生物人教版選修1檢測:專題5 課題1 DNA的粗提取與鑒定

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1、 專題5 DNA和蛋白質技術 課題1 DNA的粗提取與鑒定 題型一 DNA的粗提取與鑒定的實驗原理 1.在混合物中提取DNA分子的基本思路是( ) A.根據各種大分子的理化性質的差異 B.根據各種大分子的理化性質的共性 C.根據各種大分子在細胞內的功能 D.根據各種大分子的結構和在細胞內的位置 答案 A 解析 提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學方法分離具有不同物理或化學性質的生物大分子。就DNA分子的粗提取而言,就是利用了DNA與RNA、蛋白質和脂質等在物理和化學性質方面的差異進行分離的。 2.下列圖示中能正確反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關系的

2、是( ) 答案 C 解析 DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。當NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時,DNA的溶解度最低,而高于或低于0.14 mol/L時,隨NaCl溶液濃度的增加或降低,DNA的溶解度都逐漸升高。 3.下列有關DNA的特性的描述,錯誤的是( ) A.蛋白酶不能水解DNA,這體現了酶的專一性 B.大多數DNA不能忍受60~80 ℃的高溫 C.洗滌劑能夠瓦解細胞膜,但對DNA沒有影響 D.DNA不溶于酒精溶液 答案 B 解析 蛋白酶能水解蛋白質,但對DNA沒有影響,這體現了酶的專一性,A正確;大多數蛋白質不能忍受60~80 ℃的高溫,而DNA在

3、80 ℃以上才會變性,B錯誤;洗滌劑不會影響DNA,但能夠瓦解細胞膜,C正確;DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精溶液,利用這一原理,可以將DNA與蛋白質進一步分離,D正確。 4.DNA遇二苯胺(沸水浴)會呈現( ) A.磚紅色 B.橘黃色 C.紫色 D.藍色 答案 D 解析 DNA遇二苯胺(沸水浴)會呈現藍色,D正確。 題型二 DNA的粗提取與鑒定的實驗設計 5.下列不適宜作為DNA提取的實驗材料的是( ) A.雞血細胞  B.蛙的紅細胞 C.人的成熟紅細胞  D.菜花 答案 C 解析 雞血細胞、蛙的紅細胞、菜花細胞均含有細胞核和各種細胞器,即均含有較多

4、的DNA,因此適宜作為DNA提取的實驗材料,A、B、D不符合題意;人的成熟紅細胞不含細胞核和各種細胞器,即不含DNA,因此不適宜作為DNA提取的實驗材料,C符合題意。 6.進行DNA粗提取時,若選擇的實驗材料為植物細胞,破碎細胞時要加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入食鹽的目的是( ) A.利于DNA的溶解  B.分離DNA和蛋白質 C.溶解細胞膜  D.溶解蛋白質 答案 A 解析 實驗材料是植物細胞時,需先加入洗滌劑和食鹽,洗滌劑的作用是瓦解細胞膜,食鹽的作用是溶解DNA。 7.在提取花椰菜的DNA時,加入洗滌劑的目的是( ) A.破壞細胞膜  B.破壞葉綠素 C.破壞細胞壁  D

5、.破壞DNA 答案 A 解析 在提取花椰菜的DNA時,加入洗滌劑的目的是瓦解細胞膜,從而釋放出DNA。 8.下列有關“DNA的粗提取與鑒定”實驗相關操作中所選取的試劑,錯誤的是( ) 選項 相關操作 選用的試劑 A 破碎雞血細胞 蒸餾水 B 溶解核內DNA 0.14 mol/L的NaCl溶液 C 提取雜質較少的DNA 冷卻的95%酒精 D DNA的鑒定 現配的二苯胺試劑 答案 B 解析 在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,可使雞血細胞吸水漲破,A正確;2 mol/L的NaCl溶液能溶解較多的核內DNA,但在0.14 mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解

