高中生物 專(zhuān)題1第二節(jié) 基因工程的基本操作程序課件2 新人教版選修3

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1、1.2 1.2 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 廣東省高中生物聯(lián)賽選拔考試廣東省高中生物聯(lián)賽選拔考試 時(shí)間：本周五（時(shí)間：本周五（2 2月月2121日）晚上日）晚上7:007:00 地點(diǎn)：生化樓地點(diǎn)：生化樓502,403502,403 名額分配：高二級(jí)名額分配：高二級(jí)5555人，高一級(jí)人，高一級(jí)2525人人 有意向參加比賽的同學(xué)到科代處報(bào)名，并按指定時(shí)間參加有意向參加比賽的同學(xué)到科代處報(bào)名，并按指定時(shí)間參加選拔考試選拔考試四四個(gè)基本步驟：個(gè)基本步驟：1 1、目的、目的基因的獲取基因的獲取2 2、基因表達(dá)、基因表達(dá)載體的構(gòu)建載體的構(gòu)建3 3、將、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因?qū)胧?/p>

2、體細(xì)胞4 4、目的、目的基因的檢測(cè)與鑒定基因的檢測(cè)與鑒定步驟一：步驟一：目的基因的獲取目的基因的獲取蘇云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因，還有植物的抗?。固K云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因，還有植物的抗病（抗病毒、抗細(xì)菌）基因、種子貯藏蛋白的基因，以及病毒、抗細(xì)菌）基因、種子貯藏蛋白的基因，以及人的胰島素基因、干擾素基因等。人的胰島素基因、干擾素基因等。目的基因指的是什么基因？目的基因指的是什么基因？1 1、控制控制所需所需性狀性狀的基因的基因2 2、編碼蛋白質(zhì)編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因的結(jié)構(gòu)基因補(bǔ)：原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)補(bǔ)：原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼

3、區(qū)下游 與與RNARNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)聚合酶結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子 RNA RNA聚合酶能夠識(shí)別調(diào)控序列中的結(jié)合位點(diǎn)，聚合酶能夠識(shí)別調(diào)控序列中的結(jié)合位點(diǎn)，并與其結(jié)合。并與其結(jié)合。 轉(zhuǎn)錄開(kāi)始后，轉(zhuǎn)錄開(kāi)始后，RNARNA聚合酶沿聚合酶沿DNADNA分子移動(dòng)，并分子移動(dòng)，并以以DNADNA分子的一條鏈為模板合成分子的一條鏈為模板合成RNARNA。 轉(zhuǎn)錄完畢后，轉(zhuǎn)錄完畢后，RNARNA鏈釋放出來(lái)，緊接著鏈釋放出來(lái)，緊接著RNARNA聚聚合酶也從合酶也從DNADNA模板鏈上脫落下來(lái)。模板鏈上脫落下來(lái)。補(bǔ)：真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)補(bǔ)：真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與與R

4、NARNA聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)含子內(nèi)含子 外顯子外顯子 能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做外顯子能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做外顯子 不能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做內(nèi)不能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做內(nèi)含子含子啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 內(nèi)含子：內(nèi)含子： 外顯子：外顯子： 目的基因的獲取方法：目的基因的獲取方法： 1 1、從基因文庫(kù)中獲取目的基因、從基因文庫(kù)中獲取目的基因 2 2、通過(guò)、通過(guò)PCRPCR擴(kuò)增目的基因擴(kuò)增目的基因 3 3、人工合成法、人工合成法步驟一：步驟一：目的基因的獲取目的基因的獲取1 1、從基因文庫(kù)中獲取目的基因、從基因文庫(kù)中獲取目的基因 基因文庫(kù)：將

5、含有某種生物不同基因的許多基因文庫(kù)：將含有某種生物不同基因的許多DNADNA片斷，導(dǎo)片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不入到受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫(kù)。同基因，稱為基因文庫(kù)。限制酶限制酶基因組基因組DNADNA許多許多DNADNA片段片段1)1)基因組文庫(kù)基因組文庫(kù) 是指將某種生物體的是指將某種生物體的全部基因組全部基因組DNADNA用限制用限制酶切割成一定長(zhǎng)度范酶切割成一定長(zhǎng)度范圍的圍的DNADNA片段，再與合片段，再與合適的載體在體外重組適的載體在體外重組后，導(dǎo)入受體菌的群后，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，這個(gè)群體體中儲(chǔ)存，這個(gè)群體就

