狂犬病實(shí)驗(yàn)室診斷分析：重慶狂犬疫苗抗體檢測(cè)

泓域健康/重慶狂犬抗體檢測(cè)狂犬病實(shí)驗(yàn)室診斷分析一、 狂犬病實(shí)驗(yàn)室診斷病人發(fā)病后（死亡前）可采集其唾液（間隔3-6小時(shí)，至少采集3份）、腦脊液、血清及頸后帶毛囊的小塊皮膚；病人死后最好采集其腦組織標(biāo)本（小腦和腦干）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。直接免疫熒光法是狂犬病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，可以快速、敏感、特異地檢測(cè)人和動(dòng)物腦組織中的病毒抗原。臨床病例活體組織標(biāo)本（如頸后部皮膚毛囊）亦可進(jìn)行DFA檢測(cè)。直接快速免疫組化法及酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法亦可特異檢測(cè)狂犬病病毒抗原。病毒核酸檢測(cè)可用于早期診斷，以逆轉(zhuǎn)錄PCR法檢測(cè)體液（唾液、血清等）和腦組織等標(biāo)本，但需要嚴(yán)格的質(zhì)量控制以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。腦組織及唾液等病毒含量高的樣本還可進(jìn)行病毒分離。細(xì)胞培養(yǎng)分離所需時(shí)間（1-2天）遠(yuǎn)少于小鼠顱內(nèi)接種分離法所需時(shí)間（10-21天），且前者的生物安全風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)小于后者。未接種過疫苗的患者，發(fā)病早期幾乎沒有中和抗體產(chǎn)生，到發(fā)病晚期（通常在臨床癥狀出現(xiàn)后7-8天），病毒在腦內(nèi)大量增殖后突破血腦屏障進(jìn)入血液，刺激機(jī)體產(chǎn)生低水平的中和抗體。通過病毒中和試驗(yàn)檢測(cè)病人血清或腦脊液中的中和抗體，可作為狂犬病診斷的依據(jù)之一。世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的抗狂犬病病毒中和抗體標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法包括快速熒光灶抑制試驗(yàn)（RFFIT）和小鼠腦內(nèi)中和試驗(yàn)（MNT）。由于RFFIT法無需使用小鼠，所用時(shí)間短（24小時(shí)），目前已被廣泛采用。RFFIT方法也是我國現(xiàn)行藥典規(guī)定的檢測(cè)狂犬病病毒中和抗體的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。此外，常用的狂犬病病毒中和抗體檢測(cè)方法還有熒光抗體病毒中和試驗(yàn)（FAVNT）。用ELISA法測(cè)定的抗狂犬病病毒糖蛋白抗體滴度與用病毒中和試驗(yàn)測(cè)定的結(jié)果有一定的相關(guān)性（約80%符合率），但相應(yīng)試劑盒尚未普及。此外，還可以通過檢測(cè)中和抗體，監(jiān)測(cè)暴露前抗體背景及暴露后疫苗注射的免疫效果。WHO狂犬病專家咨詢委員會(huì)認(rèn)為：中和抗體水平等于或高于05IU/ml時(shí)，接種者才具備了有效的保護(hù)能力；如果發(fā)現(xiàn)中和抗體水平低于05IU/ml，應(yīng)進(jìn)行加強(qiáng)免疫，至達(dá)到有效保護(hù)水平為止。分析二、 中國RABV的動(dòng)物系統(tǒng)發(fā)育與進(jìn)化分析科研人員從177個(gè)陽性腦組織樣本中總共擴(kuò)增到了108個(gè)完整的N基因。