6、度最低,B錯誤;DNA不溶于酒精,而某些蛋白質能溶于酒精,故用體積分數為95%的冷酒精能提取雜質較少的DNA,C正確;在沸水浴條件下,DNA與二苯胺反應呈現藍色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑,D正確。 9.如圖所示為“DNA粗提取”實驗的相關操作步驟,其操作目的錯誤的是( ) A.①是洗滌雞血細胞,去除雞血細胞表面的雜質 B.④是稀釋NaCl溶液至0.14 mol/L,析出DNA C.③是選用2 mol/L NaCl溶液溶解黏稠物中的DNA D.②是純化DNA,去除溶于95%的酒精中的雜質 答案 A 解析?、偈亲岆u血細胞與蒸餾水混合而使雞血細胞處于低滲的環(huán)境中,使細胞吸

7、水漲破,釋放出DNA。 10.在NaCl溶液中反復溶解、析出并過濾,就能除去DNA溶液中的雜質的理由不包括( ) A.用高濃度鹽溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質 B.用低濃度鹽溶液使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質 C.反復操作就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質 D.反復操作就能夠使各種雜質變性而沉淀析出 答案 D 解析 DNA在不同濃度之間反復溶解、析出過程中,并未使蛋白質等雜質變性。 11.為了純化提取的DNA,可直接在濾液中加入下列哪種物質,反應10~15 min,以達到實驗目的( ) A.嫩肉粉  B.蒸餾水 C.2mol·L-1 NaCl溶

8、液  D.酒精 答案 A 解析 嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能催化蛋白質水解,從而去除濾液中的部分雜質。 12.在DNA粗提取的實驗中,先后兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用分別是( ) A.稀釋血液;沖洗樣品 B.使血細胞破裂;降低NaCl溶液濃度,使DNA析出 C.使血細胞破裂;增大DNA溶解量 D.使血細胞破裂;提取含雜質較少的DNA 答案 B 解析 在DNA粗提取的實驗中,先后兩次向燒杯中加入蒸餾水:第一次向雞血中加入蒸餾水,目的是使雞血細胞吸水漲破,釋放細胞核物質;第二次向2 mol·L-1的NaCl溶液中加入蒸餾水,目的是降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出。 13.利用

9、DNA和RNA、蛋白質和脂質等在物理和化學性質方面的差異,可以從生物組織中提取DNA。下面是有關DNA提取鑒定實驗的有關問題。 (1)下圖是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線。 在NaCl溶液濃度低于0.14 mol/L時,DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的增加而________;在0.14 mol/L時,DNA的溶解度________;當NaCl溶液濃度繼續(xù)增加時,DNA溶解度又________。 (2)為了純化提取的DNA,需要將獲取的含DNA的濾液做進一步處理。下面是去除雜質的三個方案: 方案一:在濾液中加入濃度為2 mol/L的NaCl溶液,過濾除去不溶的雜質,再調節(jié)NaC

10、l溶液濃度為0.14 mol/L,析出DNA。 方案二:直接在濾液中加入嫩肉粉,反應10~15 min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質。 方案三:將濾液放在60~75 ℃的恒溫水浴箱中,保溫10~15 min。 三個方案所利用的原理分別是什么? ________________________________________________________________________________________________________________________________________ (3)將上述處理液過濾,加入與濾液體積相等的體積分數為95%的冷卻

11、的酒精,攪拌后溶液中會出現白色絲狀物,這就是粗提取的DNA,將絲狀物放入試管,加入2 mol/L NaCl溶液5 mL,再加入4 mL二苯胺試劑,在________的條件下,DNA會被染成________色。如果將白色絲狀物置于載玻片上,滴加幾滴甲基綠染色液,DNA將呈現________色。 答案 (1)逐漸降低 最小 逐漸增大 (2)方案一:利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質;方案二:利用蛋白酶分解雜質蛋白質,從而使DNA與蛋白質分開;方案三:利用DNA與蛋白質對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質變性與DNA分離。 (3)沸水浴 藍 綠

