胞，因為胞，因為10代以內的細胞一般能保持正常的二倍體核型，保證代以內的細胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細胞正常的遺傳基礎。然而欲獲得了供體細胞正常的遺傳基礎。然而欲獲得“無限增殖無限增殖”的的“瘤細瘤細胞胞”則往往在則往往在“50代以后代以后”，其遺傳物質已發(fā)生變化，具，其遺傳物質已發(fā)生變化，具“癌變癌變”特性。特性。4.不清楚植物脫毒苗培養(yǎng)時選擇要求及原理不清楚植物脫毒苗培養(yǎng)
10、時選擇要求及原理點撥由于植物分生區(qū)附近點撥由于植物分生區(qū)附近(如莖尖如莖尖)的病毒極少，所以常采用的病毒極少，所以常采用莖尖組織培養(yǎng)技術獲得脫毒苗。莖尖組織培養(yǎng)技術獲得脫毒苗。5.誤認為克隆動物的產生體現了誤認為克隆動物的產生體現了“動物細胞全能性動物細胞全能性”，不能解釋，不能解釋克隆動物性狀克隆動物性狀“變異變異”的成因的成因點撥核移植形成重組細胞發(fā)育成一個新個體，體現了細胞點撥核移植形成重組細胞發(fā)育成一個新個體，體現了細胞核的全能性而非動物細胞的全能性。核移植技術獲得的動物核的全能性而非動物細胞的全能性。核移植技術獲得的動物與供核動物性狀不完全相同，主要源于如下三方面：與供核動物性狀不完全相同，主要源于如下三方面：克隆克隆動物絕大部分動物絕大部分DNA來自于供體細胞核，但其核外線粒體中的來自于供體細胞核，但其核外線粒體中的DNA主要來自于受體卵細胞；主要來自于受體卵細胞；性狀是基因與環(huán)境共同作用性狀是基因與環(huán)境共同作用的結果；的結果；在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變，產生供在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變，產生供核動物沒有的性狀。核動物沒有的性狀。
高考生物一輪總復習 專題26 克隆技術課件
