（全國通用版）2019版高考生物一輪復(fù)習(xí) 選考部分 生物技術(shù)實(shí)踐學(xué)案.doc

選考部分 生物技術(shù)實(shí)踐第1講 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用突破點(diǎn)(一)果酒和果醋的制作(對(duì)應(yīng)學(xué)生用書P194) 1制作原理類型菌種反應(yīng)果酒酵母菌階段1：有氧條件下，酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖，其反應(yīng)式為：C6H12O66O26CO26H2O階段2：無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精，其反應(yīng)式為：C6H12O62C2H5OH2CO2果醋醋酸菌氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸，其反應(yīng)式為：C6H12O62O22CH3COOH2CO22H2O缺少糖源、氧氣充足時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，其反?yīng)式為：C2H5OHO2 CH3COOHH2O2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作(2016全國卷)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}：(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程和是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的_中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙醇與_試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)；過程在酵母菌細(xì)胞的_中進(jìn)行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度_。(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在_條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度_(填“低于”或“高于”)第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于_核生物，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中_(填“含有”或“不含有”)線粒體。解析：(1)圖中過程和是酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇的過程，無氧呼吸的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。乙醇可用酸性重鉻酸鉀試劑檢測，顏色由橙色變?yōu)榛揖G色。過程為有氧呼吸的第二和第三階段，場所為線粒體。在有氧條件下酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，產(chǎn)生更多的能量供酵母菌繁殖利用，故有氧條件下酵母菌的繁殖速度更快。(2)醋酸桿菌是好氧型細(xì)菌，因此，在醋酸桿菌作用下，將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程需要在有氧條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中，第一階段酵母菌產(chǎn)生乙醇的適宜溫度為1825 ，第二階段醋酸桿菌產(chǎn)生醋酸的適宜溫度為3035 ，第一階段的溫度低于第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于原核生物，原核細(xì)胞中的細(xì)胞器只有核糖體一種，不含線粒體。答案：(1)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)酸性重鉻酸鉀線粒體快(2)有氧(3)低于(4)原不含有1果酒和果醋發(fā)酵裝置的設(shè)計(jì)思路(1)因酵母菌的繁殖需要空氣，醋酸菌是好氧菌，所以在果酒制作的前期和果醋制作的整個(gè)過程中都需氧。因酵母菌產(chǎn)生酒精是在無氧條件下，應(yīng)控制進(jìn)入氧氣，故應(yīng)在充氣口設(shè)置開關(guān)。(2)由于在發(fā)酵過程中都產(chǎn)生CO2，因此需設(shè)排氣口；為防止空氣中微生物的污染，排氣口應(yīng)連接一個(gè)長而彎曲的膠管。(3)因要對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)監(jiān)測，應(yīng)設(shè)置出料口便于取料。2果酒和果醋制作成功的關(guān)鍵點(diǎn)項(xiàng)目說明材料的選擇與處理選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。沖洗以洗去灰塵為目的，以防洗去野生型酵母菌防止發(fā)酵液被污染榨汁機(jī)和發(fā)酵瓶等都需清洗干凈，且發(fā)酵瓶要進(jìn)行消毒；清洗葡萄時(shí)要先清洗后除枝梗；發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管而不用直管控制發(fā)酵條件葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留約1/3的空間，目的是先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，快速繁殖，耗盡O2后再進(jìn)行酒精發(fā)酵，防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液的溢出；嚴(yán)格控制溫度：1825 利于酵母菌的繁殖和酒精發(fā)酵；3035 利于醋酸菌的繁殖和果醋的發(fā)酵；充氣：酒精發(fā)酵為無氧發(fā)酵，需關(guān)閉充氣口；醋酸發(fā)酵為有氧發(fā)酵，需經(jīng)充氣口充氣1下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，正確的是()A在制作果酒和果醋的實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)該一直保持厭氧環(huán)境B當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸菌能將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸C由于酵母菌的繁殖能力很強(qiáng)，不需對(duì)所用裝置進(jìn)行消毒處理D溫度對(duì)酵母菌酒精發(fā)酵的影響很大，而對(duì)醋酸菌的發(fā)酵影響不大解析：選B果酒制備用的菌種是酵母菌，為兼性厭氧型，進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，溫度一般控制在1825 ；果醋制備用的菌種是醋酸菌，屬于好氧型細(xì)菌，發(fā)酵時(shí)需要持續(xù)通入空氣，溫度應(yīng)控制在3035 ；果酒和果醋制作時(shí)都要對(duì)制作工具進(jìn)行消毒，消除雜菌影響。