12、解析 (1)DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。當NaCl溶液的物質的量濃度低于0.14 mol·L-1時,DNA的溶解度隨NaCl溶液物質的量濃度的增加而逐漸降低;NaCl溶液的物質的量濃度為0.14 mol·L-1時,DNA的溶解度最??;當NaCl溶液的物質的量濃度繼續(xù)增加時,DNA的溶解度又逐漸增大。 (2)方案一是通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質;方案二是利用嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質,而對DNA沒有影響,從而將DNA和蛋白質分開;方案三是利用DNA和蛋白質對高溫耐受性的不同,從而使兩者分離。 (3)DNA在沸水浴條件下與二苯胺反應呈藍色;甲基

13、綠可將DNA染成綠色。 14.下圖表示以雞血為實驗材料進行DNA的粗提取與鑒定的操作程序,請分析回答下列問題: (1)步驟一中,向雞血細胞液中加入________并攪拌,可使雞血細胞破裂。 (2)步驟二中,過濾后收集含有DNA的________。 (3)步驟三、四的操作原理是________________________________________; 步驟四中,通過向溶液中加入________調節(jié)NaCl溶液的物質的量濃度至________mol/L時,DNA將會析出,過濾去除溶液中的雜質。 (4)步驟七:向步驟六過濾后的________中加入等體積的冷卻的_______

14、_,靜置2~3 min,溶液中會出現________色絲狀物,這就是粗提取的DNA。 (5)步驟七:DNA遇________試劑,沸水浴5 min,冷卻后,溶液呈________色。 答案 (1)蒸餾水 (2)濾液 (3)DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質 蒸餾水 0.14 (4)濾液 酒精 白 (5)二苯胺 藍 解析 破碎紅細胞應該用蒸餾水,使之吸水漲破。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解,在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA析出。可通過加入蒸餾水將2 mol/L的NaCl溶液

15、稀釋為0.14 mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精溶液,在沸水浴的條件下,DNA與二苯胺反應呈現藍色。 1.下列有關DNA的粗提取與鑒定實驗的敘述,正確的是( ) A.取材:雞血細胞;原因:有細胞核,其他動物的血細胞都沒有細胞核 B.粗提?。翰煌瑵舛鹊腘aCl溶液;原因:DNA在其中的溶解度不同 C.提純:95%的冷酒精;原因:DNA溶于酒精,蛋白質等雜質不溶于酒精 D.鑒定:二苯胺試劑;原因:DNA溶液加入二苯胺試劑即呈藍色 答案 B 解析 除了哺乳動物成熟的紅細胞,其他動物紅細胞都有細胞核,A錯誤;DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同,根據此原理可以

16、對DNA進行粗提取,B正確;DNA不溶于酒精,而蛋白質等雜質溶于酒精,進而提純DNA,C錯誤;DNA溶液加入二苯胺試劑后沸水浴加熱呈藍色,D錯誤。 2.向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水,在這個過程中DNA和雜質蛋白質的溶解度變化情況分別是( ) A.減小、減小  B.增大、增大 C.先減小后增大、增大  D.減小、增大 答案 C 解析 由于DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小,故向溶有DNA的物質的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水,在這個過程中DNA的溶解度先減小,0.14 mol/L時溶解度最小,然后增大;而蛋白質在高

17、濃度的鹽溶液中會出現鹽析,隨濃度降低溶解度逐漸增大。 3.下列關于DNA對高溫的耐受性的說法,不正確的是( ) A.DNA對高溫的耐受性一般要比蛋白質強 B.超過80 ℃后DNA將變性,即使恢復到常溫,生物活性也不能恢復 C.不同生物的DNA的變性溫度不一定相同 D.深海熱泉附近生活的生物的DNA對高溫的耐受性更強,其DNA中鳥嘌呤所占的比例更高 答案 B 解析 DNA超過80 ℃變性,恢復到常溫,生物活性將恢復。 4.某同學用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定實驗,操作錯誤的是( ) A.加入洗滌劑后用力進行快速、充分地研磨 B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA C.加入