6、稱為該生物基因組就稱為該生物基因組文庫(kù)。文庫(kù)。與運(yùn)載體連接與運(yùn)載體連接 導(dǎo)入導(dǎo)入受菌體群體受菌體群體其目的其目的是分離有用的目的基因和保存某種生是分離有用的目的基因和保存某種生物的全部基因。物的全部基因。2)cDNA2)cDNA文庫(kù)文庫(kù) cDNAcDNA( (互補(bǔ)互補(bǔ)DNA)DNA)：是用某種生物發(fā)育的是用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的某個(gè)時(shí)期的mRNAmRNA經(jīng)體經(jīng)體外反轉(zhuǎn)錄后形成的互外反轉(zhuǎn)錄后形成的互補(bǔ)補(bǔ)DNADNA片段，與載體片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，這個(gè)受體體菌群中，這個(gè)受體菌群就叫做這種生物菌群就叫做這種生物的的cDNAcDNA文庫(kù)文庫(kù) 某種生物某個(gè)時(shí)期的某

7、種生物某個(gè)時(shí)期的mRNAmRNA反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄與運(yùn)載體連接與運(yùn)載體連接 導(dǎo)入導(dǎo)入受菌體群體受菌體群體單鏈單鏈DNADNADNADNA聚合酶聚合酶雙鏈雙鏈DNADNA如何從基因文庫(kù)中獲取目的基因？如何從基因文庫(kù)中獲取目的基因？P9P9 * *已知目的基因的已知目的基因的部分核苷酸序列部分核苷酸序列 將部分核苷酸序列擴(kuò)增，用同位素標(biāo)記將部分核苷酸序列擴(kuò)增，用同位素標(biāo)記 將基因文庫(kù)所有的菌落轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜上將基因文庫(kù)所有的菌落轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜上 處理消化細(xì)菌的蛋白質(zhì)，使處理消化細(xì)菌的蛋白質(zhì)，使DNADNA固定在膜上固定在膜上 進(jìn)行雜交進(jìn)行雜交 找出呈現(xiàn)陽(yáng)性信號(hào)的菌落找出呈現(xiàn)陽(yáng)性信號(hào)的菌落 從菌落中提

8、取目的基因從菌落中提取目的基因鳥(niǎo)槍法鳥(niǎo)槍法供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段運(yùn)載體運(yùn)載體限制酶限制酶與載體連接與載體連接載入載入受體細(xì)胞受體細(xì)胞產(chǎn)生特定性狀產(chǎn)生特定性狀導(dǎo)入導(dǎo)入外源外源DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增目的基因目的基因分離分離( (直接分離法直接分離法) )直接直接分離基因分離基因1 1）反轉(zhuǎn)錄法：）反轉(zhuǎn)錄法： 以目的基因轉(zhuǎn)錄成以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使的信使RNARNA為模板，反轉(zhuǎn)錄為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈成互補(bǔ)的單鏈DNADNA，然后在，然后在酶的作用下合成雙鏈酶的作用下合成雙鏈DNADNA，從而獲得所需的基因。從而獲得所需的基因。目的基因的目的基因的mRNA

9、mRNA單鏈單鏈DNA(cDNA)DNA(cDNA)雙鏈雙鏈DNADNA( (即目的基因即目的基因) )反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄合成合成間接合成基因間接合成基因2 2）根據(jù)已知的氨基酸序列合成）根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNADNA法法 ： 根據(jù)根據(jù)已知蛋白質(zhì)的已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使應(yīng)的信使RNARNA序列，然后序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為學(xué)方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNAmRNA

10、的核苷酸序列的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測(cè)推測(cè)推測(cè)推測(cè)目的基因目的基因化學(xué)合成化學(xué)合成上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)？上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)？操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便廣泛使用廣泛使用工作量大，工作量大，盲目盲目，分離出來(lái)的有時(shí)并分離出來(lái)的有時(shí)并非一個(gè)基因非一個(gè)基因?qū)Ｒ恍詮?qiáng)專(zhuān)一性強(qiáng)操作過(guò)程麻煩，操作過(guò)程麻煩，mRNAmRNA很不穩(wěn)定很不穩(wěn)定，要，要求的技術(shù)條件較高求的技術(shù)條件較高專(zhuān)一性強(qiáng)專(zhuān)一性強(qiáng)僅限于合成核苷酸僅限于合成核苷酸對(duì)較少的對(duì)較少的簡(jiǎn)單基因簡(jiǎn)單基因2 2、利用、利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因DNADNA復(fù)制的條件復(fù)制的條件 必修二