2如圖表示各種因素對(duì)醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的影響，其中錯(cuò)誤的是()解析：選C溫度(pH)通過影響酶的活性來改變醋酸的產(chǎn)生速率，在最適溫度(pH)時(shí)產(chǎn)生速率最大，高于或低于該溫度(pH)都會(huì)使活性降低(甚至喪失)，A、D正確。醋酸菌是好氧菌，在一定范圍內(nèi)，隨著溶氧量的增加，醋酸會(huì)隨著該菌生長繁殖速率的加快而增加，但當(dāng)溶氧量增大到一定值時(shí)，由于受其他條件的限制，不可能繼續(xù)增加而達(dá)到最大產(chǎn)生速率，B正確。醋酸產(chǎn)生速率隨時(shí)間的變化在最初階段可能不斷加快，當(dāng)活菌數(shù)目達(dá)到最多時(shí)其產(chǎn)生總量會(huì)繼續(xù)增加，而產(chǎn)生速率則不再有明顯加快的現(xiàn)象，C錯(cuò)誤。突破點(diǎn)(二)腐乳的制作 1制作原理2制作流程及影響因素1(2017江蘇高考)下列關(guān)于“腐乳的制作”實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是()A控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味B腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細(xì)菌產(chǎn)生解析：選B控制發(fā)酵溫度的主要目的是利于菌種繁殖和代謝；腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用；毛霉的作用主要是分解蛋白質(zhì)和脂肪；成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要是毛霉產(chǎn)生的菌絲。2某品牌的腐乳獨(dú)具特色，它采用優(yōu)質(zhì)黃豆作為原料，經(jīng)嚴(yán)格篩選后用傳統(tǒng)工藝制成?；卮鹣嚓P(guān)問題：(1)在腐乳腌制過程中起主要作用的是毛霉，毛霉和細(xì)菌共有的細(xì)胞器是_?，F(xiàn)代科學(xué)研究表明，除毛霉外，還有多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如_(寫出兩種即可)等。(2)毛霉等多種微生物產(chǎn)生的_酶和_酶，使制作的腐乳更加鮮美且易于消化吸收。要制作出色、香、味俱全的腐乳，關(guān)鍵在于_的配制。(3)腐乳制作過程中需要加鹽腌制8 d左右，加鹽可以_，使豆腐塊變硬，并且在接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些，避免_，裝瓶時(shí)加入鹵湯中的_和_也有相同的作用。(4)在制作過程中，若將腐乳坯堆積起來會(huì)導(dǎo)致_，影響毛霉生長。解析：(1)多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母菌、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉屬于真核生物，與細(xì)菌(原核生物)共有的細(xì)胞器是核糖體。(2)毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味，是由酒及各種香辛料配制而成的。(3)加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時(shí)還能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。鹵湯中的酒和香辛料也具有防腐殺菌的作用。(4)在制作過程中，若將腐乳坯堆積起來會(huì)因毛霉等呼吸作用釋放的能量不能揮發(fā)而使堆內(nèi)溫度升高，影響毛霉的生長。答案：(1)核糖體青霉、酵母菌(合理即可)(2)蛋白脂肪鹵湯(3)析出豆腐中的水分豆腐塊腐敗變質(zhì)香辛料酒(4)堆內(nèi)溫度升高(合理即可)影響腐乳品質(zhì)的因素項(xiàng)目說明水的控制含水量約70%，用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形鹽的控制鹽濃度過高會(huì)影響腐乳的口味；鹽濃度過低，腐乳易腐敗變質(zhì)酒的控制酒的含量一般控制在12%左右。酒精含量過高，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗溫度控制溫度為1518 ，適合毛霉生長發(fā)酵時(shí)間控制在6個(gè)月左右香辛料具有調(diào)味和殺菌的作用，也會(huì)影響腐乳的風(fēng)味或質(zhì)量1下列有關(guān)腐乳的敘述正確的是()腐乳的制作主要是利用了微生物發(fā)酵的原理，主要參與的微生物是青霉用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲，嚴(yán)格地說是直立菌絲，豆腐中還有匍匐菌絲決定腐乳特殊口味的是鹵湯腐乳的營養(yǎng)豐富，是因?yàn)榇蠓肿游镔|(zhì)經(jīng)過發(fā)酵作用分解成小分子且易于消化吸收的物質(zhì)鹵湯中含酒量應(yīng)該控制在21%左右，酒精含量過高，腐乳成熟的時(shí)間會(huì)延長；含量過低，不足以抑制微生物的生長ABC D解析：選B參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，豆腐上生長的白毛是毛霉的直立菌絲；毛霉產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶能將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解為小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸；用來制作腐乳的豆腐一般含水量為70%左右；鹵湯直接關(guān)系著腐乳的色、香、味，鹵湯中酒的含量應(yīng)該控制在12%左右。