18、酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 答案 A 解析 加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和,否則會產生許多泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作,A錯誤;蛋白酶能夠分解蛋白質,因此能起到純化DNA的目的,B正確;加入酒精后用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂,導致DNA分子不能形成絮狀沉淀,C正確;沸水浴條件下,DNA遇到二苯胺會被染成藍色,用作DNA的鑒定,D正確。 5.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中,對DNA提取量影響較小的是( ) A.使雞血細胞在蒸餾水中充分破裂,放出DNA等核物質 B.攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動 C.在析出DNA黏稠物時

19、,要緩緩加入蒸餾水,直至黏稠物不再增多 D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻 答案 B 解析 在DNA從細胞中釋放的操作中,首先加蒸餾水使雞血細胞吸水漲破,然后用玻璃棒沿一個方向攪拌,目的是加速細胞的破裂,這有利于DNA等核物質的充分釋放,A不符合題意;攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪拌的目的是防止將絲狀的DNA攪碎,利于DNA絮狀物的挑出,但不影響DNA的提取量,B符合題意;在析出DNA黏稠物時,要緩緩加入蒸餾水,且到黏稠物不再增加,如果加蒸餾水過快,會導致DNA的再溶解,從而影響DNA的提取量,C不符合題意;預冷的酒精具有以下優(yōu)點:一是抑制核酸水解酶活性,防止DN

20、A降解;二是降低分子運動,易于形成沉淀析出;三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂,因此用冷酒精沉淀DNA甚至將混合液放入冰箱冷卻可以增加DNA的提取量,D不符合題意。 6.在DNA的粗提取和鑒定實驗中有三次過濾: ①過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液; ②過濾含黏稠物的物質的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液; ③過濾溶解有DNA的物質的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液。 以上三次過濾分別是為了獲得( ) A.含核物質的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液 B.含核物質的濾液、濾液中的DNA、含DNA的濾液 C.含核物質的濾液、濾液中的DNA、紗布上的黏稠物

21、D.含較純DNA的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液 答案 A 解析 過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液應取濾液(其內含有DNA,但DNA純度不高);過濾含黏稠物的物質的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液應取紗布上的黏稠物(其內含析出的DNA);DNA易溶于物質的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液,故過濾該溶液時應取其濾液(其內含有DNA)。 7.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,發(fā)現DNA提取量不足。下列有關原因分析不正確的是( ) A.經蒸餾水處理的雞血細胞用玻璃棒攪拌的時間過短 B.溶解DNA時所調制的NaCl溶液濃度未達到2 mol/L C.DNA再溶解時,玻璃棒攪

22、拌方向是單向的 D.向2 mol/L的NaCl溶液中加入的蒸餾水太少 答案 C 解析 經蒸餾水處理的雞血細胞用玻璃棒攪拌的時間過短,部分細胞還未破裂,這會造成DNA的提取量不足,A正確;NaCl溶液濃度在0.14~2 mol/L時,隨著NaCl溶液濃度的升高,DNA的溶解度增大,因此溶解DNA時所調制的NaCl溶液濃度未達到2 mol/L時,部分DNA還沒有溶解,這會造成DNA的提取量不足,B正確;DNA再溶解時,玻璃棒應該沿著一個方向緩慢攪拌,是為了防止DNA分子的斷裂,而這不會造成DNA提取量不足,C錯誤;向2 mol/L的NaCl溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋溶液,使DNA析出,若加

