高三生物二輪復習 第1部分 專題8 第1講 基因工程和細胞工程課件 新人教版

菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破基因工程的工具及操作過程基因工程的工具及操作過程 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破限制酶、限制酶、DNA連接酶連接酶 及載體及載體(質(zhì)粒質(zhì)粒) 顯微注射法顯微注射法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 花粉管通道法花粉管通道法 Ca2處理法處理法 啟動啟動 子子 終止子終止子 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破構(gòu)建基因構(gòu)建基因 表達載體表達載體 逆轉(zhuǎn)錄法逆轉(zhuǎn)錄法 cDNA文庫文庫 抗原抗原抗體雜交抗體雜交 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破漿漿 無限增殖無限增殖 產(chǎn)生特異性抗體產(chǎn)生特異性抗體 動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng) 單克隆抗體制備單克隆抗體制備 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破細胞工程細胞工程 1.如圖為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答相關(guān)問題：菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破(1)若a、b分別表示白菜和甘藍兩種植物的體細胞，則采用化學法形成c時，一般是用 作為誘導劑。由d形成雜種植株的過程所依據(jù)的原理是 ，技術(shù)手段為 ，此技術(shù)包括兩個關(guān)鍵環(huán)節(jié)： 和 。從本質(zhì)上講，“白菜甘藍”雜種植株具有的性狀是 的結(jié)果。(2)若a、b分別為骨髓瘤細胞和B淋巴細胞，假設(shè)僅考慮某兩個細胞的融合，則可形成 種類型的細胞d，因此需用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出 細胞用于培養(yǎng)。選出此細胞后，還需進行 培養(yǎng)和 檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。聚乙二醇聚乙二醇 植物細胞的全能性植物細胞的全能性 植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù) 脫分化脫分化再分化再分化基因選擇性表達基因選擇性表達 三三 雜交瘤雜交瘤 克隆化克隆化 抗體抗體 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破胰蛋白酶胰蛋白酶 動物血清動物血清 貼壁生長貼壁生長 接觸抑制接觸抑制 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破(2)過程應采集處于 的卵母細胞，且去掉其細胞核，去核的目的是： 。(3)過程不同于植物細胞融合的誘導方法為 ，用 促使動物細胞發(fā)生融合。(4)上述圖示用到的生物工程技術(shù)有： 、 、 以及 等。M中期中期使克隆牛的遺傳物質(zhì)幾乎使克隆牛的遺傳物質(zhì)幾乎 全部來自供體細胞全部來自供體細胞 生物法生物法 滅活的病毒滅活的病毒 基因工程基因工程 動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng) 動物細胞融合動物細胞融合 體細胞核移植體細胞核移植 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破1.基因工程的原理(1)基本工具限制性核酸內(nèi)切酶：識別雙鏈DNA的某種特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，形成平末端或黏性末端。DNA連接酶：連接兩個DNA片段的磷酸二酯鍵，不能連接RNA。包括Ecoli DNA連接酶和T4DNA連接酶?；蚬こ痰脑砑暗鞍踪|(zhì)工程基因工程的原理及蛋白質(zhì)工程 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破載體：將目的基因?qū)胧荏w細胞，能在宿主細胞中穩(wěn)定存在并復制，具有遺傳標記基因，具有多個限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點。常使用的載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物和動植物病毒等。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破(2)基本操作步驟目的基因的獲取a從基因文庫中獲取。b利用PCR技術(shù)擴增。c用化學方法直接人工合成?；虮磉_載體的構(gòu)建a基因表達載體的組成：目的基因啟動子終止子標記基因。b基因表達載體的構(gòu)建方法菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破將目的基因?qū)胧荏w細胞菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破目的基因的檢測與鑒定a目的基因插入檢測：DNA分子雜交技術(shù)。