2(2018濟(jì)寧模擬)紅方是腐乳的一種。請回答與其制作有關(guān)的問題：(1)補(bǔ)充制作紅方的實(shí)驗(yàn)流程：_加鹽腌制_密封腌制。(2)在實(shí)驗(yàn)流程中，首先將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，籠屜中的溫度應(yīng)控制在_，并保持一定的_。5天后豆腐塊表面布滿毛霉菌絲，這些毛霉來自空氣中的_。(3)在實(shí)驗(yàn)流程操作中，向長滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬。同時(shí)，鹽還能_，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。解析：(1)制作紅方的實(shí)驗(yàn)流程：豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制。(2)在實(shí)驗(yàn)流程中，首先將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，籠屜中的溫度應(yīng)控制在1518 ，并保持一定的濕度。5天后豆腐塊表面布滿毛霉菌絲，這些毛霉來自空氣中的毛霉孢子。(3)在實(shí)驗(yàn)流程操作中，向長滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬。同時(shí)，鹽還能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。答案：(1)豆腐上長出毛霉加鹵湯裝瓶(2)1518濕度毛霉孢子(3)抑制微生物的生長突破點(diǎn)(三)泡菜的制作 1泡菜的制作(1)菌種來源：附著在蔬菜上的乳酸菌。(2)制作原理：在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。反應(yīng)式：C6H12O62C3H6O3。(3)完善制作流程：2測定亞硝酸鹽的含量(1)檢測原理有關(guān)反應(yīng)：NO反應(yīng)物玫瑰紅色染料。判斷方法：觀察樣品顏色變化，并與標(biāo)準(zhǔn)顯色液比較，然后計(jì)算亞硝酸鹽含量。亞硝酸鹽溶液的濃度高，顏色深些；溶液濃度低，顏色淺些。(2)檢測步驟配制溶液制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液制備樣品處理液比色。(2013全國卷)回答下列有關(guān)泡菜制作的問題：(1)制作泡菜時(shí)，所用鹽水需煮沸，其目的是_。為了縮短制作時(shí)間，有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是_。(2)泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進(jìn)行_的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的_中。(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有_、_和_等。(4)從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是_，原因是_。解析：(1)細(xì)菌分布廣泛，制作泡菜時(shí)，需要乳酸菌進(jìn)行發(fā)酵，為防止雜菌污染，所需鹽水需要煮沸；加入陳泡菜液，可以增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸產(chǎn)生。(2)乳酸菌為原核生物，可通過無氧呼吸將葡萄糖分解為乳酸，其無氧呼吸的過程發(fā)生在乳酸菌的細(xì)胞質(zhì)中。(3)在泡菜制作過程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量等。(4)由于乳酸菌比雜菌更為耐酸，在酸性環(huán)境中，乳酸菌能夠正常地增殖，而其他雜菌繁殖將受到抑制，所以在此過程中，乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少。答案：(1)殺滅雜菌增加乳酸菌數(shù)量(2)無氧呼吸細(xì)胞質(zhì)(3)溫度腌制時(shí)間食鹽用量(4)乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少乳酸菌比雜菌更為耐酸1泡菜腌制中乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化發(fā)酵時(shí)期乳酸菌乳酸亞硝酸鹽發(fā)酵初期少(有O2，乳酸菌活動(dòng)受抑制)少增加(硝酸鹽還原菌的作用)發(fā)酵中期最多(乳酸抑制其他菌活動(dòng))積累、增多、pH下降下降(硝酸鹽還原菌受抑制，部分亞硝酸鹽被分解)發(fā)酵后期減少(乳酸繼續(xù)積累，pH繼續(xù)下降，抑制其活動(dòng))繼續(xù)增多，pH繼續(xù)下降下降至相對(duì)穩(wěn)定(硝酸鹽還原菌被完全抑制)變化曲線注意：亞硝酸鹽是硝酸鹽還原菌促進(jìn)硝酸鹽還原形成的，而不是硝化細(xì)菌氧化氨形成的2四種傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品的比較菌種呼吸類型原理溫度果酒酵母菌兼性厭氧無氧呼吸產(chǎn)生酒精1825 果醋醋酸菌需氧糖(酒精)醋酸3035 腐乳毛霉等需氧蛋白酶、脂肪酶分別水解蛋白質(zhì)、脂肪1518 泡菜乳酸菌無氧無氧呼吸產(chǎn)生乳酸室溫1下列關(guān)于泡菜制作的敘述，錯(cuò)誤的是()A泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵的過程即乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸的過程B制備樣品處理液時(shí)，加入氫氧化鋁乳液的目的是除去色素等雜質(zhì)，得到澄清溶液C腌制時(shí)，溫度過高、食鹽量過低、腌制的時(shí)間過短易引起細(xì)菌大量繁殖D制作泡菜的過程中，亞硝酸鹽的含量變化規(guī)律是先減少后增加解析：選D制作泡菜過程中，亞硝酸鹽的含量變化為先增加后減少。2(2014海南高考)已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時(shí)間有關(guān)。為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學(xué)設(shè)計(jì)了一個(gè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等?