23、入蒸餾水的量太少,稀釋度不夠,這會造成DNA的提取量不足,D正確。 8.甲、乙兩圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗中涉及的兩個操作裝置圖。相關敘述正確的是( ) A.圖甲的燒杯和圖乙的試管中所用溶劑都為NaCl溶液,但兩者濃度不同 B.圖乙試管經稍稍加熱后即可觀察到一支試管中的溶液明顯變藍,另一支試管中的溶液不變藍 C.圖甲操作需用玻璃棒迅速攪拌以使DNA析出,并纏繞在玻璃棒上 D.圖乙操作中所用的二苯胺試劑需現配現用以達到較好的鑒定效果 答案 D 解析 圖甲燒杯中為酒精溶液,圖乙試管中為NaCl溶液,A錯誤;圖乙試管需要在沸水浴中加熱5 min,B錯誤;圖甲用玻璃棒沿一個方向

24、輕輕攪拌,卷起絲狀物,C錯誤;圖乙操作中所用的二苯胺試劑最好現配現用,否則二苯胺會變成淺藍色,D正確。 9.如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中的一些重要操作示意圖,請分析回答有關問題: (1)正確的操作順序是______________(用字母和箭頭表示)。 (2)圖中C、E步驟都加入了蒸餾水,但其目的不同,分別是__________________和____________________。 (3)圖中A步驟中所用酒精必須是經過________的才能使用,該步驟的目的是____________________________。 (4)為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要

25、成分為DNA,可將其溶解后,滴加________試劑后沸水浴,如果出現________,則證明該絲狀物的主要成分為DNA。 (5)由于雞血較難找到,某學生試圖用牛血代替,結果沒有成功,其原因最可能是______________________。 答案 (1)C→B→E→D→A (2)使雞血細胞吸水漲破,釋放出細胞核物質 降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出 (3)充分預冷 提取含雜質較少(或較純凈)的DNA (4)二苯胺 藍色 (5)牛成熟的紅細胞沒有細胞核和各種細胞器 解析 (1)DNA的粗提取與鑒定步驟是加入蒸餾水,破碎細胞→過濾,獲取含DNA的濾液→去除濾液中的雜質→DNA的析出

26、與鑒定。由此可知,正確的操作順序是C→B→E→D→A。 (2)C步驟加入蒸餾水的目的是使雞血細胞吸水漲破,釋放出細胞核物質;E步驟加入蒸餾水的目的是降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出。 (3)圖中A步驟中所用酒精必須經過充分冷卻才能使用,該步驟的目的是獲取含雜質較少(或較純凈)的DNA。 (4)鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分,可將其溶解后,滴加二苯胺試劑,并進行沸水浴加熱,如果出現藍色,則該絲狀物的主要成分為DNA。 (5)牛是哺乳動物,哺乳動物成熟的紅細胞沒有細胞核和各種細胞器,因此用牛血代替雞血來進行該實驗不會取得成功。 10.某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關探究

27、活動,具體步驟如下。 材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,并分別置于20 ℃和-20 ℃條件下保存24 h。 DNA的粗提?。? 第一步:將上述材料分別放入研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。 第二步:先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分數為95%的冷酒精,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步:取6支試管,分別加入等量的物質的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA的檢測:在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5

28、 min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結果如表所示。 材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃 20 ℃ ++ + +++ -20 ℃ +++ ++ ++++ 注:“+”越多表示藍色越深。 分析上述實驗過程,回答下列問題。 (1)該探究性實驗的課題名稱是______________________________。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少________。 (3)根據實驗結果,得出結論并分析。 ①結論1:與20 ℃相比,相同實驗材料在-20 ℃條件下保存,DNA的提取量較多。 結論2:_____________________________

29、_________________。 ②針對結論1,請給出合理的解釋:_______________________________。 (4)氯仿密度大于水,能使蛋白質變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度,依據氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎上繼續(xù)操作的步驟是__________________________________,然后用體積分數為95%的冷酒精使DNA析出。 答案 (1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響 (2)DNA分子的斷裂 (3)①等質量的不同實驗材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃中提取的DNA量最多?、诘蜏匾种?/p>

