《消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全》由會(huì)員分享,可在線(xiàn)閱讀,更多相關(guān)《消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全(35頁(yè)珍藏版)》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、第七章 消毒與滅菌,消毒與滅菌,消毒(disinfection):殺死物體上病原微生物的方法,并不一定能殺死含芽胞的細(xì)菌或非病原微生物。用以消毒的藥品稱(chēng)為消毒劑(disinfectant)。 滅菌(sterilization):殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高,包括殺滅細(xì)菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。 抑菌(bacteriostasis):抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素。 防腐(antisepsis):防止或抑制體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。細(xì)菌一般不死亡。 無(wú)菌(asepsis):不存在活菌。,熱力滅菌法 輻射殺菌法 濾過(guò)除菌法 超聲波殺菌法 干燥與
2、低溫抑菌法,第一節(jié) 物理消毒滅菌法,干熱滅菌法 焚燒:廢棄物、尸體 灼燒:接種環(huán)、試管口 干烤:玻璃器皿 紅外線(xiàn):醫(yī)療器械 濕熱滅菌法巴氏消毒法: 61.1 62.8 30 min 煮沸消毒法: 100 5 min 流通蒸汽消毒法: 100 15 30 min 間歇滅菌法: 100 1530 min 37 過(guò)夜100 1530 min 37 過(guò)夜 100 1530 min 高壓蒸汽滅菌法: 121.3 15 20 min ( 1.05kg/cm2 ),一. 熱力滅菌法,AUTOCLAVE (PRESSURE STERILIZERS), hospital/autoclave.htm,biolog
3、y.clc.uc.edu/./ Media_Prep/Media_Prep.htm,熱型 溫度() 時(shí)間( h ) 布層內(nèi)的溫度( ) 滅菌效果 20層 40層 100層 濕熱 90105.3 3 101 107 101.5 完全 干熱 130140 4 86 72 70.5 不完全,濕熱與干熱的穿透力及其滅菌效果的比較,紫外線(xiàn) 波長(zhǎng)200-300nm的紫外線(xiàn)具有殺菌作用。 其主要作用于DNA,使一條DNA鏈上相鄰的兩個(gè)胸腺嘧 啶共價(jià)結(jié)合形成二聚體,導(dǎo)致細(xì)菌變異和死亡。 電離輻射 高速電子、X射線(xiàn)、射線(xiàn) 微波 波長(zhǎng)1mm1m,二. 輻射殺菌法,T-T二聚體的形成導(dǎo)致互補(bǔ)鏈的過(guò)早中斷,UV的殺菌
4、機(jī)制,flash,濾過(guò)除菌法(filtration):定義。 濾菌器(filter) 薄膜濾菌器:用于除菌的濾膜孔徑0.22m 玻璃濾菌器 石棉濾菌器 素陶瓷濾菌器,三. 濾過(guò)除菌法,濾菌器,The filter,http:/sorrel.humboldt.edu/wva1/Bio%20562%20lectures/specimen_prep.html,Bacteria on a membrane filter,http:/sorrel.humboldt.edu/wva1/Bio%20562%20lectures/specimen_prep.html,濾器和層流室,1.濾菌器 (filter)
5、液體除菌 2.空氣除菌采用生物潔凈技術(shù),是一種機(jī)械的作用因素,每秒超過(guò)2萬(wàn)次振動(dòng)的聲波即為超聲波。常用的超聲波發(fā)生器能產(chǎn)生20-100千赫的聲波??墒辜?xì)菌細(xì)胞壁裂解而死亡。,四. 超聲波殺菌法,干燥法 低溫法:低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢,常用作保存細(xì)菌菌種。冷凍真空干燥法是目前保存菌種的最好方法。,五. 干燥低溫抑菌法,消毒劑的種類(lèi):酚類(lèi)、醇類(lèi)、重金屬鹽類(lèi)、氧化劑、表面活性劑、烷化劑。,第二節(jié) 化學(xué)消毒滅菌法,(一)高效消毒劑(high-level disinfectants) 1.含氯消毒劑;2.過(guò)氧化物消毒劑; 3.醛類(lèi)消毒劑;4.環(huán)氧乙烷 (二)中效消毒劑 (intermediate-l
