《臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)：實(shí)驗(yàn)二紅細(xì)胞計(jì)數(shù)》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)：實(shí)驗(yàn)二紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（31頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 顯微鏡的使用顯微鏡的使用 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)光學(xué)部分：光學(xué)部分：1 1、目鏡：、目鏡：10102 2、物鏡：、物鏡：低倍（低倍（1010）、高倍（）、高倍（4040）、油鏡（）、油鏡（100100）3 3、聚光鏡、光柵、光、聚光鏡、光柵、光源源機(jī)械部分：機(jī)械部分：1 1、鏡筒、鏡臂、鏡筒、鏡臂2 2、載物臺(tái)、載物臺(tái)3 3、粗、細(xì)調(diào)焦螺旋、粗、細(xì)調(diào)焦螺旋 4 4、鏡座、鏡座顯微鏡的構(gòu)造顯微鏡的構(gòu)造1.1.取鏡和安放取鏡和安放 一手握住鏡臂，一手托住底座，保持直立、平穩(wěn)一手握住鏡臂，一手托住底座，保持直立、平穩(wěn) 顯微鏡置于平穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)的左上角顯微鏡置于平穩(wěn)的實(shí)
2、驗(yàn)臺(tái)的左上角 鏡檢姿勢(shì)要端正鏡檢姿勢(shì)要端正2.2.低倍鏡的操作低倍鏡的操作 調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，物鏡（調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，物鏡（1010）靠近標(biāo)本）靠近標(biāo)本 細(xì)調(diào)螺旋，至目標(biāo)清晰細(xì)調(diào)螺旋，至目標(biāo)清晰 標(biāo)本移動(dòng)螺旋移動(dòng)玻片觀察部位標(biāo)本移動(dòng)螺旋移動(dòng)玻片觀察部位 （同向移動(dòng)）同向移動(dòng)）3.3.高倍鏡的操作高倍鏡的操作 旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換高倍鏡旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換高倍鏡 調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)調(diào)螺旋，視野清晰螺旋，視野清晰（只細(xì)不粗只細(xì)不粗） 調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)調(diào)螺旋時(shí)防止鏡頭與載玻片強(qiáng)力接觸，損壞鏡頭或螺旋時(shí)防止鏡頭與載玻片強(qiáng)力接觸，損壞鏡頭或載玻片。載玻片。4.4.油鏡的操作油鏡的操作 載玻片上滴香柏油，旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換油鏡載玻片上滴香柏
3、油，旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換油鏡 側(cè)面觀察，調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋使側(cè)面觀察，調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒(méi)油中油鏡頭浸沒(méi)油中，剛好貼近載，剛好貼近載玻片，細(xì)調(diào)螺旋微微向上調(diào)至清晰（玻片，細(xì)調(diào)螺旋微微向上調(diào)至清晰（光線最強(qiáng)光線最強(qiáng)） 觀察完畢，擦鏡紙擦拭鏡頭觀察完畢，擦鏡紙擦拭鏡頭 5. 5.顯微鏡使用后的維護(hù)顯微鏡使用后的維護(hù)觀察結(jié)束后，觀察結(jié)束后，調(diào)節(jié)光源到最小調(diào)節(jié)光源到最小再關(guān)掉電源開(kāi)關(guān)再關(guān)掉電源開(kāi)關(guān)先降載物臺(tái)，取下載玻片。先降載物臺(tái)，取下載玻片。用擦鏡液拭去鏡頭上的油，再用干凈的擦鏡紙擦去殘留用擦鏡液拭去鏡頭上的油，再用干凈的擦鏡紙擦去殘留的擦鏡液的擦鏡液 清潔顯微鏡的金屬部件。清潔顯微鏡的金屬部件。將各部分還原
4、，將各部分還原，將物鏡轉(zhuǎn)成將物鏡轉(zhuǎn)成“八八”字形字形，同時(shí)把，同時(shí)把聚光鏡聚光鏡降下降下，以免物鏡和聚光鏡發(fā)生碰撞危險(xiǎn)。，以免物鏡和聚光鏡發(fā)生碰撞危險(xiǎn)。罩上防塵罩，罩上防塵罩，把顯微鏡放回原處。把顯微鏡放回原處。使用步驟：使用步驟： 觀察前的準(zhǔn)備觀察前的準(zhǔn)備 （取鏡和安放）（取鏡和安放）低倍鏡觀察低倍鏡觀察高倍鏡觀察高倍鏡觀察油浸鏡觀察油浸鏡觀察 顯微鏡的維護(hù)顯微鏡的維護(hù) 鏡轉(zhuǎn)成鏡轉(zhuǎn)成“八八”形形 聚光鏡降下聚光鏡降下 對(duì)光，調(diào)焦對(duì)光，調(diào)焦只細(xì)不粗只細(xì)不粗同向移動(dòng)同向移動(dòng)油鏡浸在香柏油中油鏡浸在香柏油中粗調(diào)將載物臺(tái)升起粗調(diào)將載物臺(tái)升起光線最強(qiáng)光線最強(qiáng)使用注意事項(xiàng)使用注意事項(xiàng)1 1、低倍鏡調(diào)焦、
