2019屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 第十一單元 現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題 第36講 細(xì)胞工程學(xué)案.doc

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第36講　細(xì)胞工程 1．植物的組織培養(yǎng)(Ⅱ)　2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆(Ⅱ)　3.細(xì)胞融合與單克隆抗體(Ⅱ) 　植物的組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交 1．細(xì)胞工程的概念 2．細(xì)胞的全能性 (1)含義：具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。 (2)物質(zhì)基礎(chǔ)：細(xì)胞內(nèi)含有本物種全部的遺傳信息。 (3)植物細(xì)胞全能性表達(dá)條件：具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，處于離體狀態(tài)，提供一定的營(yíng)養(yǎng)、激素和其他適宜外界條件。 (4)體內(nèi)細(xì)胞不表達(dá)全能性的原因：基因在特定的時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá)，形成不同的組織、器官。 3．植物組織培養(yǎng)技術(shù) (1)原理：植物細(xì)胞具有全能性。 (2)過(guò)程 (3)培養(yǎng)條件 ①無(wú)菌：培養(yǎng)基滅菌、培養(yǎng)材料和培養(yǎng)器械消毒。 ②固體培養(yǎng)基：大多由無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、激素、瓊脂四部分組成。 ③光照：脫分化階段不需要光照。 ④激素調(diào)控：培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例調(diào)控組織培養(yǎng)進(jìn)程。 (選修3 P36“小知識(shí)”改編)固體培養(yǎng)基中的無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分包括______________；有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分包括______________等物質(zhì)。 答案：水分、無(wú)機(jī)鹽　小分子糖類(lèi)、氨基酸　 4．植物體細(xì)胞雜交技術(shù) (1)概念：將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。 (2)操作流程 ①去壁：酶解法，所用酶為纖維素酶和果膠酶。 ②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合：物理法——離心、振動(dòng)、電激等；化學(xué)法——常用聚乙二醇(PEG)作誘導(dǎo)劑。 ③植物體細(xì)胞雜交成功的標(biāo)志：雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁。 ④優(yōu)點(diǎn)：克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙。 ⑤變異類(lèi)型：染色體變異。 5．植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用 (2)作物新品種的培育：?jiǎn)伪扼w育種、突變體的利用。 (3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：培養(yǎng)到愈傷組織階段。 下圖是植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖，如果A、B植物均為二倍體，據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題： (1)圖中②過(guò)程依據(jù)的原理是_______________________________________________。 (2)植物體細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是______________，其產(chǎn)生與細(xì)胞內(nèi)________(細(xì)胞器)有關(guān)。 (3)③和④過(guò)程分別是________________的過(guò)程。該雜種植物有________個(gè)染色體組。 (4)該雜種植株理論上________(填“可育”或“不可育”)。 答案：(1)細(xì)胞膜具有流動(dòng)性　(2)形成新的細(xì)胞壁　高爾基體　(3)脫分化和再分化　四　(4)可育　 考向1　植物組織的培養(yǎng)過(guò)程 1．(2018江西上高二中調(diào)研)藍(lán)莓中富含的花青素能有效地改善視力，下面為科學(xué)家利用植物組織培養(yǎng)的方法，大量培養(yǎng)藍(lán)莓具體流程的文字圖解。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： 藍(lán)莓組織愈傷組織長(zhǎng)出叢芽生根移栽成活 (1)用于離體培養(yǎng)的藍(lán)莓組織叫做________，該技術(shù)的原理是________________________________________________________________________。 (2)配制MS培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)加入一定量的瓊脂、蔗糖、無(wú)機(jī)鹽、維生素、有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，蔗糖除作為碳源外，還具有____________________________的功能。常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，這三種培養(yǎng)基的主要差異是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)圖中藍(lán)莓組織要經(jīng)過(guò)消毒處理后才能進(jìn)行培養(yǎng)。其①過(guò)程中，細(xì)胞的分化程度會(huì)________(填“升高”“降低”或“不變”)。 (4)愈傷組織經(jīng)過(guò)②③過(guò)程重新分化成根或叢芽的過(guò)程叫________。 (5)藍(lán)莓花青素在60 ℃以下的熱穩(wěn)定性較好，將含花青素的粗品經(jīng)真空干燥(可使水的沸點(diǎn)降低40 ℃)制成成品。采用該方法的主要原因是________________________________________________________________________。 解析：(1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，用于離體培養(yǎng)的組織叫做外植體。(2)配制MS培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)加入一定量的瓊脂、蔗糖、無(wú)機(jī)鹽、維生素、有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，蔗糖除作為碳源外，還具有提供能量和維持滲透壓的功能。常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，這三種培養(yǎng)基的主要差異是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的用量及比例不同。(3)圖中①過(guò)程是脫分化形成愈傷組織的過(guò)程，高度分化的細(xì)胞恢復(fù)分裂能力，則分化程度降低。(4)圖中②③過(guò)程是愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化形成叢芽或根的過(guò)程。