b目的基因轉(zhuǎn)錄檢測：(核酸)分子雜交技術(shù)。c目的基因翻譯檢測：抗原抗體雜交技術(shù)。d個體生物學水平檢測：根據(jù)目的基因表達出的性狀判斷。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破2限制酶的切割序列具有包含關(guān)系：圖2中BamH和Mbo識別的堿基序列和酶切位點分別是GGATCC、GATC，這兩個限制酶都可切割同一堿基序列GGATCC。3切割時注意是否破壞所有抗性基因，導致缺乏標記基因。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破【拓展延伸】限制酶、DNA連接酶、DNA聚合酶、解旋酶的比較種類種類項目項目限制酶限制酶DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶作用底物作用底物DNA分子分子DNA分分子片段子片段脫氧脫氧核苷酸核苷酸DNA分子分子作用部位作用部位磷酸磷酸二酯鍵二酯鍵磷酸磷酸二酯鍵二酯鍵磷酸磷酸二酯鍵二酯鍵堿基對間堿基對間的氫鍵的氫鍵作用結(jié)果作用結(jié)果形成黏性形成黏性末端或平末端或平末端末端形成重組形成重組DNA分子分子形成新的形成新的DNA分子分子形成單鏈形成單鏈DNA分子分子菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破(2)過程表示動物細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后，可以用胰蛋白酶處理，使之分散成單個細胞，隨后分裝到新的培養(yǎng)瓶中進行傳代培養(yǎng)。(3)判斷目的基因是否在受體細胞中轉(zhuǎn)錄，可用分子雜交技術(shù)來檢測，從細胞中提取mRNA和用放射性同位素或者熒光標記的目的基因單鏈DNA片段進行雜交。根據(jù)題中信息“肺細胞中的let7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發(fā)肺癌”可知，導入let7基因后，肺癌細胞的增殖受到抑制；菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破據(jù)圖2可知，let7基因影響RAS基因表達的機理是：let7基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物miRNA與RAS基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RAS mRNA結(jié)合，使RAS基因翻譯受到抑制，引起細胞中的RAS蛋白含量減少，進而導致癌細胞增殖受抑制?！敬鸢浮?1)限制性核酸內(nèi)切(或限制)啟動子(2)胰蛋白(3)RNARAS蛋白菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破1.動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較細胞工程細胞工程(或細胞克隆或細胞克隆) 項目項目動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)前培養(yǎng)前處理處理無菌、用胰蛋白酶處理，無菌、用胰蛋白酶處理，使組織細胞相互分散開使組織細胞相互分散開無菌、離體無菌、離體培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分成分葡萄糖、氨基酸、無機鹽、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素、促生長因子、微量元素、動物血清等動物血清等礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素等物激素等培養(yǎng)基培養(yǎng)基狀態(tài)狀態(tài)液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基過程過程動物胚胎或出生不久的幼動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織齡動物的器官或組織原原代培養(yǎng)代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞細胞群群菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破能否培能否培養(yǎng)成個養(yǎng)成個體體不能不能能能應用應用舉例舉例大規(guī)模生產(chǎn)有重要價大規(guī)模生產(chǎn)有重要價值的生物制品，如病值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；皮膚移克隆抗體等；皮膚移植；檢測有毒物質(zhì)的植；檢測有毒物質(zhì)的毒性等毒性等快速繁殖、培育無病毒快速繁殖、培育無病毒植株；生產(chǎn)藥物；制造植株；生產(chǎn)藥物；制造人工種子；培育轉(zhuǎn)基因人工種子；培育轉(zhuǎn)基因作物等作物等菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破【拓展延伸】生產(chǎn)單克隆抗體的三種方法1利用動物細胞融合技術(shù)形成的雜交瘤細胞生產(chǎn)單克隆抗體。2將目的基因?qū)霛{細胞，利用基因工程生產(chǎn)單克隆抗體。3利用動物細胞核移植技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破據(jù)圖回答下列問題：(1)過程所需的酶是_ 。