5、觀察、低倍鏡調(diào)焦、觀察 高倍鏡高倍鏡 油鏡油鏡2 2、油鏡要求光線最強(qiáng)：光圈最大、聚光鏡最上、光源最亮油鏡要求光線最強(qiáng)：光圈最大、聚光鏡最上、光源最亮3 3、對(duì)焦時(shí)以轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)螺旋為主，盡量少用細(xì)調(diào)螺旋、對(duì)焦時(shí)以轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)螺旋為主，盡量少用細(xì)調(diào)螺旋4 4、粗調(diào)螺旋只能將鏡頭上移，不可下移、粗調(diào)螺旋只能將鏡頭上移，不可下移5 5、污點(diǎn)的判斷：、污點(diǎn)的判斷：玻片移，物鏡換，目鏡轉(zhuǎn)玻片移，物鏡換，目鏡轉(zhuǎn)6 6、收鏡時(shí)，取下載物臺(tái)上物品，、收鏡時(shí)，取下載物臺(tái)上物品，將油鏡頭擦干凈將油鏡頭擦干凈，物鏡物鏡 轉(zhuǎn)成轉(zhuǎn)成“八八”字形字形，聚光鏡下降至最低處聚光鏡下降至最低處，一手握鏡臂、一，一手握鏡臂、一手托鏡座
6、，放入柜內(nèi)。手托鏡座，放入柜內(nèi)。顯微鏡使用視頻顯微鏡使用視頻紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù) (red blood cell count(red blood cell count，RBCRBC) )手工顯微鏡法手工顯微鏡法l 認(rèn)識(shí)認(rèn)識(shí)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)板l 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)Neubauer計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)板0.1mm0.1mmcounting chamber紅色部分是紅細(xì)胞，紅色部分是紅細(xì)胞，血小板計(jì)數(shù)區(qū)域血小板計(jì)數(shù)區(qū)域 上，下兩個(gè)計(jì)數(shù)室上，下兩個(gè)計(jì)數(shù)室 每個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)劃有長(zhǎng)、寬各每個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)劃有長(zhǎng)、寬各3.0mm3.0mm的方格，平均的方格，平均分分9 9個(gè)大方格個(gè)大方格，其高其高0.1mm0.1mm，每個(gè)大方格面
7、積，每個(gè)大方格面積1.0mm1.0mm2 2，容積為容積為0.1mm0.1mm3 3（ulul） 四角的大方格各分為四角的大方格各分為1616個(gè)中方格個(gè)中方格，中央中央的一個(gè)大的一個(gè)大方格分為方格分為2525個(gè)中方格，每個(gè)中方格又分為個(gè)中方格，每個(gè)中方格又分為1616個(gè)小個(gè)小方格方格 正中及四角的正中及四角的5 5個(gè)中方格是個(gè)中方格是RBCRBC，PLTPLT計(jì)數(shù)區(qū)計(jì)數(shù)區(qū) 位于四角的位于四角的4 4個(gè)大方格為個(gè)大方格為WBCWBC計(jì)數(shù)區(qū)計(jì)數(shù)區(qū)白細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域白細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域鏡下觀鏡下觀鏡下觀鏡下觀原理：原理：等滲稀釋液等滲稀釋液將血液將血液稀釋一定倍數(shù)稀釋一定倍數(shù)(20
8、0倍倍)，充入計(jì)數(shù)，充入計(jì)數(shù) 池后，在顯微鏡下池后，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定區(qū)域內(nèi)計(jì)數(shù)一定區(qū)域內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)量，經(jīng)的紅細(xì)胞數(shù)量，經(jīng) 換算求出換算求出每升每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)量。血液中的紅細(xì)胞數(shù)量。 器材：器材：一次性消毒采血針、一次性消毒采血針、微量吸管、試管、微量吸管、試管、2ml2ml移液管、移液管、 75% 75%乙醇棉球、無(wú)菌干棉球、顯微鏡、改良乙醇棉球、無(wú)菌干棉球、顯微鏡、改良NeubauerNeubauer計(jì)計(jì) 數(shù)板、蓋玻片、玻璃棒等。數(shù)板、蓋玻片、玻璃棒等。試劑：試劑： 生理鹽水生理鹽水或紅細(xì)胞稀釋液或紅細(xì)胞稀釋液(Hayem液液)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)流程紅細(xì)胞計(jì)數(shù)流程2ml