(5)含花青素的粗品經(jīng)真空干燥(可使水的沸點(diǎn)降低40 ℃)制成成品，采用該方法的主要原因是避免(干燥時(shí)溫度過(guò)高導(dǎo)致)花青素分解。 答案：(1)外植體　植物細(xì)胞具全能性 (2)提供能量和維持滲透壓　生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的用量及比例不同 (3)降低 (4)再分化 (5)避免(干燥時(shí)溫度過(guò)高導(dǎo)致)花青素分解 2．(2018安徽蕪湖質(zhì)檢)下圖為A、B兩種二倍體植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)步驟①的方法是________________________________________________________。 步驟②常用的化學(xué)試劑是_________________________________________________________， 之后________(是/否)需要篩選。 (2)在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植物的過(guò)程中，運(yùn)用的技術(shù)手段是________________________________________________________________________， 其中步驟④是________。植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新的雜種植物，與A、B兩種植物相比，該雜種植物是新物種的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)培育該雜種植物的過(guò)程中，遺傳物質(zhì)的傳遞是否遵循孟德?tīng)栠z傳規(guī)律？為什么？ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析： (1)圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖，其中①表示去壁獲取原生質(zhì)體的過(guò)程，常用酶解法，即用纖維素酶和果膠酶處理；②表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，常用的化學(xué)試劑是聚乙二醇(PEG)，誘導(dǎo)后形成的兩兩融合的原生質(zhì)體有三種，所以需要進(jìn)行篩選。(2)圖中③表示再生出新細(xì)胞壁的過(guò)程，雜種細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育成為雜種植物，過(guò)程④表示脫分化；⑤表示再分化過(guò)程。圖中獲得的雜種植物與A、B兩種植物間均存在生殖隔離，所以是新物種。(3)圖示為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程，沒(méi)有經(jīng)過(guò)不同配子的結(jié)合，所以不屬于有性生殖，因此該過(guò)程中遺傳物質(zhì)的傳遞不遵循孟德?tīng)栠z傳規(guī)律。 答案：(1)酶解法　聚乙二醇　是 (2)植物組織培養(yǎng)技術(shù)　脫分化　該雜種植株與A、B兩種植物間均存在生殖隔離 (3)不遵循，該過(guò)程不屬于有性生殖 (1)植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值與效果 生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比值 作用效果 比值高時(shí) 促進(jìn)根分化、抑制芽形成 比值低時(shí) 促進(jìn)芽分化、抑制根形成 比值適中 促進(jìn)愈傷組織形成 (2)植物組織培養(yǎng)中光照的使用 脫分化階段不需要給予光照，再分化階段需要給予光照，以利于葉綠素的形成。 　 考向2　植物體細(xì)胞雜交過(guò)程 3．(2018長(zhǎng)春模擬)為培育出含β胡蘿卜素的“黃金大米”，科研人員提出以下兩套培育方案。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題： 甲方案： 乙方案： (1)甲方案中，β胡蘿卜素基因能在玉米和水稻體內(nèi)出現(xiàn)相同表達(dá)結(jié)果的原因是________________________________________________________________________。 若研究人員已知β胡蘿卜素基因序列，可采用________方法獲得β胡蘿卜素基因。②過(guò)程中可用____________技術(shù)檢測(cè)水稻體細(xì)胞DNA上是否插入了β胡蘿卜素基因。 (2)乙方案中，在體細(xì)胞雜交前需要用酶除去細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，誘導(dǎo)體細(xì)胞融合的化學(xué)試劑常用________。通過(guò)⑤獲得“黃金大米”幼苗需要經(jīng)過(guò)________________兩個(gè)過(guò)程，依據(jù)的原理是___________________________________________________________。 在培養(yǎng)過(guò)程中，除了在培養(yǎng)基中添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加____________。 (3)與傳統(tǒng)育種方法相比，甲、乙兩套方案共同的優(yōu)點(diǎn)是 ________________________________________________________________________。 答案：(1)所有生物共用一套遺傳密碼(密碼子)　人工合成　DNA分子雜交　(2)聚乙二醇　脫分化和再分化　(植物)細(xì)胞的全能性　(植物)激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)　(3)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(打破生殖隔離) 考向3　植物細(xì)胞工程的應(yīng)用 4．(2018湖北武漢調(diào)研)應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，不僅可實(shí)現(xiàn)種苗的快速繁殖、培育無(wú)病毒植株，也可加快作物及苗木育種。下面是培育柑橘耐鹽植株的實(shí)驗(yàn)流程： 莖段―→挑選生長(zhǎng)的愈傷組織―→耐鹽植株 回答下列問(wèn)題： (1)愈傷組織是由離體的莖段經(jīng)________過(guò)程形成的，此時(shí)愈傷組織細(xì)胞________(填“具有”或“不具有”)細(xì)胞的全能性。 (2)對(duì)愈傷組織進(jìn)行了兩次處理，處理1中γ射線照射的目的是________________，用γ射線不直接處理莖段而是處理愈傷組織，原因是________________________________________________________________________； 處理2中添加的物質(zhì)X為_(kāi)_______。 (3)植物組織培養(yǎng)技術(shù)也被廣泛應(yīng)用于其他作物的育種中。在培育白菜—甘藍(lán)、三倍體無(wú)子西瓜、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得的抗蟲(chóng)棉中，必須用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是________________________________________________________________________ ________________________。 解析：(1)離體的莖段經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程可形成愈傷組織，此時(shí)愈傷組織具有未分化的特點(diǎn)，細(xì)胞具有較高的全能性。