(2)過程后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的_存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志。(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是_。原生質(zhì)體經(jīng)過_再生，進而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植株和 _植株的根尖，通過_、_、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破【解析】熟記植物體細胞雜交過程，準確解讀信息是解題關(guān)鍵。(1)獲取植物細胞的原生質(zhì)體可用纖維素酶和果膠酶處理植物細胞。(2)根據(jù)題干信息可知，供體使用的是葉肉細胞的原生質(zhì)體，所以可將融合的細胞是否含葉綠體作為初步篩選雜種細胞的標志。(3)原生質(zhì)體因沒有了細胞壁，在低滲溶液中容易吸水漲破，加入甘露醇可保持一定的滲透壓，以保持原生質(zhì)體的完整性。原生質(zhì)體需再生出細胞壁形成雜種細胞，然后經(jīng)分裂、脫分化形成愈傷組織。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破(4)若要分析再生植株的染色體變異類型，需對再生植株細胞和雙親細胞的染色體形態(tài)與數(shù)目進行比較。植物細胞有絲分裂裝片的制作包括解離、漂洗、染色和制片四個步驟。(5)由圖可知，植株1、2、4的條帶中除了具有花椰菜的DNA片段外，還有來自黑芥的DNA片段，所以是雜種植株。(6)對雜種植株進行病原體(黑腐病菌)接種實驗，若不患黑腐病，即為高抗性雜種植株?！敬鸢浮?1)纖維素酶和果膠酶 (2)葉綠體 (3)保持原生質(zhì)體完整性細胞壁(4)雙親(或花椰菜和黑芥) 解離漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破1(2013江蘇高考T22B)用PCR方法擴增目的基因時不必知道基因的全部序列。()2(2013大綱全國卷T2B)動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶。()【提示】植物組織培養(yǎng)不需要用胰蛋白酶。3(2013重慶高考T5C)愈傷組織培養(yǎng)后的出芽是細胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達的調(diào)控。()菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破4(2012廣東高考T2B)培養(yǎng)草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是細胞雜交。()【提示】主要技術(shù)應為組織培養(yǎng)。5(2011江蘇高考T14B)體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體。()【提示】體細胞雜交技術(shù)，目前僅指用于植物體細胞雜交，由此獲得雜交植株。6(2011四川高考T5D)應用DNA探針技術(shù)可以檢測到轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達。()【提示】DNA探針雜交技術(shù)只能檢測到目的基因的存在，而不能檢測其是否翻譯出蛋白質(zhì)。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由_連接。(2)若用限制酶Sma完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是_末端，其產(chǎn)物長度為_。(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被TA堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出圖1及其對應的DNA片段，用限制酶Sma完全切割，產(chǎn)物中共有_種不同長度的DNA片段。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行連接，形成重組質(zhì)粒，那么應選用的限制酶是_。在導入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加_的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達，其最可能的原因是_。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破【研析】本題主要考查轉(zhuǎn)基因技術(shù)中的操作工具與目的基因的篩選及DNA的復制等知識，旨在考查考生的提取信息能力、識圖能力和分析推理能力。