6、evel disinfectants) 1.含碘消毒劑;2.醇類(lèi)消毒劑 (三)低效消毒劑(low-level disinfectants) 1.季銨鹽類(lèi);2.氯已定;3.高錳酸鉀,化學(xué)藥物噴灑、浸泡、熏蒸等達(dá)到消毒滅菌目的 (1)醛類(lèi)消毒劑:甲醛(浸泡、熏蒸)、多聚甲醛、戊二醛等。 (2)含氯消毒劑:二氯異氰尿酸鈉(優(yōu)氯凈)、 次氯酸鈉、漂白粉等,用于環(huán)境消毒。 (3)季銨鹽類(lèi)消毒劑:新潔爾滅(洗手、淋浴) 消毒寧、洗必太、消毒凈 (4)酚類(lèi)消毒劑:烷基化氯酚烷基化酚、間苯二酚鹵化酚、乙酚甲酚,常用煤酚皂溶液(來(lái)蘇兒),常用于腳池、車(chē)輛消毒池、地面消毒。 (5)過(guò)氧化物類(lèi)消毒劑:過(guò)氧乙酸、過(guò)氧
7、化氫、臭氧等,常用于浸泡、噴霧、熏蒸消毒 (6)含碘消毒劑:碘酊、碘伏(碘與表面活性劑等的不定型結(jié)合物能逐漸釋放碘以長(zhǎng)時(shí)間殺菌) ,常用于消毒皮膚、傷口等。 (7)醇類(lèi)消毒劑:乙醇、丙醇、丁醇、戊醇等。常用于皮膚消毒。 (8)其它消毒劑:如高錳酸鉀(熏蒸、浸泡、噴灑)、氫氧化鈉(畜舍、地面、用具、腳池)、石灰乳(墻壁、地面)等。,固體二氧化氯消毒劑,消毒滅菌的運(yùn)用,1.高危器械物品 用時(shí)需進(jìn)入無(wú)菌組織 的物品。所有這些物品都應(yīng)該滅菌 2.中危器械物品 用時(shí)不進(jìn)入無(wú)菌組織 但接觸黏膜的器械。采用消毒即可 3.低危器械物品 只接觸未損傷皮膚但 不進(jìn)入無(wú)菌組織和不接觸黏膜的物品 一般用后清洗、消毒即
8、可 4.快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械,(一)醫(yī)療器械物品的消毒滅菌,(二)室內(nèi)空氣消毒滅菌 1.物理消毒法 紫外線(xiàn)照射(1.5W/m3,1h)最常用;濾過(guò)除菌:空氣通過(guò)孔徑小于0.2 m的高效過(guò)濾裝置以除去細(xì)菌和帶菌塵埃 2化學(xué)消毒法 化學(xué)消毒劑噴霧和熏蒸:過(guò)氧乙酸噴霧、熏蒸;過(guò)氧化氫噴霧;二氧化氯溶液噴灑;中草藥點(diǎn)燃煙熏。 (三)手和皮膚的消毒 用肥皂和流動(dòng)水經(jīng)常并正確洗手 病原微生物污染時(shí)應(yīng)用消毒劑消毒,(四)黏膜的消毒 (五)病人排泄物與分泌物的消毒滅菌 (六)病人污染物品的消毒 (七)飲水的消毒 (八)環(huán)境的消毒,消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間 微生物的種類(lèi)與數(shù)量 微生物對(duì)消毒劑的敏感性高低排序如
9、下:真菌、細(xì)菌繁殖體、有包膜病毒、無(wú)包膜病毒、分枝桿菌、細(xì)菌芽胞。 溫度 酸堿度 有機(jī)物,第三節(jié) 影響消毒滅菌效果的因素,第四節(jié) 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全,生物安全(biosafety)是生物技術(shù)安全(safety of biotechnology)的簡(jiǎn)稱(chēng) 狹義地指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開(kāi)發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類(lèi)健康產(chǎn)生潛在的危害。 廣義地指與生物有關(guān)的各種因素對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類(lèi)健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。,病原微生物所致的安全問(wèn)題,如病原微生物實(shí)驗(yàn)室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發(fā)流行等,也是人類(lèi)社會(huì)所面臨的最現(xiàn)實(shí)的生物安全問(wèn)題。 病原微生
10、物實(shí)驗(yàn)室生物安全的核心是防擴(kuò)散和防感染。 關(guān)于病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全,我國(guó)法令包括對(duì)病原微生物的分類(lèi)管理,對(duì)實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)管理,實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任等,一、病原微生物的分類(lèi),根據(jù)傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度,病原微生物分為四類(lèi): 第一類(lèi)是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。 第二類(lèi)是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。,第一類(lèi)、第二類(lèi)統(tǒng)稱(chēng)為高致病性病原微生物,第三類(lèi)是指能夠引起人或動(dòng)物疾病,但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害,傳播風(fēng)險(xiǎn)有限,實(shí)驗(yàn)室感染后