(2)圖中對(duì)愈傷組織進(jìn)行了兩次處理，處理1是用γ射線照射誘發(fā)愈傷組織細(xì)胞發(fā)生基因突變。愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而發(fā)生基因突變。處理2是抗鹽接種實(shí)驗(yàn)，即在培養(yǎng)基中加入NaCl，適應(yīng)一定濃度鹽的愈傷組織才可以生長(zhǎng)，不適應(yīng)的愈傷組織死亡。(3)作物育種研究中常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將含抗蟲(chóng)基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入到植物體細(xì)胞中，再利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得抗蟲(chóng)的農(nóng)作物。運(yùn)用細(xì)胞工程培育白菜—甘藍(lán)雜種植株，需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植株。 答案：(1)脫分化　具有 (2)誘發(fā)基因突變　愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易誘發(fā)基因突變　NaCl(或鹽) (3)白菜—甘藍(lán)、抗蟲(chóng)棉 　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) 1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——?jiǎng)游锛?xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ) (1)原理：細(xì)胞增殖。 (2)過(guò)程 (3)培養(yǎng)條件 ①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；添加抗生素；定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物。 ②營(yíng)養(yǎng)：除正常的有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)外，還需加入血清、血漿等一些天然成分。 ③溫度和pH：適宜溫度為36.50.5__℃(哺乳動(dòng)物)，pH為7.2～7.4。 ④氣體環(huán)境：95%空氣加5%CO2(維持培養(yǎng)液的pH)。 (4)應(yīng)用：生物制品的生產(chǎn)、檢測(cè)有毒物質(zhì)、醫(yī)學(xué)研究。 2．動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 (1)原理：動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。 (2)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過(guò)程 (3)應(yīng)用 ①加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。 ②保護(hù)瀕危物種。 ③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。 ④作為異種移植的供體。 ⑤用于組織器官的移植。 (4)存在問(wèn)題：成功率低、克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題、動(dòng)物食品的安全性問(wèn)題等。 (選修3 P44“尋根問(wèn)底”改編)胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，對(duì)細(xì)胞的消化有兩種情況： (1)短時(shí)間內(nèi)_______________________________________________________(填“會(huì)”或“不會(huì)”)被消化，原因是 ________________________________________________________________________。　 (2)長(zhǎng)時(shí)間后細(xì)胞________(填“會(huì)”或“不會(huì)”)被消化，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案：(1)不會(huì)　細(xì)胞表面具有糖蛋白，對(duì)細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用 (2)會(huì)　細(xì)胞表面糖蛋白的保護(hù)作用是有限的；細(xì)胞膜的主要成分包括磷脂和蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)可被胰蛋白酶水解 1．(2018武漢調(diào)研)如圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖。 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)容器A中放置的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織，原因是其細(xì)胞____________________，易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)先要剪碎，然后用________________________分散細(xì)胞，制成B瓶中的細(xì)胞懸液。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入C瓶中進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱(chēng)為_(kāi)_______。 (2)細(xì)胞正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞絕大部分死亡，只有極少數(shù)細(xì)胞存活，這是因?yàn)榇婊畹募?xì)胞發(fā)生了________，可無(wú)限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為_(kāi)_______代以內(nèi)的細(xì)胞，以保持細(xì)胞正常的________核型。 (3)C、D瓶中的培養(yǎng)液為保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，需要添加一定量的________。培養(yǎng)過(guò)程中還需要提供O2和CO2等氣體環(huán)境，CO2的作用主要是________________________________________________________________________。 (4)動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)圖可知，培養(yǎng)________細(xì)胞一定要添加血清。 解析：(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊(或動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。(4)據(jù)圖可知，培養(yǎng)癌細(xì)胞時(shí)有無(wú)血清影響不大，而培養(yǎng)正常細(xì)胞時(shí)，有血清時(shí)的細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)大于無(wú)血清時(shí)的細(xì)胞數(shù)，故培養(yǎng)正常細(xì)胞必須要添加血清。 答案：(1)分裂能力強(qiáng)　胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)　原代培養(yǎng)　(2)基因突變　10　二倍體　(3)抗生素　維持培養(yǎng)液的pH　(4)正常 2．