；卮鹣嚓P(guān)問題：(1)請完善下列實(shí)驗(yàn)步驟。標(biāo)準(zhǔn)管的制備：用_和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管。樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的_，加到不同的比色管中，然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管。將每個(gè)_分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺_的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。(2)如圖表示的是泡菜中_趨勢。(3)泡菜制作過程中產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是_(填“醋酸菌”或“乳酸菌”)。解析：(1)在亞硝酸鹽的含量測定中，用不同濃度亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管；用刻度移液管分別吸取一定量的不同泡制天數(shù)的泡菜濾液，加到不同的比色管中，然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管；將每個(gè)樣品管分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺相近的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管中的亞硝酸鹽含量。(2)據(jù)圖可知，該圖表示亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時(shí)間的變化曲線。(3)制作泡菜時(shí)利用的微生物是乳酸菌。答案：(1)不同濃度亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液不同泡制天數(shù)的泡菜濾液樣品管相同(相近)(2)亞硝酸鹽含量的變化(3)乳酸菌課堂小結(jié)握主干(對(duì)應(yīng)學(xué)生用書P197)建知識(shí)體系(填一填)記核心要點(diǎn)(背一背)填空毛霉乳酸菌C6H12O62C3H6O3(乳酸)酵母菌C6H12O62C2H5OH2CO2醋酸菌1.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的三個(gè)要點(diǎn)(1)泡菜制作過程中乳酸含量先增加后保持穩(wěn)定。(2)制作果醋利用醋酸菌的有氧呼吸。(3)腐乳制作中酒精及香辛料的作用不僅僅在于調(diào)味。酒精還可以抑制微生物生長，香辛料可防腐殺菌。2泡菜制作中鹽水煮沸的兩大作用清水和鹽的質(zhì)量比為41，鹽水要煮沸后冷卻。煮沸有兩大作用，一是除去水中氧氣，二是殺滅鹽水中的其他細(xì)菌。3幾種發(fā)酵技術(shù)中的微生物種類(1)在葡萄酒的自然發(fā)酵中，菌種來源于附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。(2)腐乳制作的主要菌種是毛霉，其在1518 生長迅速。豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子。(3)制作泡菜的主要菌種是乳酸菌(厭氧菌)，在無氧條件下可將葡萄糖分解為乳酸。課后跟蹤檢測 一、選擇題1如圖是草莓酒制作的步驟，下列分析錯(cuò)誤的是()A步驟是對(duì)草莓進(jìn)行滅菌處理B步驟為加入酵母菌液C發(fā)酵過程中放氣量先增加后減少D利用酸性重鉻酸鉀溶液檢測酒精解析：選A步驟是對(duì)草莓進(jìn)行沖洗，不能進(jìn)行滅菌，否則會(huì)殺死草莓上的野生型酵母菌，A錯(cuò)誤；步驟為加入酵母菌液或含酵母菌的凝膠珠，B正確；酒精發(fā)酵過程中除了產(chǎn)生酒精，還會(huì)產(chǎn)生大量的二氧化碳，但隨著發(fā)酵的進(jìn)行，由于營養(yǎng)物質(zhì)逐漸減少等原因，酵母菌酒精發(fā)酵的速率減慢，產(chǎn)生的二氧化碳也隨之減少，因此發(fā)酵過程中放氣量先增加后減少，C正確；酒精可用酸性重鉻酸鉀溶液檢測，D正確。2如圖所示的裝置可用于生物技術(shù)實(shí)踐的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )A乙裝置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作B利用裝置甲制作腐乳時(shí)，應(yīng)隨著豆腐塊層數(shù)的加高而增加鹽量C用裝置乙制作果酒時(shí)溫度應(yīng)控制在30 左右，制作果醋時(shí)應(yīng)適當(dāng)降溫D裝置乙的排氣口通過一個(gè)長而彎曲的膠管，可防止空氣中微生物的污染解析：選C用裝置乙制作果酒時(shí)溫度應(yīng)控制在1825 ，制作果醋時(shí)溫度應(yīng)控制在3035 。3下面為腐乳制作過程的流程圖，下列說法錯(cuò)誤的是()A毛霉為好氧型真菌，為避免缺氧，放豆腐時(shí)要留出一定縫隙B加鹽腌制的目的是析出豆腐中的水分使之變硬，同時(shí)能抑制微生物的生長C加鹵湯、密封腌制中，毛霉不斷增殖，并產(chǎn)生大量的酶，分解蛋白質(zhì)D密封瓶口時(shí)，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，以防止瓶口污染解析：選C從流程圖可以看出，毛霉在加鹽腌制前就已長成，加鹵湯、密封腌制中，毛霉不再增殖。4某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不當(dāng)導(dǎo)致泡菜腐爛。下列原因中正確的是()罐口密閉缺氧，抑制了乳酸菌的生長繁殖罐口封閉不嚴(yán)，氧氣抑制了乳酸菌的生長繁殖罐口封閉不嚴(yán)，氧氣抑制了其他腐生菌的生長和繁殖罐口封閉不嚴(yán)，促進(jìn)了需氧腐生菌的生長和繁殖A BC D解析：選B制作泡菜要注意壇口的密封，封閉不嚴(yán)，氧氣進(jìn)入會(huì)抑制乳酸菌的生長繁殖，也會(huì)導(dǎo)致需氧腐生菌的生長，使泡菜腐爛。5下列有關(guān)測定亞硝酸鹽含量的敘述，錯(cuò)誤的是()A亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)需在鹽酸酸化條件下進(jìn)行B重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料C對(duì)顯色反應(yīng)樣品進(jìn)行目測，可精確算出泡菜中亞硝酸鹽含量D配制溶液所用的提取劑為氯化鎘與氯化鋇解析：選C通過比色法來測定亞硝酸鹽含量，只能大致估算出其含量，并不能精確計(jì)算出其多少。