在這些樣本中，科研人員分析并選擇了代表不同年份，動(dòng)物種類，疫情程度和地點(diǎn)的78種，連同來自中國以及鄰國和其他國家的222種參考序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育特征分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，中國動(dòng)物RABV分布在4個(gè)主要的進(jìn)化枝中：亞洲（Asian），世界性（Cosmospolitan），北極相關(guān)（Arctic-related）和印度次大陸（IndianSubcontinent），以及這些進(jìn)化分枝中不同的子分枝。其中，亞洲進(jìn)化枝是最普遍的進(jìn)化枝，廣泛分布于中國和東南亞國家，具有豐富的遺傳多樣性，主要通過狗傳播。通過查閱文獻(xiàn)研究人員發(fā)現(xiàn)，雪貂獾（ferrtebadger）RABV具有豐富的遺傳多樣性，但這僅在中國有報(bào)道。印度次大陸的進(jìn)化枝在中國還沒有被發(fā)現(xiàn)，直到2017年在靠近尼泊爾的西藏邊境地區(qū)發(fā)現(xiàn)了由一只當(dāng)?shù)亓骼斯芬娜祟惒±匀皇瞧駷橹乖谥袊_認(rèn)的唯一的印度次大陸分支RABV。緊接著，研究人員利用對(duì)于不同亞類的時(shí)間排序，重新定位了1969-2018年期間分離的具有代表性的1，118個(gè)中國毒株。其中55個(gè)中國RABV序列在1969年（最早提交）至2003年分離。自2004年開始進(jìn)行官方狂犬病監(jiān)測(cè)后，提交給GenBank的基因序列表明，大多數(shù)狂犬病爆發(fā)是由亞洲毒株（933%）引起的，其他3種毒株的參與有限。在亞洲類群中，SEA1亞類群在中國狂犬病毒株中占主導(dǎo)地位（701%），其次是SEA2（167%）。此外，緬甸、泰國、老撾和越南的許多SEA3毒株在遺傳上接近中國云南和廣西流通的一些毒株，這表明SEA3毒株可能由中國傳播至接壤的國家和地區(qū)。在中國與哈薩克斯坦、俄羅斯、蒙古和韓國之間的邊境地區(qū)也發(fā)現(xiàn)了同樣的傳播跡象。這種相似性令人擔(dān)憂，因?yàn)橹袊車?4個(gè)毗鄰的國家，所有這些國家都有狂犬病流行，在這些國家中，人們尚未對(duì)狂犬病的遺傳多樣性和系統(tǒng)發(fā)育特征進(jìn)行充分研究。在中國，狂犬病是一個(gè)重大的公共衛(wèi)生問題，20152018年更是導(dǎo)致每年幾百人死亡。超過95%的人類狂犬病病例來源于患狂犬病的狗。相比之下，中國報(bào)告的動(dòng)物狂犬病病例數(shù)卻遠(yuǎn)低于人類狂犬病病例數(shù)；僅有幾個(gè)省、自治區(qū)或直轄市的動(dòng)物狂犬病病例報(bào)告給國家獸醫(yī)當(dāng)局，且報(bào)告中國動(dòng)物傳染病月度信息的唯一官方雜志是獸醫(yī)通報(bào)（VeterinaryBulletin）。即便如此，這類零星的研究仍表明野生動(dòng)物狂犬病在赤狐（VulpesVulpes），貉（Nyctereutesprocyonoides）和鼬獾中都有增加。三、 狂犬疫苗市場(chǎng)需求大，前景廣闊（一）國內(nèi)寵物管理規(guī)模持續(xù)擴(kuò)大在單身經(jīng)濟(jì)、居民收入增加和資本的共同推動(dòng)下，我國寵物市場(chǎng)規(guī)模持續(xù)擴(kuò)張，其中城鎮(zhèn)犬貓市場(chǎng)的規(guī)模達(dá)到2490億元，同比增長(zhǎng)206%，城鎮(zhèn)犬貓數(shù)量合計(jì)11235萬只，其中貓5806萬只，犬5429萬只。據(jù)相關(guān)研究機(jī)構(gòu)預(yù)測(cè)：2022年中國寵物數(shù)量可達(dá)22億只，我國城鎮(zhèn)寵物（犬貓）主達(dá)到6844萬多人。雖然我國寵物數(shù)量基數(shù)大，但是寵物疫苗市場(chǎng)滲透率不足3%，與國外發(fā)達(dá)國家40%的水平還有很大差距，行業(yè)整體處于培育階段。