30、了相關酶的活性,DNA降解速度慢 (4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時間,吸取上清液 解析 (1)從表格可以看出,該實驗有兩個自變量:材料和溫度,所以該探究性實驗的課題名稱為“探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響”。 (2)第二步中用玻璃棒攪拌的目的是獲取DNA絮狀物,所以若攪拌速度快,易造成DNA分子的斷裂。 (3)本實驗的結論可從兩個方面來考慮:①相同材料在不同保存溫度下的結論;②不同材料在相同保存溫度下的結論。 (4)氯仿能使蛋白質變性,而對DNA影響極小,所以可將第三步獲得的溶液與氯仿混合,又因氯仿密度大于水,所以蛋白質沉淀位于溶液下部,DNA位于

31、上清液中。 11.真核生物細胞內,大量DNA和蛋白質以及一些RNA等混雜在一起,難以分離。生物興趣小組的同學為了獲得純度相對較高的DNA展開了實驗探究。 (1)分離各種物質的基本思路是根據DNA和其他物質理化性質的不同而采取一定的方法,以下是從各種物質之間________的差異角度開展研究: ①取雞血細胞懸液10 mL,加蒸餾水20 mL,同時用玻璃棒________(填“輕輕攪拌”或“快速攪拌”),過濾,取濾液,轉移到塑料材質的大燒杯中。 ②沿大燒杯內壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液,用玻璃棒沿一個方向________(填“輕輕攪拌”或“快速攪拌”),同時不斷收集析出的物質。下圖是根

32、據雞血中幾種物質的析出情況繪制的曲線,請據圖分析: ③如果只收集纖維蛋白,可采取的措施是_____________________________。 ④先用飽和度40%的硫酸銨溶液析出絕大部分纖維蛋白和大部分球蛋白,再在飽和度約為________的硫酸銨溶液中析出DNA(既保證DNA提取量較大又避免其他雜質過多),與此同時析出的物質還有________。 (2)如果要進一步去掉其他雜質,盡可能提高獲得的DNA純度,可采取的兩種辦法有:將DNA與球蛋白的混合物加入到________中,收集再次析出物;用________處理溶有DNA與蛋白質的溶液。 答案 (1)溶解度?、倏焖贁嚢琛、?/p>

33、輕輕攪拌?、墼诹蛩徜@濃度達到30%之前收集析出物?、?0% 球蛋白 (2)冷卻酒精 嫩肉粉 解析 (1)分析曲線圖可知,不同物質在不同濃度的硫酸銨中的析出的相對量有所差別,即分離各種物質的基本思路是根據DNA和其他物質之間溶解度的差異開展研究: ①取雞血細胞懸液10 mL,加蒸餾水20 mL,此時可以用玻璃棒快速攪拌,以加速血細胞的破裂。 ②沿大燒杯內壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液,為了防止將DNA的絮狀物攪碎,此時應用玻璃棒沿一個方向輕輕攪拌,同時不斷收集析出的物質。 ③從圖中看出,纖維蛋白在硫酸銨濃度在20%之前已經開始析出,說明溶解度開始減??;在濃度為30%時析出最快,說明此時的溶解度最低,并且超過30%后球蛋白也將逐漸析出,因此如果只收集纖維蛋白,可以在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物。 ④從圖中看出,DNA在飽和度約為50%的硫酸銨溶液中溶解度最小,與此同時析出的物質還有球蛋白,只是球蛋白析出量較少。 (2)如果要進一步去掉其他雜質,盡可能提高獲得的DNA純度,可將DNA與球蛋白的混合物加入到冷卻酒精中,由于DNA不溶于酒精,而其他雜質可溶于酒精,因此收集再次析出物;酶具有專一性,可以用嫩肉粉(含木瓜蛋白酶)處理溶有DNA與蛋白質的溶液,此時蛋白質可以水解,因此可以分離DNA和蛋白質。

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