二、非選擇題6(2018惠州調(diào)研)近年，藍(lán)莓成為集營養(yǎng)與保健于一身的新興水果品種，果實(shí)可鮮食，也可加工成果醋、果酒等飲品。(1)釀造藍(lán)莓果酒所需的主要微生物是_，水果中的糖類主要為該微生物提供_。(2)家庭式釀造果酒大多數(shù)采用自然發(fā)酵的方法，一般不對(duì)果實(shí)進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，原因是_；但這樣也能成功的原因是_。(3)鑒定發(fā)酵成品是否含有酒精可用_來檢驗(yàn)，如含有酒精則會(huì)呈現(xiàn)_色。(4)若用果酒制作果醋，需往果酒中通入_，并保持比果酒制作時(shí)的溫度_(填“高”或“低”)。解析：(1)釀造果酒所需的微生物主要是酵母菌，水果中的糖類主要為微生物生長提供碳源和能源。(2)家庭式釀造果酒大多數(shù)利用的是果皮上的野生型酵母菌，若對(duì)果實(shí)進(jìn)行嚴(yán)格消毒，會(huì)導(dǎo)致果實(shí)表面的酵母菌被殺死，影響發(fā)酵。發(fā)酵過程中，在缺氧、酸性的環(huán)境中酵母菌能生長，而絕大多數(shù)其他微生物的生長受抑制，因此不進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，發(fā)酵也能夠成功。(3)鑒定酒精應(yīng)選擇酸性重鉻酸鉀，若顏色變?yōu)榛揖G色，則說明有酒精產(chǎn)生。(4)制作果醋利用的微生物主要是醋酸菌，醋酸菌為好氧菌，因此發(fā)酵時(shí)需通入空氣，且其生長的適宜溫度高于酵母菌。答案：(1)酵母菌碳源和能源(2)避免果實(shí)表面的酵母菌被殺死，影響酒精發(fā)酵在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長而絕大多數(shù)其他微生物的生長繁殖受到抑制(3)酸性重鉻酸鉀灰綠(4)空氣(氧氣)高7(2016天津高考)天津獨(dú)流老醋歷史悠久、獨(dú)具風(fēng)味，其生產(chǎn)工藝流程如下圖。(1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應(yīng)溫度，這是因?yàn)槊竉。(2)在酒精發(fā)酵階段，需添加酵母菌。在操作過程中，發(fā)酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高_(dá)的數(shù)量，有利于密閉時(shí)獲得更多的酒精產(chǎn)物。(3)在醋酸發(fā)酵階段，獨(dú)流老醋采用獨(dú)特的分層固體發(fā)酵法，發(fā)酵30天。工藝如下：發(fā)酵過程中，定期取樣測定醋酸桿菌密度變化，趨勢如圖。據(jù)圖分析，與顛倒前相比，B層醋酸桿菌在顛倒后密度變化的特點(diǎn)是_，由此推測，影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素是_。乳酸含量高是獨(dú)流老醋風(fēng)味獨(dú)特的重要成因。發(fā)酵過程中，發(fā)酵缸中_層的醋醅有利于乳酸菌繁殖，積累乳酸。成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少，主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的改變，加劇了不同種類乳酸菌的_，淘汰了部分乳酸菌種類。解析：(1)酶的活性受溫度的影響，在最適溫度下酶的催化能力最強(qiáng)。(2)發(fā)酵過程中先通氣的目的是讓酵母菌大量繁殖，使發(fā)酵液中的酵母菌總數(shù)達(dá)到一定程度，有利于發(fā)酵的進(jìn)行。(3)醋酸桿菌是好氧菌，據(jù)圖分析，第15天將A、B層顛倒，顛倒后使原來處于下層缺氧狀態(tài)的醋酸桿菌分布在上層有氧的環(huán)境，醋酸桿菌大量繁殖，其數(shù)量上升，后來因?yàn)榕囵B(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)被逐漸消耗以及呼吸產(chǎn)物對(duì)pH的影響，導(dǎo)致其數(shù)量不再增長而趨于穩(wěn)定。由此推測影響醋酸桿菌密度變化的主要因素是氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH。因?yàn)槿樗峋菂捬蹙?，故下?未顛倒前B層處于下層，顛倒后A層處于下層)有利于乳酸菌繁殖。由題目信息可知，由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗、發(fā)酵環(huán)境發(fā)生改變等，生物個(gè)體之間的斗爭、不同種類之間的競爭會(huì)加劇。答案：(1)在最適溫度條件下催化能力最強(qiáng)(2)酵母菌(3)先快速增長后趨于穩(wěn)定氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻動(dòng)，或下)種間競爭(或競爭)8(2017全國卷)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}：(1)該實(shí)驗(yàn)的自變量是_、_。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是_。(3)如果在實(shí)驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系，則無法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間；若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間，還需要做的事情是_。(4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)開，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開。解析：(1)實(shí)驗(yàn)使用甲、乙兩種菌種，并在32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果，所以該實(shí)驗(yàn)的自變量是菌種和發(fā)酵時(shí)間。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧型微生物。(3)因“32 h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系”，說明發(fā)酵的最佳時(shí)間可能超過32 h，故可繼續(xù)延長發(fā)酵時(shí)間，定期取樣觀測發(fā)酵效果，以確定最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間，此時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間。