9、N.S10ul全血全血稀釋稀釋/混勻混勻充池，充池，靜置靜置2-3min計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)5個(gè)中方個(gè)中方格格RBC總數(shù)總數(shù)上清洗上清洗3次次低倍鏡瀏覽，低倍鏡瀏覽，高倍鏡計(jì)數(shù)高倍鏡計(jì)數(shù)RBCLoading the counting chamber 混勻，一次完成，不能滿溢、不足、不能有氣泡，靜置混勻，一次完成，不能滿溢、不足、不能有氣泡，靜置2-3min濕潤(rùn)支持柱，濕潤(rùn)支持柱，推壓的方法蓋推壓的方法蓋上蓋玻片上蓋玻片計(jì)數(shù)原則：計(jì)數(shù)原則：遵循一定方向，壓線細(xì)胞數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右遵循一定方向，壓線細(xì)胞數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右不能重復(fù)，不能漏數(shù)不能重復(fù)，不能漏數(shù)Hemacytometer counting
10、chamber 報(bào)告方式：報(bào)告方式：X.XXX.XX10101212/L/L計(jì)算公式：計(jì)算公式：RBC/L 6101225=10 201 10510 =10100NNN注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：采血部位的選擇，采血應(yīng)順利采血部位的選擇，采血應(yīng)順利稀釋倍數(shù)要準(zhǔn)確（血量稀釋倍數(shù)要準(zhǔn)確（血量/稀釋液量）稀釋液量）稀釋液、小試管、稀釋液、小試管、計(jì)數(shù)板，蓋玻片均清潔干燥計(jì)數(shù)板，蓋玻片均清潔干燥混勻，充池一次完成，不能滿溢、不足、有氣泡混勻，充池一次完成，不能滿溢、不足、有氣泡壓線細(xì)胞計(jì)數(shù)：數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右壓線細(xì)胞計(jì)數(shù)：數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右每個(gè)中方格之間細(xì)胞相差每個(gè)中方格之間細(xì)胞相差20個(gè)要重新充池個(gè)
11、要重新充池2次計(jì)數(shù)不超次計(jì)數(shù)不超5%參考值：參考值： 成年：成年：男性男性 (4.05.5)1012/L 女性女性 (3.55.0)1012/L新生兒：新生兒： (6.07.0)1012/L。 臨床意義臨床意義: : 1 1生理性變化生理性變化 年齡與性別的差異年齡與性別的差異 精神因素精神因素 劇烈體力運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng)劇烈體力運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng) 氣壓降低氣壓降低 妊娠中、后期妊娠中、后期2 2病理性變化病理性變化(1) (1) 紅細(xì)胞和血紅蛋白量減少：在臨床最常見(jiàn)于紅細(xì)胞和血紅蛋白量減少：在臨床最常見(jiàn)于各各 種原因的貧血種原因的貧血 急慢性紅細(xì)胞丟失過(guò)多急慢性紅細(xì)胞丟失過(guò)多: :各種原因的出血。各種原因的
12、出血。 紅細(xì)胞壽命縮短：如各種原因的溶血紅細(xì)胞壽命縮短：如各種原因的溶血 造血原料不足造血原料不足 骨髓造血功能減退骨髓造血功能減退（2 2）紅細(xì)胞增多）紅細(xì)胞增多 原發(fā)性紅細(xì)胞增多：真性紅細(xì)胞增多等原發(fā)性紅細(xì)胞增多：真性紅細(xì)胞增多等 繼發(fā)性紅細(xì)胞增多：引起繼發(fā)性紅細(xì)胞增多：引起低氧血癥低氧血癥的疾病如心血管的疾病如心血管病、肺疾病、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)（庫(kù)欣病病、肺疾病、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)（庫(kù)欣病) )等等 相對(duì)性紅細(xì)胞增多相對(duì)性紅細(xì)胞增多紅細(xì)胞計(jì)數(shù)視頻紅細(xì)胞計(jì)數(shù)視頻作業(yè)：作業(yè)：1、繪畫(huà)并簡(jiǎn)單描述牛鮑計(jì)數(shù)板的顯微鏡視、繪畫(huà)并簡(jiǎn)單描述牛鮑計(jì)數(shù)板的顯微鏡視野結(jié)構(gòu)圖，并標(biāo)示紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小野結(jié)構(gòu)圖，并標(biāo)示紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)區(qū)域。板計(jì)數(shù)區(qū)域。2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析。、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析。下周實(shí)驗(yàn)預(yù)告下周實(shí)驗(yàn)預(yù)告 血紅蛋白測(cè)定血紅蛋白測(cè)定 血沉，比容血沉，比容 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 點(diǎn)彩紅細(xì)胞點(diǎn)彩紅細(xì)胞
臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)：實(shí)驗(yàn)二紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