(2018福建漳州月考)如圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病的過(guò)程圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)圖中②所示的結(jié)構(gòu)名稱(chēng)是_____________________________________________________。 (2)圖中③④所示的生物技術(shù)名稱(chēng)分別是________________、________________。 (3)過(guò)程③通常用去核的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富外，還因?yàn)樗黖_____________________。 (4)過(guò)程④通常用②做受體細(xì)胞的原因是_________________________________________。 (5)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是____________________，該種基因治療所屬類(lèi)型為_(kāi)___________________。 解析：(1)①是從供體(患者)體細(xì)胞分離出的細(xì)胞核，②是從核移植得到的重組細(xì)胞A培養(yǎng)形成的早期胚胎中提取的胚胎干細(xì)胞。(2)③表示核移植技術(shù)，④表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)。(3)核移植的受體細(xì)胞一般是卵母細(xì)胞，原因是它體積大、易操作，含有供胚胎發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，它還含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。(4)早期胚胎中的干細(xì)胞分化程度低，全能性高，可誘導(dǎo)分化成各種組織器官。(5)圖示培育出的細(xì)胞(胰島B細(xì)胞)核來(lái)自患者本人，所以移植后不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；圖中所示基因治療是體外轉(zhuǎn)基因，故所屬類(lèi)型為體外基因治療。 答案：(1)胚胎干細(xì)胞 (2)核移植技術(shù)　轉(zhuǎn)基因技術(shù)(基因工程、DNA重組技術(shù)、基因拼接技術(shù)) (3)含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì) (4)這些細(xì)胞分化程度極低，具有全能性，可以定向地誘導(dǎo)分化為各類(lèi)細(xì)胞 (5)沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)　體外基因治療 (1)核移植時(shí)應(yīng)選MⅡ中期卵母細(xì)胞的原因 ①此類(lèi)細(xì)胞體積大，易于操作；②卵黃多，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，可為發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng)；③卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。 (2)克隆動(dòng)物是由重組的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)而來(lái)的，該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)源于受體細(xì)胞，細(xì)胞核基因來(lái)源于提供細(xì)胞核的親本，其遺傳物質(zhì)來(lái)自2個(gè)親本。 (3)核移植中供體動(dòng)物、提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物、代孕動(dòng)物和克隆動(dòng)物之間的關(guān)系：克隆動(dòng)物絕大部分性狀與供體動(dòng)物相同，少數(shù)性狀與提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物相同，與代孕動(dòng)物的性狀無(wú)遺傳關(guān)系。 (4)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)從生殖方式的角度看屬無(wú)性生殖，重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵，需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持?！? 　動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體 1．動(dòng)物細(xì)胞融合 (1)概念：兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，也稱(chēng)細(xì)胞雜交。 (2)條件：需要用聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒或電激等誘導(dǎo)因素。 (3)原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 (4)結(jié)果：形成具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱(chēng)為雜交細(xì)胞。 (5)意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段，為制備單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。 2．單克隆抗體 (1)制備原理：一種漿細(xì)胞產(chǎn)生一種抗體，漿細(xì)胞在體外不能(填“能”或“不能”)無(wú)限增殖；骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖；漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞，既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (2)制備過(guò)程 (3)制備單克隆抗體過(guò)程中的兩次篩選 項(xiàng)目 篩選的對(duì)象 方法 第一次 篩選 雜交瘤細(xì)胞 利用特定的選擇培養(yǎng)基：在該培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞能存活，其他細(xì)胞(未融合的B細(xì)胞和瘤細(xì)胞、融合后的B—B細(xì)胞和瘤—瘤細(xì)胞)均不能成活 第二次 篩選 能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞 利用特定抗原通過(guò)抗原—抗體雜交技術(shù)確認(rèn)抗體性質(zhì) (4)優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備。 (5)用途：作為診斷試劑；用于治療疾病和運(yùn)載藥物。 下圖為單克隆抗體制備流程(順序已被打亂)，請(qǐng)據(jù)圖分析： 　 (1)圖中B注射特定抗原的目的是什么？ (2)在獲取C細(xì)胞的過(guò)程中，篩選淘汰了哪些細(xì)胞？ (3)請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)。 答案：(1)目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，從而產(chǎn)生效應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)。 (2)未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)被淘汰，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)。 (3) 1．如圖為動(dòng)物細(xì)胞融合示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)圖中仙臺(tái)病毒的作用是___________________________________________。 (2)若僅考慮兩兩融合，則A細(xì)胞和B細(xì)胞融合后共有______________________________三種類(lèi)型。 (3)由雜種細(xì)胞形成無(wú)性系1、2、3的方法，可以稱(chēng)為_(kāi)_____________。 (4)此項(xiàng)技術(shù)最重要的應(yīng)用是________________________________。 解析：(1)誘導(dǎo)細(xì)胞融合需要有促融劑，例如聚乙二醇、仙臺(tái)病毒等。(2)若僅考慮兩兩融合，則A細(xì)胞和B細(xì)胞融合后共有A—A、A—B、B—B三種類(lèi)型。(3)無(wú)性繁殖可以稱(chēng)之為克隆。(4)細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用是制備單克隆抗體。 答案：(1)促進(jìn)細(xì)胞融合(作為促融劑) (2)A—A、A—B、B—B (3)克隆 (4)制備單克隆抗體 2．(2018寧夏平羅中學(xué)月考)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫病，致殘性強(qiáng)。研究表明，該病的病理與腫瘤壞死因子α(TNFα)密切相關(guān)，而一種人鼠嵌合的抗TNFα單克隆抗體能有效治療RA。如圖為該單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的____________、____________技術(shù)。 (2)圖中的抗原A是____________，HAT培養(yǎng)基的作用是____________。B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞具有的特點(diǎn)是_______________________________________。 (3)醫(yī)療上，把單克隆抗體與化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合制成“________”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細(xì)胞并將其殺死。 (4)克隆動(dòng)物是指用____________方法得到的動(dòng)物。 (5)單克隆抗體的特點(diǎn)是________、________、________。 解析：(1)單克隆抗體制備涉及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。(2)圖中刺激免疫動(dòng)物產(chǎn)生抗TNFα單克隆抗體的抗原是腫瘤壞死因子α(TNFα)。HAT培養(yǎng)基的作用是篩選出雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。(3)醫(yī)療上，把單克隆抗體與化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細(xì)胞并將其殺死。(4)克隆動(dòng)物是指用核移植方法得到的動(dòng)物。(5)單克隆抗體的特點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備 答案：(1)動(dòng)物細(xì)胞融合　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (2)腫瘤壞死因子α(或TNFα)　篩選出雜交瘤細(xì)胞　既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體 (3)生物導(dǎo)彈　(4)(動(dòng)物體細(xì)胞)核移植 (5)特異性強(qiáng)　靈敏度高　并可能大量制備 [清一清] 易錯(cuò)點(diǎn)1　不清楚植物脫毒苗培養(yǎng)時(shí)選擇要求及原理 [點(diǎn)撥]　 由于植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少，所以常采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗。 易錯(cuò)點(diǎn)2　誤認(rèn)為植物組織培養(yǎng)均需“再分化至幼苗”，“人工種子”即平常所說(shuō)的“種子” [點(diǎn)撥]　 (1)組織培養(yǎng)的目的不同，培養(yǎng)的階段不同。如：生產(chǎn)細(xì)胞代謝產(chǎn)物，只需培養(yǎng)至愈傷組織時(shí)期；生產(chǎn)人工種子，則需要培養(yǎng)至胚狀體時(shí)期；獲得植株就需培養(yǎng)至幼苗時(shí)期。 (2)人工種子是通過(guò)無(wú)性生殖(植物體細(xì)胞的組織培養(yǎng)技術(shù))形成的，只有一個(gè)親本的性狀；自然種子是有性生殖的產(chǎn)物，具有兩個(gè)親本的性狀。 易錯(cuò)點(diǎn)3　混淆植物有性生殖與體細(xì)胞雜交中遺傳物質(zhì)的變化 [點(diǎn)撥]　若兩個(gè)不同品種的植物細(xì)胞A、B進(jìn)行融合，A含有2X條染色體，2個(gè)染色體組，基因型為Aabb；B含有2Y條染色體，2個(gè)染色體組，基因型為ccDd，則： (1)植物體細(xì)胞雜交獲得的新植株應(yīng)為四倍體，體細(xì)胞中染色體數(shù)為2X＋2Y，基因型為AabbccDd，從中不難看出，體細(xì)胞雜交即兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，不管是染色體數(shù)、基因型還是染色體組都采用直接相加的方法。 (2)植物有性雜交獲得的子代細(xì)胞中染色體數(shù)為X＋Y、基因?yàn)锳bcD或abcD或Abcd或abcd，即先減半再相加。 易錯(cuò)點(diǎn)4　誤認(rèn)為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中加入5%CO2的目的是維持氣體平衡或用于呼吸 [點(diǎn)撥]　 動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需向培養(yǎng)液中加入5%CO2(＋95%空氣)，加入CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH。 易錯(cuò)點(diǎn)5　不清楚動(dòng)物細(xì)胞克隆化培養(yǎng)時(shí)為何常選10代以內(nèi)的細(xì)胞，而瘤細(xì)胞卻為50代以后 [點(diǎn)撥]　取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng)，一般選用傳至10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。然而欲獲得無(wú)限增殖的瘤細(xì)胞則往往在50代以后，其遺傳物質(zhì)已發(fā)生變化，具癌變特性。 [判一判] (1)在誘導(dǎo)離體菊花莖段形成幼苗的過(guò)程中，不會(huì)發(fā)生細(xì)胞的增殖和分化(四川高考)(　　) (2)在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞 (　　) (3)棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗能體現(xiàn)細(xì)胞全能性(　　) (4)植物的每個(gè)細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性(　　) (5)可以用鹽酸處理植物細(xì)胞獲得植物原生質(zhì)體(　　) (6)經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體可直接作為人工種子(　　) (7)微型繁殖一定能保持親本的優(yōu)良性狀(　　) (8)組織培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)的細(xì)胞由于處于不斷的分生狀態(tài)而容易發(fā)生突變(　　