11、必修二 P54P54DNADNA母鏈：母鏈：提供復(fù)制的模板提供復(fù)制的模板解旋酶：解旋酶：打開(kāi)打開(kāi)DNADNA雙鏈雙鏈4 4種脫氧核苷酸：種脫氧核苷酸：合成子鏈的原料合成子鏈的原料DNADNA聚合酶：聚合酶：催化合成催化合成DNADNA子鏈子鏈ATPATP：為復(fù)制過(guò)程提供能量為復(fù)制過(guò)程提供能量引物：引物：使使DNADNA聚合酶從引物的聚合酶從引物的3 3端開(kāi)始連接端開(kāi)始連接脫氧核苷酸脫氧核苷酸PCRPCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） 原理：原理：DNADNA復(fù)制復(fù)制 條件：條件：DNADNA復(fù)制復(fù)制PCRPCRDNADNA母鏈母鏈解旋酶解旋酶4 4種脫氧核苷酸種脫氧核苷酸DNADNA聚合

12、酶聚合酶ATPATP引物引物DNADNA母鏈母鏈80-10080-1004 4種脫氧核苷酸種脫氧核苷酸熱穩(wěn)定的熱穩(wěn)定的DNADNA聚合酶（聚合酶（TaqTaq酶）酶）ATPATP引物引物PCR PCR 循環(huán)第一步循環(huán)第一步 ：加熱變性加熱變性: :雙鏈雙鏈DNADNA解聚成為單鏈解聚成為單鏈PCR PCR 循環(huán)第二步循環(huán)第二步 ：引物與靶序列：引物與靶序列復(fù)性（退火）復(fù)性（退火）: :引物與模板引物與模板DNADNA單鏈單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合結(jié)合靶序列靶序列靶序列靶序列引物引物引物引物553 3555533553333TaqTaq DNA DNA聚合酶聚合酶PCR PCR 循環(huán)第

13、三步循環(huán)第三步 ：引物延伸引物延伸: :合成新的合成新的DNADNA鏈鏈第第1 1個(gè)個(gè) PCR PCR 循環(huán)完成后循環(huán)完成后 ：得到兩個(gè)拷貝的靶序列：得到兩個(gè)拷貝的靶序列循環(huán)循環(huán)次數(shù)次數(shù)DNADNA數(shù)量數(shù)量1 12 22 24 43 38 820201,048,5761,048,57630301,073,741,8241,073,741,8243030次循環(huán)后靶序列擴(kuò)增的數(shù)量次循環(huán)后靶序列擴(kuò)增的數(shù)量小結(jié)：小結(jié)：PCRPCR多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外快速擴(kuò)增體外快速擴(kuò)增DNADNA的技術(shù)的技術(shù)原理：原理：DNADNA復(fù)制復(fù)制條件：模板（待擴(kuò)增基因的核苷酸序列）條件：模板（待擴(kuò)增基因的核苷酸

14、序列） 酶：酶：TaqTaq酶（熱穩(wěn)定的酶（熱穩(wěn)定的DNADNA聚合酶）聚合酶） 原料：原料：4 4種游離的脫氧核苷酸種游離的脫氧核苷酸 引物、能量引物、能量過(guò)程：變性過(guò)程：變性- -退火退火- -延伸延伸結(jié)果：以結(jié)果：以2 2n n指數(shù)方式擴(kuò)增指數(shù)方式擴(kuò)增步驟二：基因表達(dá)載體的構(gòu)建步驟二：基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因工程的基因工程的核心核心1 1、目的：、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。用。它們各自的它們各自的作用是什么作用是什么? ?2 2、基因表達(dá)載

15、體的組成：、基因表達(dá)載體的組成：復(fù)制原點(diǎn)復(fù)制原點(diǎn)+ +啟動(dòng)子啟動(dòng)子+ +目的基因目的基因+ +終止子終止子+ +標(biāo)記基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子：?jiǎn)?dòng)子：位于基因的首端的一段特殊的位于基因的首端的一段特殊的DNADNA片斷，片斷，它是它是RNARNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNAmRNA，最終獲得蛋白質(zhì)，最終獲得蛋白質(zhì)終止子：終止子：位于基因的尾端的一段特殊的位于基因的尾端的一段特殊的DNADNA片斷，片斷，能終止能終止mRNAmRNA的轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄標(biāo)記基因標(biāo)記基因的作用是的作用是為了為了鑒別鑒別受體細(xì)胞中是否含有受體細(xì)胞中是否含有