11、很少引起嚴(yán)重疾病,并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。 第四類(lèi)是指在通常情況下不會(huì)引起人或動(dòng)物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。,二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí),一、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。 從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)應(yīng)當(dāng)有名以上的工作人員共同進(jìn)行。在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi),只能同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。應(yīng)有健全安全保衛(wèi)制度 。,實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)掌握實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)際操作技能。應(yīng)有符合要求的防護(hù)用品,應(yīng)建立健康檔案;進(jìn)行預(yù)防接種。 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有科學(xué)、嚴(yán)格的管理制
12、度,定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備、材料等進(jìn)行檢查、維護(hù)和更新,應(yīng)對(duì)廢水、廢氣以及其他廢物進(jìn)行合理處置,防止環(huán)境污染。,生物安全,三、實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任,實(shí)驗(yàn)室感染控制工作包括定期檢查實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)、病原微生物菌(毒)種和樣本保存與使用、安全操作、實(shí)驗(yàn)室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實(shí)施情況。 實(shí)驗(yàn)室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時(shí),預(yù)防、控制措施包括:封閉被病原微生物污染的實(shí)驗(yàn)室或可能造成病原微生物擴(kuò)散的場(chǎng)所;開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查;對(duì)病人進(jìn)行隔離治療,對(duì)相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查;對(duì)密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀(guān)察;進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)消毒;對(duì)染疫或者疑似染疫的動(dòng)物采取隔離、撲殺等措施。,監(jiān)督的主要內(nèi)容是監(jiān)督病原微生物實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行國(guó)家有關(guān)法律、行政法規(guī)、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和要求的記錄、檔案及報(bào)告的情況 法律責(zé)任的核心是承擔(dān)造成傳染病傳播、流行或者其他嚴(yán)重后果的法律責(zé)任。,思考題,常用的消毒劑有哪些種類(lèi)? 簡(jiǎn)述化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制。 濕熱滅菌有哪些方法? 各有何用途? 筒述紫外線(xiàn)殺菌的作用機(jī)制和注意事項(xiàng)。 在溫度和時(shí)間相同的情況下,為什么濕熱滅菌法的效果比干熱法好? 當(dāng)從事病原生物學(xué)安全實(shí)驗(yàn)室工作時(shí),應(yīng)考慮哪些與生物安全相關(guān)的問(wèn)題?,名詞:消毒、滅菌、無(wú)菌、無(wú)菌操作、防腐 常用的消毒滅菌的物理方法有哪些? 常用的熱力消毒滅菌所用的溫度和時(shí)間? 紫外線(xiàn)殺菌的機(jī)理 影響化學(xué)消毒劑效果的因素,思考題,