) (9)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)應(yīng)從組織培養(yǎng)得到的新個(gè)體中提取細(xì)胞產(chǎn)物(　　) (10)肝細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸(　　) (11)與“多利”羊等克隆哺乳動(dòng)物相關(guān)的技術(shù)有胚胎移植、細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)(　　) (12)植物原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合原理是相同的(　　) (13)小鼠骨髓瘤細(xì)胞的染色體數(shù)為40，B淋巴細(xì)胞的染色體數(shù)為46，融合后形成的雜交瘤細(xì)胞DNA分子數(shù)為86(　　) (14)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎(　　) (15)體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體(　　) 答案：(1)　(2)　(3)√　(4)　(5)　(6)　(7)　(8)√　(9)　(10)　(11)√　(12)√　(13)　(14)　(15) (高考新課標(biāo)標(biāo)全國(guó)卷Ⅱ)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物。 回答下列問(wèn)題： (1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用________酶和________酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的________，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成________組織，然后經(jīng)過(guò)________形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱(chēng)為_(kāi)_______________________________________________________________________。 (2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指____________________________________。假設(shè)甲和乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是________________________________________________________________________ ____________________。 (3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的____________________等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。 解析：(1)植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程包括植物細(xì)胞融合和植物組織培養(yǎng)，其過(guò)程依次為酶解法去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁、用物理或化學(xué)法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁、雜種細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)(脫分化形成愈傷組織，再分化形成幼根和芽進(jìn)而形成完整植株)培育成完整植株。其中，酶解法去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁利用了酶的專(zhuān)一性，選擇纖維素酶和果膠酶，水解植物細(xì)胞的細(xì)胞壁的主要成分——纖維素和果膠，暴露出有活力的原生質(zhì)體。 (2)多倍體是指體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上的染色體組的個(gè)體。甲和乙均為二倍體植物，假設(shè)二者有性雜交的后代不可育，其原因是該后代在進(jìn)行減數(shù)第一次分裂過(guò)程中，由于沒(méi)有同源染色體，聯(lián)會(huì)出現(xiàn)紊亂，不能產(chǎn)生可育的配子。而植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的雜種植物，細(xì)胞內(nèi)含有原物種體細(xì)胞內(nèi)的染色體，在減數(shù)第一次分裂過(guò)程中能夠進(jìn)行同源染色體配對(duì)，產(chǎn)生可育的配子。(3)經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等，用人工薄膜包裝后可得到人工種子。 答案：(1)纖維素　果膠　原生質(zhì)體　愈傷　再分化(或分化)　植物體細(xì)胞雜交技術(shù)　(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體(其他合理答案也可)　在減數(shù)分裂過(guò)程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(其他合理答案也可)　(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽(答對(duì)其中一個(gè)即可) (2016高考全國(guó)卷Ⅱ)如圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。 回答下列問(wèn)題： (1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為_(kāi)___________。過(guò)程①表示去除細(xì)胞核，該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用________的方法。②代表的過(guò)程是__________。 (2)經(jīng)過(guò)多次傳代后，供體細(xì)胞中__________________的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。 (3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了________________________________________________________________________。 解析：(1)核移植過(guò)程中，供體的體細(xì)胞中性染色體組成可為XX或XY；去核時(shí)常采用顯微操作的方法；圖示②過(guò)程表示胚胎移植。(2)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)，細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)由于卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，所以克隆動(dòng)物與供體性狀不完全相同。(4)克隆動(dòng)物的成功獲得證明了已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。 答案：(1)XX或XY　顯微操作　胚胎移植 (2)遺傳物質(zhì)　(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響　(4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性 (高考新課標(biāo)全國(guó)卷Ⅰ)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。 回答下列問(wèn)題： (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是________小鼠，理由是________________________________________________________________________。