16、目的基因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)目的基因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)運(yùn)載體運(yùn)載體與與表達(dá)載體表達(dá)載體的區(qū)別：二者都有標(biāo)記基的區(qū)別：二者都有標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)兩部分因和復(fù)制原點(diǎn)兩部分DNADNA片段。表達(dá)載體在載片段。表達(dá)載體在載體基礎(chǔ)上增加了目的基因、啟動(dòng)子、終止子三體基礎(chǔ)上增加了目的基因、啟動(dòng)子、終止子三部分結(jié)構(gòu)部分結(jié)構(gòu)用到的工具酶：用到的工具酶：既用到限制酶切割載體，又既用到限制酶切割載體，又用到用到DNADNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩種連接酶將目的基因和載體拼接，兩種酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵啟動(dòng)子、終止子啟動(dòng)子、終止子對(duì)于目的基因表達(dá)必不

17、可少對(duì)于目的基因表達(dá)必不可少目的基因不能單獨(dú)進(jìn)入受體細(xì)胞，目的基因不能單獨(dú)進(jìn)入受體細(xì)胞，必需以表必需以表達(dá)載體的方式攜帶進(jìn)去。達(dá)載體的方式攜帶進(jìn)去。注意注意3 3、基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程、基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程質(zhì)粒質(zhì)粒DNADNA分子分子限制酶處理限制酶處理兩個(gè)切口兩個(gè)切口獲得目的基因獲得目的基因DNADNA連接酶連接酶重組重組DNADNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）同一種同一種一個(gè)切口一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)黏性末端步驟三：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞步驟三：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化2.2.常用的受體細(xì)胞：常用的受體細(xì)胞： 有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌有大腸桿菌、枯草桿菌、土

18、壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。和動(dòng)植物細(xì)胞等。3.3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原理將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原理借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。1.1.轉(zhuǎn)化：轉(zhuǎn)化： 目的基因進(jìn)入目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持內(nèi)維持穩(wěn)定穩(wěn)定和和表達(dá)表達(dá)的過(guò)程的過(guò)程( (一）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞一）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞1. 1.方法：方法： 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法基因槍法花粉管通道法花粉管通道法2.2.原理：原理：TiTi質(zhì)粒上的質(zhì)粒上的T-DNAT-DNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的整合到受體

19、細(xì)胞染色體的DNADNA上。上。（二）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞（二）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞方法：方法：顯微注射法顯微注射法目的基因表達(dá)載體提純目的基因表達(dá)載體提純 取卵（受精卵）取卵（受精卵） 顯微注射顯微注射 受精卵受精卵 新性狀動(dòng)物新性狀動(dòng)物過(guò)程：過(guò)程：（三）將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞（三）將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少方法：方法： 用用CaCa2+2+處理細(xì)胞處理細(xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞 表表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞吸收細(xì)胞吸收DNADNA分子分子步驟四：目的基因的檢測(cè)與鑒定步驟

20、四：目的基因的檢測(cè)與鑒定檢查是否成功檢查是否成功1 1、檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的、檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNADNA上是否插入了目的基因上是否插入了目的基因（1 1）方法方法: :DNADNA分子雜交分子雜交（2 2）過(guò)程）過(guò)程: :首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNADNA用含目的基因的用含目的基因的DNADNA片段用放射性同位素等作標(biāo)記片段用放射性同位素等作標(biāo)記, ,以此做探針以此做探針使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交, ,若顯示出雜交帶若顯示出雜交帶, ,表明染色體已插入染色體表明染色體已插入染色體DNADNA中中（一）檢測(cè)（一）檢測(cè)DNA

21、DNA分子雜交示意圖分子雜交示意圖 采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物的采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物的DNADNA分子的單鏈放在一起，如果這兩個(gè)單鏈具有互分子的單鏈放在一起，如果這兩個(gè)單鏈具有互補(bǔ)的堿基序列，那么，互補(bǔ)的堿基序列就會(huì)結(jié)補(bǔ)的堿基序列，那么，互補(bǔ)的堿基序列就會(huì)結(jié)合在一起，形成雜合雙鏈區(qū)；在沒(méi)有互補(bǔ)堿基合在一起，形成雜合雙鏈區(qū)；在沒(méi)有互補(bǔ)堿基序列的部位，仍然是兩條游離的單鏈。序列的部位，仍然是兩條游離的單鏈。 （二）鑒定（個(gè)體生物學(xué)水平）（二）鑒定（個(gè)體生物學(xué)水平）2 2、檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了、檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNAmRNA3 3、檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)、檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法方法: :方法方法: :抗原抗原- -抗體雜交抗體雜交用上述探針和轉(zhuǎn)基因生物的用上述探針和轉(zhuǎn)基因生物的mRNAmRNA雜交雜交, ,若出現(xiàn)雜若出現(xiàn)雜交帶交帶, ,表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNAmRNADNADNA分子雜交分子雜交過(guò)程過(guò)程: :