(4)從大豆到豆豉，在相關(guān)微生物的作用下，大豆中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)殡暮桶被幔巨D(zhuǎn)變?yōu)楦视秃椭舅?。答案?1)菌種發(fā)酵時(shí)間(2)好氧菌(3)延長發(fā)酵時(shí)間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油9腐乳是我國特有的發(fā)酵食品，是備受消費(fèi)者喜愛的營養(yǎng)食品。某科研機(jī)構(gòu)研究了腐乳生產(chǎn)過程中不同濃度的食鹽對(duì)腐乳中氨基酸含量和pH的影響，部分?jǐn)?shù)據(jù)如下所示。請回答下列問題。鹽度(%)時(shí)間(d)581156.666.726.70106.636.626.68204.646.586.62304.616.566.58454.506.476.52604.116.446.50后期發(fā)酵階段腐乳的pH變化(注：后期發(fā)酵階段是指從腐乳裝瓶后直到成熟的過程)(1)腐乳生產(chǎn)過程有多種微生物的參與，其中起主要作用的是_。(2)腐乳制備過程中，加鹽可以_，使豆腐塊變硬。(3)由圖可知，后期發(fā)酵過程中，隨著時(shí)間的延長，腐乳中游離氨基酸的含量將_，蛋白質(zhì)含量呈_趨勢。這是由于前期發(fā)酵階段產(chǎn)生了大量的_，在后期發(fā)酵階段將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子的物質(zhì)。(4)由表可知，后期發(fā)酵到60天時(shí)，鹽度為_的腐乳已經(jīng)腐敗，說明原因：_。(5)綜上研究結(jié)果，為了滿足口味清淡消費(fèi)者的需求，同時(shí)保證營養(yǎng)豐富、口感鮮美，在生產(chǎn)過程中應(yīng)該將腐乳的鹽度控制在_左右。解析：參與腐乳生產(chǎn)的微生物主要是毛霉。在腐乳制備過程中，加鹽可以使豆腐中的水析出，使豆腐塊變硬，同時(shí)也可以抑制其他微生物的生長。毛霉產(chǎn)生的蛋白酶可以將蛋白質(zhì)分解成小分子的游離氨基酸和多肽。因此，在后期的發(fā)酵過程中，腐乳中蛋白質(zhì)的含量下降，游離氨基酸的含量上升。由表可知，鹽度為5%的腐乳隨時(shí)間延長，pH逐漸降低，表明已經(jīng)腐敗變質(zhì)，這是腐乳中鹽濃度過低，不能抑制其他微生物的生長導(dǎo)致的。答案：(1)毛霉(2)析出豆腐中的水分(3)上升下降蛋白酶(4)5%鹽濃度過低，不足以抑制微生物的生長，導(dǎo)致腐敗變質(zhì)(5)8%10無論是北方還是南方，泡菜的制作方法大致相同，一般的制作方法是：新鮮的蔬菜經(jīng)過整理、清潔后，放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中，然后向壇中加入鹽水、香料及一些“陳泡菜水”，密封后置于陰涼處，最適環(huán)境溫度為2830 。在實(shí)驗(yàn)室或工廠生產(chǎn)泡菜時(shí)，還要跟蹤檢測泡菜腌制過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量?；卮鹩嘘P(guān)問題：(1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是_。加入“陳泡菜水”的作用是_。(2)從細(xì)胞結(jié)構(gòu)來看，制作泡菜用的乳酸菌屬于_(填“原核生物”“真核生物”或“病毒”)。若要獲得大量乳酸菌菌種，應(yīng)選用培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有_、_、水、無機(jī)鹽等，同時(shí)還必須滿足_、_等具體培養(yǎng)條件的要求。(3)泡菜壇一般用水封的目的是_。若泡菜壇有裂縫，可能會(huì)出現(xiàn)的結(jié)果是_。(4)若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是_，如何進(jìn)行調(diào)整？_，其中鹽與清水的質(zhì)量比為_。解析：(1)制作泡菜時(shí)，所用的泡菜壇應(yīng)用白酒擦拭消毒以防雜菌污染?！瓣惻莶怂敝泻腥樗峋?，制作泡菜時(shí)加入的“陳泡菜水”可提供乳酸菌菌種。(2)乳酸菌是原核生物。培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基中應(yīng)有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等，同時(shí)還需滿足pH、無氧等具體培養(yǎng)條件的要求。(3)乳酸菌為厭氧菌，泡菜壇一般用水封的目的是隔絕空氣，創(chuàng)造無氧環(huán)境。若泡菜壇有裂縫，則會(huì)有部分空氣進(jìn)入，導(dǎo)致乳酸菌不能正常生長，而一些雜菌大量繁殖，泡菜會(huì)變質(zhì)。(4)加鹽太多，抑制了乳酸菌的繁殖，可導(dǎo)致制作的泡菜“咸而不酸”。制作泡菜時(shí)，按照鹽與清水的質(zhì)量比為14的比例配制鹽水。答案：(1)消毒(或防止雜菌污染)提供乳酸菌菌種(2)原核生物碳源氮源(合理即可)pH無氧(3)創(chuàng)造無氧環(huán)境乳酸菌不能正常生長，而一些雜菌大量繁殖，泡菜會(huì)變質(zhì)(4)加鹽過多，抑制了乳酸菌發(fā)酵減少鹽的投放量1411近年來，紀(jì)錄片舌尖上的中國引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請分析回答下列問題：(1)在果醋制作時(shí)，運(yùn)用醋酸菌在供應(yīng)_和糖源充足時(shí)，將果糖分解成醋酸；在糖源不充足時(shí)，也可以利用酒精生成醋酸，請寫出該過程的反應(yīng)式：_。(2)腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制。用鹽腌制時(shí)，應(yīng)注意控制_；配制鹵湯時(shí)，要使鹵湯中酒的含量控制在_%左右。(3)制作泡菜的原理是_。蔬菜在腌制過程中，會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，在_條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生_反應(yīng)后，再與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成_色染料。解析：(1)在果醋制作時(shí)，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，其反?yīng)式為：C2H5OHO2酶,CH3COOHH2O。