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________， 體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是_______________________________________________。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有________個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是____________。 解析：(1)據(jù)圖分析可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到16 000以上，小鼠Y的血清抗體的效價(jià)最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞。細(xì)胞的融合是隨機(jī)的，并且不可能所有細(xì)胞都融合，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類(lèi)型的細(xì)胞。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的是具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目為40＋60＝100條。(4)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的，且經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞高度分化，不能無(wú)限增殖，而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡。 答案：(1)4　Y　Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高　(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞　細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100% (3)1　100　(4)不能無(wú)限增殖 [課時(shí)作業(yè)] 1．傳統(tǒng)的人工繁殖蘭花的方法是分株繁殖和種子繁殖，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人們開(kāi)始采用“組織培養(yǎng)繁殖蘭花”，如圖所示，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)圖中①過(guò)程為_(kāi)_______，②的名稱(chēng)為_(kāi)_______，其細(xì)胞與葉肉細(xì)胞相比，不含有的細(xì)胞器是________。 (2)蘭花的葉肉細(xì)胞之所以能培養(yǎng)為新個(gè)體，是因?yàn)榧?xì)胞中含有__________________，具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。 (3)圖中③過(guò)程為_(kāi)_______。與①過(guò)程相比較，培養(yǎng)基中各種激素的種類(lèi)________(填“相同”或“不同”，下同)，各種激素的含量________。 (4)有人想利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)解決蘭花生根速度慢、幼苗生存能力弱的問(wèn)題，但操作后得到的“韭菜—蘭花”，并沒(méi)有預(yù)想中的“繁殖容易，香氣濃郁”，可能的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案：(1)脫分化　愈傷組織　葉綠體　(2)本物種的全部遺傳信息　(3)再分化　相同　不同　(4)兩個(gè)物種之間的基因相互影響，導(dǎo)致某些基因無(wú)法正常表達(dá) 2．已知番茄的紅果(Y)對(duì)黃果(y)為顯性，二室(M)對(duì)多室(m)為顯性，控制兩對(duì)相對(duì)性狀的基因分別位于兩對(duì)同源染色體上。育種工作者利用紅果多室(Yymm)番茄植株，采用不同的方法進(jìn)行了四組實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題： (1)以上四種育種實(shí)驗(yàn)都主要應(yīng)用了______________________________________的原理，培育中發(fā)生了脫分化的過(guò)程有________。 (2)用番茄植株的花粉隨機(jī)進(jìn)行有關(guān)實(shí)驗(yàn)，得到幼苗B直接移栽，發(fā)育成的番茄植株的基因型和表現(xiàn)型分別是________、________，如果植物體C僅是花粉兩兩隨機(jī)融合得到的，則植物體C的基因型及其比例是______________。 (3)圖中______________大部分細(xì)胞中染色體數(shù)量最少，要保證植物體B可以用于生產(chǎn)，培育中④過(guò)程可使用____________________處理幼苗。 (4)圖中植物體________少數(shù)細(xì)胞中染色體數(shù)量最多，培育該植物體的過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)_______________________________________________________________________， 植物體D能表現(xiàn)出兩個(gè)親本的一些性狀，根本原因是__________________________________。 (5)植物體A只表現(xiàn)紅果多室，原因是___________________________________。 答案：(1)植物細(xì)胞全能性?、佗邰茛? (2)Ym或ym　無(wú)果　YYmm∶Yymm∶yymm＝1∶2∶1 (3)花粉和幼苗B　一定濃度的秋水仙素或適當(dāng)?shù)蜏? (4)D　植物體細(xì)胞雜交　具有兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì) (5)該培育過(guò)程中只進(jìn)行了有絲分裂，且沒(méi)發(fā)生基因突變，完全保持了親本的遺傳性狀 3．(2015高考安徽卷)科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如下圖。 (1)由過(guò)程①獲得的A為_(kāi)______________________________。 (2)在核移植之前，必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核，目的是___________________________。 受體應(yīng)選用________期卵母細(xì)胞。 (3)進(jìn)行胚胎移植時(shí)，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生_______________， 這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。 (4)采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無(wú)限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊，這是因?yàn)開(kāi)_______________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)分析圖示可知，過(guò)程①構(gòu)建的A為含目的基因的表達(dá)載體。 (2)核移植以前，必須去掉受體卵母細(xì)胞的核，目的是保證核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞。受體應(yīng)該選用處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞。 (3)在進(jìn)行胚胎移植時(shí)，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的外來(lái)胚胎基本上不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。 (4)轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆產(chǎn)生的重組細(xì)胞具有全能性，培養(yǎng)產(chǎn)生的含目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，因此理論上可獲得無(wú)限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊。 答案：(1)含目的基因的表達(dá)載體 (2)保證核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞 MⅡ中 (3)免疫排斥反應(yīng) (4)整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng) 4．(2018重慶萬(wàn)州二中月考)單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可以大量制備，已被廣泛應(yīng)用于疾病的診斷和治療。用H7N9病毒制備單克隆抗體的流程如圖所示： (1)過(guò)程③常用的方法是__________________________________________。 (2)向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生________免疫。從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞Ⅰ是________________，細(xì)胞Ⅱ應(yīng)具有的特點(diǎn)是________________________________。 (3)體外培養(yǎng)細(xì)胞Ⅱ，首先應(yīng)保證其處于_________________的環(huán)境中，其次需要提供充足的營(yíng)養(yǎng)和適宜的溫度。培養(yǎng)箱充入二氧化碳的作用是________________。 (4)對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞Ⅱ還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和________________檢測(cè)。 (5)若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的________作為疫苗。 解析：(1)③將重組DNA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞，常用顯微注射法。(2)向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，這是體液免疫，從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞 Ⅰ 是B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞或已免疫的B淋巴細(xì)胞)，將無(wú)限增殖的基因?qū)霛{細(xì)胞，得到的細(xì)胞 Ⅱ 應(yīng)具有的特點(diǎn)是既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。(3)體外培養(yǎng)細(xì)胞 Ⅱ ，首先應(yīng)保證其處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境中，其次需要提供充足的營(yíng)養(yǎng)和適宜的溫度。培養(yǎng)箱充入二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH。(4)對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞 Ⅱ 還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和檢測(cè)(專(zhuān)一)抗體。(5)疫苗為毒性弱的抗原，因此要預(yù)防H7N9禽流感，可以用圖中的抗原蛋白作為疫苗。 答案：(1)顯微注射法　(2)體液(只答特異性不可)　B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞或已免疫的B淋巴細(xì)胞)　既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體　(3)無(wú)菌、無(wú)毒(缺一不可) 維持培養(yǎng)液的pH　(4)(專(zhuān)一)抗體　(5)抗原蛋白 5．(2018湖南長(zhǎng)郡中學(xué)模擬)動(dòng)植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域有著廣泛的用途。回答下列問(wèn)題： (1)在將兩種植物細(xì)胞進(jìn)行雜交之前，需要用____________________酶進(jìn)行處理，若將處理后的細(xì)胞放入較高濃度的蔗糖溶液中，會(huì)發(fā)生________。誘導(dǎo)兩種植物細(xì)胞融合可以采用物理或化學(xué)的方法進(jìn)行，常用的物理方法有______________________________ (寫(xiě)2種即可)。 (2)融合的細(xì)胞形成愈傷組織，在愈傷組織的培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值________(填“高”或“低”)時(shí)，有利于叢芽的分化；通過(guò)上述過(guò)程獲得雜種植株依據(jù)的原理是________________________________________________________________________。 (3)在制備單克隆抗體的過(guò)程中，融合的結(jié)果是出現(xiàn)多種不同的雜交細(xì)胞，需要在特定的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，從而得到________細(xì)胞。單克隆抗體與傳統(tǒng)方法獲得的抗體相比，具有________________________________________________________________________ 的特點(diǎn)，因此廣泛用于疾病的診斷等方面。 解析：(1)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程有兩個(gè)關(guān)鍵，一個(gè)是在將植物細(xì)胞進(jìn)行雜交之前，必須去除細(xì)胞壁，該過(guò)程需要用到纖維素酶和果膠酶；另外一個(gè)是誘導(dǎo)原生質(zhì)體的融合，方法包括物理法(離心、振動(dòng)、電刺激)和化學(xué)法(聚乙二醇)。將處理后的細(xì)胞放入較高濃度的蔗糖溶液中，會(huì)發(fā)生滲透作用。(2)在愈傷組織的培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值低時(shí)，有利于叢芽的分化；通過(guò)題述過(guò)程獲得雜種植株依據(jù)的原理是細(xì)胞膜具有一定流動(dòng)性和植物細(xì)胞具有全能性。(3)用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠大量增殖又能產(chǎn)生特異性抗體。與傳統(tǒng)方法獲得的抗體相比，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備的特點(diǎn)。 答案：(1)纖維素酶和果膠　滲透作用　離心、振動(dòng)、電激 (2)低　細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞具有全能性 (3)雜交瘤　 特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備