隨著人們飼養(yǎng)寵物習(xí)慣的逐漸興起，我國寵物數(shù)量呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)，未來隨寵物市場(chǎng)規(guī)模的擴(kuò)大、犬貓等寵物咬傷潛在風(fēng)險(xiǎn)的提升以及暴露前免疫知識(shí)的普及，人用狂犬病疫苗潛在市場(chǎng)將進(jìn)一步提升。（二）狂犬病至今尚無特效治療方法，狂犬疫苗產(chǎn)品市場(chǎng)前景廣闊狂犬病是世界上病死率最高的疾病，一旦發(fā)病，病死率接近100%，至今尚無特效治療方法。國內(nèi)狂犬病疫苗屬于剛性疫苗。近年來，國內(nèi)人用狂犬病疫苗每年的批簽發(fā)總數(shù)量維持在6，000-8，000萬支，即1，200-1，600萬人份，整體批簽發(fā)量基數(shù)較大。我國人用狂犬病疫苗市場(chǎng)規(guī)模從2015年的168億元增長(zhǎng)至2018年的284億元，期間年復(fù)合增長(zhǎng)率保持191%的較高增速，國際權(quán)威機(jī)構(gòu)Frost&Sullivan預(yù)計(jì)到2023年我國人用狂犬病疫苗市場(chǎng)規(guī)模將達(dá)到425億元。四、 狂犬病疫苗批簽發(fā)量呈現(xiàn)平穩(wěn)波動(dòng)的態(tài)勢(shì)由于狂犬病患病高死亡率，狂犬病疫苗使用接種尤為剛性，人用狂犬病疫苗是我國常年批簽發(fā)量較大的疫苗品種之一。近年來，國內(nèi)狂犬疫苗每年的批簽發(fā)總量維持在6000-8000萬支，即1200-1600萬人份（4-5針/人份），2020年我國全年批簽發(fā)各類狂犬疫苗大約8238萬劑，較2019年同期增長(zhǎng)4004%。2021年第一季度，狂犬病疫苗批簽發(fā)量為1439萬支，同比增長(zhǎng)3019%。五、 狂犬病病死率高危害極大狂犬病是一種危害極大的病毒性人畜共患病，它是有史以來病死率最高的疾病（病死率為100%），狂犬病在全世界絕大多數(shù)國家均有流行，世界衛(wèi)生組織估計(jì)全球每年因狂犬病死亡達(dá)59萬人。根據(jù)中國疾控中心統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，2020年，中國人間狂犬病發(fā)病數(shù)為202例，死亡人數(shù)為188人，病死率較高。2021年1月至3月，中國人間狂犬病發(fā)病書為13人，死亡12人，病死率較高。六、 凍干人用狂犬病疫苗（Vero細(xì)胞）批簽發(fā)量較多按照培養(yǎng)基質(zhì)分品種進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，目前Vero細(xì)胞狂犬病疫苗是主流產(chǎn)品。凍干人用狂犬病疫苗（Vero細(xì)胞）的批簽發(fā)量為620129萬支，市占率為7527%;人用狂犬病疫苗（Vero細(xì)胞）的批簽發(fā)量為110318萬支，市占率為1339%;地鼠腎細(xì)胞狂犬病疫苗的批簽發(fā)量為53457萬支，市占率為649%;最后是人二倍體細(xì)胞狂犬病疫苗的批簽發(fā)量為39931萬支，市占率為485%。由此來看，二代狂犬病疫苗（Vero細(xì)胞基質(zhì)）仍然占據(jù)主導(dǎo)地位，三代狂犬病疫苗（人二倍體細(xì)胞基質(zhì)）正在逐步崛起。七、 狂犬疫苗企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)格局：遼寧成大批簽發(fā)量較多從供應(yīng)企業(yè)來看，遼寧成大憑借產(chǎn)能優(yōu)勢(shì)占據(jù)著過半的市場(chǎng)份額。我國生產(chǎn)狂犬疫苗的企業(yè)有遼寧成大、廣州諾誠、寧波榮安、河南遠(yuǎn)大等。其中遼寧成大占據(jù)狂犬疫苗市場(chǎng)的批簽發(fā)量占比達(dá)到472%;其次，寧波榮安與大連雅立峰的批簽發(fā)量占比分別為247%和75%;此外，成都康華三代狂犬疫苗的批簽發(fā)量占比為47%。