(2)腐乳制作過程中，加鹽腌制時(shí)，應(yīng)注意控制鹽的用量；配制鹵湯時(shí)，要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右，若酒精含量過高會(huì)延長腐乳成熟的時(shí)間，若酒精含量過低則不足以殺菌。(3)制作泡菜的原理是乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖，將葡萄糖分解成乳酸。在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，再與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。答案：(1)氧氣C2H5OHO2酶,CH3COOHH2O(2)鹽的用量12(3)乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖，將葡萄糖分解成乳酸鹽酸酸化重氮化玫瑰紅第2講 微生物的培養(yǎng)和利用突破點(diǎn)(一)培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù) 1培養(yǎng)基2無菌技術(shù)3大腸桿菌的純化培養(yǎng)(2014全國卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是_；然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過_滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是_。(3)示意圖A和B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)的利用率。解析：(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。0.1 mL稀釋液中平均有38個(gè)活菌，可推測每升水樣中的活菌數(shù)38101001 0003.8107(個(gè))。(2)接種環(huán)、接種針或其他金屬用具直接在酒精燈外焰灼燒，可以迅速徹底地滅菌。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較兩圖可以看出，A是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果，B是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)由于振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)1培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的確定方法(1)自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)是無機(jī)物，碳源可來自大氣中的CO2，氮源可由含氮無機(jī)鹽提供。(2)異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物，即碳源必須由含碳有機(jī)物提供，氮源主要由有機(jī)物提供，部分異養(yǎng)型微生物可以利用無機(jī)氮源。2選擇無菌技術(shù)的原則(1)考慮無菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對(duì)象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。3兩種純化細(xì)菌方法的比較項(xiàng)目優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)適用范圍平板劃線法可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離不能計(jì)數(shù)適用于好氧菌稀釋涂布平板法可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征操作復(fù)雜、需要涂布多個(gè)平板適用于厭氧菌和兼性厭氧菌1在微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過程中，無菌技術(shù)是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。下列常用的無菌操作錯(cuò)誤的是()A無菌操作不要求殺死培養(yǎng)基內(nèi)的一切微生物B用酒精擦拭雙手的方法對(duì)操作者進(jìn)行消毒C實(shí)驗(yàn)操作過程中應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行D玻璃器皿可用酒精擦拭來進(jìn)行滅菌解析：選D無菌技術(shù)是用來防止培養(yǎng)物被其他外來微生物污染，而不是殺死培養(yǎng)基中的一切微生物；對(duì)操作者應(yīng)用較溫和的方法進(jìn)行消毒；實(shí)驗(yàn)操作過程中應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止微生物污染培養(yǎng)基；無菌操作用到的玻璃器皿要用干熱滅菌法徹底消滅其中的微生物，用酒精擦拭只能消毒不能滅菌。2為了獲得純度高的大腸桿菌，需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。(1)培養(yǎng)大腸桿菌，配制固體培養(yǎng)基的基本步驟為：計(jì)算稱量_倒平板。(2)稱量時(shí)，由于牛肉膏比較黏稠，可以用_挑取，放在_上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨_，稱量時(shí)動(dòng)作要迅速，稱量后要及時(shí)蓋上瓶蓋。(3)在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌能生長，說明培養(yǎng)基含有_等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。(4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如_和_等，使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)_，從而獲得純菌株。解析：配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基本步驟為：計(jì)算稱量溶化滅菌倒平板。