解題過程如下：審審題題信息信息1：“目的基因目的基因D中的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰的兩堿中的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰的兩堿基基”的連接的連接得出通過得出通過“脫氧核糖脫氧核糖磷酸磷酸脫氧核糖脫氧核糖”連接連接信息信息2：由題干一個關(guān)鍵詞：由題干一個關(guān)鍵詞“bp即堿基對即堿基對”及及Sma的切割的切割位點位點得出切割產(chǎn)物為三部分，得出切割產(chǎn)物為三部分，796bp的長度向左向右分的長度向左向右分別減小了別減小了3個個bp信息信息3：由：由“目的基因目的基因D中中CG被被TA替換替換”推出推出Sma無法再對突變后形成的無法再對突變后形成的d基因中突變堿基序列進行切割，即基因中突變堿基序列進行切割，即d基因只能被切割為兩部分基因只能被切割為兩部分(1327bp和和661 bp)信息信息4：圖：圖2標記基因標記基因A(抗生素抗生素A抗性基因抗性基因)、B(抗生素抗生素B抗抗性基因性基因)的堿基序列分別為的堿基序列分別為GGATCC、GATC推測只有推測只有BamH切割才能保留其中的一個標記基因和目的基因不切割才能保留其中的一個標記基因和目的基因不受破壞受破壞菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破破破題題思考思考1：基因的平面結(jié)構(gòu)中單、雙鏈中相鄰堿基間的不：基因的平面結(jié)構(gòu)中單、雙鏈中相鄰堿基間的不同連接方式同連接方式思考思考2：限制酶在基因工程操作中的作用特點：限制酶在基因工程操作中的作用特點思考思考3：表達載體構(gòu)建時必須注意的問題：表達載體構(gòu)建時必須注意的問題思考思考4：基因工程操作的基本流程：基因工程操作的基本流程答答題題(1)忽略設(shè)問中單鏈脫氧核苷酸鏈上堿基的連接而誤答忽略設(shè)問中單鏈脫氧核苷酸鏈上堿基的連接而誤答為雙鏈上兩堿基間的連接為雙鏈上兩堿基間的連接“氫鍵氫鍵”(2)忽視題干一個關(guān)鍵信息忽視題干一個關(guān)鍵信息“DNA片段長度片段長度(bp即堿基對即堿基對)”，造成對限制酶切割后的堿基序列長度無法計算，造成對限制酶切割后的堿基序列長度無法計算(3)標記基因的堿基序列特點決定了對表達載體進行切標記基因的堿基序列特點決定了對表達載體進行切割時的酶只有割時的酶只有BamH(4)目的基因與載體連接時一定要注意彼此末端的方向目的基因與載體連接時一定要注意彼此末端的方向性，否則連接后會造成性，否則連接后會造成“基因沉默基因沉默”即基因不能正常即基因不能正常表達表達菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破【答案】(1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)平537bp、790bp、661 bp(3)4(4)BamH抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破【方法總結(jié)】1熟練掌握基因工程的原理(工具及操作程序)是解答有關(guān)基因工程題目的關(guān)鍵。限制酶和DNA連接酶作用部位為磷酸二酯鍵，基本程序可概括為“切、接、增、轉(zhuǎn)、檢”。2依據(jù)受體細胞的種類確定導入方法；依據(jù)對表達產(chǎn)物的要求確定不同水平上的檢測方法。菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破常考實驗?？紝嶒瀱慰寺】贵w的制備單克隆抗體的制備菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破A是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應T淋巴細胞B中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性D是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群【解析】明確單克隆抗體制備過程的幾個關(guān)鍵環(huán)節(jié)是準確解答本題的關(guān)鍵。是從小鼠脾臟中獲得的能產(chǎn)生抗體的漿細胞，A項錯誤；中應該使用能促進細胞融合的促融劑，如聚乙二醇等，B項錯誤；同時具有從脾臟中分離出的漿細胞和骨髓瘤細胞的特性，C項錯誤；是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群，D項正確?！敬鸢浮緿菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破基因工程基因工程 菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破CPCR體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶D不一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細胞【解析】設(shè)計引物時應當考慮需擴增的目的基因與載體兩端的序列進行互補配對，A項錯誤；利用PCR技術(shù)擴增目的基因只需要知道基因兩端的序列，據(jù)此設(shè)計合適的引物即可，不必知道基因的全部序列，B項正確；菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破PCR體系中應該用耐高溫的DNA聚合酶，而不是從受體細胞中提取的普通DNA聚合酶，C項錯誤；需根據(jù)目的基因的編碼產(chǎn)物的特性來選擇合適的受體細胞，如果是分泌蛋白，則最好選用真核細胞作為受體細胞，D項不正確?！敬鸢浮緽菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 提提考考能能三三管管齊齊下下明明考考向向四四步步落落實實固固考考基基二二維維突突破破菜菜 單單高高考考沖沖關(guān)關(guān)理理脈脈絡絡一一目目了了然然二輪專題復習二輪專題復習 生物生物 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