稱量時(shí)，由于牛肉膏比較黏稠，可用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量，而牛肉膏和蛋白胨容易吸潮，稱量時(shí)動(dòng)作要迅速。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中含有大腸桿菌所需要的碳源、氮源、無機(jī)鹽、水等營養(yǎng)要素，所以常用來培養(yǎng)大腸桿菌。微生物純化培養(yǎng)的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，可使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落，從而獲得純菌株。答案：(1)溶化滅菌(2)玻璃棒稱量紙容易吸潮(3)碳源、氮源、無機(jī)鹽、水(4)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落突破點(diǎn)(二)微生物的篩選與計(jì)數(shù) 1土壤中分解尿素細(xì)菌的分離2纖維素分解菌的篩選3纖維素酶來源纖維素分解菌組成復(fù)合酶，至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶作用纖維素C1酶、CX酶纖維二糖葡萄糖苷酶葡萄糖(2017全國卷)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}：(1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生_。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是_。但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是_(答出兩點(diǎn)即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇_(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_。(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_(答出兩點(diǎn)即可)。解析：(1)土壤中的某些細(xì)菌之所以能夠分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生脲酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物，必須利用現(xiàn)成的有機(jī)物(如葡萄糖)作為碳源；葡萄糖通過呼吸作用被分解時(shí)，能為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，同時(shí)，葡萄糖還可以為其他有機(jī)物的合成提供原料。(2)選擇培養(yǎng)基是允許特定種類的微生物(目的微生物)生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。本實(shí)驗(yàn)的目的菌是可分解尿素的細(xì)菌，因此配制的培養(yǎng)基應(yīng)只允許尿素分解菌生長，NH4NO3可以作為所有細(xì)菌的氮源，培養(yǎng)基中若含有NH4NO3，將不能起到篩選作用。(3)KH2PO4和Na2HPO4能為細(xì)菌生長提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽，而H2PO/HPO可作為緩沖劑，使培養(yǎng)基中pH保持相對(duì)穩(wěn)定。答案：(1)脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定1微生物的篩選與鑒別方法(1)微生物的篩選方法單菌落挑取法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物選擇培養(yǎng)法利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物鑒定培養(yǎng)法利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物(2)微生物的鑒別方法菌落特征鑒別法根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別指示劑鑒別法如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變紅，說明該種微生物能夠分解尿素染色鑒別法如利用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來篩選分解纖維素的微生物2兩種計(jì)數(shù)方法的比較間接計(jì)數(shù)法(稀釋涂布平板法)直接計(jì)數(shù)法(顯微計(jì)數(shù)法)原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量公式每克樣品中的菌落數(shù)(CV)MC：某稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)；M：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：每小格平均細(xì)菌數(shù)400104稀釋倍數(shù)缺點(diǎn)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落不能區(qū)分細(xì)胞死活結(jié)果比實(shí)際值偏小比實(shí)際值偏大1(2014全國卷)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_分解成_。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成_色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：酵母膏無機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙注：“”表示有，“”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養(yǎng)基乙_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_。解析：(1)纖維素酶包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，C1酶、CX酶催化纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)CR能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物